李金秋，徐麗秀，朱佳瑜，夏依達(dá)·吐爾遜，阿仙姑·哈斯木

新疆醫(yī)科大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院/新疆地方病分子生物學(xué)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，烏魯木齊 836001

宮頸鱗癌(cervical squamous cell carcinoma，CSCC)是婦科常見的惡性腫瘤之一，其發(fā)病正逐漸年輕化(20～39歲)，2020年的統(tǒng)計(jì)數(shù)據(jù)顯示，中國宮頸癌新發(fā)病例達(dá)11萬例，死亡病例約6萬例，居惡性腫瘤第10位[1]。晚期宮頸癌患者死亡的主要原因?yàn)槟[瘤細(xì)胞生長(zhǎng)速度過快及難以控制的盆腔淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移[2]。腫瘤的發(fā)生發(fā)展是一個(gè)復(fù)雜的過程，而過度的細(xì)胞增殖及細(xì)胞凋亡程序的紊亂是造成惡性腫瘤發(fā)生的主要原因之一[3-4]。激活性蛋白激酶C受體1(receptor for activated C kinase 1，RACK1)，是一種胞質(zhì)內(nèi)游離的支架蛋白，可與蛋白激酶C(PKC)及其他多種關(guān)鍵信號(hào)蛋白相互作用，進(jìn)一步介導(dǎo)細(xì)胞內(nèi)的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)，直接參與多個(gè)重要基因的表達(dá)調(diào)控，影響細(xì)胞增殖、凋亡及遷移[5]。目前已有研究發(fā)現(xiàn)，RACK1在多種惡性腫瘤中呈高表達(dá)并與患者的不良預(yù)后密切相關(guān)，已被確定為脂肪細(xì)胞分化和代謝紊亂所需的新基因[6]。但RACK1異常表達(dá)對(duì)宮頸癌細(xì)胞增殖及凋亡的作用機(jī)制仍不明確。本研究檢測(cè)RACK1在宮頸癌組織中的表達(dá)水平，并通過構(gòu)建慢病毒穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞系驗(yàn)證RACK1對(duì)宮頸癌細(xì)胞惡性增殖及凋亡能力的影響，以期為明確宮頸癌發(fā)病機(jī)制及改善患者的預(yù)后提供一定的理論基礎(chǔ)。

1 材料與方法

1.1 組織樣本 收集新疆醫(yī)科大學(xué)第一附屬醫(yī)院婦科2020年12月－2021年12月收治的24例CSCC患者的宮頸癌組織和24例無宮頸病變的正常宮頸組織。本研究獲新疆醫(yī)科大學(xué)第一附屬醫(yī)院倫理委員會(huì)批準(zhǔn)(20180223-128)。所有患者均簽署書面知情同意書。

1.2 細(xì)胞及試劑 宮頸癌SiHa、C33a細(xì)胞株及正常宮頸H8細(xì)胞株購自武漢普諾森生命科技有限公司。RACK1-siRNA慢病毒由上海吉?jiǎng)P有限公司構(gòu)建。RIPA組織細(xì)胞裂解液、Trizol試劑購自北京索萊寶生物科技有限公司，c-myc、caspase-3、caspase-9、Bax、Bcl-2單克隆抗體購自美國CST公司，RACK1、磷酸化Janus激酶2(p-JAK2)、磷酸化細(xì)胞信號(hào)傳導(dǎo)與轉(zhuǎn)錄活化因子3(p-STAT3)、JAK2、STAT3抗體購自美國Abcam公司，β-actin兔抗人多克隆抗體購自美國Protein Teach公司，QuantiNova SYBR Green PCR Kit試劑盒購自德國Qiagen公司，7AAD凋亡檢測(cè)試劑盒購自美國BD公司。

