李雪玲,張 東,李思平,林聽(tīng)聽(tīng),劉 鑫
(1.上海海洋大學(xué),水產(chǎn)科學(xué)國(guó)家級(jí)實(shí)驗(yàn)教學(xué)示范中心,上海 201306;2.中國(guó)水產(chǎn)科學(xué)研究院東海水產(chǎn)研究所,農(nóng)業(yè)農(nóng)村部東海與遠(yuǎn)洋漁業(yè)資源開(kāi)發(fā)利用重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,上海 200090)
海龍科海馬屬(Hippocampus)魚(yú)類(lèi)通稱(chēng)海馬,廣泛分布于熱帶和溫帶沿海海域,是一種集藥用和觀賞價(jià)值于一身的珍貴海洋魚(yú)類(lèi)。海馬在溫腎壯陽(yáng)、消腫散結(jié)、鎮(zhèn)靜安神等方面表現(xiàn)出極佳的治療效果,被譽(yù)為“南方人參”[1]。現(xiàn)代藥理學(xué)研究證明,海馬除了含有多種氨基酸、蛋白質(zhì)和脂肪酸等營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)[2],還含有其他功能性組分,例如膽甾醇和膽甾烯類(lèi)等甾體類(lèi)化合物[3],構(gòu)成了海馬類(lèi)藥材補(bǔ)腎壯陽(yáng)的基礎(chǔ),被認(rèn)為是最主要的活性成分。孫慧慧等[4]發(fā)現(xiàn),海馬的甾醇提取物可改變小鼠睪丸曲細(xì)精管結(jié)構(gòu),增加精子的數(shù)目,促進(jìn)精子的形成。海馬中含有能夠阻斷癌細(xì)胞和病毒基因合成的尿苷[5]和次黃嘌呤[6]等核苷類(lèi)化合物,在抗氧化和抗病毒方面有顯著作用。海馬中還含有豐富的鋅和硒等礦物元素[7],鋅能夠參與機(jī)體的基因調(diào)控、促進(jìn)骨骼生長(zhǎng)、提高免疫力和生殖力等[8],硒具有抗腫瘤、抗菌消炎和抗衰老等作用[9]。
由于海馬在中醫(yī)藥用上的重要地位,需求量大,目前依靠自然捕撈已難以滿(mǎn)足市場(chǎng)需求,而且,對(duì)野生海馬的過(guò)量捕撈已導(dǎo)致海馬成為瀕危物種。為滿(mǎn)足日益增長(zhǎng)的市場(chǎng)需求,我國(guó)早在1957年就開(kāi)始海馬人工養(yǎng)殖研究[10]?;液qR(H.erectus),也稱(chēng)線(xiàn)紋海馬,因其生長(zhǎng)速度快、個(gè)體大、幼苗成活率高、養(yǎng)殖周期短等優(yōu)勢(shì),已成為我國(guó)主要的海馬養(yǎng)殖品種[11-12]。我國(guó)灰海馬干品的年產(chǎn)量已達(dá)15 t左右[13],為海馬保健食品或藥品的研發(fā)提供了物質(zhì)基礎(chǔ),具有廣闊的生物醫(yī)藥開(kāi)發(fā)前景。
研究表明,魚(yú)類(lèi)的營(yíng)養(yǎng)價(jià)值和組成成分與很多因素有關(guān),包括魚(yú)類(lèi)自身因素(品種、性別、生長(zhǎng)階段、部位和繁育狀態(tài)等)、環(huán)境因子(溫度、光照和鹽度等)和攝食史(餌料組成、投餌密度和攝食量)等[14-15]。魚(yú)體不同部位的組織或肌肉中營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)及微量元素的含量不同,例如,俄羅斯鱘(Acipenser gueldenstaedti)頭部肌肉的氨基酸含量高于尾部肌肉,而尾部肌肉中脂肪酸含量較高[16];施 氏 鱘(A.schrencki)與 達(dá) 氏 鱘(A.dabryanus)雜交后代的頭部和尾部肌肉的脂肪含量均低于軀干部肌肉,后尾部的鋅元素含量高于其他部位[15];紋首鮨(Serranus scriba)和地中海石斑魚(yú)(Epinephelus costae)的鰓中鋅含量高于肌肉、低于肝臟[17],鯔(Mugil cephalus)、西非擬緋鯉(Pseudupeneus prayensis) 和 三 線(xiàn) 磯 鱸(Parapristipoma humile)頭部鋅元素的含量為肌肉中的4至8倍[18]。中醫(yī)歷來(lái)采用將海馬干燥全體入藥的做法[19],無(wú)法針對(duì)性地發(fā)揮各部位及各種功能成分的藥理作用。因此,本研究對(duì)灰海馬頭部和軀干部的營(yíng)養(yǎng)價(jià)值開(kāi)展比較研究,探究海馬的營(yíng)養(yǎng)成分及功能性組分的分布規(guī)律。
