黨 娟

（六盤水市水城區(qū)農(nóng)業(yè)農(nóng)村局，貴州 水城 553600）

蔬菜是六盤水市水城區(qū)重要的初級農(nóng)產(chǎn)品，也是區(qū)級農(nóng)業(yè)監(jiān)管部門日常開展農(nóng)藥殘留檢測的主要分析對象。有機(jī)磷類農(nóng)藥作為廣譜性殺蟲劑，廣泛應(yīng)用于蔬菜生產(chǎn)種植中，其引起的農(nóng)藥殘留問題也備受重視［1］。有機(jī)氯、菊酯類農(nóng)藥在人體的代謝速度慢，易在人體脂肪組織中積累，極易在環(huán)境中沉積，對人體健康產(chǎn)生各種危害［2-3］。

目前，農(nóng)產(chǎn)品中的藥物殘留檢測已成為監(jiān)管監(jiān)控農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全狀況、保障人民身體健康的重要手段和必要措施。相關(guān)農(nóng)業(yè)監(jiān)管部門測定蔬菜中多種有機(jī)磷、有機(jī)氯農(nóng)藥殘留時，多采用農(nóng)業(yè)行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)NY/T 761—2008，該方法準(zhǔn)確性易受蔬菜基質(zhì)影響，產(chǎn)生基質(zhì)效應(yīng)，造成結(jié)果偏差，影響最后結(jié)果判定［4］?；|(zhì)效應(yīng)指樣品中除分析物以外的其他成分對待測物測定值的影響，即基質(zhì)對分析方法準(zhǔn)確測定分析物的能力的干擾。在氣相色譜分析中，一般認(rèn)為基質(zhì)效應(yīng)產(chǎn)生是樣品中的組分分子與目標(biāo)分析物分子競爭進(jìn)樣口和柱頭的活性點(diǎn)，而具體產(chǎn)生機(jī)制還不清楚［5］。在實(shí)際檢測工作中，當(dāng)農(nóng)產(chǎn)品中某種農(nóng)藥殘留量的檢出值處在最大殘留量限值的臨界值上下或存在較強(qiáng)基質(zhì)效應(yīng)影響時，容易產(chǎn)生假陽性，影響對樣品是否合格的判定，一般采用空白基質(zhì)加標(biāo)準(zhǔn)溶液進(jìn)行測定結(jié)果校正，以免錯判，造成錯罰。因此，校準(zhǔn)基質(zhì)效應(yīng)對提升農(nóng)藥殘留檢驗(yàn)檢測技術(shù)水平及農(nóng)產(chǎn)品日常監(jiān)管至關(guān)重要［6］。為六盤水6 種蔬菜中20 種有機(jī)農(nóng)藥殘留的檢測結(jié)果準(zhǔn)確性和有效性提供參考，掌握基質(zhì)效應(yīng)在農(nóng)產(chǎn)品農(nóng)藥殘留檢測中的關(guān)鍵影響，不斷提升農(nóng)藥殘留檢驗(yàn)檢測技術(shù)水平，持續(xù)加強(qiáng)日常農(nóng)產(chǎn)品農(nóng)藥殘留問題監(jiān)管監(jiān)測，保證農(nóng)產(chǎn)品的質(zhì)量，更好地促進(jìn)農(nóng)業(yè)農(nóng)產(chǎn)品的健康發(fā)展，試驗(yàn)利用氣相色譜法測定六盤水6 種蔬菜中20 種有機(jī)磷、有機(jī)氯、菊酯類農(nóng)藥在濃度0.08 mg/L、0.4 mg/L 下的響應(yīng)強(qiáng)度，研究基質(zhì)效應(yīng)對六盤水6種蔬菜中20種農(nóng)藥殘留檢測的影響。

1 材料與方法

1.1 材料

蘿卜、白菜、花菜、西紅柿、豇豆和黃瓜6種蔬菜樣品，采摘于貴州六盤水市水城區(qū)。按GB/T 8855 抽取各蔬菜樣品，采摘后直接打漿，充分混勻后置于－18℃冰箱中保存，備用。