1.3 方法

1.3.1 細(xì)胞培養(yǎng)、轉(zhuǎn)染及分組 用含10%胎牛血清(FBS)及1%青鏈霉素雙抗的DMEM高糖培養(yǎng)基培養(yǎng)SiHa、H8細(xì)胞，用含10% FBS及1%青鏈霉素雙抗的DMEM中糖培養(yǎng)基并添加1%的谷氨酰胺培養(yǎng)C33a細(xì)胞。均放置在恒溫、5% CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。顯微鏡下觀察細(xì)胞密度達(dá)80%～90%時(shí)轉(zhuǎn)染慢病毒。SiHa和C33a細(xì)胞均根據(jù)不同處理方法分為正常對(duì)照組(NC)、空載組(sh-NON)和沉默組1(shRACK1-1)、沉默組2(shRACK1-2)。具體轉(zhuǎn)染步驟按照慢病毒構(gòu)建公司說明書進(jìn)行操作。轉(zhuǎn)染24 h后，將部分細(xì)胞消化并均勻鋪在激光共聚焦小皿內(nèi)，待完全貼壁后，加入DAPI避光染細(xì)胞核15 min，PBS沖洗3次，每次15 min，將小皿放置于激光共聚焦顯微鏡下觀察轉(zhuǎn)染效率，拍照。qPCR驗(yàn)證轉(zhuǎn)染后RACK1的表達(dá)情況。

1.3.2 宮頸組織RNA的提取 采用Trizol提取宮頸組織中的RNA，在液氮中取出癌組織以及正常組織，剪成1～2 mm的塊狀，放入2.0 ml U底管中，加入4 mm大型鋼柱珠子1粒，3 mm小型鋼珠2粒，蓋上蓋子放進(jìn)液氮中冷凍60 s；取出2.0 ml U底管，加入1 ml Trizol溶液。設(shè)置研磨儀參數(shù)(頻率60 Hz)，研磨30 s。研磨充分后，采用Trizol法提取C33a、SiHa和H8細(xì)胞總RNA，根據(jù)RevertAid First Strand cDNA試劑盒說明書將RNA反轉(zhuǎn)錄合成cDNA。

1.3.3 qRT-PCR檢測(cè)宮頸癌組織及C33a、SiHa細(xì)胞中RACK1、c-myc、caspase-3、caspase-9、Bax、Bcl-2mRNA的表達(dá)水平 根據(jù)QuantiNova SYBR Green PCR kit試劑盒說明，配制總反應(yīng)體積為10 μl的反應(yīng)體系，以β-actin作為內(nèi)參照。檢測(cè)CSCC組織、NC組織及H8細(xì)胞中RACK1mRNA的表達(dá)水平，以及CSCC組織內(nèi)c-myc、caspase-3、caspase-9、Bax、Bcl-2mRNA的表達(dá)水平，并檢測(cè)shRACK1-1、shRACK1-2、sh-NON組和NC組C33a、SiHa細(xì)胞中RACK1、c-myc、caspase-3、caspase-9、Bax、Bcl-2mRNA的相對(duì)表達(dá)水平。采用2–ΔΔCt法計(jì)算mRNA相對(duì)表達(dá)量，實(shí)驗(yàn)均重復(fù)3次。引物序列見表1。

表1 qRT-PCR引物序列Tab.1 The qRT-PCR primer sequences

1.3.4 Western blotting檢測(cè)RACK1、c-myc、caspase-3、caspase-9、Bax、Bcl-2、p-JAK2、p-STAT3、JAK2、STAT3蛋白表達(dá)水平 收集各組細(xì)胞沉淀加入RIPA細(xì)胞裂解液與PMSF(100:1)，提取各組細(xì)胞總蛋白并使用BCA試劑盒檢測(cè)蛋白濃度，根據(jù)蛋白濃度進(jìn)行定量。高溫變性后每組取30 μg蛋白進(jìn)行80 min電泳分離，電轉(zhuǎn)至PVDF膜上，室溫用5%脫脂牛奶封閉2 h，4 ℃一抗孵育過夜，二抗(HRP標(biāo)記)孵育2 h。采用ECL法顯色，使用化學(xué)發(fā)光儀進(jìn)行拍照并分析其灰度值，計(jì)算各蛋白相對(duì)表達(dá)量。

1.3.5 MTT實(shí)驗(yàn)檢測(cè)細(xì)胞活性 采用MTT法檢測(cè)各組C33a、SiHa細(xì)胞的增殖能力，分別在接種后第24、48、72 h檢測(cè)OD值。將細(xì)胞以5×103個(gè)/150 μl密度接種于96孔板中，每組設(shè)3個(gè)復(fù)孔，每隔24 h取出，45°傾斜96孔板，將20 μl MTT溶液沿空壁加至培養(yǎng)基中，隨后繼續(xù)培養(yǎng)，4 h后棄去上清，沿孔壁緩緩加入150 μl二甲基亞砜(DMSO)，酶標(biāo)儀設(shè)定所需的程序后，振蕩10 min，檢測(cè)波長(zhǎng)490 nm處的OD值。