已有研究發(fā)現(xiàn),雌、雄魚(yú)的營(yíng)養(yǎng)成分有差異。例如,雌性美洲鰣(Alosa sapidissima)肌肉中各種氨基酸含量都低于雄魚(yú)肌肉氨基酸含量,但EPA和DHA等多不飽和脂肪酸的平均含量比雄魚(yú)高,產(chǎn)生差異的原因可能與雌、雄魚(yú)發(fā)育和繁殖有關(guān),雄魚(yú)消耗少量的蛋白質(zhì)用于精巢的發(fā)育,但在求偶過(guò)程中消耗大量的脂肪追逐雌魚(yú)[20]。作為雄性撫育后代、雄性參與繁殖競(jìng)爭(zhēng)的物種,雌、雄海馬的營(yíng)養(yǎng)成分及功能性組分也可能存在差異。目前已證實(shí)海馬的品種[21]、生長(zhǎng)環(huán)境[22]、餌料[23]、生長(zhǎng)階段和繁育狀態(tài)[7]等都會(huì)影響其生化組成,但關(guān)于性別對(duì)海馬營(yíng)養(yǎng)成分影響的報(bào)道較少見(jiàn)。
此外,魚(yú)類(lèi)的健康狀況對(duì)其營(yíng)養(yǎng)價(jià)值的影響也不可忽略,例如脊椎與鰓頜畸形的赤點(diǎn)石斑魚(yú)(E.akaara)的氨基酸總量和脂肪含量都顯著低于健康魚(yú)[24]。腸炎是海馬養(yǎng)殖過(guò)程中常見(jiàn)的疾病之一,患腸炎病海馬攝食減少或停止攝食,體消瘦[25],恢復(fù)健康后可能影響品相,從而降低其價(jià)值。
本研究以灰海馬為研究對(duì)象,通過(guò)對(duì)比健康和腸炎、不同性別以及不同部位的營(yíng)養(yǎng)成分(氨基酸、脂肪酸和兩種最重要的微量元素鋅、硒)和功能性組分(核苷、核苷酸和膽甾醇)的差異,評(píng)價(jià)這些因素對(duì)灰海馬的營(yíng)養(yǎng)和功能性成分的影響,以期為灰海馬營(yíng)養(yǎng)價(jià)值的研究、品質(zhì)控制及生產(chǎn)加工等提供參考依據(jù)。
灰海馬采集自中國(guó)水產(chǎn)科學(xué)研究院海南瓊海研究中心,為人工繁育的子三代個(gè)體。根據(jù)LIN等[25]的報(bào)道,將泄殖孔腫大發(fā)白、腹部腫脹,按壓有膿液流出的認(rèn)定為患腸炎海馬,無(wú)上述癥狀的海馬作為健康海馬。隨機(jī)選取健康雌海馬(46尾)、健康雄海馬(46尾)、腸炎雌海馬(42尾)和腸炎雄海馬(44尾),在鰓孔與胸鰭連線(xiàn)處橫切,將海馬分為頭部和軀干兩部分,分別檢測(cè)。實(shí)驗(yàn)海馬置于-60℃冷凍干燥48 h至恒重,隨后用粉碎機(jī)將凍干的海馬研磨后,過(guò)80目篩網(wǎng),得到海馬粉末,并保存于-80℃直至分析。所測(cè)海馬的主要外觀性狀指標(biāo)如表1所示。
表1 實(shí)驗(yàn)灰海馬主要外觀性狀Tab.1 Main appearance characters of Hippocampus erectus
17種氨基酸混合標(biāo)準(zhǔn)品、十九烷酸甲酯、膽甾醇,購(gòu)自上海安譜實(shí)驗(yàn)科技股份有限公司;5種核苷酸、5種核苷、35種脂肪酸混合標(biāo)準(zhǔn)品、石油醚,購(gòu)自德國(guó)Sigma公司;鋅、硒,購(gòu)自中國(guó)國(guó)家有色金屬及電子材料分析測(cè)試中心;甲醇、三氟化硼甲醇、乙腈(均為色譜純),購(gòu)自德國(guó)CNW 科技公司;高氯酸、氫氧化鉀、磷酸、氫氧化鈉、鹽酸、檸檬酸鈉、硝酸(均為分析純),磷酸二氫鉀、四丁基硫酸氫銨(均為色譜純),購(gòu)自國(guó)藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司;乙醇、正己烷,購(gòu)自上海阿拉丁生化科技股份有限公司。
