任怡鎂，王 然，逄金柱，賴(lài)必輝

1 中國(guó)農(nóng)業(yè)大學(xué)營(yíng)養(yǎng)與健康系，北京 100191

2 內(nèi)蒙古蒙牛乳業(yè)（集團(tuán)）股份有限公司，內(nèi)蒙古呼和浩特 011500

0 引言

疲勞狀態(tài)是指正常生活工作條件下疲勞感較易產(chǎn)生，經(jīng)休息后不易緩解，或雖緩解但易再次出現(xiàn)的一種狀態(tài)[1]。高強(qiáng)度工作、不良的生活方式、精神壓力、情緒的起伏波動(dòng)，以及機(jī)體組織器官的功能衰退和紊亂都是疲勞狀態(tài)的風(fēng)險(xiǎn)因素[2]。隨著社會(huì)的快速發(fā)展，人們工作和生活節(jié)奏加快，處于疲勞狀態(tài)的人群越來(lái)越普遍。研究表明，我國(guó)約有70%的人現(xiàn)處于疲勞狀態(tài)[3]。疲勞狀態(tài)可致使人出現(xiàn)精力減退、抵抗力下降、工作效率降低等癥狀，如果不及時(shí)加以干預(yù)，可能會(huì)進(jìn)一步影響人們的生活質(zhì)量，甚至引起器質(zhì)性的病變[4，5]。目前，疲勞狀態(tài)己成為一個(gè)不容忽視的健康問(wèn)題。

羊奶的營(yíng)養(yǎng)成分與牛乳相似，但由于其中氨基酸、維生素和鈣的含量均高于牛奶，且更容易消化吸收，比牛奶擁有更高的營(yíng)養(yǎng)價(jià)值[6～8]。此外，羊奶中含有多種對(duì)人體有益的免疫球蛋白等活性物質(zhì)，對(duì)提升人體免疫力、抗過(guò)敏具有良好作用[9，10]。羊奶粉是國(guó)內(nèi)市場(chǎng)主要的羊奶制品[11]，李曼微等[12]的研究表明，添加了人參的復(fù)方羊奶粉能增加小鼠的機(jī)體能源貯備，減少代謝物堆積，增強(qiáng)運(yùn)動(dòng)耐力，在緩解疲勞的功能方面有著一定的潛力。然而，關(guān)于羊奶粉抗疲勞方面的研究仍然較少，羊奶粉的功能性和附加值探索有待完善。

本研究通過(guò)測(cè)定羊奶粉干預(yù)下小鼠負(fù)重游泳時(shí)間、檢測(cè)運(yùn)動(dòng)后小鼠血清尿素、肝糖原和血乳酸的含量，評(píng)價(jià)羊奶粉緩解小鼠體力疲勞的作用效果，為后續(xù)相關(guān)功能產(chǎn)品的開(kāi)發(fā)提供理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 樣品

羊奶粉由內(nèi)蒙古歐世蒙牛乳制品有限責(zé)任公司提供，主要成分為全脂羊奶粉、脫鹽乳清粉、濃縮乳清蛋白粉等。西洋參含片由福建上普藥業(yè)有限公司提供，主要成分為西洋參、葡萄糖、淀粉、硬脂酸鎂，規(guī)格為每片1.25 g，每100 g西洋參含片含總皂苷1.0 g。

1.2 儀器和試劑

水浴鍋（歐萊博科技有限公司，HH-W420），低溫高速離心機(jī)（Thermo Fisher，F(xiàn)resco 21），分光光度計(jì)（上海精科分析儀器廠，754N），酶標(biāo)儀（Thermo Scientific，Varioskan Flash）尿素、血乳酸、肝糖原測(cè)定試劑盒均購(gòu)自南京建成生物工程研究所。

1.3 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物

160 只5～6 周齡雄性BALB/c小鼠，體重量18～22 g/只，均采購(gòu)自北京維通利華實(shí)驗(yàn)動(dòng)物技術(shù)有限公司。隨機(jī)分為四組，飼養(yǎng)條件為12 h光照交替，潔凈度SPF級(jí)，濕度維持在45%～50%，溫度保持在（20±2）°C。小鼠可自主攝食及飲水，活動(dòng)自由。