1.3.6 平板克隆實(shí)驗(yàn)檢測(cè)細(xì)胞集落形成能力 取各組對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期細(xì)胞，胰酶消化，將細(xì)胞吹散并懸浮于完全培養(yǎng)基中。每組細(xì)胞分別以103個(gè)/孔接種至6孔板中，每孔含2 ml完全培養(yǎng)基。37 ℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng)2周，當(dāng)出現(xiàn)肉眼可見的形似菌落時(shí)終止培養(yǎng)。棄上清，PBS洗3次，每次10 min，每孔加入3 ml固定液，常溫固定30 min后，PBS洗2次，加800 μl結(jié)晶紫溶液浸染10 min，PBS沖洗至液體澄清，自然干燥。觀察大體趨勢(shì)后，顯微鏡下計(jì)數(shù)細(xì)胞團(tuán)并拍照。

1.3.7 流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)細(xì)胞凋亡水平 收集各組穩(wěn)定轉(zhuǎn)染的細(xì)胞株，PBS洗3次，胰酶消化后5000 r/min離心10 min，加入100 μl結(jié)合緩沖液，重懸細(xì)胞并將細(xì)胞密度調(diào)整為1×106/ml，加入5 μl Annexin V-FITC和PE，避光雙染15 min，再次加入400 μl緩沖液，采用流式細(xì)胞儀檢測(cè)細(xì)胞凋亡水平的變化。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 采用SPSS 19.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。計(jì)量資料以±s表示，兩組間比較采用t檢驗(yàn)，多組間比較采用單因素方差分析，進(jìn)一步兩兩比較采用LSD-t檢驗(yàn)；RACK1mRNA與c-myc、caspase-9、caspase-3、Bax、Bcl-2mRNA表達(dá)水平的相關(guān)性采用Spearman相關(guān)分析。P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié) 果

2.1 RACK1在宮頸癌組織、正常宮頸組織和宮頸癌細(xì)胞中的表達(dá)情況 qRT-PCR檢測(cè)結(jié)果顯示，與正常宮頸組織(NC)相比較，宮頸癌組織(CSCC)中RACK1mRNA表達(dá)水平明顯升高(P<0.001，圖1A)；且C33a、SiHa細(xì)胞中RACK1mRNA的表達(dá)水平明顯高于H8細(xì)胞(P<0.001，圖1B)。Western blotting檢測(cè)結(jié)果顯示，與H8細(xì)胞(0.4083±0.0931)相比，C33a(1.3697±0.0587)和SiHa(1.2848±0.0899)細(xì)胞中RACK1蛋白表達(dá)水平明顯增高(P<0.001，圖1C)。

圖1 RACK1在宮頸癌組織(CSCC)、正常宮頸組織(NC)和宮頸癌細(xì)胞中的表達(dá)Fig.1 Expression of RACK1 in cervical cancer and normal cervical tissues and cells

2.2 宮頸癌C33a和SiHa細(xì)胞轉(zhuǎn)染慢病毒后RACK1mRNA和蛋白的表達(dá)情況 Western blotting檢測(cè)結(jié)果顯示，shRACK1-1組和shRACK1-2組C33a、SiHa細(xì)胞的RACK1蛋白表達(dá)水平較NC組、sh-NON組明顯降低(P<0.001，圖2A)，而sh-NON組與NC組比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。qRT-PCR檢測(cè)結(jié)果與Western blotting檢測(cè)結(jié)果一致(圖2B)。故后續(xù)實(shí)驗(yàn)僅選用shRACK1-1、shRACK1-2和sh-NON組進(jìn)行檢測(cè)。

圖2 慢病毒轉(zhuǎn)染后各組宮頸癌C33a、SiHa細(xì)胞RACK1 mRNA及蛋白表達(dá)情況Fig.2 mRNA and protein expression of RACK1 in cervical cancer C33a and SiHa cells of each group after lentivirus transfection

