丁健美 劉之熙

摘 要 通過(guò)查閱文獻(xiàn)，歸納總結(jié)了目前用于雜交水稻品種鑒定的幾類(lèi)方法。種子形態(tài)鑒定法、幼苗形態(tài)鑒定法、田間種植鑒定法、計(jì)算機(jī)模擬形態(tài)分析技術(shù)等形態(tài)學(xué)方法，難以辨別種子形狀差異和形態(tài)不太明細(xì)的真假品種，且鑒定周期長(zhǎng)，在一定程度上受鑒定人員的自身技術(shù)與經(jīng)驗(yàn)制約。同工酶電泳鑒定、蛋白質(zhì)電泳鑒定等生化鑒定法，受限條件較多，實(shí)際工作中應(yīng)用較少。DNA分子技術(shù)鑒定法主要有RAPD標(biāo)記鑒定、RFLP標(biāo)記鑒定、AFLP標(biāo)記鑒定、SSR標(biāo)記鑒定、SNP標(biāo)記鑒定。DNA分子標(biāo)記鑒定，可應(yīng)用于雜交水稻品種純度與真實(shí)性鑒定、審定監(jiān)管等各環(huán)節(jié)，具有鑒定快速、周期短、準(zhǔn)確、簡(jiǎn)便、經(jīng)濟(jì)等諸多優(yōu)點(diǎn)，是農(nóng)作物品種鑒定的發(fā)展方向。

關(guān)鍵詞 雜交水稻;品種鑒定

中圖分類(lèi)號(hào)：S511.5 文獻(xiàn)標(biāo)志碼：C DOI：10.19415/j.cnki.1673-890x.2022.13.040

品種鑒定是種子市場(chǎng)監(jiān)管和品種審定準(zhǔn)入的主要內(nèi)容，是育種工作的重要階段，也是衡量成果能否轉(zhuǎn)化的重要環(huán)節(jié)。因此，品種鑒定在種子生產(chǎn)、加工、儲(chǔ)藏及經(jīng)營(yíng)貿(mào)易等流通過(guò)程中具有重要意義和應(yīng)用價(jià)值。但在種子流通中，為節(jié)省成本與縮短時(shí)間周期，往往忽略品種鑒定的重要性，導(dǎo)致仍有種子摻假的案件發(fā)生，給生產(chǎn)造成了難以挽回的損失[1]。雜交水稻是我國(guó)最主要的農(nóng)作物，對(duì)保障國(guó)家糧食安全起到舉足輕重的作用，因此，隨著全國(guó)雜交水稻種植面積比重逐年增大，對(duì)雜交水稻種子的質(zhì)量（主要是真實(shí)性和純度）檢查和監(jiān)督尤為重要。目前，雜交水稻品種鑒定的方法主要有形態(tài)鑒定法、生化鑒定法、DNA分子技術(shù)鑒定法。

1? 形態(tài)鑒定法

1.1? 種子形態(tài)鑒定法

種子形狀比較穩(wěn)定，故形態(tài)鑒定方法簡(jiǎn)單，快速經(jīng)濟(jì)。主要通過(guò)觀察種子的外觀形態(tài)特征，包括種子的長(zhǎng)寬度與大小、形狀、顏色、光澤、種皮形態(tài)、堊白、胚乳等性狀，借助儀器或工具（如放大鏡、解剖鏡等）觀察，進(jìn)行品種鑒定，一般情況下可鑒定出雜交水稻樣品的真實(shí)性[2-3]。但由于這些性狀只適用于品種間差異較大的樣品鑒定，且受鑒定者經(jīng)驗(yàn)的制約，品種鑒定結(jié)果可靠性較差，應(yīng)用范圍較窄。