1.4 動(dòng)物實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)

將160 只健康的5～6 周齡雄性BALB/c小鼠隨機(jī)分為四組，每組40 只，空白對(duì)照組每天灌胃生理鹽水；陽(yáng)性對(duì)照組灌胃西洋參含片，劑量為625.0 mg/kg；低劑量組灌胃羊奶粉的劑量為6.25 g/kg；高劑量組灌胃羊奶粉的劑量為12.5 g/kg；持續(xù)灌胃30 天。30 天后，測(cè)定小鼠負(fù)重游泳時(shí)間，檢測(cè)其血清尿素、肝糖原和血乳酸含量。

1.5 小鼠負(fù)重游泳實(shí)驗(yàn)

末次灌胃30 min后，在小鼠尾根部負(fù)荷其體重5%的鉛皮，并將小鼠置于游泳箱中游泳，游泳箱水深30 cm，水溫（25±1.0）℃。記錄小鼠自開(kāi)始游泳直至其死亡的具體時(shí)間，即小鼠負(fù)重游泳時(shí)間。

1.6 小鼠血清尿素測(cè)定

末次灌胃30 min后，將小鼠放入30 ℃的恒溫游泳箱中不負(fù)重游泳90 min，休息60 min后采血并分離血清，按試劑盒說(shuō)明書(shū)步驟測(cè)定小鼠血清尿素含量。

1.7 小鼠肝糖原測(cè)定

末次灌胃30 min后，處死小鼠，將其肝臟經(jīng)生理鹽水漂洗后用濾紙吸干，精確稱(chēng)取肝臟100 mg，按試劑盒說(shuō)明書(shū)步驟測(cè)定小鼠組織勻漿中肝糖原的含量。

1.8 小鼠血乳酸測(cè)定

末次灌胃后，于小鼠尾尖處采血20 μL，隨后使小鼠在溫度約30 ℃的水中不負(fù)重游泳10 min。分別于游泳后0 min和休息20 min采血20 μL，將3 次采得的小鼠血樣按試劑盒說(shuō)明書(shū)步驟進(jìn)行血乳酸含量測(cè)定。

1.9 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析

使用統(tǒng)計(jì)軟件SPSS 21.0對(duì)各組別進(jìn)行單因素方差分析檢驗(yàn)（One-way ANOVA）。數(shù)據(jù)以平均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（Mean±SD）表示，相同字母表示不具有顯著性差異，不同字母表示有顯著性差異（p＜0.05）。

2 結(jié)果與討論

2.1 羊奶粉對(duì)小鼠負(fù)重游泳時(shí)間的影響

游泳時(shí)間的長(zhǎng)短可以反映動(dòng)物的運(yùn)動(dòng)耐力，運(yùn)動(dòng)耐力的提高是抗疲勞能力加強(qiáng)最直接的表現(xiàn)。如圖1所示，與空白對(duì)照組相比，各干預(yù)組小鼠的負(fù)重游泳時(shí)間均顯著延長(zhǎng)（p＜0.05），表明羊奶粉干預(yù)可以提高小鼠的運(yùn)動(dòng)耐力。與陽(yáng)性對(duì)照組相比，高劑量羊奶粉組小鼠的負(fù)重游泳時(shí)間有所提高，說(shuō)明高劑量羊奶粉的抗疲勞能力略?xún)?yōu)于西洋參。

圖1 羊奶粉對(duì)小鼠負(fù)重游泳時(shí)間的影響

2.2 羊奶粉對(duì)小鼠血清尿素水平的影響

尿素是機(jī)體氨基酸分解和蛋白質(zhì)代謝的產(chǎn)物，其濃度主要受蛋白質(zhì)攝入量及分解代謝情況等影響[13，14]。當(dāng)機(jī)體進(jìn)行長(zhǎng)時(shí)間、高強(qiáng)度的運(yùn)動(dòng)，糖類(lèi)和脂肪所提供的能量不能滿(mǎn)足機(jī)體需求時(shí)，體內(nèi)蛋白質(zhì)和氨基酸的代謝分解增強(qiáng)，血清尿素的含量就會(huì)增加[15～17]。若受試物可使機(jī)體運(yùn)動(dòng)后的血清尿素水平降低，說(shuō)明該受試物可以加強(qiáng)運(yùn)動(dòng)適應(yīng)性和耐力[18]。

