趙安容 王圣之 崔利君 李波★

癲癇是臨床常見的神經系統(tǒng)疾??；其發(fā)病機制復雜，至今認為明確，但醫(yī)學界普遍認為神經免疫調節(jié)網絡失衡是導致其發(fā)生的主要原因之一［1］。癲癇持續(xù)狀態(tài)是患者癲癇發(fā)作時間持續(xù)5 分鐘以上無法停止，在臨床中致死率、致殘率極高，而且部分得到救治患者可因此出現(xiàn)不可逆腦損傷［2］。炎癥狀態(tài)會刺激神經元持續(xù)性放電會導致大腦膠質細胞功能障礙，細胞凋亡速度加快加重癲癇發(fā)作頻率與時間。神經元特異烯醇化酶（neuron-specific enolase，NSE）、腫瘤壞死因子-α（tumor necrosis factor α，TNF-α）與甘丙肽（Galanin，GAL）在臨床中被認為與癲癇的發(fā)生有密切關系；而腦電圖是目前臨床中診斷癲癇的首選方法，也是最有價值的方式［3-4］。臨床中對于癲癇持續(xù)狀態(tài)患者腦電圖異常情況的研究較少，而癲癇持續(xù)狀態(tài)患者腦電圖結果與NSE、TNF-α 與GAL 水平存在何種關系，目前也未闡明。本文旨在探討NSE、TNF-α 與GAL 水平與患者腦電圖的關系，為癲癇持續(xù)狀態(tài)患者的診斷及后續(xù)治療提供相應幫助。報告如下：

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取巴中市中心醫(yī)院2019年3月至2021年4月癲癇持續(xù)狀態(tài)患者進行篩選，符合標準者共136例將其設置為觀察組；另選本院同期體檢健康者65例為對照組。觀察組男性70 例、女性66 例；平均年齡（48.3±15.2）歲；病程平均（6.0±1.0）年。對照組男性38 例、女性27 例；平均年齡（47.8±15.3）歲。兩組性別、年齡比較，差異無統(tǒng)計學意義（P＞0.05）。

納入標準：①觀察組患者臨床資料完整無缺失；②對照組均為巴中市中心醫(yī)院同期體檢健康者無各類急慢性疾?。虎塾^察組符合國際抗癲癇聯(lián)盟制定的癲癇發(fā)作與癲癇綜合征診斷指南標準［5］；④觀察組患者均在癲癇發(fā)作時意識尚未恢復又再次發(fā)作癲癇或是發(fā)作時間＞5 min 無法自行停止。排除標準：①患有各類急慢性病者；②心、肝、腎患有嚴重疾病或是各項對應檢查結果≥2 項指標與正常值存在明顯差異；③患有精神抑郁類疾病者且長期服用治療藥物者；④繼發(fā)性癲癇者；⑤近3 個月內服用過免疫制劑、激素類藥物者；⑥內分泌功能紊亂；⑦有腦卒中、腦出血、腦部手術史者；⑧神經系統(tǒng)疾病。本研究已通過單位倫理委員會通過。所有入試者及家屬均知情并簽署同意書。

1.2 方法

抽取兩組研究對象外周血5 mL（觀察組抽取其癲癇發(fā)作后2 h 內與24 h 后血液），3 000 r/min 離心5 min，r=13.5 cm，留取血清放入-70℃環(huán)境中保存，采用酶聯(lián)免疫吸附法對NES、TNF-α 與GAL 水平。試劑盒生產商為上海恒遠生物科技有限公司。

腦電圖檢查：采用16 導數(shù)字化無紙記錄腦電圖儀對觀察組患者進行檢查，根據國際10/20 系統(tǒng)安置頭皮電極，使用平均參考導聯(lián)與雙極導聯(lián)進行掃描記錄。檢查過程中讓患者作出睜眼、閉眼等行為，同時進行閃光刺激與過度換氣誘發(fā)實驗，患者腦電圖記錄時間需＞30 min。

1.3 觀察指標

異常腦電圖評定標準［6］：輕度異常：α 節(jié)律呈現(xiàn)規(guī)則或是不穩(wěn)定表現(xiàn)，患者睜眼時無明顯消失或是抑制反應表現(xiàn)，β 波出現(xiàn)高波幅，且Q 波在各區(qū)活動增加，也可表現(xiàn)為主要活動區(qū)活動增加，在過度喚起時Q 波出現(xiàn)高幅波動。中度異常：α 節(jié)律出現(xiàn)明顯不對稱，甚至出現(xiàn)消失，Q 波活動呈現(xiàn)彌散性，Q 波可出現(xiàn)活動陣發(fā)性發(fā)作，過度換氣后高波幅δ 波成群出現(xiàn)。重度異常：Q 波、δ 波的活動出現(xiàn)彌散性發(fā)作，α波變慢或是消失，δ 波陣發(fā)性出現(xiàn)或是自發(fā)并伴有高波幅棘波、棘慢綜合波、尖波；偶爾出現(xiàn)暴發(fā)性活動。