1.2? 幼苗形態(tài)鑒定法

在相同條件的溫濕度、光照等環(huán)境下，對(duì)種子進(jìn)行培養(yǎng)，當(dāng)發(fā)芽良好的種子生長(zhǎng)發(fā)育到適合鑒定的幼苗階段，結(jié)合獨(dú)特的形態(tài)特征進(jìn)行比較鑒定。李穩(wěn)香等用幼苗形態(tài)鑒定法，發(fā)現(xiàn)應(yīng)用于鑒定威優(yōu)、汕優(yōu)、協(xié)優(yōu)系統(tǒng)的雜交一代均有較好效果，尤以鑒定威優(yōu)46效果與田間種植鑒定結(jié)果均基本一致[4]。此鑒定方法較簡(jiǎn)單，易于操作，成本低，鑒定周期短，鑒定結(jié)果較準(zhǔn)確。但由于幼苗期所依據(jù)的性狀有限，且受種子處理方法與生長(zhǎng)環(huán)境的影響頗大。因此，該鑒定方法只適用于幼苗形狀差異較明顯的品種。

1.3? 田間種植鑒定法

田間種植是鑒定品種最為可靠的方法之一，主要依據(jù)品種的特征特性進(jìn)行鑒定。將種子適時(shí)催芽、播種，秧苗栽插到田間，通過(guò)水肥管理、病蟲(chóng)害預(yù)防等，直到抽穗時(shí)進(jìn)行鑒定。我國(guó)每年冬季都會(huì)在海南島進(jìn)行田間種植鑒定，這種鑒定方法比較簡(jiǎn)單，鑒定結(jié)果較為符合大批量的實(shí)際生產(chǎn)。雖然該鑒定方法不影響內(nèi)地的農(nóng)業(yè)生產(chǎn)，但鑒定時(shí)間較長(zhǎng)，對(duì)于種子的經(jīng)營(yíng)特別是種子的出口貿(mào)易是一道不可逾越的障礙，尤其是我國(guó)加入WTO以后，這道障礙越來(lái)越明顯。受季節(jié)、環(huán)境等條件的影響，試驗(yàn)有誤差（如光、溫敏兩系不育系），占用資源土地和生產(chǎn)技術(shù)人員，一旦試驗(yàn)失敗，不容易重新布置試驗(yàn)，但是不可否認(rèn)的是，該鑒定方法適合大批量的實(shí)際生產(chǎn)。

1.4? 計(jì)算機(jī)模擬形態(tài)分析技術(shù)

在常規(guī)鑒定技術(shù)的基礎(chǔ)上利用計(jì)算機(jī)的優(yōu)勢(shì)進(jìn)行有限的模擬分析，在鑒定方法上并沒(méi)有根本改進(jìn)，因而鑒定效果并不理想。

由于形態(tài)學(xué)方法難以辨別種子形狀差異和形態(tài)不太明細(xì)的真假品種，且鑒定周期長(zhǎng)，在一定程度上受鑒定人員的自身技術(shù)與經(jīng)驗(yàn)制約。因此，通過(guò)專(zhuān)業(yè)的實(shí)驗(yàn)室內(nèi)檢測(cè)方法來(lái)代替形態(tài)學(xué)鑒定已成為雜交水稻種子鑒定技術(shù)發(fā)展的必然方向[5]。

2? 生化鑒定法

蛋白質(zhì)是基因表達(dá)的產(chǎn)物，也是測(cè)定基因組一致性的依據(jù)。生化鑒定法的原理是依據(jù)不同品種之間所遺傳的物質(zhì)不相同，則形成不一樣的RNA，最終產(chǎn)生不一樣的蛋白質(zhì)或者同工酶。因此，生化鑒定法是在特定的環(huán)境下，利用電泳中的譜帶多樣性，對(duì)不同品種（系）的遺傳特性進(jìn)行純度與真實(shí)性鑒定，具有不受外部環(huán)境影響、較為方便、鑒定準(zhǔn)確性高等優(yōu)點(diǎn)。此法主要包括同工酶電泳鑒定和蛋白質(zhì)電泳鑒定。