2.3 沉默RACK1對(duì)宮頸癌細(xì)胞增殖能力的影響MTT法檢測(cè)結(jié)果顯示，shRACK1-1、shRACK1-2組C33a、SiHa細(xì)胞在24 h、48 h和72 h的生長(zhǎng)速度均較sh-NON組明顯降低(P<0.001，圖3A)。平板克隆實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，與sh-NON組比較，shRACK1-1組和shRACK1-2組C33a、SiHa細(xì)胞的集落形成能力明顯被抑制(圖3B)。

圖3 沉默RACK1對(duì)宮頸癌C33a和SiHa細(xì)胞增殖及集落形成能力的影響Fig.3 Effect of RACK1 silencing on proliferation and colony formation of cervical cancer C33a and SiHa cells

2.4 沉默RACK1對(duì)宮頸癌細(xì)胞凋亡的影響 流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)結(jié)果顯示，shRACK1-1組及shRACK1-2組C33a、SiHa細(xì)胞總凋亡率均較sh-NON組明顯增高(P<0.001)(圖4)。

圖4 流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)沉默RACK1對(duì)宮頸癌C33a和SiHa細(xì)胞凋亡的影響Fig.4 Effect of RACK1 silencing on apoptosis of cervical cancer C33a and SiHa cells (Flow cytometry)

2.5 沉默RACK1對(duì)宮頸癌C33a和SiHa細(xì)胞增殖及凋亡相關(guān)蛋白表達(dá)的影響 Western blotting檢測(cè)結(jié)果顯示，沉默RACK1后，與sh-NON組比較，shRACK1-1組和shRACK1-2組C33a、SiHa細(xì)胞中增殖相關(guān)的關(guān)鍵蛋白c-myc和抗凋亡蛋白Bcl-2表達(dá)水平明顯降低，而促凋亡蛋白caspase-3、caspase-9、Ba x的表達(dá)水平明顯升高(P<0.001或P<0.01，圖5A)。qRT-PCR檢測(cè)結(jié)果與Western blotting檢測(cè)結(jié)果一致(P<0.001，圖5B)。

圖5 沉默RACK1后各組C33a、SiHa細(xì)胞增殖、凋亡相關(guān)蛋白及mRNA的表達(dá)情況Fig.5 Proteins and mRNA expression related to proliferation and apoptosis in each group of C33a and SiHa cells after RACK1 silencing

2.6 宮頸癌組織中RACK1mRNA與增殖、凋亡相關(guān)基因表達(dá)的相關(guān)性 Spearman相關(guān)分析結(jié)果顯示，宮頸癌組織中RACK1mRNA的表達(dá)水平與c-myc(r=0.713，P<0.001)、Bcl-2(r=0.846，P<0.001)mRNA呈明顯正相關(guān)，而與caspase-3(r=–0.679，P<0.001)、caspase-9(r=–0.735，P<0.001)、Bax(r=–0.691，P<0.001) mRNA表達(dá)水平呈明顯負(fù)相關(guān)(圖6)。

圖6 宮頸癌組織中RACK1 mRNA與c-myc、caspase-3、caspase-9、Bax、Bcl-2 mRNA表達(dá)的相關(guān)性Fig.6 Correlation between mRNA expression of RACK1 and the mRNA expression of c-myc, caspase-3, caspase-9, Bax and Bcl-2 in cervical cancer tissues

2.7 沉默RACK1對(duì)宮頸癌細(xì)胞中JAK2/STAT3通路的影響 Western blotting檢測(cè)結(jié)果顯示，與sh-NON組比較，shRACK1-1組、shRACK1-2組C33a、SiHa細(xì)胞的非磷酸化JAK2和STAT3表達(dá)水平差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，而p-JAK2、p-STAT3表達(dá)水平明顯升高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.001，圖7)。

圖7 沉默RACK1對(duì)宮頸癌細(xì)胞JAK2/STAT3通路的影響Fig.7 Effect of RACK1 silencing on JAK2/STAT3 pathway in cervical cancer cells