游標(biāo)卡尺DL92150,寧波得力工具有限公司;電子天平,杭州萬(wàn)特衡器有限公司;SZC-D脂肪測(cè)定儀,上海纖檢儀器有限公司;KDN-103F自動(dòng)定氮儀、KDN-04消化爐,上海洪紀(jì)儀器設(shè)備有限公司;LA8080氨基酸自動(dòng)分析儀,日本日立高新技術(shù)科學(xué)株式會(huì)社;iCAPQ電感耦合等離子體質(zhì)譜儀(ICP-MS)、BR4I離心機(jī)、Thermo U3000高液相色譜儀,美國(guó)Thermo公司;馬弗爐、7890A氣相色譜儀、Aglient 1200高效液相色譜儀,美國(guó)Aglient公司;ETHOS 1微波消解儀,意大利MILESTONE公司。
1.3.1 基本營(yíng)養(yǎng)成分的測(cè)定
水分含量采用直接干燥法進(jìn)行測(cè)定,方法參照GB 5009.3-2016《食品中水分的測(cè)定》;粗蛋白含量采用凱氏定氮法測(cè)定,方法參照GB 5009.5-2016《食品中蛋白質(zhì)的測(cè)定》;粗脂肪含量測(cè)定采用GB 5009.6-2016《食品中脂肪的測(cè)定》中的索氏抽提法;灰分含量測(cè)定采用GB 5009.4-2016《食品中灰分的測(cè)定》中的馬弗爐灼燒法。除水分以濕重計(jì)外,粗蛋白、粗脂肪和灰分均以干質(zhì)量計(jì)。
1.3.2 氨基酸含量測(cè)定及營(yíng)養(yǎng)評(píng)價(jià)
氨基酸含量參考GB 5009.124-2016《食品中氨基酸的測(cè)定》,用日立LA8080型全自動(dòng)氨基酸分析儀直接測(cè)定。
根據(jù)FAO/WHO(1973)的氨基酸評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)模式(amino acid score,AAS)、化學(xué)評(píng)分(chemical score,CS)和必需氨基酸指數(shù)(essential amino acid index,EAAI)3種方法對(duì)灰海馬氨基酸進(jìn)行分析比較。計(jì)算公式如下所示:
式中:a為樣品中必需氨基酸(essential amino acid,EAA)含量(mg·g-1);A為聯(lián)合國(guó)糧食及農(nóng)業(yè)組織(Food and Agriculture Organization,F(xiàn)AO)/世界衛(wèi)生組織(World Health Organization,WHO)標(biāo)準(zhǔn)模式中對(duì)應(yīng)的EAA含量(mg·g-1);S為雞蛋蛋白質(zhì)中對(duì)應(yīng)的EAA含量(mg·g-1);n為所比較的必需氨基酸個(gè)數(shù);ai為被測(cè)樣品每克氮中必需氨基酸的含量(mg·g-1);Ai為全雞蛋蛋白質(zhì)每克氮中相應(yīng)必需氨基酸的含量(mg·g-1)。
1.3.3 脂肪酸測(cè)定
參照GB 5009.168-2016《食品中脂肪酸的測(cè)定》,采用氣相色譜法對(duì)灰海馬脂肪酸含量進(jìn)行測(cè)定。
1.3.4 微量元素鋅和硒測(cè)定
參照GB 5009.268-2016《食品中多元素的測(cè)定》,采用微波消解-電感耦合等離子體質(zhì)譜法對(duì)灰海馬鋅和硒含量進(jìn)行測(cè)定。
1.3.5 核苷類(lèi)測(cè)定
參照GB 5413.40-2016《嬰幼兒食品和乳品中核苷酸的測(cè)定》,采用高效液相色譜法對(duì)灰海馬的核苷及核苷酸含量進(jìn)行測(cè)定。
1.3.6 膽甾醇的測(cè)定
參考李瓊等的方法[26],采用外標(biāo)法對(duì)灰海馬中膽甾醇含量進(jìn)行測(cè)定。