2.1? 同工酶電泳鑒定

同工酶電泳技術(shù)于20世紀(jì)60年代初就初步應(yīng)用于品種鑒定的研究。朱英國(guó)等對(duì)國(guó)內(nèi)166個(gè)水稻品種在苗期進(jìn)行酯酶同工酶檢測(cè)，獲得11種酶譜類(lèi)型[6]。武漢大學(xué)遺傳研究所與北京種子公司協(xié)作，用水稻的幼苗為材料，并利用雜種F1和三系親本的酯酶同工酶圖譜的差異來(lái)鑒定不同的水稻品種和品系[7];顏啟傳也利用該技術(shù)檢測(cè)了雜交水稻及其三系親本的真實(shí)性和品種純度，通過(guò)檢測(cè)分析證實(shí)該鑒定法的檢測(cè)結(jié)果較準(zhǔn)確，提高了鑒定分辨率[8]。因此，20世紀(jì)70年代已推廣同工酶電泳法用于品種鑒定，在生產(chǎn)上有著一定的應(yīng)用價(jià)值和意義。

同工酶鑒定法對(duì)種子或幼苗的生長(zhǎng)質(zhì)量要求較高，酶的提取和電泳技術(shù)的實(shí)驗(yàn)條件也要求嚴(yán)格，同工酶表達(dá)的特異性又影響著其在不同組織的分布與活性，一旦種子或幼苗出現(xiàn)長(zhǎng)勢(shì)不太好，產(chǎn)生酶的活性低，就會(huì)直接導(dǎo)致酶帶模糊不清，影響鑒定結(jié)果，可利用的同工酶非常有限。

2.2? 蛋白質(zhì)電泳鑒定

種子中蛋白質(zhì)的種類(lèi)及含量相對(duì)比較穩(wěn)定，可以用作品種鑒定的依據(jù)。不同品種遺傳基礎(chǔ)物質(zhì)的DNA不同，形成的模板RNA也有差異，使其合成的蛋白質(zhì)表現(xiàn)出差異，依據(jù)品種之間在蛋白質(zhì)的差異，利用電泳技術(shù)對(duì)品種的蛋白質(zhì)進(jìn)行分離檢查，制成電泳圖譜，通過(guò)觀察不同品種電泳圖譜的不同來(lái)加以區(qū)別。蛋白質(zhì)電泳作為鑒定品種的一種方法，應(yīng)用于雜交水稻品種鑒定方面的報(bào)道不多，陸作楣等提取62份雜交水稻三系親本和雜種一代種子胚乳貯藏蛋白中總蛋白、醇溶蛋白和谷蛋白樣品，采用SDS-PAGE電泳法分析，根據(jù)谷蛋白譜帶特征的差異進(jìn)行品種鑒定[9]。

蛋白質(zhì)電泳鑒定法快速可靠，不受外部環(huán)境制約。但所用的提取液和電泳系統(tǒng)不同，萌芽的種子、幼芽或幼苗及成熟期各個(gè)時(shí)期表達(dá)不穩(wěn)定，影響著電泳圖譜的分離，鑒定結(jié)果與操作過(guò)程也相關(guān)，如實(shí)驗(yàn)材料的采集、電泳系統(tǒng)的條件、提取的蛋白液、膠濃度等不同，結(jié)果也會(huì)不同，導(dǎo)致難以形成統(tǒng)一標(biāo)準(zhǔn)[10-11]。此外，對(duì)于遺傳相近的品種之間，貯藏蛋白的標(biāo)記多態(tài)性不太豐富，難以找到特異蛋白，在實(shí)踐中未得到推廣應(yīng)用。

3? DNA分子技術(shù)鑒定法

隨著DNA分子技術(shù)鑒定應(yīng)用于植物新品種鑒定大量研究的陸續(xù)開(kāi)展，為雜交水稻品種鑒定提供了新的思路。DNA分子標(biāo)記技術(shù)以其多態(tài)性高、遺傳穩(wěn)定性強(qiáng)，在基因組中頻繁出現(xiàn)，易獲得、易操作、重復(fù)性好等特點(diǎn)被研究者廣泛關(guān)注和應(yīng)用。研究表明，DNA分子標(biāo)記可應(yīng)用于雜交水稻品種純度與真實(shí)性鑒定，審定監(jiān)管等各環(huán)節(jié)，其具備鑒定快速、周期短、準(zhǔn)確及簡(jiǎn)便、經(jīng)濟(jì)等諸多優(yōu)點(diǎn)[12-16]，是農(nóng)作物品種鑒定的發(fā)展方向。