儀器設(shè)備：GC-2014 氣相色譜儀（日本，島津公司），組織搗碎勻漿機(jī)（JJ-2B 型，江蘇省金壇市榮華儀器制造有限公司），電子天平（T-203，北京賽多利斯儀器系統(tǒng)有限公司），氮吹濃縮裝置（MTN-28000D，天津奧特恩斯儀器有限公司），溫度控制儀（8002型，北京永興明醫(yī)療儀器廠）。

試劑：乙酰甲胺磷、甲拌磷、毒死蜱、水胺硫磷、甲胺磷、滅線磷、氧樂果、樂果、甲基對硫磷、馬拉硫磷、三唑磷、百菌清、甲氰菊酯、氯氟氰菊酯、氯氰菊酯、溴氰菊酯、腐霉利、聯(lián)苯菊酯、氟氯氰菊酯、氰戊菊酯20種農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)品，濃度均為100 mg/L，購于農(nóng)業(yè)部環(huán)境保護(hù)科研監(jiān)測所，乙腈（色譜純），正己烷（色譜純），丙酮（色譜純、經(jīng)重蒸），氯化鈉（分析純，140℃烘烤4 h）。

1.2 方法

1.2.1 標(biāo)準(zhǔn)溶液制備 取各標(biāo)準(zhǔn)農(nóng)藥適量，用丙酮或正己烷配制濃度為8.00 mg/L 的標(biāo)準(zhǔn)儲備液，4℃冷藏避光，備用。臨用前用丙酮或空白基質(zhì)溶液稀釋成混合標(biāo)準(zhǔn)液。

1.2.2 樣品前處理 參照農(nóng)業(yè)行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)NY/T 761—2008，準(zhǔn)確稱取25.0 g 蔬菜試樣放入100 mL 燒杯中，加入50.0 mL 乙腈，高速勻漿2 min 后，用濾紙過濾到裝有7 g 氯化納的100 mL 具塞量筒中，收集濾液50 mL左右，蓋上塞子，劇烈震蕩1～2 min，鹽析，在室溫下靜置1 h，使乙腈相和水相分層。準(zhǔn)確吸取2 份10 mL 上清液，凈化，將裝有10.0 mL 上清液的燒杯置于70℃水浴鍋加熱，氮吹濃縮，保證杯底還有少許樣液，鹽濕狀態(tài)最佳。有機(jī)磷類：加入2.0 mL 丙酮，搖勻，轉(zhuǎn)移至15 mL 刻度離心管，用3.0 mL 丙酮分3 次沖洗燒杯，并轉(zhuǎn)移至離心管，定容至5 mL，渦旋儀混勻后，用0.2 μm濾膜過濾，待測；有機(jī)氯、菊酯類：加入2.0 mL 正己烷，搖勻備用。將florisil 柱依次用5 mL 洗液（丙酮∶正己烷=1∶9）、5.0 mL 正己烷預(yù)淋洗濕潤，使孔徑張開，去除雜質(zhì)，當(dāng)溶劑液面與柱吸附層表面水平，用15.0 mL 刻度離心管接收洗脫液5.0 mL 洗液多次沖洗燒杯后淋洗florisil 柱，水浴定容至5.0 mL，渦旋儀混勻后備用，待測。

1.2.3 氣相色譜條件 參照農(nóng)業(yè)行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)NY/T 761—2008，選 用DB-17色譜柱（30 m×0.53 mm×1.0 μm），進(jìn)樣口溫度：220℃；檢測器溫度：250℃；程序升溫：150℃（保持2 min），以8℃/min 升溫250℃，保持12 min；不分流方式進(jìn)樣，進(jìn)樣體積1 μL，載氣N2，流速10 mL/min，外標(biāo)法定量。

