馬駿池，趙晉彤，高世勇，賈紹華，張秀娟

哈爾濱商業(yè)大學(xué) 藥學(xué)院，黑龍江 哈爾濱 150076

五味子Schisandra chinensis（Turcz.）Baill 是一種常用的收斂固澀藥，具有益氣生津、寧心安神的功效，屬藥食同源藥材?！侗静菥V目》曾記載，將五味子分為北五味子與南五味子兩類。五味子含有的活性化學(xué)成分主要有木脂素、多糖、揮發(fā)油等。北五味子揮發(fā)油成分、總木脂素的含量及多糖療效均大于南五味子[1]。其中，五味子乙素（schisandrin B，Sch B）是北五味子中含量最高的聯(lián)苯環(huán)辛烯類木脂素，化學(xué)式為C23H28O6，結(jié)構(gòu)見(jiàn)圖1，相對(duì)分子質(zhì)量為400.46[2]。由于Sch B 在臨床上具有抗炎、抗氧化等多種藥理作用，采用何種提取工藝實(shí)現(xiàn)原藥材最大限度的利用成為現(xiàn)在研究的熱點(diǎn)。本文綜述了近年來(lái)Sch B 的提取工藝與檢測(cè)方法的研究現(xiàn)狀，為更有效地提高Sch B 的生物活性提供更多有價(jià)值的參考。

圖1 五味子乙素的結(jié)構(gòu)

1 五味子乙素提取工藝

在傳統(tǒng)中藥的研究中，提取工藝是整個(gè)藥物研究中的重要環(huán)節(jié)，現(xiàn)代科學(xué)技術(shù)的不斷進(jìn)步推動(dòng)了Sch B提取工藝的發(fā)展進(jìn)程，為后續(xù)的分離純化、檢測(cè)及藥材的質(zhì)量評(píng)定提供條件，為相關(guān)新藥的開(kāi)發(fā)奠定了基礎(chǔ)。目前，Sch B的提取工藝主要有熱回流提取、超聲提取、微波提取、生物提取、超臨界流體提取等，各提取方法的原理及優(yōu)缺點(diǎn)見(jiàn)表1。

表1 五味子乙素提取工藝總結(jié)

1.1 熱回流提取

熱回流提取法是最為常見(jiàn)的Sch B 傳統(tǒng)提取法，Sch B是木脂素的一種，利用相似相溶原理，采用回流加熱的方法，保證了乙醇體積分?jǐn)?shù)不變，且同時(shí)具有設(shè)備簡(jiǎn)單、操作方便的優(yōu)點(diǎn)。李奉勤等[3]通過(guò)正交試驗(yàn)優(yōu)化出乙醇熱回流提取法的最佳提取條件為加5倍量的85%乙醇，調(diào)節(jié)pH為5.5，回流提取2 h。

1.2 超聲輔助提取

Zhang 等[4]利用部分析因設(shè)計(jì)（FFD）和響應(yīng)面法（RSM）優(yōu)化了超聲輔助提取法，結(jié)果表明，在60 ℃的條件下，95%乙醇，液固比為5 mL·g-1，功率600 W 超聲70 min，所得Sch B 最大質(zhì)量分?jǐn)?shù)為5.80 mg·g-1。超聲輔助提取法也是藥物成分提取的一種常見(jiàn)手段，通過(guò)超聲波的空化效應(yīng)和機(jī)械作用破碎藥材的細(xì)胞壁，使有效成分游離于溶劑，進(jìn)而增大提取效率。

1.3 微波輔助提取

微波提取是通過(guò)微波輻射對(duì)被提取物進(jìn)行適當(dāng)破碎，增大接觸面積而提高提取效率的現(xiàn)代科技手段。張立輝等[5]對(duì)復(fù)方五仁醇制劑中五味子乙素的提取工藝進(jìn)行比較，得出最佳條件為6 倍量85%乙醇，微波功率500 W，時(shí)間為8 min，所得Sch B 質(zhì)量分?jǐn)?shù)最高為0.355%。Cheng 等[6]通過(guò)使用超聲?微波輔助提取法（UMAE），RSM 優(yōu)化UMAE 參數(shù)，發(fā)現(xiàn)微波功率430 W，乙醇體積分?jǐn)?shù)84%，樣品粒度120目，溶媒?原料比15∶1，萃取時(shí)間2.1 min 時(shí)，可得到包括Sch B 等五味子中的5種木脂素的質(zhì)量分?jǐn)?shù)為（14.22±0.135）mg·g-1。

