■趙天成 劉 釗 臧 曉 吳 旻 劉忠軍 張愛武

(吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物科學(xué)技術(shù)學(xué)院，吉林 長春 130118)

養(yǎng)殖業(yè)普遍面臨動(dòng)物應(yīng)激、疾病等引發(fā)的損失，傳統(tǒng)的添加抗生素方法使動(dòng)物機(jī)體腸道菌群失衡。隨著動(dòng)物養(yǎng)殖過程中添加抗生素帶來的抗藥性以及部分藥物殘留從而導(dǎo)致對(duì)動(dòng)物的不良影響，農(nóng)業(yè)農(nóng)村部發(fā)布第194號(hào)公告，提出為了維護(hù)我國動(dòng)物源性食品安全和公共衛(wèi)生安全，決定停止生產(chǎn)、進(jìn)口、經(jīng)營、使用藥物飼料添加劑（中草藥除外），并對(duì)相關(guān)管理政策做出調(diào)整[1]。發(fā)展綠色畜牧業(yè)的重要方向之一就是開發(fā)代替抗生素的高效、安全、綠色的飼料添加劑。百里香酚是百里香、牛至、冬香薄荷等植物精油的主要活性成分[2]。百里香酚作為優(yōu)質(zhì)飼料添加劑已經(jīng)應(yīng)用在多種動(dòng)物生產(chǎn)當(dāng)中。Hong 等[3]、Cetin 等[4]、Giannenas 等[5]研究表明百里香酚可以改善禽類腸道環(huán)境，提高生長性能。Tan等[6]研究表明百里香酚可以改善仔豬腸道形態(tài)，提高表觀消化率。

藍(lán)狐在我國養(yǎng)殖數(shù)量較多，是經(jīng)濟(jì)價(jià)值較高的毛皮動(dòng)物，生產(chǎn)過程中由于環(huán)境改變引起動(dòng)物應(yīng)激反應(yīng)，免疫能力下降，而患病會(huì)導(dǎo)致藍(lán)狐死亡淘汰或毛皮質(zhì)量不佳，降低經(jīng)濟(jì)效益。本試驗(yàn)通過在藍(lán)狐的飼糧中添加不同水平的百里香酚，研究百里香酚對(duì)冬毛期藍(lán)狐的生產(chǎn)性能與生化指標(biāo)的影響，為百里香酚在藍(lán)狐生產(chǎn)中的應(yīng)用提供基礎(chǔ)理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

1.1.1 試驗(yàn)動(dòng)物

隨機(jī)選?。?20±5）日齡、體重（6.05±0.16）kg的健康雄性藍(lán)狐40只。藍(lán)狐來源于吉林省松原市乾安縣北大荒藍(lán)狐良種場。

1.1.2 試劑

百里香酚固體精油由西安小小生物公司生產(chǎn)，有效成分含量為99%。

1.2 試驗(yàn)方法

1.2.1 試驗(yàn)設(shè)計(jì)

采用單因素試驗(yàn)設(shè)計(jì)，40 只藍(lán)狐隨機(jī)分成4 組(試驗(yàn)組Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ和對(duì)照組)，每組10只，單籠飼養(yǎng)，對(duì)照組飼喂基礎(chǔ)飼糧（見表1），試驗(yàn)組Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ在基礎(chǔ)飼糧中分別添加100 mg/kg（試驗(yàn)組Ⅰ）、200 mg/kg（試驗(yàn)組Ⅱ）、300 mg/kg（試驗(yàn)組Ⅲ）的百里香酚。試驗(yàn)于2020年11月13日至2020年12月18日于吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)教學(xué)試驗(yàn)基地進(jìn)行。預(yù)飼期5 d，正式試驗(yàn)期30 d。試驗(yàn)開始和結(jié)束時(shí)稱重和采樣。

表1 基礎(chǔ)飼糧組成及營養(yǎng)水平(風(fēng)干基礎(chǔ))

1.2.2 飼養(yǎng)管理

試驗(yàn)開始前，對(duì)藍(lán)狐進(jìn)行基礎(chǔ)免疫（注射狂犬病疫苗及犬細(xì)小疫苗），每日定時(shí)飼喂，06：30 和16：00各飼喂一次，自由采水，定時(shí)清掃籠舍。

