席雪琴

摘? ? 要：我國(guó)作為農(nóng)業(yè)大國(guó)，一直都將合理使用農(nóng)藥視為保障糧食、果蔬高質(zhì)高產(chǎn)的重要手段。但農(nóng)業(yè)經(jīng)濟(jì)發(fā)展較差，一些種植戶(hù)濫用或是過(guò)量施用農(nóng)藥，不僅造成環(huán)境污染，也會(huì)影響食品安全。因此，果蔬中農(nóng)藥殘留的速檢技術(shù)的應(yīng)用與發(fā)展獲得了社會(huì)各界的廣泛關(guān)注，同時(shí)也成為食品安全領(lǐng)域研究的重點(diǎn)課題。文章簡(jiǎn)述了果蔬中農(nóng)藥殘留速測(cè)技術(shù)應(yīng)用發(fā)展的必要性，分析了果蔬農(nóng)藥殘留基本情況，研究了果蔬中農(nóng)藥殘留速測(cè)技術(shù)，以供參考。

關(guān)鍵詞：果蔬;農(nóng)藥殘留;速檢技術(shù)

文章編號(hào)：1005-2690（2022）06-0087-03? ? ? ?中國(guó)圖書(shū)分類(lèi)號(hào)：S481.8? ? ? ?文獻(xiàn)標(biāo)志碼：B

在人們健康意識(shí)不斷增強(qiáng)，生活水平不斷提高的背景下，綠色農(nóng)產(chǎn)品、有機(jī)農(nóng)產(chǎn)品獲得了較為理想的發(fā)展空間，得到了政府與消費(fèi)者的廣泛關(guān)注。同時(shí)，果蔬中的農(nóng)藥殘留給人體健康、環(huán)境帶來(lái)不同的影響。農(nóng)藥殘留問(wèn)題不僅會(huì)給消費(fèi)者食用安全帶來(lái)一定影響，還會(huì)阻礙我國(guó)農(nóng)產(chǎn)品對(duì)外出口。

因此，不論是為我國(guó)農(nóng)產(chǎn)品食用安全提供保障，還是為推動(dòng)農(nóng)產(chǎn)品對(duì)外出口奠定堅(jiān)實(shí)基礎(chǔ)，都要重視農(nóng)藥殘留速測(cè)技術(shù)的應(yīng)用與發(fā)展。

1 果蔬中農(nóng)藥殘留速測(cè)技術(shù)應(yīng)用發(fā)展的必要性

在世界經(jīng)濟(jì)一體化快速發(fā)展以及農(nóng)藥殘留給人體健康、環(huán)境帶來(lái)影響的背景下，很多發(fā)達(dá)國(guó)家都會(huì)限量果蔬中的農(nóng)藥殘留，運(yùn)用檢測(cè)技術(shù)設(shè)置綠色貿(mào)易壁壘。因此，不論是為給消費(fèi)者食用安全提供有力保障，還是為農(nóng)產(chǎn)品對(duì)外出口提供有力支持，必須要重視果蔬中農(nóng)藥殘留速測(cè)技術(shù)應(yīng)用研究。

就目前來(lái)看，傳統(tǒng)檢測(cè)技術(shù)雖然比較權(quán)威，但因?yàn)樘幚順悠份^為復(fù)雜、需要應(yīng)用的儀器設(shè)備比較昂貴、要經(jīng)過(guò)較長(zhǎng)時(shí)間才可以得到分析結(jié)果、操作人員需要有較高的專(zhuān)業(yè)素質(zhì)等因素的影響，只能在少數(shù)專(zhuān)業(yè)檢測(cè)機(jī)構(gòu)開(kāi)展果蔬農(nóng)藥殘留檢測(cè)工作。隨著農(nóng)產(chǎn)品流通越來(lái)越頻繁、速度越來(lái)越快以及人們對(duì)食品安全問(wèn)題的重視程度越來(lái)越高，傳統(tǒng)檢測(cè)技術(shù)已經(jīng)無(wú)法滿(mǎn)足現(xiàn)代果蔬農(nóng)藥殘留檢測(cè)需求。快速檢測(cè)技術(shù)的產(chǎn)生和應(yīng)用，可以隨時(shí)隨地且快速檢測(cè)市場(chǎng)上的蔬菜水果，能夠從源頭上有效控制農(nóng)藥殘留。因此，為了進(jìn)一步提升果蔬農(nóng)藥殘留安全檢測(cè)水平，應(yīng)重視應(yīng)用便捷、快速且成本較低的速測(cè)技術(shù)[1]。