首先采用Excel 2017對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行整理,然后采用SPSS 23.0軟件對(duì)各組間數(shù)據(jù)進(jìn)行嵌套方差分析,將健康狀態(tài)(健康、腸炎)設(shè)為一級(jí)因素,性別(雌、雄)設(shè)為二級(jí)因素,部位(頭部、軀干)設(shè)為三級(jí)因素,比較各級(jí)因素間的主效應(yīng)。當(dāng)差異性顯著時(shí),采用獨(dú)立樣本t檢驗(yàn)對(duì)各因素進(jìn)行比較。數(shù)據(jù)采用平均值±標(biāo)準(zhǔn)差表示。
如表2所示,灰海馬粗蛋白質(zhì)量分?jǐn)?shù)含量較高(61.09% ~70.52%),粗脂肪質(zhì)量分?jǐn)?shù)較低(0.95% ~3.90%)。不同健康狀態(tài)、不同性別和不同部位灰海馬水分含量均無(wú)顯著差異(P>0.05);不同健康狀態(tài)和性別灰海馬灰分、粗蛋白和粗脂肪含量均無(wú)顯著差異(P>0.05),其中頭部的粗蛋白(61.09% ~64.88%)與粗脂肪(0.95% ~1.07%)含量顯著低于軀干(粗蛋白61.79% ~70.52%,粗脂肪2.54% ~3.90%)(P<0.05),而灰分則與之相反。
如表3所示,不同健康狀態(tài)、性別和部位灰海馬氨基酸組成一致,共檢測(cè)到17種氨基酸(色氨酸未單獨(dú)分析),灰海馬氨基酸總量(TAA)為51.90 ~67.02 g·100g-1;其中7種必需氨基酸(EAA)含量為14.03 ~17.81 g·100g-1;2種半必需氨基酸(SEAA)含量為5.34 ~6.67 g·100g-1;8種非必需氨基酸(NEAA)含量為31.20~42.54 g·100g-1,支鏈氨基酸含量均值為6.09~7.74 g·100g-1,脂肪族氨基酸含量均值為44.40 ~56.09 g·100g-1,雜環(huán)族氨基酸含量均值為6.17 ~7.41 g·100g-1?;液qR體內(nèi)含量最高的氨基酸為甘氨酸,其次為谷氨酸、丙氨酸、脯氨酸、天冬氨酸和精氨酸,胱氨酸含量最低。EAA/TAA比值范圍為25.59% ~29.02%,EAA/NEAA比值為39.62% ~48.27%。甘氨酸、胱氨酸、蛋氨酸和脯氨酸在不同健康狀態(tài)、性別和部位間均無(wú)顯著差異(P>0.05),其余13種氨基酸在不同健康狀況和不同性別間無(wú)顯著差異(P>0.05),但不同部位間均有顯著差異(P<0.05),軀干含量顯著高于頭部。
表3 灰海馬氨基酸組成及含量Tab.3 Amino acid composition and content in Hippocampus erectus
為進(jìn)一步對(duì)灰海馬體內(nèi)氨基酸營(yíng)養(yǎng)價(jià)值進(jìn)行評(píng)估,采用FAO/WHO提供的理想蛋白質(zhì)中EAA質(zhì)量分?jǐn)?shù)的模式及評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)和中國(guó)預(yù)防醫(yī)學(xué)科學(xué)院營(yíng)養(yǎng)與食品衛(wèi)生研究所提出的雞蛋蛋白質(zhì)模式作參照,分別計(jì)算海馬體內(nèi)氨基酸的AAS、CS和EAAI,結(jié)果如表4所示。根據(jù)AAS分析結(jié)果可以發(fā)現(xiàn),蛋氨酸+胱氨酸的評(píng)分最高為0.90 ~1.04,其次為蘇氨酸(0.80 ~1.02)和賴(lài)氨酸(0.78~1.10)。異亮氨酸評(píng)分最低為0.53~0.71,是第一限制性氨基酸。CS結(jié)果顯示,蘇氨酸評(píng)分最高為0.68 ~0.87,異亮氨酸評(píng)分最低為0.40 ~0.53,是第一限制性氨基酸?;液qR頭部EAAI指數(shù)(52.16 ~56.57)低于軀干(60.18 ~66.68)。