對觀察組患者進行隨訪2年，采用Engel 分級［7］對不同類型患者預后情況進行判斷，Ⅰ級：患者藥物或是手術治療后到隨訪結束癲癇未發(fā)作，Ⅱ級：癲癇發(fā)作次數(shù)顯著減少，1年內發(fā)作次數(shù)≤2 次，Ⅳ級：發(fā)作次數(shù)＞3 次/年，但發(fā)作頻率減少75%；Ⅳ級患者發(fā)作次數(shù)無減少，甚至出現(xiàn)增加。預后良好：Ⅰ級，預后不良：Ⅱ～Ⅳ級；記錄不同預后患者NES、TNF-α 與GAL 水平，并分析不同腦電圖結果患者預后情況。

1.4 統(tǒng)計學方法

采用SPSS 26.0 軟件對數(shù)據進行統(tǒng)計學分析，計數(shù)資料用n（%）表示，采用χ2檢驗，符合正態(tài)分布的計量資料用（±s）表示，NES、TNF-α 與GAL 水平采用獨立樣本t檢驗與單因素方差分析，相關性分析采用kendall，以P＜0.05 表示差異有統(tǒng)計學意義。

2 結果

2.1 兩組NES、TNF-α 與GAL 水平比較

觀察組發(fā)作2、24 h時的NES、TNF-α與GAL水平明顯高于對照組，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）。見表1。

表1 兩組NES、TNF-α 與GAL 水平比較（±s）Table 1 nes and TNF in two groups-α Comparison with gal level（±s）

表1 兩組NES、TNF-α 與GAL 水平比較（±s）Table 1 nes and TNF in two groups-α Comparison with gal level（±s）

注：與對照組比較，aP＜0.05。

組別觀察組時間點發(fā)作2 h 內發(fā)作24 h 后n對照組F 值P 值136 136 65 NES（μg/L）65.71±7.98a 64.88±8.02a 12.30±1.03 1418.819＜0.05 TNF-α（μg/L）68.79±8.62a 67.39±8.73a 4.01±7.87 1482.402＜0.05 GAL（ng/L）123.36±23.45a 122.65±25.30a 106.85±7.82 13.930＜0.05

2.2 不同腦電圖結果患者NES、TNF-α 與GAL 水平比較及相關性

不同腦電圖結果患者NES、TNF-α、GAL 水平在發(fā)作2 h 內、24 后比較結果：重度異常組＞中度異常組＞輕度異常組。差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）。見表2、圖1A～C。

表2 不同腦電圖結果患者NES、TNF-α 與GAL 水平比較及相關性（±s）Table 2 nes and TNF in patients with different EEG results-α Comparison and correlation with gal level（±s）

表2 不同腦電圖結果患者NES、TNF-α 與GAL 水平比較及相關性（±s）Table 2 nes and TNF in patients with different EEG results-α Comparison and correlation with gal level（±s）

注：與重度組比較，aP＜0.05；與中度組比較，bP＜0.05。

發(fā)作2 h 內發(fā)作24 h 后組別輕度異常組中度異常組重度異常組F 值P 值n 15 69 52 NES（μg/L）51.64±4.87ab 63.10±3.10a 73.23±4.92 190.949＜0.001 TNF-α（μg/L）57.58±9.63ab 68.17±5.53a 72.85±8.73 25.341＜0.001 GAL（ng/L）96.73±26.50ab 119.23±17.32a 136.53±21.31 25.943＜0.001 NES（μg/L）53.60±8.12ab 64.16±5.15a 69.09±7.79 32.779＜0.05 TNF-α（μg/L）55.21±11.86ab 67.87±6.26a 70.27±7.65 23.359＜0.05 GAL（ng/L）98.31±27.03ab 119.80±19.82a 133.45±25.81 14.548＜0.05

圖1 本文典型輕度患者腦電圖檢查結果Figure 1 EEG results of typical mild patients in this paper

2.2.1 NES、TNF-α 與GAL 水平與腦電圖相關性

腦電圖與NES、TNF-α 與GAL 水平相關性分別為（r=0.767，0.311，0.372，P均＜0.05）。

2.3 不同預后患者NES、TNF-α 與GAL 水平比較

觀察組136 例患者均得到隨訪，其中預后良好者60 例、不良者76 例；分析其就診時發(fā)作2 h 內、24 h 后NES、TNF-α 與GAL 水平預后良好者明顯低于預后不良者，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）；發(fā)作2 h 內預后良好、預后不良者NES 水平與發(fā)作24 h比較，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）。見表3。

表3 不同預后患者NES、TNF-α 與GAL 水平比較（±s）Table 3 Nes and TNF in patients with different prognosis-α Comparison with gal level（±s）

表3 不同預后患者NES、TNF-α 與GAL 水平比較（±s）Table 3 Nes and TNF in patients with different prognosis-α Comparison with gal level（±s）