3 討 論

宮頸癌作為婦科常見的惡性腫瘤，全球每年新增病例超過50萬，而死亡人數(shù)高達(dá)30萬，嚴(yán)重威脅患者的生命安全，并加重社會(huì)及家庭的經(jīng)濟(jì)負(fù)擔(dān)[6]。宮頸癌發(fā)病的主要原因?yàn)槿祟惾轭^瘤病毒(HPV)持續(xù)感染，其次為多個(gè)性伴侶、性生活過早、吸煙等[7]。盡管隨著早期篩查的普及和臨床治療方法的改進(jìn)，宮頸癌發(fā)病率已大幅降低，但宮頸癌晚期轉(zhuǎn)移仍是造成其預(yù)后不良的重要原因[8]。在我國，西部地區(qū)宮頸癌死亡率較沿海城市高，尤其在新疆地區(qū)，宮頸癌作為高發(fā)腫瘤嚴(yán)重影響當(dāng)?shù)嘏曰颊叩纳钯|(zhì)量[9]。因此，明確腫瘤細(xì)胞增殖的分子機(jī)制，遏制細(xì)胞失控性增殖進(jìn)而減緩腫瘤的惡性進(jìn)展，對(duì)宮頸癌的臨床治療及患者的預(yù)后均具有積極意義。

RACK1是一種多功能支架蛋白，在細(xì)胞信號(hào)樞紐和蛋白活性調(diào)節(jié)中發(fā)揮重要作用，參與腫瘤細(xì)胞的增殖、遷移和侵襲。RACK1在乳腺癌[10]、口腔鱗狀細(xì)胞癌[11]、非小細(xì)胞肺癌[12]、前列腺癌[13]等多種腫瘤中的表達(dá)明顯增高，且與患者的不良預(yù)后密切相關(guān)。Liao等[14]發(fā)現(xiàn)，RACK1在宮頸癌中的表達(dá)明顯升高，下調(diào)RACK1的表達(dá)可延緩宮頸癌細(xì)胞的惡性進(jìn)展。Wang等[15]發(fā)現(xiàn)，RACK1可促進(jìn)宮頸癌miR-302b/c/d-3p的表達(dá)，抑制細(xì)胞周期蛋白O(Cyclin O)的表達(dá)，并誘導(dǎo)細(xì)胞發(fā)生凋亡。近年來有研究發(fā)現(xiàn)，RACK1可與其他多種蛋白結(jié)合形成信號(hào)復(fù)合體參與腫瘤細(xì)胞的增殖及遷移，如RACK1與GNA14's相互作用后通過MAPK/JNK和PI3K/Akt信號(hào)通路抑制肝細(xì)胞癌的惡性進(jìn)展[16]。2020年，Duan等[17]發(fā)現(xiàn)，RACK1可通過與NLRC3和NEK7相互作用，促進(jìn)NLRP3炎性小體的組裝，進(jìn)而介導(dǎo)NLRP3炎性小體的活化。此外，還有研究發(fā)現(xiàn)，RACK1表達(dá)上調(diào)可抑制Wnt/β-catenin信號(hào)通路的激活，從而減緩胃癌細(xì)胞的生長(zhǎng)和上皮-間質(zhì)轉(zhuǎn)化(EMT)的發(fā)生[18]。以上研究均提示，RACK1在腫瘤進(jìn)展過程中扮演的角色并非一成不變，可能會(huì)受到組織特異性及地域環(huán)境等因素的影響。本研究檢測(cè)了24例CSCC組織及24例NC組織RACK1mRNA的表達(dá)情況，以及兩種宮頸鱗狀癌細(xì)胞系(C33a和SiHa)和正常宮頸上皮細(xì)胞系(H8)中RACK1mRNA及蛋白的表達(dá)情況，結(jié)果發(fā)現(xiàn)RACK1在CSCC組織和C33a、SiHa細(xì)胞中均呈高表達(dá)，與上述文獻(xiàn)報(bào)道一致，提示RACK1可能與宮頸癌的惡性進(jìn)展相關(guān)。

