黃世安 林 欣 張 琴 陳 紅 朱守亮 馬玉華 董曉慶

(1貴州大學(xué)農(nóng)學(xué)院，貴州 貴陽 550025； 2貴州省果樹工程技術(shù)研究中心， 貴州 貴陽 550025；3貴州省果樹蔬菜工作站，貴州 貴陽 550025; 4貴州省農(nóng)業(yè)科學(xué)院果樹科學(xué)研究所，貴州 貴陽 550025)

果皮蠟質(zhì)是覆蓋在果實最外層的一類有機(jī)混合物的總稱，是果實最直接的保護(hù)層。作為保護(hù)果實的第一道屏障，果皮蠟質(zhì)能夠抵御各種生物和非生物脅迫[1]，在果實發(fā)育和貯藏期間發(fā)揮重要保護(hù)作用[2-3]。此外，一些果實在發(fā)育過程中會因為蠟質(zhì)的存在而形成白色蠟霜[4]。果皮蠟質(zhì)由蠟質(zhì)晶體構(gòu)成的外蠟和鑲嵌在外部角質(zhì)層的無定形內(nèi)蠟組成，主要含有脂肪酸、烷烴、醇類、醛類、酮類、酯類以及三萜類化合物等[5]，蠟質(zhì)晶體主要有片狀、管狀、絲狀、桿狀、顆粒狀和平板狀結(jié)構(gòu)[6]。

在蘋果、柑橘、梨等果實生產(chǎn)中常常通過機(jī)械打蠟，起到類似于自發(fā)氣調(diào)貯藏的方式來提高果實耐貯性[7-9]，但人工果蠟使用不當(dāng)會堵塞果實皮孔，阻礙氣體交換，導(dǎo)致果實在貯藏過程中產(chǎn)生異味，降低其品質(zhì)[10]。而天然果皮蠟質(zhì)不會造成這種情況，因此對于天然果皮蠟質(zhì)的研究顯得尤為必要。在以往的研究中，三萜類化合物和β-二酮是藍(lán)莓蠟質(zhì)中含量最高的成分，其中烷烴、伯醇和脂肪酸含量起到?jīng)Q定藍(lán)莓果實失重的作用[4]。蘋果蠟質(zhì)中的烷烴成分可保持果實水分、減緩果實軟化[11-12]；烷烴和醛是生成柑橘板狀蠟質(zhì)的必需物質(zhì)，并且烷烴和三萜能控制果實角質(zhì)層水滲透[13-14]；梨果皮蠟質(zhì)中，二十九烷和十八碳醛可保持果實品質(zhì)，其中烯烴和脂肪酸含量與果實硬度顯著負(fù)相關(guān)[15]。

李果實是貴州省重點支持發(fā)展的果品之一，李產(chǎn)業(yè)成為全省決戰(zhàn)脫貧攻堅、決勝小康的主力軍。李果實采后品質(zhì)降低、耐貯性下降，影響果實長期貯藏[16]。雖然給李果實打蠟?zāi)芴峁┮环N新的貯藏保鮮措施，但是對李天然果蠟的特性研究鮮有報道。本研究選擇具有代表性的3種李，分析不同品種間果皮表面結(jié)構(gòu)、蠟質(zhì)含量和蠟質(zhì)成分差異，旨在為進(jìn)一步開展貯藏時期李果皮蠟質(zhì)結(jié)構(gòu)和成分變化研究提供理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗材料與試劑

選擇形狀大小、可溶性固形物含量(total soluable solid, TSS)和硬度一致，無損傷的空心李、蜂糖李和脆紅李果實為研究對象。其中，空心李(TSS：8.7～10.6%，硬度：5.5～7.0 kg·cm-2)采摘自貴州省沿河土家族自治縣，蜂糖李(TSS：13.3～15.5%，硬度：10.2～11.7 kg·cm-2)采摘自貴州省六馬縣，脆紅李(TSS：9.4～10.1%，硬度：9.8～12.0 kg·cm-2)采摘自貴州省農(nóng)業(yè)科學(xué)院果樹科學(xué)研究所百宜基地。配戴聚氯乙烯手套人工采摘，采摘時輕拿輕放，盡量減少對李蠟霜的損傷。采摘后將果實放于塑料籃子(540 mm× 360 mm×310 mm)，4 h內(nèi)運送到實驗室進(jìn)行處理，果實采摘后預(yù)冷一夜。