2 果蔬農(nóng)藥殘留基本情況

我國(guó)果蔬行業(yè)在種植中經(jīng)常會(huì)用到除草劑、殺菌劑以及殺蟲(chóng)劑等各類(lèi)化學(xué)制劑，導(dǎo)致果蔬中殘留有機(jī)氯、有機(jī)磷以及含有重金屬元素等，這些農(nóng)藥殘留物質(zhì)進(jìn)入人體后，會(huì)被血液快速吸收，損害大腦神經(jīng)元，嚴(yán)重影響人體免疫機(jī)能，還可能導(dǎo)致器官病變、癌變。在影響人體健康的同時(shí)，會(huì)破壞、威脅生態(tài)環(huán)境。因此，為了真正做到從源頭有效控制農(nóng)藥殘留，必須要重視農(nóng)藥殘留檢測(cè)工作與相關(guān)技術(shù)的研發(fā)[2]。

3 果蔬中農(nóng)藥殘留速測(cè)技術(shù)的應(yīng)用發(fā)展分析

3.1 生物檢測(cè)技術(shù)

1） 發(fā)光菌檢測(cè)法。細(xì)菌的發(fā)光程度會(huì)受到農(nóng)藥、細(xì)菌的影響，發(fā)光細(xì)菌雖然有很多種類(lèi)，但從發(fā)光機(jī)制來(lái)看還是存在很大相似性，簡(jiǎn)單來(lái)說(shuō)是胞內(nèi)熒光酶受到分子氧的作用后，被其催化，將還原態(tài)的黃素核甘酸（FMNH2）、長(zhǎng)鏈脂肪醛氧化成長(zhǎng)鏈脂肪酸、FMN以及強(qiáng)度最大的藍(lán)綠光釋放出來(lái)。菌屬和發(fā)光桿菌屬都是應(yīng)用較為廣泛的發(fā)光菌，但需要注意的是，在具體應(yīng)用中被激活后的發(fā)光菌，隨著時(shí)間的變化，發(fā)光強(qiáng)度也會(huì)發(fā)生一定的變化。所以在之后的相關(guān)分析中，應(yīng)用發(fā)光變化率時(shí)間較短的開(kāi)展各項(xiàng)測(cè)試。該檢測(cè)法在具體應(yīng)用中，會(huì)發(fā)生反應(yīng)的藥劑非常少，難以準(zhǔn)確高效辨別殘留農(nóng)藥的種類(lèi)，因此，現(xiàn)階段該檢測(cè)方法應(yīng)用不廣泛。

2） 敏感家蠅檢測(cè)法。該檢測(cè)法在具體應(yīng)用中，可以著重應(yīng)用敏感品系家蠅，為其喂食樣本后，根據(jù)最終家蠅的死亡率對(duì)農(nóng)藥殘留量作出判斷。該檢測(cè)方法操作較為簡(jiǎn)單，農(nóng)戶(hù)可自主開(kāi)展，但也存在一定的局限性，需要繁殖大量的敏感性家蠅，前期需要開(kāi)展較為復(fù)雜的準(zhǔn)備工作。該檢測(cè)法在具體應(yīng)用中會(huì)發(fā)生反應(yīng)的藥劑非常少，難以準(zhǔn)確高效辨別殘留農(nóng)藥的種類(lèi)，只適用于田間未采收的蔬菜[3]。

3.2 生化檢測(cè)技術(shù)