1.2.3 樣品采集

正式試驗(yàn)的最后5 d每天采集糞便及未食用完的飼料。試驗(yàn)結(jié)束時(shí)，采集每只藍(lán)狐后腿靜脈血液8 mL放在促凝采血管中，經(jīng)4 000 r/min離心10 min，將分離出的血清分裝在2 mL編好號(hào)的離心管中，置于-80 ℃保存，備用。試驗(yàn)結(jié)束時(shí)每組隨機(jī)選6 只藍(lán)狐處死，取皮后取胸腺、胰腺、肝臟、脾臟和腎臟，用濾紙吸干臟器表面的血液后進(jìn)行稱重，并記錄。

1.2.4 指標(biāo)測定

1.2.4.1 生產(chǎn)性能

增重：正式試驗(yàn)第一天和最后一天飼喂前稱量體重，分別作為初重和末重，并計(jì)算出平均日增重。皮張質(zhì)量：藍(lán)狐的鮮皮重為未去油的狐皮重量，鮮皮長為鼻尖到尾根的距離，隨機(jī)在藍(lán)狐背中部取帶毛囊的1 cm2樣本進(jìn)行測定針毛長度。

1.2.4.2 藍(lán)狐對(duì)營養(yǎng)物質(zhì)的表觀消化率

表觀消化率采用全收糞法測定。粗蛋白含量測定采用凱氏定氮法（GB/T 6432—1994）；粗脂肪含量測定采用索氏浸提法（GB/T 6433—2006）；粗灰分含量測定采用灰分法（GB/T 6438—1992），并計(jì)算有機(jī)物、粗脂肪和粗蛋白的消化率。

1.2.4.3 血清生化指標(biāo)

血清中免疫球蛋白A（IgA）、免疫球蛋白G（IgG）、免疫球蛋白M（IgM）、白細(xì)胞介素4（IL-4）、尿素氮（Bloodurea nitrogen，BUN）含量及血清超氧化物歧化酶（Superoxide dismutase，SOD）、過氧化氫酶（Cata?lase，CAT）活力采用檢測試劑盒（南京建成生物工程研究所有限公司）進(jìn)行檢測。

1.2.4.4 臟器指數(shù)

臟器指數(shù)（%）=器官重量/體重×100

1.3 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)

試驗(yàn)數(shù)據(jù)采用統(tǒng)計(jì)軟件SPSS 25.0進(jìn)行單因素方差分析（one-way ANOVA，LSD），Duncan’s法多重比較檢驗(yàn)，結(jié)果以“平均值±標(biāo)準(zhǔn)差”來表示，P＜0.05為差異顯著。

2 結(jié)果與分析

2.1 百里香酚對(duì)冬毛期藍(lán)狐生產(chǎn)性能的影響（見表2）

表2 百里香酚對(duì)冬毛期藍(lán)狐生產(chǎn)性能的影響

由表2可知，試驗(yàn)組Ⅲ的末重顯著高于試驗(yàn)組Ⅰ、對(duì)照組（P＜0.05）。各組平均日增重差異不顯著（P>0.05）。試驗(yàn)組Ⅲ的鮮皮重顯著大于試驗(yàn)組Ⅰ（P＜0.05）。試驗(yàn)組Ⅱ的鮮皮長顯著大于對(duì)照組（P＜0.05）。試驗(yàn)組Ⅱ的針毛長顯著大于其他各組（P＜0.05）。

2.2 百里香酚對(duì)冬毛期藍(lán)狐營養(yǎng)物質(zhì)表觀消化率的影響（見表3）

如表3所示，試驗(yàn)組Ⅲ組的有機(jī)物表觀消化率顯著高于其他各組（P＜0.05）。粗脂肪和粗蛋白的表觀消化率各組之間差異不顯著（P>0.05）。

表3 百里香酚對(duì)冬毛期藍(lán)狐營養(yǎng)物質(zhì)表觀消化率的影響(%)

2.3 百里香酚對(duì)冬毛期藍(lán)狐臟器指數(shù)的影響（見表4）

由表4可知，試驗(yàn)組Ⅲ的胸腺指數(shù)極顯著高于試驗(yàn)組Ⅰ、試驗(yàn)組Ⅱ（P＜0.01）。對(duì)照組的胰腺指數(shù)顯著高于試驗(yàn)組Ⅰ（P＜0.05）。試驗(yàn)組Ⅱ的脾臟指數(shù)顯著高于對(duì)照組（P＜0.05）。對(duì)照組的腎臟指數(shù)顯著高于試驗(yàn)組Ⅱ（P＜0.05）。肝臟指數(shù)各組之間差異不顯著（P>0.05）。