1.4 生物提取

陰冠秀等[7]研究結(jié)果表明，酶解溫度52.89 ℃，提取時(shí)間4.04 h，酶用量0.96%，酶解法輔助超聲得到Sch B 最優(yōu)產(chǎn)率為0.262%。生物提取具有較高專一性，提取較為充分。生物提取通?？膳c其他提取方法，如超聲提取法等聯(lián)用，是現(xiàn)代藥物提取技術(shù)中一類較有發(fā)展前景的方法。

1.5 超臨界流體提取

Dai等[8]建立了19.5 min內(nèi)提取定量五味子中4種木脂素的方法，設(shè)定最佳超臨界流體萃取條件為15 MPa，50 ℃反應(yīng)4 min，超臨界CO2加入1%甲醇提高流體的極性，洗脫體積為6 mL，流速設(shè)置為2 mL·min-1，確認(rèn)分流率為2.5%。

1.6 超高壓提取法（UHPE）

Liu 等[9]通過(guò)UHPE 提取五味子中的木脂素，得到其最佳提取條件為壓力400 MPa，90%乙醇，液固比90∶1，提取時(shí)間5 min。相較熱回流提取法和超聲輔助提取法，UHPE 的提取率最高，提取時(shí)間最短。此外，UHPE的提取物具有最高的抗氧化活性。

1.7 組織破碎提取技術(shù)（STE）

Cheng等[10]通過(guò)RSM 優(yōu)化了STE，以Sch B 等木脂素的提取率為指標(biāo)，與熱回流法、超聲輔助提取、微波輔助提取等方法進(jìn)行比較，獲得最佳提取條件為以75%乙醇為提取溶劑，提取電壓為180 V，提取時(shí)間為1 min，固液比為1∶19，樣品粒徑為120目。結(jié)果表明，STE 可以在最短的提取時(shí)間內(nèi)達(dá)到最大的提取效率。

1.8 加速溶劑提取法（ASE）

ASE 與相對(duì)成熟的公認(rèn)提取技術(shù)相比具有有機(jī)溶劑用量少、提取效率高、選擇性高、擁有高自動(dòng)化的提取技術(shù)等優(yōu)勢(shì)，現(xiàn)已在藥物、食品等領(lǐng)域得到廣泛應(yīng)用。Zhao 等[11]運(yùn)用三變量Box?Behnken 設(shè)計(jì)（BBD）的RSM 建模優(yōu)化了ASE，以提取五味子中的木脂素，得出最佳提取條件為提取溶劑為87%乙醇，溫度160 ℃，靜態(tài)提取時(shí)間10 min，萃取壓為1.034×109Pa，沖洗液量60%。

2 五味子乙素的分離純化工藝

在對(duì)中藥藥材進(jìn)行質(zhì)量評(píng)價(jià)及藥理活性的深入研究中，分離純化工藝起著至關(guān)重要的作用，Sch B分離純化工藝、原理、優(yōu)缺點(diǎn)見(jiàn)表2。

表2 五味子乙素分離純化工藝總結(jié)

2.1 硅膠柱層析法

硅膠柱層析法（正相色譜法）是通過(guò)化學(xué)成分極性大小所對(duì)應(yīng)硅膠吸附力的不同來(lái)達(dá)到物質(zhì)分離一種常見(jiàn)手段。Zhang 等[4]先采用超聲輔助提取，再通過(guò)硅膠柱層析以石油醚?丙酮（95∶5）為洗脫劑，結(jié)晶后從400 g藥材粉末中得到純度為99.4%，總回收率為57.1%的Sch B 1.46 g。

2.2 大孔樹(shù)脂吸附技術(shù)

Caichompoo 等[12]通過(guò)大孔樹(shù)脂吸附技術(shù)對(duì)五味子果實(shí)與種子的提取物進(jìn)行純化，將提取液溶解在30%乙醇中，吸附于AB?8 型大孔樹(shù)脂上，依次用30%乙醇和70%乙醇洗脫，70%乙醇洗脫后得到殘留木脂素65.2%。大孔樹(shù)脂吸附技術(shù)最早用于廢水處理、分析化學(xué)等領(lǐng)域中，通過(guò)大孔樹(shù)脂與吸附質(zhì)間產(chǎn)生的范德華力達(dá)到與其他物質(zhì)分離的目的。