DNA分子技術(shù)鑒定不受生物體各組織、各發(fā)育階段、環(huán)境與季節(jié)的限制和人為因素的影響，同時(shí)，可以彌補(bǔ)和克服形態(tài)鑒定與生化鑒定的不足。目前，在雜交水稻分類(lèi)中廣為應(yīng)用的DNA分子技術(shù)鑒定主要有RAPD、RFLP、AFLP、SSR、SNP。

3.1? RAPD標(biāo)記鑒定

RAPD是William JGK等和Welsh J等于1990年創(chuàng)建的一種分子標(biāo)記，在PCR基礎(chǔ)之上的一種可對(duì)整個(gè)序列的基因組進(jìn)行分析的分子技術(shù)。利用隨機(jī)引物對(duì)基因組DNA進(jìn)行擴(kuò)增得到多帶，而對(duì)某個(gè)特定的基因型來(lái)講，這些擴(kuò)增的片段或片段的類(lèi)型是唯一的，因此，可以用來(lái)鑒定品種。1996年，錢(qián)前等利用RAPD標(biāo)記，成功實(shí)現(xiàn)對(duì)真、假“II優(yōu)63”種子的鑒定[17]。相比RFLP，RAPD操作較簡(jiǎn)單，所需的DNA量小，多態(tài)性強(qiáng)、操作簡(jiǎn)便，成本較低。

隨著雜交水稻品種的豐富性及交易市場(chǎng)的活躍性，只用單個(gè)多態(tài)標(biāo)記鑒定種子的做法，不能滿(mǎn)足特定品種大量篩選引物的需求，RAPD標(biāo)記鑒定對(duì)引物的選擇和實(shí)驗(yàn)的條件要求較嚴(yán)，因此，該技術(shù)在品種鑒定中有一定的局限性。

3.2? RFLP標(biāo)記鑒定

RFLP即限制性片段長(zhǎng)度多態(tài)性標(biāo)記，是根據(jù)不同品種間不同基因組的限制性?xún)?nèi)切酶位點(diǎn)的堿基發(fā)生變化，或者是酶切位點(diǎn)間發(fā)生了堿基的缺失與插入，酶切位點(diǎn)的片段發(fā)生了變化，造成差異，這種差異可以通過(guò)特定的探針進(jìn)行雜交檢測(cè)，根據(jù)探針位于染色體的不同位點(diǎn)可以作為一種分子標(biāo)記，構(gòu)建分子圖譜，根據(jù)圖譜的特異性，從而鑒別真假種子[18]。RFLP標(biāo)記可用于形態(tài)標(biāo)記、同工酶標(biāo)記和蛋白質(zhì)電泳技術(shù)難以區(qū)別的品種的鑒定。

RFLP是較早使用DNA分子標(biāo)記的應(yīng)用，檢查結(jié)果比較穩(wěn)定，該技術(shù)已在小麥、玉米、黃瓜、辣椒、大白菜和甘藍(lán)等作物上得到初步應(yīng)用。但RFLP對(duì)DNA的質(zhì)量要求較高，檢測(cè)技術(shù)繁瑣，不適合雜交育種和品種鑒定的大規(guī)模應(yīng)用。

