范衛(wèi)平

(北京虹木生物技術(shù)有限公司，北京 102218)

枸櫞酸鈣片系由枸櫞酸鈣和預膠化淀粉、硬脂酸鎂、玉米淀粉等輔料制成的補鈣制劑。枸櫞酸鈣為有機酸鈣，具有水溶性好、溶解度高、對腸胃刺激小等優(yōu)點，枸櫞酸鈣及其制劑國內(nèi)上市情況如表1所示。相比碳酸鈣等無機酸鈣，枸櫞酸鈣含鈣量較低且水溶性好，因此適用于預防和治療兒童骨質(zhì)疏松、手足抽搐癥等鈣缺乏癥以及兒童補鈣[1-2]。《中國藥典》2015年版[3]中枸櫞酸鈣片的溶出度方法為滴定法，因受輔料硬脂酸鎂及籃法溶出液中微量金屬元素的干擾，準確度低、重復性差，不利于溶出曲線及溶出度結(jié)果的準確評價。原子吸收分光光度法具有更高的靈敏性與可靠性，已廣泛應用于藥品中金屬元素的常量及痕量測定[4-8]。本文建立了一種火焰原子吸收分光光度法測定枸櫞酸鈣片的溶出度，用2%鑭溶液消除干擾元素的影響，專屬性好、準確度高，適合枸櫞酸片的溶出度測定。

表1 枸櫞酸鈣及其制劑國內(nèi)上市情況

1 實 驗

1.1 實驗材料

自動溶出儀(Logan，UDT-812A-12)，原子吸收分光光度計(普析通用，A3)，鈣空心陰極燈，北京有色金屬研究總院；天子天平(賽多利斯，十萬分之一)。

鹽酸(GR)，國藥；枸櫞酸鈣(99.0%)，阿拉??；氧化鑭(99.9%)，阿拉??；鈣單元素標準溶液(GBW(E)080261，100 μg/mL)，計量院；枸櫞酸鈣片(批號200504、200506、200507)，自制。

1.2 溶液制備

1.2.1 試 液

0.1 mol/L鹽酸溶液：取鹽酸9 mL，加水至1000 mL。

鑭掩蔽劑：取氧化鑭20 g，加0.1 mol/L鹽酸溶液1000 mL使溶解。

1.2.2 對照品溶液

精密量取鈣標準溶液4 mL，置20 mL量瓶中，用0.1 mol/L鹽酸溶液稀釋至刻度，作為對照貯備溶液；分別精密量取對照貯備溶液2、3、4、5、6，各置20 mL量瓶中，加鑭掩蔽劑1 mL，用0.1 mol/L鹽酸稀釋至刻度，制成濃度為2、3、4、5、6 μg/mL的系列濃度對照品溶液。

1.2.3 供試品溶液

精密量取0.1 mol/L鹽酸溶液900 mL置各溶出杯內(nèi)，待溶出介質(zhì)溫度恒定在(37±0.5) ℃后，取枸櫞酸鈣6片，分別投入6個干燥的轉(zhuǎn)籃內(nèi)，將轉(zhuǎn)籃降入溶出杯內(nèi)，轉(zhuǎn)速為100 r/min，經(jīng)30 min時，取溶液適量濾過，精密量取續(xù)濾液1 mL，置20 mL量瓶中，加鑭掩蔽劑1 mL，用0.1 mol/L鹽酸溶液稀釋至刻度，搖勻，即得。

1.3 測定參數(shù)

測定波長：422.7 nm；狹縫寬度：0.6 nm；空心陰極燈電流：10 mA；火焰類型：空氣-乙炔；乙炔流速：1.5 L/min，空氣流速：10 L/min；燃燒器高度：5 mm。

1.4 樣品測定

取“1.2.2 對照品溶液”項下各濃度對照品溶液，以每一濃度3次吸光度度數(shù)平均值為縱坐標，以濃度為橫坐標，擬合線性回歸方程，繪制標準曲線；取各批號樣品，照“1.2.3 供試品溶液”項下方法制備供試品溶液，測定吸光度，取3次度數(shù)平均值，按標準曲線法計算供試品溶液的濃度，并按下式計算樣品的溶出度。