如圖2所示，與空白對(duì)照組相比，陽(yáng)性對(duì)照組以及羊奶粉低、高劑量組小鼠在運(yùn)動(dòng)后的血清尿素含量均顯著降低（p＜0.05），低劑量和高劑量羊奶粉組之間血清尿素濃度無(wú)顯著性差異。結(jié)果說(shuō)明在羊奶粉的干預(yù)下，小鼠蛋白質(zhì)分解代謝減少，對(duì)耐力運(yùn)動(dòng)的適應(yīng)性有所加強(qiáng)，抗疲勞能力提高。

圖2 羊奶粉對(duì)小鼠血清尿素濃度的影響

2.3 羊奶粉對(duì)小鼠肝糖原含量的影響

肝糖原是重要的儲(chǔ)能物質(zhì)，是肝臟能量代謝的標(biāo)志[19，20]。當(dāng)血液中的葡萄糖不足時(shí)，肝糖原會(huì)水解成葡萄糖以維持血糖濃度[21，22]，因此肝糖原的含量與機(jī)體的運(yùn)動(dòng)耐力成正比[23]。如圖3所示，與空白對(duì)照組相比，陽(yáng)性對(duì)照組和羊奶粉低、高劑量組小鼠的肝糖原含量均顯著升高（p＜0.05），表明在羊奶粉干預(yù)下，小鼠體內(nèi)肝糖原儲(chǔ)備增加，緩解疲勞的潛能增強(qiáng)。

圖3 羊奶粉對(duì)小鼠肝糖原含量的影響

2.4 羊奶粉對(duì)小鼠血乳酸濃度曲線(xiàn)下面積的影響

糖酵解是生物體進(jìn)行葡萄糖分解代謝的必經(jīng)過(guò)程，乳酸是糖酵解供能系統(tǒng)的終產(chǎn)物[24，25]，當(dāng)運(yùn)動(dòng)強(qiáng)度加劇，體內(nèi)供氧不足，肌肉開(kāi)啟無(wú)氧方式供能，隨之產(chǎn)生大量乳酸，乳酸堆積則會(huì)引起機(jī)體疲勞[26]。通過(guò)測(cè)定小鼠游泳前后的血乳酸含量，計(jì)算乳酸濃度的曲線(xiàn)下面積。如圖4所示，與空白對(duì)照組相比，陽(yáng)性對(duì)照組和低、高劑量羊奶粉干預(yù)組小鼠的血乳酸曲線(xiàn)下面積呈下降趨勢(shì)，但各組之間均無(wú)顯著性差異（p＞0.05）。該結(jié)果說(shuō)明羊奶粉能在一定程度上抑制小鼠運(yùn)動(dòng)后的血乳酸水平升高。

圖4 羊奶粉對(duì)小鼠血乳酸濃度曲線(xiàn)下面積的影響（NS 表示無(wú)顯著性差異）

3 結(jié)論

本研究利用動(dòng)物實(shí)驗(yàn)評(píng)價(jià)了羊奶粉緩解體力疲勞的作用，結(jié)果表明，羊奶粉干預(yù)可顯著增強(qiáng)小鼠運(yùn)動(dòng)耐力，抑制小鼠體內(nèi)蛋白質(zhì)的分解代謝，增加小鼠的肝糖原儲(chǔ)備水平，增強(qiáng)其對(duì)耐力運(yùn)動(dòng)的適應(yīng)性，并可能通過(guò)抑制運(yùn)動(dòng)后小鼠的血乳酸升高，促進(jìn)血乳酸的消除，從而起到增強(qiáng)身體活力、緩解疲勞的作用。C