注：與發(fā)作24 h 預后良好比較比較，aP＜0.05；與發(fā)作24 h 預后不良比較，bP＜0.05。

發(fā)作24 h 內發(fā)作24 h 后預后預后良好預后不良t 值P 值n 60 76 NES（μg/L）58.86±5.17a 71.11±5.15b 13.750＜0.001 TNF-α（μg/L）65.41±8.23 71.46±8.01 4.316＜0.001 GAL（ng/L）112.59±22.38 131.87±20.73 5.199＜0.001 NES（μg/L）61.69±7.80 67.40±7.31 4.387＜0.05 TNF-α（μg/L）64.94±9.78 69.33±7.30 2.998＜0.05 GAL（ng/L）114.01±24.22 129.47±24.16 3.700＜0.05

3 討論

近年來根據統(tǒng)計研究我國癲癇發(fā)病率得到了明顯上升，且呈現(xiàn)年輕化趨勢，部分患者因對抗癲癇治療存在錯誤理解，拒絕服用藥物或是服藥依從性較差，病情控制較差，且癲癇發(fā)作存在突然性，若患者在公共場合或是獨處時發(fā)病，對其心理、生理造成的損害無法量化預估［8］。而癲癇持續(xù)狀態(tài)的發(fā)作時因時間長，在公共場所發(fā)生時不僅對患者造成嚴重影響對他人造成的視覺、心理沖擊較大，圍觀群眾想幫助患者也可能因不知正確的方法，造成自身或是患者受傷，引起社會輿論關注；若患者獨處時發(fā)病，因未得到及時救治可造成患者腦部不可逆損傷，嚴重可因此造成患者終身殘疾或是死亡的發(fā)生［9-10］。

癲癇發(fā)作的主要特征為神經元重復過度異常放電，且經過多年研究，炎癥因子與神經元內分泌細胞與其發(fā)病存在密切關系。發(fā)病時因神經元異常發(fā)病誘使神經出現(xiàn)損傷，進而破壞血腦屏障與周圍神經膠質細胞［11-12］。NES、TNF-α 與GAL 已被多類研究證實在癲癇患者疾病中的價值，本文分析其在癲癇持續(xù)狀態(tài)患者中的水平發(fā)現(xiàn)：在發(fā)病2 h 內與24 h 后，上述指標水平并不存在明顯差異，但遠高于對照組；隨后根據患者腦電圖結果對異常程度分組再度觀察發(fā)現(xiàn)腦電圖異常程度越高2 h 內與24 h 后NES、TNF-α 與GAL 水平也越高。分析原因：癲癇發(fā)作時巨噬細胞會產生大量自由基，血腦屏障被破壞后血液中NSE、TNF-α 濃度隨之上升，且研究表明兩者與神經細胞損傷存在正相關，腦電圖結果異常程度越高則表明患者腦部異常放電情況越嚴重，因此當患者腦電圖結果為重度異常時，神經元內細胞受損程度不斷提升，抑制NSE、TNF-α分泌能力逐漸下降，上述指標無法得到制衡，會進一步分泌損害大腦神經，所以表達水平會更高［13-14］。GAL 作為一種神經遞質物，其具有對海馬區(qū)錐體細胞興奮后突觸電位抑制作用，當腦部神經元放電頻率過高時，GAL 會大量分泌來組織神經元興奮，當其呈現(xiàn)高水平表達時，是在降低神經元興奮度起到緩解癲癇的作用［15］。本文分析NES、TNF-α與GAL 水平與腦電圖結果的相關性發(fā)現(xiàn)，其相互之間為正相關關系，這表明當上述指標水平升高時腦電圖異常程度也將隨之升高；反之則下降。

本文對患者進行了2年隨訪，根據其預后結果對發(fā)作2 h 時、發(fā)作24 h 后NES、TNF-α 與GAL 水平進行觀察發(fā)現(xiàn)：預后良好與預后不良者兩個時點NES、TNF-α 與GAL 水平均存在明顯差異，其中預后良好、不良者發(fā)作2 h 時NES 與發(fā)作24 h 后水平存在明顯差異；另外兩項指標卻不存在差異。主要原因為：癲癇發(fā)生時NSE 在人體腦脊液中也異常興奮，并通過受損血腦屏障進入人體血液中，癲癇持續(xù)狀態(tài)發(fā)作時神經元與神經膠質細胞壞死持續(xù)時間長，細胞漿內蛋白外泄進一步刺激了NSE 表達，NSE 不斷分泌誘使神經元細胞持續(xù)興奮放電頻率、時間增加，腦部神經刺激不斷提升，所以腦電圖檢查與NSE 相關程度會更高［16］。

本文雖得出了相關的研究結果與結論，但本研究為回顧性分析，納入樣本量較少且未對其他影響結果的因素以及患者治療藥物的使用進行考慮，同時觀察組患者NES、TNF-α 與GAL 水平為疾病發(fā)作2 h內與24 h 后所測結果，無穩(wěn)定期結果，在對預后的判定上可能存在一定局限。因此，后續(xù)要加大樣本量并對影響結果的各類因素予以考量進一步分析。

綜上所述，血清NES、TNF-α 與GAL 水平與癲癇持續(xù)狀態(tài)患者腦電圖結果間存在顯著相關關系，且可能參與患者疾病預后。但因本文存在一定局限性不足，后續(xù)要進一步分析研究為該病患者的治療康復提供更全面的數(shù)據理論支持。