表4 百里香酚對(duì)冬毛期藍(lán)狐臟器指數(shù)的影響(%)

2.4 百里香酚對(duì)冬毛期藍(lán)狐血清生化指標(biāo)的影響（見表5）

由表5 可知，試驗(yàn)組Ⅰ的IgG 含量極顯著高于試驗(yàn)組Ⅲ、對(duì)照組（P＜0.01），試驗(yàn)組Ⅱ的IgG含量極顯著高于對(duì)照組（P＜0.01）。試驗(yàn)組Ⅰ、試驗(yàn)組Ⅲ的IgA 含量顯著高于對(duì)照組（P＜0.05）。試驗(yàn)組Ⅰ、試驗(yàn)組Ⅱ、試驗(yàn)組Ⅲ的IgM 含量極顯著高于對(duì)照組（P＜0.01）。試驗(yàn)組Ⅱ的BUN 含量顯著高于試驗(yàn)組Ⅲ（P＜0.05）。SOD和CAT活力各組之間差異不顯著（P>0.05）。

表5 百里香酚對(duì)冬毛期藍(lán)狐血清生化指標(biāo)的影響

3 討論

3.1 百里香酚對(duì)冬毛期藍(lán)狐生產(chǎn)性能的影響

毛皮動(dòng)物的毛皮質(zhì)量優(yōu)劣影響著毛皮動(dòng)物經(jīng)濟(jì)效益的高低。研究表明，百里香酚可以提高動(dòng)物的生長性能。黃崇波等[7]研究表明，在肉兔飼糧中添加百里香酚可提高肉兔生長性能以及飼料轉(zhuǎn)換效率。We?ber等[8]研究表明，肉仔雞飼糧中添加百里香酚與胡椒堿混合物可顯著改善肉仔雞的生長性能。孫海濤等[9]研究發(fā)現(xiàn)，在肉兔飼糧中添加有機(jī)酸+精油（百里香酚、香蘭素）能顯著提高肉兔的平均日增重。田梅等[10]研究表明，以橄欖油為載體，飼糧添加百里香酚可以提高肉兔的采食量和生長性能。Diao等[11]研究表明，2 000 mg/kg 苯甲酸和100 mg/kg 百里酚的聯(lián)合處理可以提高仔豬生長性能。

本研究結(jié)果與田梅等[10]研究結(jié)果相近，本研究發(fā)現(xiàn)，添加百里香酚對(duì)藍(lán)狐體重、皮長、皮重和針毛長度有影響，添加200 mg/kg 百里香酚對(duì)皮長和針毛長的影響效果更優(yōu)。藍(lán)狐體重的大小與皮重相關(guān)。在平均日增重方面，百里香酚添加到300 mg/kg時(shí)平均日增重才有一定幅度提升。與對(duì)照組相比添加300 mg/kg百里香酚顯著增加藍(lán)狐的末重。添加200 mg/kg百里香酚顯著提高藍(lán)狐皮長和針毛長，增加了皮張的延展性。綜上所述，飼糧中添加百里香酚可以提高冬毛期藍(lán)狐的毛皮質(zhì)量，并提升藍(lán)狐的生產(chǎn)性能。

3.2 百里香酚對(duì)冬毛期藍(lán)狐的表觀消化率的影響

進(jìn)入冬毛期的藍(lán)狐體重增長趨于平緩[12]，藍(lán)狐表觀消化率的高低影響著體重變化。薛秀梅[13]研究表明，添加200 mg/L 百里香酚和20 mg/L 莫能菌素的精粗比2∶8（苜蓿）飼糧和精粗比3∶7（羊草）飼糧對(duì)提高消化率有顯著的積極影響。周瑞[14]研究表明羔羊飼糧中添加牛至精油（主要活性成分為百里香酚和丁香酚）可以提高飼糧中粗蛋白的表觀消化率。Kolling等[15]研究表明，牛至（主要活性成分為百里香酚和丁香酚）增加了攝入的飼糧干物質(zhì)的可消化部分。