表4 灰海馬氨基酸營(yíng)養(yǎng)評(píng)價(jià)Tab.4 Evaluation of essential amino acids in Hippocampus erectus
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由表5可知,不同健康狀態(tài)、性別灰海馬頭部和軀干共檢測(cè)出22種脂肪酸,其中SFA 10種,MUFA 5種,PUFA 7種,除患腸炎雄海馬頭部未檢測(cè)到C13∶0外,其余組分相同。飽和脂肪酸含量為9.74 ~20.48 g· kg-1,其中棕櫚酸(C16∶0)含量最高,軀干含量最高可達(dá)到(9.04±0.42)g·kg-1。單不飽和脂肪酸含量為7.07 ~20.13 g· kg-1,其 中 含 量 最 高 的 是 油 酸(C18∶1n9c),為4.43 ~11.48 g·kg-1;多不飽和脂肪酸含量為5.77 ~13.97 g·kg-1,DHA含量最高為3.48 ~7.44 g·kg-1。不同健康狀態(tài)和不同性別灰海馬脂肪酸含量總體上無(wú)顯著差異,除C24∶0和C22∶1n9頭部與軀干無(wú)顯著差異外(P>0.05),其余脂肪酸在頭部的含量均顯著低于軀干(P<0.05)。
表5 灰海馬脂肪酸組成及含量(g·kg-1,干重)Tab.5 Fatty acid composition and content in Hippocampus erectus(g·kg-1,dry weight)
灰海馬體內(nèi)鋅和硒含量見(jiàn)表6,不同健康狀態(tài)和性別灰海馬體內(nèi)鋅和硒含量無(wú)顯著差異(P>0.05)。硒含量海馬頭部(0.88 ~0.95 mg·kg-1)顯 著 低 于 軀 干(1.16 ~1.32 mg·kg-1)(P<0.05),鋅元素含量頭部與軀干則無(wú)顯著差異(P>0.05)。
表6 灰海馬微量元素鋅、硒含量與組成(mg·kg-1,干重)Tab.6 Composition and content of zinc and selenium in Hippocampus erectus(mg·kg-1,dry weight)
由表7可知,灰海馬體內(nèi)共檢測(cè)到2種核苷酸和6種核苷,其中尿苷含量最高為476.77 ~684.26 mg·kg-1,腺嘌呤含量最低為5.28 ~11.75 mg·kg-1。健康和腸炎、雌和雄海馬的頭部與軀干所含尿嘧啶、胞苷、腺苷和膽甾醇含量均無(wú)顯著差異(P>0.05);雄海馬尿苷含量顯著高于雌海馬(P<0.05);而肌苷含量則是雌性高于雄性;腺嘌呤、鳥(niǎo)苷和胸苷頭部含量顯著高于軀干(P<0.05)。
表7 灰海馬功能性組分組成和含量(mg·kg-1,干重)Tab.7 Composition and content of nucleosides and cholesterol in Hippocampus erectus(mg·kg-1,dry weight)
灰海馬的頭部和軀干部粗蛋白平均質(zhì)量分?jǐn)?shù)分別為61.09% ~64.88%和61.79% ~70.52%,粗脂肪平均質(zhì)量分?jǐn)?shù)分別為0.95% ~1.00%和2.54% ~3.09%,具有高蛋白低脂肪的特征,與三斑海馬[21]、克氏海馬[27]的結(jié)果一致。不同健康狀態(tài)的灰海馬灰分、粗蛋白和粗脂肪含量無(wú)顯著差異,無(wú)論患腸炎與否,灰海馬頭部粗蛋白、粗脂肪含量均低于軀干,推斷腸炎可能并不一定影響灰海馬的基本營(yíng)養(yǎng)成分含量及分布趨勢(shì)。此外,本研究中雌、雄灰海馬基本營(yíng)養(yǎng)成分含量相近的結(jié)果,與已報(bào)道的灰海馬及雌、雄克氏海馬一致[7,27]?;液qR頭部灰分含量顯著高于軀干,粗脂肪和粗蛋白含量顯著低于軀干,推測(cè)灰海馬頭部的礦物質(zhì)含量可能高于軀干;從利用脂肪和蛋白質(zhì)的角度而言,灰海馬軀干的營(yíng)養(yǎng)價(jià)值更高。