3.3? AFLP標(biāo)記鑒定

AFLP標(biāo)記是以結(jié)合RFLP標(biāo)記和PCR技術(shù)為基礎(chǔ)建立起來(lái)的，通過(guò)DNA制備、擴(kuò)增酶切片段、凝膠及電泳四個(gè)基本步驟，對(duì)品種進(jìn)行鑒定。陳一華等最少利用3對(duì)AFLP引物組合就可以區(qū)分l5個(gè)雜交水稻品種，根據(jù)品種間DNA多態(tài)性條帶的有無(wú)，轉(zhuǎn)換成1和0指紋數(shù)據(jù)，從而實(shí)現(xiàn)了計(jì)算機(jī)輔助種子鑒定[19]。美國(guó)先鋒公司培育的一個(gè)優(yōu)良玉米雜交種的親本（申請(qǐng)專(zhuān)利）被一個(gè)小公司偷用制種，獲得了很大利潤(rùn)。先鋒公司發(fā)現(xiàn)了該公司的侵權(quán)行為后，提出訴訟，但因證據(jù)不充分一直未能得到解決，最后，先鋒公司用AFLP技術(shù)獲得DNA指紋證據(jù)后贏得了訴訟，那個(gè)小種子公司因被罰巨額賠款而倒閉。

AFLP多態(tài)性水平相當(dāng)高，且穩(wěn)定可靠，但需DNA模板量大，需酶切，對(duì)DNA純度要求高，如基因組的酶切不完全，會(huì)影響鑒定結(jié)果。同時(shí)，操作程序長(zhǎng)，步驟繁瑣，電泳技術(shù)較復(fù)雜，成本太高，并要求較高的試驗(yàn)技能和高精度的儀器設(shè)備[20-21]，同時(shí)，它還是專(zhuān)利技術(shù)，難以在雜交水稻品種鑒定中普及使用。

3.4? SSR標(biāo)記鑒定

目前在雜交水稻品種鑒定中，利用分子標(biāo)記檢測(cè)技術(shù)最多的就是SSR分子標(biāo)記鑒定，與RAPD、RFLP、AFLP分子標(biāo)記鑒定法相比，SSR分子標(biāo)記鑒定結(jié)果更容易觀察分析，且對(duì)差異不太明顯的品種也能鑒定區(qū)分。

SSR標(biāo)記法是發(fā)展起來(lái)的一種以特異引物PCR為基礎(chǔ)的分子標(biāo)記技術(shù)，具有實(shí)驗(yàn)穩(wěn)定、多態(tài)性高、實(shí)驗(yàn)程序簡(jiǎn)單等優(yōu)點(diǎn)，SSR標(biāo)記法已被廣泛用于農(nóng)作物類(lèi)品種鑒定。SSR標(biāo)記法主要包括DNA提取、PCR擴(kuò)增、凝膠電泳、成像觀察四個(gè)基本步驟，檢測(cè)程序相對(duì)簡(jiǎn)單，一份樣品從取樣、檢測(cè)及讀取結(jié)果可在幾小時(shí)內(nèi)完成，且不受外部環(huán)境與季節(jié)的影響。

SSR標(biāo)記兩端的序列多是相對(duì)保守的單拷貝序列[22-23]。不同品種間微衛(wèi)星基序重復(fù)次數(shù)的不同而形成了多態(tài)性，這種多態(tài)性可以通過(guò)PCR擴(kuò)增檢測(cè)出來(lái)，即為簡(jiǎn)單序列長(zhǎng)度多態(tài)性[24]。優(yōu)化PCR擴(kuò)增程序主要是在保證取得較好擴(kuò)增效果的前提下，縮短反應(yīng)時(shí)間，提高工作效率。詹慶才利用SSR 標(biāo)記鑒定雜交水稻種子純度時(shí)，改變PCR擴(kuò)增程序，將變性和退火時(shí)間改為15 s，延伸時(shí)間改為30 s，擴(kuò)增35個(gè)循環(huán)，縮短PCR反應(yīng)時(shí)間，得到了理想的擴(kuò)增結(jié)果[25]。