本研究結(jié)果與薛秀梅[13]研究結(jié)果相近，添加300 mg/kg 的試驗(yàn)組Ⅲ有機(jī)物表觀消化率有著顯著的提高，同時(shí)藍(lán)狐末重也到達(dá)最大。飼糧中添加百里香酚對(duì)粗蛋白和粗脂肪表觀消化率也有提升的趨勢(shì)。但濃度達(dá)到300 mg/kg時(shí)粗蛋白表觀消化率有下降趨勢(shì)，以200 mg/kg添加水平為最優(yōu)。

3.3 百里香酚對(duì)冬毛期藍(lán)狐臟器指數(shù)的影響

胸腺和脾臟作為免疫器官，免疫器官指數(shù)在一定程度上反映了動(dòng)物的免疫功能，在動(dòng)物健康的條件下，免疫器官指數(shù)越大其免疫功能越強(qiáng)[16]。本試驗(yàn)中，添加百里香酚可以提高藍(lán)狐胸腺指數(shù)和脾臟指數(shù)，進(jìn)而增強(qiáng)冬毛期藍(lán)狐的免疫功能。冬毛期藍(lán)狐各個(gè)器官發(fā)育成熟，為過冬囤積脂肪，人工飼養(yǎng)條件下可能導(dǎo)致腎腫大和脂肪肝，本試驗(yàn)中，添加百里香酚顯著降低了胰腺指數(shù)和腎臟指數(shù)，肝臟指數(shù)也有下降的趨勢(shì)，降低藍(lán)狐患病的概率，提高藍(lán)狐存活率。

3.4 百里香酚對(duì)冬毛期藍(lán)狐血清生化指標(biāo)的影響

血液生化指標(biāo)的改變是組織細(xì)胞通透性發(fā)生改變和機(jī)體新陳代謝機(jī)能發(fā)生改變的反映，尿素氮直接反映機(jī)體蛋白質(zhì)分解代謝水平[17]。免疫球蛋白在免疫發(fā)生過程中起關(guān)鍵作用，免疫球蛋白濃度的高低反映動(dòng)物機(jī)體免疫能力的強(qiáng)弱[18]。Li 等[19]研究表明，仔豬飼糧中添加主成分為百里香酚和肉桂醛的植物精油可以提高血清中IgA和IgM含量。孫代鵬等[20]通過在斷奶仔豬飼糧中添加植物精油（主要成分為百里香酚和肉桂醛），顯著提高血清中IgA和IgG含量。朱曉磊[21]研究發(fā)現(xiàn)，在麻花雞飼糧中添加0.25 mg/kg 百里香精油（主要成分為香荊芥酚、百里香酚等）可以顯著提高肉雞血清中IgA、IgG和IgM含量。本試驗(yàn)中添加百里香酚對(duì)藍(lán)狐血清中IgG、IgA和IgM的含量都有顯著的提高，進(jìn)而提升藍(lán)狐的免疫能力，并且添加100 mg/kg百里香酚極顯著提高血清中IgG含量。

SOD能有效地清除氧自由基，從而阻斷毒性更強(qiáng)的氫氧根離子的產(chǎn)生，構(gòu)成機(jī)體抗氧化活性酶的第一道防線，檢測SOD的活性可以反映機(jī)體清除自由基的能力及細(xì)胞受損的嚴(yán)重程度[22]。Hashemipour 等[23]在肉仔雞飼糧中添加一定量的百里香酚和香芹酚混合精油顯著提高了SOD 活性。王蘭等[24]在肉仔雞飼糧中添加百里香酚、肉桂醛、香芹酚的混合精油，顯著提高了SOD的活性。本試驗(yàn)中，添加百里香酚也有提高SOD 活性的趨勢(shì)。BUN 含量常作為尿液排泄氮的指標(biāo)，用來衡量動(dòng)物氮的利用率或排泄率[25]。本試驗(yàn)中，300 mg/kg百里香酚顯著降低BUN含量，從而提升氮沉積。冬毛期藍(lán)狐飼糧中添加百里香酚可以提高動(dòng)物機(jī)體免疫能力和抗氧化能力。綜合來看百里香酚的添加水平在200～300 mg/kg 效果相對(duì)較好，考慮經(jīng)濟(jì)因素以200 mg/kg的添加水平為優(yōu)。

4 結(jié)論

冬毛期藍(lán)狐飼糧中添加200 mg/kg百里香酚可以提高藍(lán)狐的生產(chǎn)性能、免疫能力和抗氧化能力，提高藍(lán)狐的毛皮質(zhì)量。