雙(三甲基硅烷基)三氟乙酰胺[bis(trimethylsilyl)trifluoroacetamide, BSTFA]+ 1%三甲基氯硅烷(trimethylchlorsosilane, TMCS)硅烷化試劑、正構(gòu)烷烴混標(biāo)(均為色譜純)，購于上海安譜實驗科技股份有限公司；戊二醛50%、甲醇、磷酸二氫鈉、磷酸氫二鈉、叔丁醇、氯仿(均為分析純)，購于成都金山化學(xué)試劑有限公司。

1.2 主要儀器與設(shè)備

E-1010離子濺射儀、S3400N型掃描電子顯微鏡，日本日立公司；7890B-5977A氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀、色譜柱DB-5MS(30 m×0.25 mm，0.25 μm)，美國安捷倫公司；MD200-2干式氮吹儀，上海滬析實業(yè)有限公司；RE-5200A旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器，上海亞榮生化儀器廠；SB-5200DT超聲波清洗機(jī)，寧波新芝生物科技有限公司；LNG-T98冷凍濃縮離心干燥器，太倉市華美生化儀器廠。

1.3 試驗方法

1.3.1 果皮蠟質(zhì)結(jié)構(gòu)觀測 3個品種各選擇3個果實，每個果子在赤道處(果臍正對處，兩側(cè)面)3個點取樣，觀察果皮蠟質(zhì)結(jié)構(gòu)。取3 mm×3 mm×2 mm的果皮，加入100 μL 2.5%戊二醛固定果皮切片，固定12 h后將果皮切片加入1 mL pH值7.0的2.0%磷酸鹽緩沖液中浸泡3 min，用梯度叔丁醇(50%、70%、90%)分別脫水后，再用100%叔丁醇脫水2次，每次10 min，脫水后真空干燥[17]。待離心管內(nèi)的冰晶揮發(fā)干后取出粘臺，經(jīng)E-1010離子濺射儀噴金，在S3400N型掃描電子顯微鏡上觀察蠟質(zhì)結(jié)構(gòu)。

1.3.2 果皮蠟質(zhì)提取 蠟質(zhì)提取：取3個500 mL燒杯，分別倒入300 mL三氯甲烷/甲醇(V/V∶4/1)，使用自制鐵絲夾夾住1個果實依次在3個燒杯中提取。期間不斷用自制鐵絲夾夾住果實在溶液中攪動，此過程不可破壞果皮，在通風(fēng)櫥內(nèi)完成。每個品種3次重復(fù)，每個重復(fù)5個果實。

提取條件：將燒杯置于40℃的超聲波清洗器中提取30 s。

濃縮轉(zhuǎn)移：果皮蠟質(zhì)提取后，將5個果實3個燒杯中的蠟質(zhì)提取液轉(zhuǎn)移到圓底燒瓶中，在旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器上進(jìn)行蠟質(zhì)提取液的濃縮，完成蠟質(zhì)濃縮后，倒入20 mL三氯甲烷/甲醇至圓底燒瓶中，搖勻并置于超聲波清洗器震蕩，充分溶解瓶壁蠟質(zhì)[2]。將濃縮液轉(zhuǎn)移至40 mL棕色玻璃螺口瓶中，在氮氣下吹干至恒定質(zhì)量(30 min內(nèi)蠟質(zhì)變化不超過10 mg)，并稱取提取物質(zhì)量。

蠟質(zhì)含量測定：使用電子游標(biāo)卡尺測量提取蠟質(zhì)后的李果實橫徑(d1)、縱徑(d2)、高(h)，根據(jù)式(1)計算單個果實表面積(S)；再用差量法求得提取物質(zhì)量，根據(jù)式(2)計算果皮提取物含量(μg·cm-2)。

(1)

(2)