D=C×20×900÷106×570.50÷(40.08×3×0.5)×100%

式中：C——供試品溶液的濃度，μg/mL

20——稀釋倍數(shù)

900——溶出杯溶出介質(zhì)的體積，mL

570.50——枸櫞酸鈣的相對分子質(zhì)量

40.08——鈣的相對原子質(zhì)量

0.5——每片含枸櫞酸鈣的標示量，g

結(jié)果表明，200504、200506、200507三批樣品的溶出度分別為80.1%、78.6%、81.2%，符合藥典標準規(guī)定(限度為標示量的75%)。

2 結(jié)果與討論

2.1 專屬性實驗

按處方量稱取空白輔料約0.45 g，精密加入0.1 mol/L鹽酸溶液900 mL使溶解，濾過，精密量取續(xù)濾液1 mL，置20 mL量瓶中，加鑭掩蔽劑1 mL，用0.1 mol/L鹽酸溶液稀釋至刻度，搖勻，照“1.3 測定方法”測定吸光度。結(jié)果表明，空白輔料在422.7 nm波長處無吸收，不干擾鈣元素的測定。

2.2 準確度實驗

取枸櫞酸鈣0.3 g(相當于溶出限度的80%)、0.375 g(相當于溶出限度的100%)、0.45 g(相當于溶出限度的120%)各三份，精密稱定，加入空白輔料0.45 g，混勻，精密加入0.1 mol/L鹽酸溶液900 mL使溶解，濾過，精密量取續(xù)濾液1 mL，置20 mL量瓶中，加鑭掩蔽劑1 mL，用0.1 mol/L鹽酸溶液稀釋至刻度，搖勻，照“1.3 測定方法”測定吸光度。結(jié)果表明，9個樣品平均回收率為100.09%，RSD=0.72%。該方法準確度良好。實驗結(jié)果見表2。

表2 準確度實驗結(jié)果

2.3 精密度實驗

取200504批樣品，照“1.2.3 供試品溶液”制備供試品溶液，照“1.4 樣品測定”測定溶出度。結(jié)果表明，6次實驗平均溶出度為79.7%，RSD=1.80%。該方法精密度良好。

2.4 線性與范圍

取“1.2.2 對照品溶液”項下各對照品溶液，測定吸光度，以吸光度為縱坐標，以濃度為橫坐標，擬合線性方程，計算標準曲線。結(jié)果表明，在2～6 μg/mL的濃度范圍內(nèi)，鈣元素線性關(guān)系良好，線性方程為y=0.1167x+0.0033，R2=0.9993。該方法線性關(guān)系良好。

2.5 檢測限與定量限

取“2.4 線性”項下濃度與吸光度數(shù)據(jù)結(jié)果，按標準曲線斜率法計算得檢測限為0.37 μg/mL；因結(jié)果計算為標準曲線法，所以定量限為標準曲線溶液的最低濃度，即2 μg/mL。

2.6 耐用性實驗

調(diào)整狹縫寬度(0.6±0.2) nm、乙炔流速(1.5±0.3) L/min、空氣流速(10±2) L/min、燃燒器高度(5±2) mm等測試條件，取“1.2.2 對照品溶液”項下濃度為4 μg/mL的對照品溶液作為耐用性供試品溶液，按標準曲線法計算其濃度。結(jié)果表明，不同條件下測得鈣濃度的RSD=1.41%，該方法耐用性良好。實驗結(jié)果見表3。

表3 耐用性實驗結(jié)果

3 結(jié) 論

本文建立的火焰原子吸收分光光度法測定枸櫞酸鈣片的溶出度，很好的避免了原方法中的樣品處理步驟繁瑣、耗時長、不易批量測定等缺點，通過加入鑭掩蔽劑，該方法專屬性好、準確度高、檢測限低，適合枸櫞酸鈣片溶出度的高通量測定。