1.2.4 試驗(yàn)設(shè)計(jì) 用1.2.2 方法制備6 種蔬菜的空白基質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)溶液，分別配制0.08 mg/L、0.4 mg/L濃度水平，用GC-2014 氣相色譜儀進(jìn)行檢測，同條件下檢測標(biāo)準(zhǔn)樣品溶液。空白基質(zhì)加標(biāo)準(zhǔn)溶液的峰面積與標(biāo)準(zhǔn)樣品溶液的峰面積之比為基質(zhì)效應(yīng)?；|(zhì)效應(yīng)公式：ME=B/A，式中ME 為基質(zhì)效應(yīng)，A 為標(biāo)準(zhǔn)樣品溶液峰面積，B 為空白基質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)溶液峰面積；農(nóng)藥在6種蔬菜中20種農(nóng)藥基質(zhì)效應(yīng)強(qiáng)弱采用Matuszewski B K等［7］評價，基質(zhì)效應(yīng)≤0.85，基質(zhì)對農(nóng)藥分析物的響應(yīng)產(chǎn)生抑制作用，0.85＜基質(zhì)效應(yīng)≤1.15，基質(zhì)效應(yīng)非常小，或不存在基質(zhì)效應(yīng)，基質(zhì)效應(yīng)＞1.15，基質(zhì)增強(qiáng)農(nóng)藥分析物響應(yīng)。

2 結(jié)果與分析

2.1 蘿卜中20種農(nóng)藥不同基質(zhì)溶液濃度下的基質(zhì)效應(yīng)

由表1 可知，在蘿卜中20 種農(nóng)藥濃度為0.08 mg/L 時，基質(zhì)效應(yīng)為0.826～1.972，乙酰甲胺磷、氧樂果的基質(zhì)效應(yīng)最強(qiáng)，分別為1.972 和1.894，能明顯增強(qiáng)分析物響應(yīng)，百菌清的基質(zhì)效應(yīng)最弱，為0.826，甲胺磷、氰戊菊酯等為0.913～1.048，基質(zhì)效應(yīng)非常小，或不存在基質(zhì)效應(yīng)。 在農(nóng)藥濃度為0.4 mg/L 時，基質(zhì)效應(yīng)為0.891～1.523，氧樂果、乙酰甲胺磷的基質(zhì)效應(yīng)較強(qiáng)，分別為1.523 和1.467，百菌清的基質(zhì)效應(yīng)最弱，為0.891，甲胺磷、氰戊菊酯等為0.949～1.080，基質(zhì)效應(yīng)非常弱，或不存在基質(zhì)效應(yīng)。該方法下，除乙酰甲胺磷、氧樂果之外，其他農(nóng)藥基質(zhì)效應(yīng)對分析蘿卜中的農(nóng)藥殘留影響可以接受。

表1 蘿卜中20種農(nóng)藥不同濃度下的基質(zhì)效應(yīng)

2.2 白菜中20種農(nóng)藥不同濃度下的基質(zhì)效應(yīng)

由表2 可知，白菜基質(zhì)中20 種農(nóng)藥濃度為0.08 mg/L 時，基質(zhì)效應(yīng)為0.785～2.014，乙酰甲胺磷、氧樂果基質(zhì)效應(yīng)最強(qiáng)，分別為2.014 和1.954，能明顯增強(qiáng)分析物響應(yīng)，百菌清基質(zhì)效應(yīng)為0.785，對分析物的分析具有抑制作用，其他農(nóng)藥基質(zhì)效應(yīng)均為0.85～1.15，基質(zhì)效應(yīng)非常小，或不存在基質(zhì)效應(yīng)。在農(nóng)藥濃度為0.4 mg/L 時，基質(zhì)效應(yīng)為0.877～1.889，氧樂果、乙酰甲胺磷的基質(zhì)效應(yīng)增強(qiáng)，分別為1.889 和1.713，其他農(nóng)藥基質(zhì)效應(yīng)為0.877～1.023，即基質(zhì)效應(yīng)非常小，或不存在基質(zhì)效應(yīng)。