SSR標(biāo)記法的DNA 提取和純化是雜交水稻品種鑒定重要而基礎(chǔ)的操作步驟。劉之熙等分別采用CTAB方法和簡(jiǎn)單方法提取“兩優(yōu)培九”幼苗的DNA，均以RM234為引物進(jìn)行PCR擴(kuò)增，結(jié)果表明簡(jiǎn)單方法提取的DNA不會(huì)影響準(zhǔn)確性和分辨率，且簡(jiǎn)單方法縮短了提取時(shí)間，降低成本，極大地提高了工作效率;同時(shí)，對(duì)傳統(tǒng)CTAB和PCR程序進(jìn)行了改善，利用4%的瓊脂糖凝膠進(jìn)行電泳[26]。

隨著雜交水稻新品種組合的培育與栽培，SSR引物的特異性可能會(huì)逐步退化，甚至喪失，已有的SSR引物可能滿(mǎn)足不了新品種鑒定要求，因此，需不斷創(chuàng)建新的SSR標(biāo)記。馬紅勃等利用12個(gè)SSR標(biāo)記構(gòu)建了42份雜交稻（其中有24份材料為雜交稻品種，另外18份材料為雜交稻親本）的DNA指紋圖譜，并對(duì)于遺傳多樣性進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析[27]。通過(guò)聚類(lèi)將這42個(gè)品種分成六大類(lèi)群，較好地反映了品種之間的親緣關(guān)系，也為雜交親本的選擇提供了一定的參考。同時(shí)，所構(gòu)建的指紋圖譜也為雜交水稻品種鑒定提供了科學(xué)依據(jù)。肖子發(fā)等通過(guò)實(shí)驗(yàn)選用了48對(duì)SSR引物，多于國(guó)內(nèi)一些專(zhuān)業(yè)檢測(cè)機(jī)構(gòu)或科研單位采用的12對(duì)或24對(duì)引物[28];通過(guò)實(shí)驗(yàn)，利用篩選的48對(duì)SSR引物完成了湖南省審定的77個(gè)雜交稻品種的DNA指紋圖譜構(gòu)建，成功建立了品種指紋圖譜數(shù)據(jù)庫(kù)，可有效進(jìn)行雜交水稻品種鑒定。

根據(jù)國(guó)家水稻品種鑒定DNA指紋方法推薦的24對(duì)SSR引物，任輝對(duì)8個(gè)雜交水稻品種進(jìn)行SSR分子標(biāo)記鑒定，優(yōu)化DNA提取方法和PCR擴(kuò)增反應(yīng)體系，并將SSR分子標(biāo)記鑒定結(jié)果與分別在5個(gè)不同省份的制種基地田間鑒定結(jié)果進(jìn)行比較，統(tǒng)計(jì)分析發(fā)現(xiàn)：SSR分子標(biāo)記鑒定結(jié)果與田間檢驗(yàn)結(jié)果無(wú)顯著差異，但SSR分子標(biāo)記鑒定結(jié)果更容易區(qū)分異（雜）種子，而田間鑒定結(jié)果難以區(qū)分相似的異（雜）株[29]。因此認(rèn)為，采用SSR分子標(biāo)記鑒定方法能夠更快速、更準(zhǔn)確地鑒定雜交稻品種。

2014年6月1日，農(nóng)業(yè)部出臺(tái)了新的農(nóng)業(yè)行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)（NY/T1433-2014）《水稻品種鑒定技術(shù)規(guī)程? SSR標(biāo)記法》，當(dāng)日正式實(shí)施，推薦引物增加48對(duì)，其中，保留了原來(lái)的19對(duì)引物，新增29對(duì)引物。曾曉珊等為確保研究結(jié)果與國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)的一致性，采用國(guó)家規(guī)定的水稻品種真實(shí)性鑒定方法中要求的48對(duì)引物，對(duì)27個(gè)親本進(jìn)行了DNA指紋分析，依次對(duì)27個(gè)水稻親本材料基因組DNA（按順序排列）進(jìn)行PCR擴(kuò)增，經(jīng)顯影、拍照，得到一套SSR引物的圖譜[30]，根據(jù)所構(gòu)建的指紋圖譜，可對(duì)某一品種的真實(shí)性進(jìn)行鑒定。