1.3.3 果皮蠟質(zhì)成分測定 取出吹干的蠟質(zhì)樣本加入10 mL氯仿復(fù)溶，渦旋30 s，超聲10 min后取5 mL提取液，氮吹儀吹干后加入200 μL的BSTFA(含1%TMCS)衍生化試劑，在70℃烘箱內(nèi)反應(yīng)1 h，室溫靜置30 min。再加入1 mL氯仿復(fù)溶，渦旋2 min，超聲10 min，靜置10 min后室溫離心10 min(12 000 r·min-1， 25℃)，取300 μL上清液過0.22 μm有機(jī)相濾膜，轉(zhuǎn)移至帶襯管的玻璃瓶中，進(jìn)行氣相色譜-質(zhì)譜(gas chromatography-mass spectrometry, CC-MS)代謝組學(xué)分析。使用20 μg·mL-1濃度的正構(gòu)烷烴混標(biāo)(C7-C40)，轉(zhuǎn)移至帶襯管的玻璃瓶中。

色譜條件：DB-5MS毛細(xì)管柱，載氣為高純氦氣(He，純度>99.999%)，流速1.0 mL·min-1，進(jìn)樣口溫度260℃；升溫程序：初溫80℃保持2 min，再以 15℃·min-1升至260℃，保持10 min，最后以5℃·min-1升至315℃，保持10 min。質(zhì)譜條件：電子轟擊離子源，離子源溫度230℃，四級桿溫度150℃，電子能量70 eV。掃描方式為全掃描模式(SCAN)，質(zhì)量掃描范圍：m/z 50～500。

1.4 數(shù)據(jù)分析

使用獨立數(shù)據(jù)采集方法獲取片段離子，經(jīng)Analysis Base File Converter軟件轉(zhuǎn)換為abf格式，之后導(dǎo)入MS-DIAL軟件進(jìn)行預(yù)處理，導(dǎo)出原始數(shù)據(jù)矩陣，采用NIST數(shù)據(jù)庫進(jìn)行物質(zhì)定性分析，對所有峰面積根據(jù)篩選后RSD(ALL)<0.3的內(nèi)標(biāo)進(jìn)行分段歸一化處理確定其相對含量。人工篩選出具體的蠟質(zhì)組分后采用Excel 2016辦公軟件對數(shù)據(jù)進(jìn)行整理與分析，用OriginPro 2021作圖。利用DPS軟件中的Duncan’s新復(fù)極差法中5%顯著差異進(jìn)行多重比較分析。

2 結(jié)果與分析

2.1 3種李果皮表面結(jié)構(gòu)

注：1，2：空心李果皮蠟質(zhì)結(jié)構(gòu)；3：空心李果皮皮孔；4，5：蜂糖李果皮蠟質(zhì)結(jié)構(gòu)；6：蜂糖李果皮皮孔；7，8：脆紅李果皮蠟質(zhì)結(jié)構(gòu)；9：脆紅李果皮皮孔；SE為放大倍數(shù)。Note: 1, 2: Peel surface structure of Kongxin plum. 3: Lenticel of Kongxin plum fruit. 4, 5: Peel surface structure of Fengtang plum fruit. 6: Lenticel of Fengtang plum. 7, 8: Peel surface structure of Cuihong plum fruit. 9: Lenticel of Cuihong plum fruit. SE is the magnification.圖1 3種李果皮照片和果皮表面結(jié)構(gòu)掃描電鏡圖Fig.1 Photographs of fruit and scanning electron microscope of peel surface structure in three varieties plum

如圖1所示，3種李果皮上均覆蓋有白霜狀蠟質(zhì)，空心李、蜂糖李和脆紅李果皮表面的蠟質(zhì)覆蓋面積分別為70%～90%、50%～70%和20%～40%。觀察果皮蠟質(zhì)掃描電鏡圖，空心李果皮有大量堆疊的片狀蠟質(zhì)，也有桿狀蠟質(zhì)結(jié)構(gòu)，在桿狀的節(jié)點上會聚集絮狀或顆粒狀結(jié)構(gòu)。蜂糖李果皮上明顯分布著顆粒狀蠟質(zhì)晶體，含有大量大小不一、不規(guī)則小圓片狀蠟質(zhì)晶體以及少部分桿狀蠟質(zhì)。脆紅李果皮既有呈不規(guī)則小圓片狀蠟質(zhì)晶體，也有大量堆疊的桿狀蠟質(zhì)結(jié)構(gòu)形成的網(wǎng)絡(luò)。在300倍的掃描電鏡下，空心李和脆紅李的皮孔為圓形，大小在20～40 μm之間，皮孔周圍覆蓋嚼爛狀蠟質(zhì)，部分皮孔上覆蓋有蠟質(zhì)。在200倍的掃描電鏡下，蜂糖李皮孔為橢圓形，大小在300～600 μm之間，皮孔較空心李和脆紅李大，且兩側(cè)副衛(wèi)細(xì)胞有角質(zhì)加厚。