現(xiàn)階段應(yīng)用酶抑制法較為廣泛，是一種相對(duì)成熟的農(nóng)藥殘留速測(cè)技術(shù)，尤其是基于該方法研發(fā)的各類(lèi)速測(cè)工具，能夠合理彌補(bǔ)儀器分析法存在的不足。當(dāng)前，膽堿酯酶抑制法是應(yīng)用較多的方式，適用于有機(jī)磷、氨基甲酸酯類(lèi)農(nóng)藥殘留的測(cè)定。將酶和樣品提取液放在一起，使之發(fā)生反應(yīng)，若樣品中有上述兩種農(nóng)藥殘留，會(huì)抑制酶的活性，顯色后吸光度也不同。結(jié)合這一原理，開(kāi)發(fā)出以下幾種類(lèi)型的產(chǎn)品。

1） 速測(cè)箱。該檢測(cè)法在具體應(yīng)用中可以提取樣品，讓其與膽堿酯酶發(fā)生反應(yīng)，在此過(guò)程中，膽堿酯酶沒(méi)有被抑制，基質(zhì)水解呈藍(lán)色則可以判定被檢樣品中不含有機(jī)磷和氨基甲酸酯類(lèi)農(nóng)藥，但膽堿酯酶被抑制，且基質(zhì)無(wú)法水解，顏色沒(méi)有發(fā)生改變，這便說(shuō)明樣品中含有機(jī)磷和氨基甲酸酯類(lèi)農(nóng)藥。需要注意的是，對(duì)于常見(jiàn)農(nóng)藥，該檢測(cè)法在實(shí)際應(yīng)用中會(huì)限量使用，所以只能應(yīng)用在定性快速初篩中[4]。

2） 速測(cè)儀。為了滿(mǎn)足市場(chǎng)發(fā)展需求，近幾年，各類(lèi)快速檢測(cè)儀在農(nóng)藥殘留快速檢測(cè)中的應(yīng)用越來(lái)越廣泛。對(duì)于乙酰膽堿酯酶活性來(lái)講，農(nóng)藥殘留對(duì)其有一定的抑制作用，且抑制率會(huì)隨著濃度的增加而升高。基于此，可以采用相關(guān)儀器合理測(cè)定酶與底物、顯色劑顯色反應(yīng)的變色速率，從而分析酶抑制率，以此檢測(cè)判定果蔬中的農(nóng)藥殘留量是否超標(biāo)[5]。

3） 速測(cè)卡。農(nóng)藥速測(cè)卡在具體應(yīng)用中，其含有的藥片有兩種，分別為白色、紅色。其中，白色藥片含有膽堿酯酶，這種生物催化劑主要由蛋白質(zhì)分子構(gòu)成。紅色藥片含有的乙酰膽堿與物靛酚乙酸酯非常類(lèi)似，在受到膽堿酯酶的催化后，靛酚乙酸酯會(huì)迅速發(fā)生水解反應(yīng)，并且生成藍(lán)色靛酚與乙酸。在被檢測(cè)的樣品中，即使存在微量的有機(jī)磷或氨基甲酸酯類(lèi)農(nóng)藥也會(huì)強(qiáng)烈抑制藍(lán)色靛酚與乙酸的生成，這樣在檢測(cè)中可通過(guò)目測(cè)的方式合理判斷果蔬中農(nóng)藥殘留的情況。若樣品最終檢測(cè)呈陽(yáng)性，可以通過(guò)其他分析方法檢測(cè)果蔬中的農(nóng)藥殘留量是否超標(biāo)[6]。

4） 傳感器。其主要分為兩種，一種是生物傳感器，另一種是同相傳感器。生物傳感器是通過(guò)緊密結(jié)合生物敏感部件、轉(zhuǎn)換器，具有顯著可選擇性、可逆向性的特點(diǎn)，分析特定化學(xué)物質(zhì)或生物活性物質(zhì)的一種裝置。需要注意的是，應(yīng)用生物傳感器得到的分析結(jié)果難以保障穩(wěn)定性，重現(xiàn)性也不理想，使用壽命較短，所以目前該檢測(cè)法還處于研發(fā)狀態(tài)。同相傳感器是用壓電結(jié)晶，簡(jiǎn)單來(lái)講，就是在附加電壓的過(guò)程中，晶體質(zhì)量、大小的不同會(huì)導(dǎo)致晶體震動(dòng)能力發(fā)生改變，而晶體上包被了可以吸附目標(biāo)物的材料，所以在接觸晶體配基時(shí)，會(huì)產(chǎn)生吸附，同時(shí)晶體質(zhì)量、頻率也會(huì)因此出現(xiàn)變化，吸附的物質(zhì)量不同，發(fā)生的變化也不同，需要定量測(cè)定。