表2 白菜中20種農(nóng)藥不同濃度下的基質(zhì)效應(yīng)

2.3 花菜中20種農(nóng)藥不同濃度下的基質(zhì)效應(yīng)

由表3 可知，在花菜基質(zhì)中，20 種農(nóng)藥濃度為0.08 mg/L 時，基質(zhì)效應(yīng)為0.979～2.234，氧樂果、乙酰甲胺磷、水胺硫磷、溴氰菊酯、甲胺磷、毒死蜱6 種農(nóng)藥基質(zhì)效應(yīng)均大于1.15，分 別 為2.234、1.815、1.454、1.315、1.251、1.198。花菜基質(zhì)增強(qiáng)農(nóng)藥分析物的響應(yīng)，花菜中農(nóng)藥的基質(zhì)效應(yīng)影響較其他基質(zhì)顯著，存在較強(qiáng)的基質(zhì)干擾。其他農(nóng)藥基質(zhì)效應(yīng)均為0.85～1.15，基質(zhì)效應(yīng)非常小，或不存在基質(zhì)效應(yīng)。當(dāng)農(nóng)藥濃度為0.4 mg/L 時，基質(zhì)效應(yīng)為0.968～2.02，氧樂果、乙酰甲胺磷存在較強(qiáng)基質(zhì)效應(yīng)，分別為2.02 和1.678，對檢測結(jié)果存在較大影響，水胺硫磷為1.214，存在基質(zhì)效應(yīng)增強(qiáng)，其他農(nóng)藥基質(zhì)效應(yīng)均為0.85～1.15，基質(zhì)效應(yīng)非常小，或不存在基質(zhì)效應(yīng)。花菜蛋白質(zhì)、脂肪、碳水化合物、食物纖維等不易揮發(fā)性物質(zhì)含量較高，影響儀器進(jìn)樣口活性，減少吸附，引起較強(qiáng)的基質(zhì)效應(yīng)。

表3 花菜中20種農(nóng)藥不同濃度下的基質(zhì)效應(yīng)

2.4 西紅柿中20 種農(nóng)藥不同濃度下的基質(zhì)效應(yīng)

由表4 可知，在西紅柿中20 種農(nóng)藥濃度為0.08 mg/L 時，基質(zhì)效應(yīng)為0.946～1.981，氧樂果、乙酰甲胺磷基質(zhì)效應(yīng)較強(qiáng)，分別為1.981 和1.618，能增強(qiáng)分析物響應(yīng)，百菌清基質(zhì)效應(yīng)（1.391）次之，水胺硫磷也存在有基質(zhì)效應(yīng)增強(qiáng)（1.252），其他農(nóng)藥基質(zhì)效應(yīng)均為0.85～1.15，基質(zhì)效應(yīng)非常小，或不存在基質(zhì)效應(yīng)。在農(nóng)藥濃度為0.4 mg/L 時，基質(zhì)效應(yīng)為0.931～1.784，氧樂果、乙酰甲胺磷、百菌清的基質(zhì)效應(yīng)較強(qiáng)，分別為1.784、1.571 和1.253，其他農(nóng)藥基質(zhì)效應(yīng)均為0.85～1.15，基質(zhì)效應(yīng)非常小，或不存在基質(zhì)效應(yīng)。六盤水當(dāng)?shù)氐奈骷t柿富含有機(jī)酸，百菌清在酸性基質(zhì)中較穩(wěn)定，含有酸性成分的基質(zhì)有減少或抑制異構(gòu)體轉(zhuǎn)化的作用［8］，引起較強(qiáng)的基質(zhì)效應(yīng)。

表4 西紅柿中20種農(nóng)藥不同濃度下的基質(zhì)效應(yīng)

2.5 豇豆中20種農(nóng)藥不同濃度下的基質(zhì)效應(yīng)