2.2 3種李果皮提取物含量差異

如圖2所示，3個品種李中空心李果皮蠟質(zhì)含量最高，為3 439.83 μg·cm-2；其次是蜂糖李，為2 012.69 μg·cm-2；脆紅李最低，為895.22 μg·cm-2，3種李之間蠟質(zhì)含量存在顯著差異(P<0.05)。

注：不同字母表示不同品種蠟質(zhì)含量在0.05水平上有顯著差異。Note: Different letters indicate that wax content of different varieties of plum has significant difference at 0.05 level.圖2 3種李果皮蠟質(zhì)含量Fig.2 Content in peel wax of three varieties plum

2.3 3種李果皮蠟質(zhì)成分

2.3.1 3種李果皮蠟質(zhì)組分差異 GC-MS分析結(jié)果表明，李果皮的三氯甲烷/甲醇(V/V∶4/1)提取物中共分析出87種蠟質(zhì)成分，3種李果皮蠟質(zhì)成分基本一致，主要包括脂肪酸、烷烴、醇類、醛類、酯類、酮類、三萜類化合物等，但不同成分含量比例不同。對3種李果皮蠟質(zhì)組成進(jìn)行主成分分析，如圖3-A所示。在主成分分析的評分圖中，第1和第2主成分的特征值分別為3.66和2.38，貢獻(xiàn)率分別為52.25%和34.04%，累積貢獻(xiàn)率為86.29%。脆紅李在第1主成分上得分最高，蜂糖李在第1主成分上得分最低；空心李在第2主成分上得分最高，與蜂糖李和脆紅李相比在第2主成分上差別較大。3種李果皮蠟質(zhì)組分和相對含量差別較大，組分區(qū)分明顯。3種李中，蜂糖李中脂肪酸含量相對較高，脆紅李中酮類含量相對較高。

由圖3-B可知，3種李蠟質(zhì)組分含量最高的是醇類，占蠟質(zhì)總量比例分別為60.08%、65.38%和50.38%。其次是烷烴，在空心李、蜂糖李和脆紅李中分別占19.08%、23.23%和19.60%。空心李和脆紅李果皮蠟質(zhì)中三萜類化合物含量高于蜂糖李，分別占14.40%和18.73%。3個品種中脂肪酸含量以蜂糖李最高，占5.85%，脆紅李次之，空心李最低。脆紅李和空心李中酯類含量高于蜂糖李，分別占4.67%和2.57%。醛類含量相差不大，脆紅李中含量最高，占2.97%。李表皮蠟質(zhì)代謝物中酮類含量極低，占蠟質(zhì)總量少于1%?？招睦罟は炠|(zhì)中各組分所占比例從高到低依次為醇類>烷烴>三萜類化合物>酯類>脂肪酸>醛類>酮類。蜂糖李果皮蠟質(zhì)中各組分所占比例從高到低依次為醇類>烷烴>脂肪酸>酯類>醛類>三萜類化合物>酮類。脆紅李果皮蠟質(zhì)中各組分所占比例從高到低依次為醇類>烷烴>三萜類化合物>酯類>醛類>脂肪酸>酮類。

圖3 3種李果皮蠟質(zhì)組分主成分分析(A)和百分比(B)Fig.3 The principal component analysis (A) and percentage (B) of peel wax compositions of three varieties plum