2.3 高速逆流色譜法（HSCCC）

HSCCC作為一種新型的液?液色譜分離技術(shù)，根據(jù)色譜理論，可以通過(guò)合適的分配系數(shù)使樣品各組分。王磊[13]得到了對(duì)于五味子木脂素粗品最佳的HSCCC條件：正己烷?甲醇?水（7∶6∶1），上為固定相，下為流動(dòng)相，轉(zhuǎn)速為800 r·min-1，流速為2.0 mL·min-1，并首次經(jīng)HSCCC同時(shí)分離了4種活性木脂素成分。

2.4 膠束電動(dòng)毛細(xì)管電泳法（MEKC）

Ma等[14]對(duì)傳統(tǒng)的MEKC 進(jìn)行了優(yōu)化，建立了毛細(xì)管中2,2?疊氮比（3?乙基苯并噻唑啉?6?磺酸）?掃描膠束電動(dòng)色譜?二極管陣列檢測(cè)器方法，通過(guò)對(duì)掃描及分離參數(shù)的調(diào)整，將敏感性增強(qiáng)因子調(diào)至17～167，檢出限調(diào)至6 ng·mL-1，進(jìn)行天然產(chǎn)物中包括Sch B的微量抗氧化劑篩選和更為精準(zhǔn)的定量。

3 五味子乙素的檢測(cè)方法

3.1 紫外分光光度法（UV）

Sch B 含有共軛雙鍵且在570 nm 處有最大吸收。郝書(shū)文等[15]利用UV 在570 nm 處測(cè)定北五味子與北五味子果梗提取液的光密度，通過(guò)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線來(lái)定量Sch B 的含量。UV 雖然操作簡(jiǎn)單、耗時(shí)短，但在專屬性和準(zhǔn)確度方面較有局限性。

3.2 薄層色譜法（TLC）

曹濤等[16]通過(guò)TLC 與UV 聯(lián)用對(duì)自制Sch B 結(jié)晶母液進(jìn)行鑒定，石油醚?乙酸乙酯（20∶5）展開(kāi)，UV 254 nm 檢視，I2熏顯色，結(jié)果表明，硅膠G 薄層色譜板均見(jiàn)單一熒光斑點(diǎn)或棕色斑點(diǎn)，無(wú)雜質(zhì)。

3.3 高效液相色譜法（HPLC）

HPLC 即以液體為流動(dòng)相，將待測(cè)樣品經(jīng)高壓輸液系統(tǒng)泵入固定相色譜柱，經(jīng)分離后檢測(cè)。周艷等[17]通過(guò)HPLC 評(píng)估了炮制后的五味子各類木脂素的含量差別后發(fā)現(xiàn)，炮制品的Sch B 含量不穩(wěn)定，其余成分均有不同程度的提高。

超高液相色譜法（UPLC）即HPLC 技術(shù)上的改革與創(chuàng)新，運(yùn)用與HPLC 相同的原理，縮短了檢測(cè)時(shí)間并節(jié)省流動(dòng)相。王會(huì)品等[18]使用UPLC 同時(shí)對(duì)肝復(fù)康丸中Sch B 及其他9個(gè)成分進(jìn)行測(cè)定，經(jīng)精密度、穩(wěn)定性、重復(fù)性、加樣回收率等方法學(xué)驗(yàn)證準(zhǔn)確有效，為肝復(fù)康丸的質(zhì)量評(píng)定提供了方法學(xué)支持。

3.4 聯(lián)用法

3.4.1 超高速液相色譜?質(zhì)譜法（UFLC?MS/MS）Shi等[19]通過(guò)UFLC?MS/MS對(duì)口服加味開(kāi)心散浸膏的血管性癡呆大鼠模型血漿中的Sch B 等成分進(jìn)行定量測(cè)定，所建立的方法具有較高的精密度和準(zhǔn)確性，該藥物代謝動(dòng)力學(xué)研究對(duì)中藥方劑的作用機(jī)制探索和臨床應(yīng)用有一定的參考價(jià)值。

3.4.2 液相色譜?串聯(lián)質(zhì)譜法（LC?MS/MS）Li等[20]首次建立了一種靈敏、準(zhǔn)確的大鼠血漿中對(duì)映體定量的LC?MS/MS，分別提取北五味子和南五味子的Sch B 后，口服給藥大鼠，成功對(duì)其體內(nèi)立體選擇性藥物代謝動(dòng)力學(xué)進(jìn)行研究。