腫瘤細(xì)胞的無限增殖和死亡抑制為腫瘤進(jìn)展提供了潛在的動(dòng)力。有研究發(fā)現(xiàn)，RACK1具有與幾種促凋亡蛋白相互作用的能力。在結(jié)腸癌細(xì)胞中，RACK1可與凋亡蛋白Fem1b相互作用，并促進(jìn)其泛素化，而下調(diào)RACK1則可導(dǎo)致Fem1b介導(dǎo)的細(xì)胞凋亡[19-20]。有研究提出，RACK1保護(hù)腫瘤細(xì)胞免于發(fā)生凋亡的作用主要與其調(diào)節(jié)BimEL的降解而產(chǎn)生的抗性有關(guān)[21]。本研究發(fā)現(xiàn)，RACK1沉默后，宮頸癌細(xì)胞SiHa、C33a的增殖能力明顯下降，細(xì)胞凋亡率明顯增高；增殖相關(guān)蛋白c-myc、抗凋亡蛋白Bcl-2表達(dá)明顯降低，而與細(xì)胞凋亡密切相關(guān)的蛋白caspase-3、caspase-9和Bax表達(dá)明顯增高。為進(jìn)一步證實(shí)RACK1與宮頸癌細(xì)胞增殖及凋亡有關(guān)，本研究應(yīng)用qRT-PCR方法檢測(cè)宮頸癌組織中RACK1mRNA的表達(dá)水平，并分析其與增殖和凋亡相關(guān)基因表達(dá)的相關(guān)性，結(jié)果顯示，在宮頸癌組織中，RACK1的表達(dá)與凋亡相關(guān)基因caspase-3、caspase-9和Bax呈明顯正相關(guān)，而與c-myc、Bcl-2呈明顯負(fù)相關(guān)。以上結(jié)果均提示，沉默RACK1可抑制宮頸癌細(xì)胞的增殖能力，促進(jìn)腫瘤細(xì)胞發(fā)生凋亡。

JAK2/STAT3作為經(jīng)典的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路，其異?；罨婕澳[瘤細(xì)胞的多種生物學(xué)改變，包括促進(jìn)腫瘤細(xì)胞增殖、轉(zhuǎn)移、侵襲等[22-23]。Yuan等[24]發(fā)現(xiàn)，補(bǔ)體C3過表達(dá)可激活JAK2/STAT3通路加速胃癌進(jìn)展。另有研究顯示，circSPARC可通過調(diào)節(jié)JAK2/STAT3通路促進(jìn)結(jié)直腸癌的惡性進(jìn)展[25]。然而，RACK1對(duì)JAK2/STAT3通路的調(diào)控機(jī)制鮮有報(bào)道，Zhang等[26]發(fā)現(xiàn)，RACK1通過募集JAK2至核糖體來調(diào)控STAT3的活化，進(jìn)而促進(jìn)卵巢癌細(xì)胞的增殖。因此，RACK1促進(jìn)腫瘤惡性進(jìn)展的作用與JAK2/STAT3通路密切相關(guān)。本研究通過檢測(cè)JAK2/STAT3信號(hào)通路蛋白的表達(dá)水平，進(jìn)一步探討了RACK1對(duì)宮頸癌細(xì)胞增殖與凋亡的可能作用。結(jié)果顯示，JAK2/STAT3通路的關(guān)鍵蛋白(p-JAK2和p-STAT3)在shRACK1-1組、shRACK1-2組中的表達(dá)水平明顯高于sh-NON組，而JAK2和STAT3蛋白表達(dá)未見明顯改變，提示RACK1可通過JAK2/STAT3信號(hào)通路來調(diào)節(jié)宮頸癌細(xì)胞的增殖和凋亡。

綜上所述，R ACK1在宮頸癌中呈過表達(dá)趨勢(shì)，靶向沉默RACK1基因可有效降低增殖相關(guān)蛋白c-myc和抗凋亡蛋白Bcl-2的表達(dá)，增強(qiáng)促凋亡蛋白caspase-3、caspase-9、Bax的表達(dá)，該過程與JAK2/STAT3信號(hào)通路有關(guān)。但本研究仍存在不足之處，如對(duì)RACK1通過JAK2/STAT3信號(hào)通路調(diào)控細(xì)胞增殖與凋亡的探討中缺少體內(nèi)驗(yàn)證及通路恢復(fù)實(shí)驗(yàn)，因此，后續(xù)可進(jìn)一步分析RACK1對(duì)JAK2/STAT3通路具體的分子調(diào)控機(jī)制，為RACK1作為評(píng)估宮頸癌生物學(xué)行為的潛在分子標(biāo)志物提供理論基礎(chǔ)。