2.3.2 3種李果皮蠟質(zhì)成分及含量顯著性 由表1知，使用平均保留時間確定代謝物名稱，分析出87種蠟質(zhì)成分，包含20種醇類、12種烷烴、23種脂肪酸、15種酯類、6種醛類、8種酮類以及3種三萜類化合物。3種李果皮中分析出的16種醇類、6種烷烴、19種脂肪酸、12種酯類、5種醛類、6種酮類以及3種三萜類化合物的含量存在顯著差異(P<0.05)。

表1 3種李果皮蠟質(zhì)成分和含量顯著性Table 1 Significance of peel wax compositions and content of three varieties plum

表1(續(xù))

表1(續(xù))

圖4 3種李果皮蠟質(zhì)組分聚類熱圖分析Fig.4 Clustering heatmap analysis in peel wax compositions of three varieties plum

2.3.3 3種李果皮表皮蠟質(zhì)的組成 如圖4所示，對3個品種中的87種蠟質(zhì)成分以及醇類、伯醇、仲醇、不飽和醇、二元醇、烷烴、直鏈烷烴、支鏈烷烴、脂肪酸、飽和脂肪酸、不飽和脂肪酸、酯類、酮類、醛類、飽和醛、不飽和醛和三萜類化合物含量進(jìn)行熱圖結(jié)合層次聚類分析。結(jié)果顯示3種李蠟質(zhì)成分區(qū)分明顯，與主成分分析結(jié)果一致?？招睦钆c脆紅李的成分聚類在一起，但空心李距離蜂糖李較遠(yuǎn)，說明空心李與脆紅李的蠟質(zhì)成分相近，與蜂糖李差異性較大。3種李中空心李的醇類含量最高，尤其是伯醇中十八醇、二十六醇與二元醇的1,11-十一烷二醇、1,30-三十烷二醇；仲醇在李果皮蠟質(zhì)中含量極低，但在蜂糖李中含量高于脆紅李以及空心李。直鏈烷烴與支鏈烷烴在脆紅李中含量最低，支鏈烷烴在空心李中含量最高。李蠟質(zhì)中，二十九烷是含量最高的烷烴成分，在蜂糖李中含量最高。飽和脂肪酸與飽和醛在蜂糖李中含量最高，不飽和脂肪酸與不飽和醛在脆紅李中含量最高。酮類在脆紅李中含量最高，酯類在蜂糖李中含量最低。蠟質(zhì)中三萜類物質(zhì)，尤其是熊果醛、熊果酸在蜂糖李中的含量最低，在空心李中的含量最高。

如圖5所示，對3種李果皮蠟質(zhì)的二無醇和三萜類含量進(jìn)行分析。其中二元醇包含1,11-十一烷二醇、1,12-十二烷二醇、1,30-三十烷二醇3種。3種李中，二元醇在空心李中含量最高，脆紅李中最低。1,30-三十烷二醇是3種李中含量最高的二元醇，在空心李中含量最高，且顯著高于其他2種李(P<0.05)。3種李中，空心李的三萜類含量最高，脆紅李次之，蜂糖李最低?？招睦钪泻孔罡叩娜祁愂切芄铱招睦畹男芄┖托芄岷匡@著高于其他2種李(P<0.05)。蜂糖李的熊去氧膽酸含量顯著高于空心李(P<0.05)，而熊果醛、熊果酸含量極低。脆紅李中含量最高的成分也是熊果醛，且含有較多的熊果酸，但幾乎不含熊去氧膽酸。

注：不同字母表示同一成分不同品種間含量在0.05水平上有顯著差異。Note: Different letters indicate that there are significant differences in the content of the same composition among different varieties at 0.05 level.圖5 3種李果皮蠟質(zhì)二元醇與三萜類的分布以及含量Fig.5 Distribution and content of glycols and triterpenes in fruits of three varieties of plum