由表5 可知，在豇豆基質(zhì)中，當(dāng)農(nóng)藥濃度為0.08 mg/L 時，基質(zhì)效應(yīng)為0.965～2.312，氧樂果、乙酰甲胺磷的基質(zhì)效應(yīng)增強(qiáng)明顯，分別為2.312 和2.254，水胺硫磷（1.547）＞溴氰菊酯（1.358）＞甲胺磷（1.245）＞甲拌磷（1.184）＞氰戊菊酯（1.183），其他農(nóng)藥基質(zhì)效應(yīng)均為0.85～1.15，對農(nóng)藥分析影響不明顯，基質(zhì)效應(yīng)非常小，或不存在基質(zhì)效應(yīng)。當(dāng)農(nóng)藥濃度為0.4 mg/L 時，基質(zhì)效應(yīng)為0.953～2.035，乙酰甲胺磷、氧樂果、水胺硫磷、溴氰菊酯基質(zhì)效應(yīng)增強(qiáng)，分別為2.035、1.895、1.487 和1.215，其他農(nóng)藥基質(zhì)效應(yīng)均為0.85～1.15，基質(zhì)效應(yīng)非常小，或不存在基質(zhì)效應(yīng)?？梢婔垢缓鞍踪|(zhì)、淀粉、脂肪、粗纖維等不易揮發(fā)性物質(zhì)含量較高，且水分含量相對較低，不易揮發(fā)性物質(zhì)含量較高，易使儀器進(jìn)樣口活性點(diǎn)占據(jù)，減少農(nóng)藥的吸附量，會引起較強(qiáng)的基質(zhì)效應(yīng)［9］。

表5 豇豆中20種農(nóng)藥不同濃度下的基質(zhì)效應(yīng)

2.6 黃瓜中20 種農(nóng)藥不同濃度下的的基質(zhì)效應(yīng)

由表6 可知，在黃瓜基質(zhì)中，當(dāng)農(nóng)藥濃度為0.08 mg/L 時，基質(zhì)效應(yīng)為0.821～2.125，氧樂果的基質(zhì)效應(yīng)最強(qiáng)，達(dá)2.125，其次為乙酰甲胺磷、水胺硫磷，分別為1.616、1.273。百菌清的基質(zhì)效應(yīng)減弱，為0.821，基質(zhì)對農(nóng)藥分析物的響應(yīng)產(chǎn)生抑制作用。其他農(nóng)藥基質(zhì)效應(yīng)均為0.85～1.15，基質(zhì)效應(yīng)非常小，或不存在基質(zhì)效應(yīng)。當(dāng)農(nóng)藥濃度為0.4 mg/L 時，氧樂果基質(zhì)效應(yīng)最強(qiáng)，為1.657，乙酰甲胺磷次之，為1.453，其他農(nóng)藥基質(zhì)效應(yīng)在0.897～1.162；可見黃瓜中氧樂果、乙酰甲胺磷的基質(zhì)效應(yīng)在低濃度下表現(xiàn)較強(qiáng)，農(nóng)藥濃度升高，基質(zhì)效應(yīng)強(qiáng)度降低，其他農(nóng)藥基質(zhì)效應(yīng)不明顯。

表6 黃瓜中20種農(nóng)藥不同濃度下的基質(zhì)效應(yīng)