3.3 免疫分析

該方法稱(chēng)之為免疫吸附分析法。其中應(yīng)用較為廣泛的主要有以下幾種方法。

1） 放射性免疫分析。作為起步相對(duì)較早的一種方式，在具體應(yīng)用中，主要是在試管中培育抗血清與待測(cè)農(nóng)藥，按照要求培育一段時(shí)間后，在其中加入適量同位素標(biāo)記的待測(cè)農(nóng)藥，以此創(chuàng)造競(jìng)爭(zhēng)條件，讓其與抗體充分結(jié)合并發(fā)生反應(yīng)。結(jié)合具體情況，以與具體檢測(cè)要求相符合的方式有效完成被抗體結(jié)合的、未被抗體結(jié)合的標(biāo)記農(nóng)藥的分離工作。在此之后，最終留在溶液中的便是未被抗體結(jié)合的放射性標(biāo)記農(nóng)藥[7]。

2） 流動(dòng)注射免疫分析。作為較為新穎的一項(xiàng)檢測(cè)技術(shù)，在連續(xù)測(cè)定工作中以及對(duì)大流量的某些樣品測(cè)定中得到了廣泛應(yīng)用，可以為實(shí)現(xiàn)自動(dòng)化提供有力支持，檢測(cè)時(shí)間較短、速度非?？欤瑫r(shí)相應(yīng)的檢測(cè)結(jié)果也更快速、靈敏。但其具有的變異系數(shù)較大，一般情況下需要一次性裝膜的柱子抗體，期間需要應(yīng)用酶標(biāo)半抗原較多，且1次只能檢測(cè)1個(gè)樣品。對(duì)于新型熒光光纖免疫磁珠流動(dòng)分析系統(tǒng)來(lái)講，根據(jù)普通熒光、力學(xué)熒光流動(dòng)的分析可以得到有效開(kāi)展，熒光光纖免疫流動(dòng)分析也可以有效開(kāi)展。相比于流動(dòng)注射免疫分析來(lái)講，其靈敏性更高，標(biāo)記物不易失活性，不會(huì)產(chǎn)生放射性污染。可以做到對(duì)附、富集、分離等功能的有機(jī)整合，通過(guò)有效應(yīng)用流動(dòng)分析停留技術(shù)、可控電磁場(chǎng)，能夠自動(dòng)在線分離抗體（抗原）結(jié)合態(tài)和游離態(tài)標(biāo)記物，這樣便不需要對(duì)一般流動(dòng)免疫分析中柱的再生和膜進(jìn)行更換[8]。

3） 酶聯(lián)免疫分析。該檢測(cè)法在具體應(yīng)用中，充分發(fā)揮抗原與抗體的特異性、可逆性，以此檢測(cè)果蔬中的農(nóng)藥殘留，具有靈敏度較高，實(shí)際操作便捷，效率較高等特點(diǎn)。在現(xiàn)場(chǎng)快速檢測(cè)大量樣品的工作中，應(yīng)用試劑盒的效果較為理想，定性、定量以及準(zhǔn)確性也會(huì)得到顯著增強(qiáng)。需要注意的是，在具體應(yīng)用中對(duì)試劑的選擇性較多，也難以做到對(duì)多種成分同時(shí)分離，在具體應(yīng)用中，若遇到結(jié)構(gòu)類(lèi)似的化合物會(huì)產(chǎn)生不同程度的交叉反應(yīng)。