灰海馬頭部灰分含量高于鰱魚(yú)頭[(8.31±1.25)%]、鳙魚(yú)頭[(6.45±0.85)%],粗蛋白含量為鰱魚(yú)頭[(12.94±1.57)%]、鳙魚(yú)頭[(12.91±2.15)%]、海鰻頭部(15.2%)的4 ~5倍,粗脂肪含量與海鰻(3.4%)、鳙魚(yú)頭[(1.84±0.92%)%]相近,而明顯低于鰱魚(yú)頭[(9.83±0.79)%][28-29]。綜上,灰海馬的頭部相比其他幾種魚(yú)類(lèi)具有更高的蛋白質(zhì)營(yíng)養(yǎng)價(jià)值。我國(guó)的水產(chǎn)經(jīng)濟(jì)魚(yú)類(lèi)多以肌肉為食用部位,鰱、鳙魚(yú)肌肉粗蛋白含量均達(dá)80%以上[28],比灰海馬頭部或軀干部的粗蛋白含量高10%左右,因此,灰海馬不適合作為蛋白質(zhì)的主要來(lái)源,但可作為蛋白質(zhì)的食源補(bǔ)充。
不同健康狀況、性別灰海馬頭部和軀干均檢測(cè)到17種氨基酸,其中甘氨酸含量最高,谷氨酸、丙氨酸、脯氨酸、天冬氨酸和精氨酸含量較高,胱氨酸含量最低,這一組成特點(diǎn)與大海馬等5種海馬一致[21],說(shuō)明海馬屬種類(lèi)的氨基酸組成相似。甘氨酸、胱氨酸、蛋氨酸和脯氨酸在不同健康狀態(tài)、性別和部位間均無(wú)顯著差異(P>0.05),其余13種氨基酸在不同健康狀況和不同性別間無(wú)顯著差異(P>0.05),但不同部位間均有顯著差異(P<0.05),具體表現(xiàn)為軀干含量顯著高于頭部。推測(cè)灰海馬氨基酸可能均勻分布在各部位或集中分布在內(nèi)臟中。
灰海馬EAA/TAA比值范圍為25.59% ~29.02%,EAA/NEAA 比 值 為 39.62% ~48.27%,與灰海馬、三斑海馬整體的檢測(cè)結(jié)果[5]一致。根據(jù)FAO/WHO理想模式,優(yōu)質(zhì)蛋白質(zhì)中EAA/NEAA在60%以上,EAA/TAA在40%左右,不同健康狀態(tài)、性別灰海馬頭部和軀干氨基酸均低于該標(biāo)準(zhǔn),因此從EAA/TAA、EAA/NEAA比值來(lái)看,灰海馬并非優(yōu)質(zhì)蛋白源,可搭配其他蛋白質(zhì)食物,均衡蛋白質(zhì)營(yíng)養(yǎng)。
根據(jù)AAS結(jié)果,不同健康狀態(tài)、性別及部位灰海馬中,蛋氨酸+胱氨酸的評(píng)分(0.90 ~1.04)最高,其次為蘇氨酸(0.80 ~1.02)和賴(lài)氨酸(0.78 ~1.10)。異亮氨酸評(píng)分(0.53 ~0.71)最低,是第一限制性氨基酸。CS評(píng)價(jià)中,蘇氨酸評(píng)分(0.68 ~0.87)最高,異亮氨酸評(píng)分(0.40 ~0.53)最低。研究表明,產(chǎn)自東山的三斑海馬AAS評(píng)分最低的氨基酸也是異亮氨酸[5];而雌雄灰海馬整體的AAS評(píng)分賴(lài)氨酸最高,蘇氨酸次之,第一限制氨基酸為纈氨酸;CS評(píng)分最高的是賴(lài)氨酸和蘇氨酸,第一限制氨酸氨為蛋氨酸+胱氨酸[5]。本研究的實(shí)驗(yàn)材料為采集自海南省的人工養(yǎng)殖灰海馬,其餌料組成、環(huán)境參數(shù)均與產(chǎn)自福建的海馬存在差異,有研究表明,魚(yú)類(lèi)的氨基酸組成和含量與餌料、環(huán)境相關(guān)[30]。此外,本研究比較了灰海馬不同部位的氨基酸含量,導(dǎo)致各處理組的氨基酸含量數(shù)值與已有報(bào)道的數(shù)據(jù)略有差異,其中蘇氨酸和賴(lài)氨酸的AAS評(píng)分差異不大,而纈氨酸、蛋氨酸+胱氨酸AAS評(píng)分差異較大,推測(cè)灰海馬蘇氨酸和賴(lài)氨酸的含量高低與外源因素(餌料、環(huán)境參數(shù))不相關(guān),而蛋氨酸、胱氨酸和纈氨酸受外源因素影響較大。不同健康狀態(tài)、性別及部位灰海馬EAAI指數(shù)為52.16 ~66.68,與灰海馬、三斑海馬整體的EAAI指數(shù)[5]相當(dāng),低于青甘金槍魚(yú)(Thunnus tonggol)(96.23)[31]、鐮 狀 真 鯊(Carcharhinus falciformis) (72.42)[32], 高 于 大 黃 魚(yú)(Pseudosciaena crocea)(47.30)[33]。灰海馬頭部EAAI指數(shù)(52.16 ~56.57)顯著低于軀干(60.18 ~66.68),原因可能與軀干含有內(nèi)臟有關(guān),周紛等[34]對(duì)比大黃魚(yú)的鱗、皮、內(nèi)臟、魚(yú)卵、魚(yú)頭肉以及碎肉發(fā)現(xiàn),內(nèi)臟和魚(yú)卵的氨基酸含量顯著高于其他組織。