3 討論與結(jié)論

采用氣相色譜法測定六盤水6 種蔬菜中的20 種農(nóng)藥，多數(shù)農(nóng)藥均存在不同程度的基質(zhì)效應(yīng)，以氧樂果、乙酰甲胺磷為例，氧樂果在低濃度0.08 mg/L 時，基質(zhì)效應(yīng)為1.894～2.312，而在高濃度0.4 mg/L 時，基質(zhì)效應(yīng)為1.523～2.02；乙酰甲胺磷在低濃度0.08 mg/L 時，基質(zhì)效應(yīng)為1.815～2.154，而在高濃度0.4 mg/L 時，基質(zhì)效應(yīng)為1.453～2.035，所以低濃度農(nóng)藥產(chǎn)生的基質(zhì)效應(yīng)較高濃度農(nóng)藥的基質(zhì)效應(yīng)明顯。6 種蔬菜中19種農(nóng)藥在氣相色譜法測定中普遍表現(xiàn)為基質(zhì)增強(qiáng)效應(yīng)，特別是樂果和乙酰甲胺磷，基質(zhì)效應(yīng)分別為1.523～2.312、1.453～2.254。百菌清在濃度0.08 mg/L 時，蘿卜、白菜、黃瓜基質(zhì)中出現(xiàn)基質(zhì)效應(yīng)減弱，分別為0.826、0.785、0.821，基質(zhì)減弱效應(yīng)可能是個別農(nóng)藥在特定的基質(zhì)中會產(chǎn)生降解或者結(jié)構(gòu)轉(zhuǎn)化，引起基質(zhì)效應(yīng)減弱，而百菌清在西紅柿基質(zhì)中較為穩(wěn)定，其酸性基質(zhì)特性起保護(hù)作用，減少異構(gòu)體轉(zhuǎn)化，引起基質(zhì)效應(yīng)增強(qiáng)。VLADIMIR 等［10］評價了農(nóng)藥在甘藍(lán)、柑桔、小麥三種不同基質(zhì)中的穩(wěn)定性，在20℃條件下儲存40 d 后，甘藍(lán)基質(zhì)中百菌清和異菌腮發(fā)生了濃度降低現(xiàn)象，在柑桔基質(zhì)中異菌腮、抗蚜威和多數(shù)有機(jī)磷農(nóng)藥均發(fā)現(xiàn)了降解現(xiàn)象。試驗(yàn)中蘿卜、白菜、黃瓜基質(zhì)存在農(nóng)藥部分降解或抑制作用，在實(shí)際檢測過程中，蘿卜、白菜、黃瓜會考慮加入微量1%甲酸或1%乙酸可提高百菌清穩(wěn)定性。20 種農(nóng)藥同一濃度在同一基質(zhì)之間基質(zhì)效應(yīng)差異明顯，這可能與每種農(nóng)藥的特殊分子結(jié)構(gòu)、極性等有關(guān)，同一農(nóng)藥在相同濃度不同蔬菜間的基質(zhì)效應(yīng)影響較相似。

試驗(yàn)表明，6 種蔬菜中氧樂果、乙酰甲胺磷的基質(zhì)效應(yīng)表現(xiàn)較為突出，基質(zhì)明顯增強(qiáng)農(nóng)藥分析物的響應(yīng)。氧樂果在低濃度0.08 mg/L 時，基質(zhì)效應(yīng)為1.894～2.312，而在高濃度0.4 mg/L 時，基質(zhì)效應(yīng)為1.523～2.02；乙酰甲胺磷在低濃度0.08 mg/L 時，基質(zhì)效應(yīng)為1.815～2.154，而在高濃度0.4 mg/L 時，基質(zhì)效應(yīng)為1.453～2.035；百菌清濃度為0.08 mg/L時，在蘿卜、白菜、黃瓜基質(zhì)中出現(xiàn)基質(zhì)效應(yīng)減弱，分別為0.826、0.785、0.821，基質(zhì)對農(nóng)藥分析物的響應(yīng)產(chǎn)生抑制作用。在實(shí)際檢測過程中，采用氣相色譜法進(jìn)行果蔬的農(nóng)藥殘留檢測時，要注意基質(zhì)效應(yīng)的影響，特別是低濃度農(nóng)藥產(chǎn)生的基質(zhì)效應(yīng)較高濃度農(nóng)藥的基質(zhì)效應(yīng)更為明顯。建議采用空白基質(zhì)加標(biāo)準(zhǔn)溶液校正，以保證檢測結(jié)果有效性和準(zhǔn)確性，持續(xù)提升農(nóng)業(yè)監(jiān)管部門監(jiān)管能力，保證農(nóng)產(chǎn)品的質(zhì)量，更好的促進(jìn)農(nóng)業(yè)農(nóng)產(chǎn)品的健康發(fā)展。