4） 多組分分析物免疫分析。該檢測(cè)法在具體應(yīng)用中，可以在同一份樣品中，對(duì)兩種或是兩種以上的相關(guān)分析物進(jìn)行測(cè)定。其原理主要是在被測(cè)物的樣品中適當(dāng)加入不同標(biāo)記物標(biāo)記的抗原或者半抗原混合物，有效發(fā)揮競(jìng)爭(zhēng)作用合理測(cè)定各自抗原與抗體的含量。

5） 熒光免疫分析。在具體應(yīng)用中，主要是培育苯乙烯管中混合血清、待測(cè)農(nóng)藥、熒光標(biāo)記的待測(cè)農(nóng)藥，將卜球蛋白和分子量為6 000的聚乙二醇加入其中，讓與其結(jié)合的待測(cè)農(nóng)藥、熒光標(biāo)記的待測(cè)農(nóng)藥沉淀，將未被結(jié)合的熒光標(biāo)記的待測(cè)農(nóng)藥留在上清液中。對(duì)于一定量的抗血清、熒光標(biāo)記待測(cè)農(nóng)藥來(lái)講，試管中若含有的待測(cè)農(nóng)藥較多，抗體結(jié)合的熒光標(biāo)記待測(cè)農(nóng)藥較少，會(huì)有很多熒光標(biāo)記的待測(cè)農(nóng)藥游離在上清液中。對(duì)于快速的熒光偏振光免疫分析法來(lái)講，在具體應(yīng)用中，其主要是有效結(jié)合實(shí)現(xiàn)熒光標(biāo)記的半抗原、特異性抗體，以此顯著增強(qiáng)半抗原的熒光極性。在這一檢測(cè)技術(shù)下支持下，若發(fā)現(xiàn)樣品中含有未標(biāo)記的被測(cè)物，便會(huì)和抗原競(jìng)爭(zhēng)、和抗體結(jié)合，并降低極性信號(hào)，該檢測(cè)法在應(yīng)用中不需要沖洗、濃縮，可以直接分析[9]。

3.4 化學(xué)檢測(cè)技術(shù)

3.4.1 和色譜分析有關(guān)的檢測(cè)技術(shù)

1） 氣相色譜。作為一種比較經(jīng)典的分析方式，在揮發(fā)性農(nóng)藥殘留測(cè)定中應(yīng)用較為廣泛?；鹧婀舛葯z測(cè)器、園子發(fā)射檢測(cè)器等都是常用的檢測(cè)器。其中的原子發(fā)射檢測(cè)器在具體應(yīng)用中，既可以參考目標(biāo)化合物表中列出的農(nóng)藥輕松、高效地開(kāi)展各項(xiàng)檢測(cè)工作，還能準(zhǔn)確完成幾百種農(nóng)藥、代謝物的檢測(cè)。

2） 高效液相色譜。其作為流動(dòng)相的一種分析技術(shù)，一般都應(yīng)用在沸點(diǎn)較高，相對(duì)分子質(zhì)量較大且穩(wěn)定性較差的農(nóng)藥分離、分析中。

3） 色譜-質(zhì)譜聯(lián)用。在具體應(yīng)用中，只要可以應(yīng)用氣相色譜法完成各項(xiàng)檢測(cè)分析工作的樣品，都可以在該檢測(cè)法支持下，順利完成定性、定量測(cè)定工作。同時(shí)要對(duì)農(nóng)藥殘留限量提高要求，明確樣品基質(zhì)可能會(huì)受到哪些因素的影響，該檢測(cè)法也未得到廣泛應(yīng)用?，F(xiàn)階段應(yīng)用較多的有以下兩種，一是氣相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜儀聯(lián)用，二是液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用。氣相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜儀聯(lián)用主要是將離子阱視為質(zhì)量分析器的一種離子阱串聯(lián)質(zhì)譜儀，在具體應(yīng)用中有較高的靈敏度。需要注意的是，該檢測(cè)法只能檢測(cè)目標(biāo)分析物，無(wú)法做到一次進(jìn)樣分析大量化合物。液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用在分子量較大、易于揮發(fā)且無(wú)法以氣相色譜分析化合物檢測(cè)，應(yīng)用效果較為理想。不僅能夠展現(xiàn)出較高的靈敏度以及良好的選擇性，還可以同時(shí)進(jìn)行定性、定量，最終獲得的檢測(cè)結(jié)果更加可靠。該檢測(cè)法在具體應(yīng)用中，可以發(fā)揮出分析多殘留的能力，在確證初級(jí)監(jiān)測(cè)呈陽(yáng)性反應(yīng)的樣品中具有非常顯著的優(yōu)勢(shì)。