3 討論

不同物種以及同一物種的不同品種間蠟質(zhì)含量也不同[2,12,14]。徐呈祥等[14]研究表明，采用三氯甲烷/甲醇(V/V∶3/1) 溶液提取砂糖橘與貢柑果皮蠟質(zhì)，貢柑果皮蠟質(zhì)含量高于砂糖橘。本試驗用三氯甲烷/甲醇(V/V∶4/1)溶液提取3種李果皮蠟質(zhì)，結(jié)果顯示，蠟質(zhì)含量存在顯著差異(P<0.05)，其中空心李蠟質(zhì)含量最高，蜂糖李次之，脆紅李最低。不同方法提取果皮蠟質(zhì)，蠟質(zhì)含量也不相同。酶解法提取柑橘果皮蠟質(zhì)的含量低于三氯甲烷/甲醇(V/V∶ 3/1)溶液提取法1～2個數(shù)量級[18]，使用火棉膠提取番茄果皮蠟質(zhì)，其含量比三氯甲烷溶液提取的含量低[19]。使用不同有機(jī)溶劑提取果皮蠟質(zhì)會影響蠟質(zhì)含量與成分，一般使用正己烷提取非極性餾分，二氯甲烷提取弱極性餾分，甲醇提取極性餾分[20]。對于不同有機(jī)溶劑對李果皮蠟質(zhì)的影響，貴州省果樹工程技術(shù)研究中心董曉慶團(tuán)隊也對正己烷、三氯甲烷、三氯甲烷/甲醇(V/V∶ 4/1)三種提取劑進(jìn)行了比較，結(jié)果顯示三氯甲烷/甲醇(V/V∶ 4/1)蠟質(zhì)含量最高(數(shù)據(jù)未發(fā)表)。

果皮中常見的蠟質(zhì)結(jié)構(gòu)有片狀、管狀、桿狀、針狀、顆粒狀等類型，蠟質(zhì)中主要包含脂肪族化合物、環(huán)狀化合物以及甾醇類化合物等[21]。對大量植物表皮蠟質(zhì)結(jié)構(gòu)和成分的研究發(fā)現(xiàn)，蠟質(zhì)結(jié)構(gòu)和成分顯著相關(guān)。表皮蠟質(zhì)呈現(xiàn)的蠟質(zhì)結(jié)構(gòu)與蠟質(zhì)成分含量相關(guān)，片狀結(jié)構(gòu)的蠟質(zhì)含有大量醇和三萜類化合物；柱、管狀結(jié)構(gòu)的蠟質(zhì)含有大量的酮和次級醇；桿、棒狀結(jié)構(gòu)的蠟質(zhì)含有大量二酮，且含二酮的植物表皮會產(chǎn)生白霜狀蠟質(zhì)[22]；波浪狀結(jié)構(gòu)的蠟質(zhì)含有大量烷烴[23]。

本研究中李果皮片狀蠟質(zhì)結(jié)構(gòu)分布密度與李果皮蠟質(zhì)中醇和烷烴含量密切相關(guān)。3種李果皮蠟質(zhì)呈現(xiàn)不同的蠟質(zhì)結(jié)構(gòu)，與蠟質(zhì)成分含量相關(guān)，此外，成分含量的差異可能會使不同的蠟質(zhì)結(jié)構(gòu)組合在一起?？招睦詈痛嗉t李蠟質(zhì)結(jié)構(gòu)相似，即有大量堆疊的桿狀蠟質(zhì)結(jié)構(gòu)，且在桿狀的節(jié)點上會聚集絮狀或者顆粒狀晶體。3種李果皮上附著一層白霜狀蠟質(zhì)，空心李白霜狀蠟質(zhì)覆蓋面積高于蜂糖李和脆紅李，且空心李果皮蠟質(zhì)呈現(xiàn)較多的桿狀結(jié)構(gòu)。對禾本科植物蠟質(zhì)的研究發(fā)現(xiàn)禾本科表皮結(jié)構(gòu)存在桿狀結(jié)構(gòu)，并在蠟質(zhì)中檢測出二酮物質(zhì)[22,24]，但在本研究中雖有大量的桿狀結(jié)構(gòu)，并未檢測出二酮物質(zhì)。蠟質(zhì)合成途徑中仲醇是酮的前體，仲醇含量會影響酮與二酮的含量，3種李果皮蠟質(zhì)中仲醇含量極低，極低的仲醇含量導(dǎo)致李果皮蠟質(zhì)中酮及二酮的含量極低，與Priyanka等[25]研究藍(lán)莓果皮蠟質(zhì)的結(jié)果一致。此外，郝浩浩[26]在研究成熟柑橘果皮蠟質(zhì)中同樣沒有檢測出二酮物質(zhì)，臍橙和椪柑果皮蠟質(zhì)呈現(xiàn)不同形態(tài)的桿狀結(jié)構(gòu)，蠟質(zhì)中含量最高的成分是醛類。