綜上所述，通過(guò)SSR分子標(biāo)記鑒定雜交水稻品種，其檢測(cè)技術(shù)已成熟。但隨著每年不斷出現(xiàn)新的品種，SSR引物的特異性可能喪失，因此，還需不斷優(yōu)化和更新SSR分子標(biāo)記鑒定體系。

3.5? SNP標(biāo)記鑒定

SNP指在基因組上單個(gè)核苷酸的變異所形成的核酸序列多態(tài)性，是目前認(rèn)為最具有研發(fā)潛力的檢測(cè)技術(shù)，與SSR標(biāo)記相比具有以下優(yōu)勢(shì)：1）遺傳穩(wěn)定性更高;2）高效檢測(cè)、通量高，每次可檢測(cè)多個(gè)樣品，甚至上千個(gè)，實(shí)現(xiàn)數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析自動(dòng)化，共享發(fā)展數(shù)據(jù)平臺(tái)，間接降低了檢驗(yàn)檢測(cè)成本;3）檢測(cè)快速，檢測(cè)位點(diǎn)數(shù)可達(dá)幾百萬(wàn)個(gè);4）部分標(biāo)記與功能基因甚至植物表型相關(guān)。

美國(guó)康奈爾大學(xué)McCouch實(shí)驗(yàn)室率先在Affymetrix公司定制了含有4.4萬(wàn)個(gè)SNP標(biāo)記的SNP芯片，國(guó)內(nèi)研究者對(duì)幾千份國(guó)內(nèi)外水稻品種的基因序列進(jìn)行了重新測(cè)序，這些研究表明，通過(guò)SNP芯片構(gòu)建水稻品種DNA指紋是切實(shí)可行的[31]。

王鈺等通過(guò)一種基于PCR的水稻SNP標(biāo)記檢測(cè)方法結(jié)果得出，開(kāi)發(fā)的SNP標(biāo)記有助于分析水稻品種的遺傳差異[32]，也為建立水稻SSR/SNP指紋數(shù)據(jù)庫(kù)，實(shí)現(xiàn)水稻種子信息比對(duì)、追溯、防偽、統(tǒng)計(jì)、監(jiān)管和服務(wù)等功能奠定了基礎(chǔ)。

2021年6月20日，全國(guó)農(nóng)技中心在北京組織召開(kāi)農(nóng)業(yè)行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)審定會(huì)，《水稻品種真實(shí)性鑒定? SNP標(biāo)記法》《玉米品種真實(shí)性鑒? SNP標(biāo)記法》《小麥品種真實(shí)性鑒定? SNP標(biāo)記法》3項(xiàng)標(biāo)準(zhǔn)通過(guò)審定。標(biāo)志著SNP標(biāo)記法在生物檢測(cè)領(lǐng)域有著廣闊的發(fā)展前景，為維護(hù)農(nóng)作物品種創(chuàng)新、市場(chǎng)流通秩序等提供了強(qiáng)有力的技術(shù)支撐及依據(jù)。

盡管SNP成本高、一般實(shí)驗(yàn)室無(wú)法完成檢測(cè)分析工作，但SNP這項(xiàng)檢測(cè)技術(shù)具有準(zhǔn)確性高的特點(diǎn)，能夠有效避免形態(tài)學(xué)和環(huán)境因素的干擾，從而極大地縮短育種進(jìn)程。因此，構(gòu)建全國(guó)統(tǒng)一標(biāo)準(zhǔn)的品種高密度SNP指紋十分必要，今后有望以加強(qiáng)SNP分型檢測(cè)儀等實(shí)驗(yàn)室應(yīng)用平臺(tái)為載體，融合種植鑒定，實(shí)驗(yàn)室分子鑒定及分子育種協(xié)同發(fā)展，開(kāi)啟雜交水稻品種鑒定的新篇章。

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收稿日期：2022-04-21

作者簡(jiǎn)介：丁健美（1975—），女，湖南株洲人，本科，研究實(shí)習(xí)員，主要從事農(nóng)業(yè)檢驗(yàn)檢測(cè)。E-mail：djm1800@126.com。