4） 薄層色譜法。在具體應(yīng)用中，主要是在發(fā)現(xiàn)被檢測(cè)物經(jīng)顯色后，將其和標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)進(jìn)行比較，以此完成定性。結(jié)合具體情況，以薄層掃描儀完成定量的一種測(cè)定方法。該檢測(cè)法不僅具有較多的顯色反應(yīng)類(lèi)型，顯色劑范圍比較廣泛，速度較快，不會(huì)受到物質(zhì)限定。所以，在揮發(fā)性較小以及溫度較高的情況下容易發(fā)生變化，應(yīng)用效果較為理想。

5） 超臨流體色譜法。在具體應(yīng)用中，主要是將超臨界流體視為流動(dòng)相的一種分析技術(shù)。該檢測(cè)法在實(shí)際應(yīng)用中，即使在低溫條件下，依然可以高效分析大分子量的化合物。另外，對(duì)于熱度不是特別穩(wěn)定的化合物或者極性較強(qiáng)的化合物，還能夠?qū)崿F(xiàn)與其他氣相、液相色譜檢測(cè)器的有效搭配，與紅外、質(zhì)譜也可以展現(xiàn)出理想的聯(lián)用效果，非常值得推廣。

3.4.2 毛細(xì)管電泳

該檢測(cè)法的應(yīng)用原理是指在高壓場(chǎng)作用下，運(yùn)用毛細(xì)管柱內(nèi)的不同帶電粒子，在背景緩沖液中以不同速度進(jìn)行定向遷移，以此達(dá)到分離的目的。該檢測(cè)法不僅具備較高的靈敏度，不需要耗費(fèi)大量資源、大量樣品，操作便捷，但也存在檢測(cè)光程較短以及進(jìn)樣量較少等問(wèn)題，需要在之后的應(yīng)用中不斷優(yōu)化。

3.4.3 直接光譜分析

表面增強(qiáng)拉曼光譜技術(shù)、近紅外衰減傘反射光譜技術(shù)的有效應(yīng)用，能夠大幅度提升光譜分析靈敏度。該技術(shù)在應(yīng)用中不需要應(yīng)用大量樣品，應(yīng)用潛力非常大。另外，相比于透射光譜技術(shù)來(lái)講，以衰減全反射-傅里葉變換紅外光譜聯(lián)用法對(duì)農(nóng)藥殘留進(jìn)行檢測(cè)，會(huì)展現(xiàn)出更好的靈敏度，檢樣量較少，不需要預(yù)處理，非常值得應(yīng)用推廣。

4 結(jié)束語(yǔ)

在社會(huì)經(jīng)濟(jì)科技快速發(fā)展帶動(dòng)下以及構(gòu)建與完善食品安全管理體系的情況下，為果蔬中農(nóng)藥殘留速測(cè)技術(shù)的應(yīng)用發(fā)展創(chuàng)造了有利條件，同時(shí)也涌現(xiàn)出了很多新技術(shù)、新設(shè)備。要想確保這些技術(shù)設(shè)備的優(yōu)勢(shì)特點(diǎn)在果蔬中農(nóng)藥殘留速測(cè)中得到充分發(fā)揮，就必須緊跟時(shí)代發(fā)展步伐，從不同層面加強(qiáng)創(chuàng)新研發(fā)，以此從整體上提升果蔬中農(nóng)藥殘留速測(cè)水平，為我國(guó)農(nóng)產(chǎn)品使用安全提供一定保障。

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