本研究共檢測(cè)出22種脂肪酸,其中SFA 10種,PUFA 5種,MUFA 7種,質(zhì)量分?jǐn)?shù)大小依次為SFA>PUFA>MUFA,SFA中棕櫚酸(C16∶0)含量最高,MUFA中油酸(C18∶1)含量最高,PUFA中DHA含量最高。比灰海馬、三斑海馬整體[5]脂肪酸的種類(lèi)數(shù)多5種,主要表現(xiàn)在SFA的種類(lèi)上,本研究測(cè)定的灰海馬頭部與軀干各類(lèi)脂肪酸的組成特點(diǎn)與三斑海馬、灰海馬整體相似。研究表明,產(chǎn)自東山的雌性灰海馬及三斑海馬[5]的脂肪酸含量高于雄性,本研究中雌、雄性灰海馬頭部和軀干SFA和MUFA總量相當(dāng),而雌性PUFA總量高于雄性,推測(cè)除餌料、環(huán)境參數(shù)等外源因素外,可能由于相較于先前的研究,本研究檢測(cè)到的SFA和MUFA種類(lèi)更多,導(dǎo)致雌、雄灰海馬SFA和MUFA的總量差異不顯著。
神經(jīng)酸(C24∶1)在治療心腦血管疾病、預(yù)防艾滋病和提高免疫力等方面發(fā)揮重要作用[35]。本研究發(fā)現(xiàn),灰海馬神經(jīng)酸含量為0.12 ~0.33g·kg-1,與之前研究灰海馬整體神經(jīng)酸含量(0.16 ~0.21 g·kg-1)相近[7]?;液qR神經(jīng)酸含量最高可達(dá)0.33 g·kg-1,高于鯔(0.30 g·kg-1)[36],低于牛眼鯛(Boops boops)(1.10 g·kg-1)[36]、須鰻鰕虎魚(yú)(Taenioides cirratus)(3.8 g·kg-1)[37]。
鋅和硒是動(dòng)物及人體所必需的營(yíng)養(yǎng)元素,鋅能夠調(diào)節(jié)生物體內(nèi)多種生理生化活動(dòng),享有“生命之花”、“智慧元素”的美稱(chēng);人體攝入適量的鋅有助于增強(qiáng)食欲、提高機(jī)體免疫力、增進(jìn)智力和促進(jìn)骨骼增長(zhǎng)等[8]。硒具有抗氧化活性、抗癌、抗衰老、抗菌和抗病毒等作用,當(dāng)其攝入量不足時(shí)會(huì)引發(fā)克山病、大骨節(jié)病和甲狀腺癌等各種疾病[9]。
不同健康狀態(tài)、性別灰海馬頭部和軀干鋅含量豐富(86.35 ~116.50 mg·kg-1),明顯高于棕線(xiàn)石斑魚(yú)(E.costae)(16.00 mg·kg-1)[17]、黃斑 籃 子 魚(yú)(Siganus oramin)(11.44 mg·kg-1)[38]、大 眼 裸 燈 魚(yú)(Gymnoscopelus piabilis)(28.00 mg· kg-1)[39]和 大 西 洋 白 姑 魚(yú)(Argyrosomus regius)(8.63 mg·kg-1)[18]等海水魚(yú);雌、雄灰海馬頭部和軀干鋅含量與雌雄灰海馬整體鋅含量相近[5]。不同健康狀態(tài)、性別灰海馬頭部和軀干鋅含量無(wú)顯著差異,表明灰海馬的鋅元素在頭部和軀干均勻分布。