在一些研究中醇類也能形成桿狀結(jié)構(gòu)，并存在兩種組分，一種組分是仲醇、10-二十九烷及其同系物和少量不對稱二元醇[27]；另有一種組分是14,16-三十一烷二醇的對稱二元醇[28]?？招睦詈头涮抢詈休^高的二元醇，尤其是空心李中的1,30-三十烷二醇的含量顯著高于蜂糖李和脆紅李。研究表明，呈桿狀結(jié)構(gòu)的蠟質(zhì)組分中大多含有三萜類化合物[29]。本研究中空心李的桿狀晶體結(jié)構(gòu)比蜂糖李和脆紅李密集，而且空心李蠟質(zhì)中三萜類含量顯著高于蜂糖李和脆紅李，這可能是空心李果皮表皮白霜狀蠟質(zhì)極為豐富的原因。因此李果皮蠟質(zhì)中對稱二元醇和三萜類化合物對桿狀蠟質(zhì)結(jié)構(gòu)以及白霜狀蠟質(zhì)的形成起重要作用。

Oliveira等[30]研究發(fā)現(xiàn)干旱的旱地林地區(qū)植被蠟質(zhì)中主要含有極性低的物質(zhì)，而濕潤的熱帶草原地區(qū)主要含有極性高的物質(zhì)，低極性物質(zhì)能更有效的防止水分散失。Chai等[12]在研究10種蘋果果皮蠟質(zhì)發(fā)現(xiàn)，烷烴的相對含量與李果實貯藏性有直接關(guān)系。本研究中蜂糖李果皮蠟質(zhì)中低極性物質(zhì)烷烴含量比例高于空心李和脆紅李，推測蜂糖李果實在生產(chǎn)中更耐貯藏。3種李果皮蠟質(zhì)中飽和脂肪酸和飽和脂肪醛含量最高的是蜂糖李，最低的是脆紅李；不飽和脂肪酸和不飽和脂肪醛含量最高的是脆紅李，最低的是蜂糖李。對3種李蠟質(zhì)成分與硬度和TSS的相關(guān)性分析中，醇類、烷烴以及三萜類與硬度呈負(fù)相關(guān)(R2分別為-0.841、-0.757和-0.634)，三萜類與TSS呈極顯著負(fù)相關(guān)(R2=-0.991，P<0.01)，進(jìn)一步說明三萜類與李果實品質(zhì)有重要關(guān)系，但果皮蠟質(zhì)中具體成分和李果實貯藏之間的關(guān)系還需進(jìn)一步深入研究。

此外，3種李果皮蠟質(zhì)中還存在黃酮類和蒽醌類，任玉琴等[31]研究發(fā)現(xiàn)李果實中黃酮類物質(zhì)具有重要的抗氧化作用，Rajan等[32]研究發(fā)現(xiàn)蒽醌類物質(zhì)具有抗炎殺菌的作用，但目前還未有研究報道這些物質(zhì)對蠟質(zhì)結(jié)構(gòu)的形成是否起到作用以及如何作用，因此需要進(jìn)一步深入研究和探討。

4 結(jié)論

本研究通過分析3種李果皮結(jié)構(gòu)以及果皮蠟質(zhì)成分，發(fā)現(xiàn)蠟質(zhì)成分及其含量的差異會使李果皮蠟質(zhì)結(jié)構(gòu)存在不同類型的組合。3種李中分析出7類87種蠟質(zhì)成分，主成分分析結(jié)果顯示3種李蠟質(zhì)組分區(qū)別明顯，聚類熱圖顯示空心李與脆紅李的蠟質(zhì)成分相近，與蜂糖李差異較大。本研究發(fā)現(xiàn)蠟質(zhì)中對稱二元醇和三萜類化合物對李果皮蠟質(zhì)桿狀結(jié)構(gòu)以及白霜狀蠟質(zhì)的形成起重要作用，并且三萜類化合物與李果實品質(zhì)存在重要關(guān)系。