本研究發(fā)現(xiàn),灰海馬頭部和軀干硒含量為0.71~1.32 mg·kg-1,高于云紋石斑魚(yú)(E.moara)(0.41 mg·kg-1)、鞍帶石斑魚(yú)(E.lanceolatus)(0.21 mg·kg-1)和云紋石斑魚(yú)(♀)×鞍帶石斑魚(yú)(♂)的雜交種(0.30 mg·kg-1)[40]。大部分海水魚(yú)各組織間的硒含量有所不同,其中肝臟含量較高;例如,溝鲹(Atropus atropos)的肝臟(14.20 mg·kg-1)含硒量高于肌肉(1.21 mg·kg-1)、鰓(5.30 mg·kg-1)和整體(2.60 mg·kg-1),鯔肝臟硒含量(28.30 mg·kg-1)遠(yuǎn)高于其肌肉(1.40 mg·kg-1)、鰓(2.86 mg·kg-1)和整體(1.20 mg·kg-1)[41];也有個(gè)別魚(yú)的鰓絲含硒量較高,如短尾大眼鯛(Priacanthus macracanthus)鰓含硒量高達(dá)12.00 mg·kg-1,是肌肉含量的6倍,這可能與其生活水域有關(guān),有研究表明,魚(yú)鰓中的微量元素含量反映了生活水域中的元素濃度[18]。海馬頭部硒含量顯著低于軀干,說(shuō)明肝臟是硒的主要代謝器官。
海馬類(lèi)藥材補(bǔ)腎壯陽(yáng)的藥理成分為膽甾醇和膽甾烯類(lèi)等甾體類(lèi)化合物[3],本研究中不同性別及健康狀況灰海馬膽甾醇含量無(wú)顯著差異,灰海馬頭部膽甾醇含量均值為1 828.93 ~2 164.62 mg·kg-1,軀 干 膽 甾 醇 含 量 均 值 為1 893.82 ~2 555.56 mg·kg-1,低于大海馬的總甾醇含量[4](5 010.00 mg·kg-1),而總甾醇包括膽甾醇、膽甾烯等甾體類(lèi)化合物,且大海馬的研究中以整體干品為研究對(duì)象,故認(rèn)為灰海馬膽甾醇含量可能與大海馬相近。本研究中灰海馬頭部和軀干部膽甾醇含量總和與已報(bào)道的雌雄灰海馬膽甾醇[5]含量相當(dāng)。核苷類(lèi)物質(zhì)是改善人類(lèi)健康和預(yù)防疾病的重要成分,是眾多中藥材的重要活性成分之一,該類(lèi)物質(zhì)可參與DNA的代謝過(guò)程,可調(diào)節(jié)機(jī)體各種生理活動(dòng),具有抗菌、抗病毒、提高機(jī)體免疫力、改善肝損傷、預(yù)防心血管疾病和調(diào)節(jié)中樞神經(jīng)系統(tǒng)等多種功效[42]。灰海馬體內(nèi)共檢測(cè)到2種核苷酸和6種核苷,其中尿苷含量最高。雄海馬尿苷含量顯著高于雌海馬,這與閆珍珍等[5]的研究結(jié)果一致。肌苷含量則是雄性低于雌性,可能與本研究將未懷孕的雄海馬作為研究對(duì)象有關(guān),先前的研究認(rèn)為雄海馬未懷孕時(shí)肌苷含量低于雌海馬,但雄海馬受孕后其肌苷含量高于雌性[7]。腺嘌呤、鳥(niǎo)苷和胸苷頭部含量顯著高于軀干,說(shuō)明海馬體內(nèi)核苷類(lèi)物質(zhì)分布不均勻,產(chǎn)生差異的原因尚不明確,有待進(jìn)一步研究。
研究表明,養(yǎng)殖大海馬[43-44]的體質(zhì)量、體長(zhǎng)(本文為體高)、體寬、體厚、胸鰭長(zhǎng)、背鰭長(zhǎng)、眼徑、頭長(zhǎng)、軀干長(zhǎng)/體寬、頭長(zhǎng)/吻長(zhǎng)、體長(zhǎng)/頭長(zhǎng)、色澤和氣味可作為商品等級(jí)的劃分依據(jù),其中濕重、干重和體長(zhǎng)指標(biāo)為優(yōu)勢(shì)指標(biāo),即這3項(xiàng)指標(biāo)高的海馬品質(zhì)好。參考大海馬外觀聚類(lèi)分析的結(jié)果,本文所測(cè)灰海馬的濕重、干重和體長(zhǎng)指標(biāo)介于第Ⅲ類(lèi)群和第Ⅳ類(lèi)群之間,考慮到將海馬的頭部和軀干分開(kāi)檢測(cè),所以飽和脂肪酸含量和單不飽和脂肪酸含量均略低于第Ⅲ類(lèi)群(55.99%、34.40%)和第Ⅳ類(lèi)群(47.81%、31.38%)。必需氨基酸含量為13.90~17.81 g·100g-1,與第Ⅲ類(lèi)群(15.84 g·100g-1)相近;支鏈氨基酸含量均值為6.09~7.74 g·100g-1,與第Ⅲ類(lèi)群(7.143 g·100g-1)相近;脂肪族氨基酸含量均值為44.40~56.09 g·100g-1,高于第Ⅲ類(lèi)群(27.196 g·100g-1);雜環(huán)族氨基酸均值為6.17~7.41 g·100g-1,高于第Ⅲ類(lèi)群(5.395 g·100g-1)。