3.4.3 高效液相色譜聯(lián)合指紋圖譜檢測(cè)法 Wei等[21]基于高效液相色譜?二極管陣列檢測(cè)器法（HPLC?PAD），建立HPLC與指紋圖譜聯(lián)合的方式對(duì)五味子中Sch B 等8種活性成分進(jìn)行同時(shí)測(cè)定。結(jié)果表明，該方法具有良好的線性關(guān)系、精密度、重復(fù)性、穩(wěn)定性和回收率。該研究發(fā)現(xiàn)，HPLC 與指紋圖譜聯(lián)合對(duì)中藥成分的多組分分析具有很大的應(yīng)用前景，可用于中藥材的質(zhì)量鑒定。

3.4.4 高效液相色譜?二極管陣列檢測(cè)器?質(zhì)譜法（HPLC?PAD?MS）Liu 等[22]通過(guò)優(yōu)化HPLC 色譜條件和提取工藝，分別比較保留時(shí)間、UV 光譜和MS數(shù)據(jù)，確定樣品HPLC 圖譜中色譜峰的特征，建立了HPLC?PAD?MS，并成功進(jìn)行了對(duì)Sch B等12種木脂素樣品的定量分析和樣品來(lái)源的質(zhì)量評(píng)價(jià)。

3.4.5 閃蒸?氣相色譜?質(zhì)譜法（FE?GC?MS）黃翌磊等[23]利用FE?GC?MS 同時(shí)定量了中成藥四神丸中的Sch B 等8種有效成分，對(duì)各企業(yè)生產(chǎn)的藥物進(jìn)行質(zhì)量評(píng)定，優(yōu)化后的檢測(cè)條件：閃蒸溫度為300 ℃，色譜柱為UA?5（30 m×0.25 mm，0.25 μm），程序升溫條件為初始溫度50 ℃，10 ℃·min-1升到200 ℃，再以5 ℃·min-1升到300 ℃，分析時(shí)間10 min。

4 五味子乙素的藥理作用

隨著現(xiàn)代科學(xué)技術(shù)手段的不斷進(jìn)步，研究者對(duì)Sch B的藥理作用不斷產(chǎn)生新的認(rèn)知。現(xiàn)將國(guó)內(nèi)外近年來(lái)Sch B 藥理作用研究進(jìn)展進(jìn)行匯總，為其深入研究提供參考。

4.1 抗炎

Lin 等[24]通過(guò)高糖誘導(dǎo)人微血管內(nèi)皮細(xì)胞HMEC?1、人腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞HBMEC和人臍靜脈血管內(nèi)皮細(xì)胞HUVEC?12 損傷，采用蛋白質(zhì)印跡法和酶聯(lián)免疫吸附劑測(cè)定來(lái)定量Sch B 作用下熱休克蛋白（Hsp27）、凋亡相關(guān)蛋白（Noxa）、Toll 受體（TLR5）、磷酸化核轉(zhuǎn)錄因子?κB（NF?κB）抑制蛋白（p?IκBα）、磷酸化?p65（p?p65）蛋白和腫瘤壞死因子?α（TNF?α）、白細(xì)胞介素?6（IL?6）、單核細(xì)胞趨化蛋白（MCP?1）、IL?1β的表達(dá)。結(jié)果顯示，Sch B可以抑制Hsp27 的過(guò)表達(dá)，下調(diào)炎癥細(xì)胞因子，進(jìn)而抑制p65 轉(zhuǎn)運(yùn)至細(xì)胞核所引起的炎癥級(jí)聯(lián)反應(yīng)的發(fā)生。Li 等[25]通過(guò)葡聚糖硫酸鈉自由飲用建立小鼠潰瘍性結(jié)腸炎模型，探究Sch B 對(duì)潰瘍性結(jié)腸炎（UC）的影響。研究表明，Sch B 可以促進(jìn)激活黏附斑激酶來(lái)保護(hù)腸黏膜屏障并有效預(yù)防炎癥反應(yīng)的發(fā)生。Ran 等[26]研究發(fā)現(xiàn)，Sch B 可以通過(guò)細(xì)胞NF?κB和絲裂原活化蛋白激酶（MAPK）信號(hào)通路2 種途徑來(lái)改善骨關(guān)節(jié)炎。Jia 等[27]通過(guò)將小鼠暴露于香煙煙霧下建立小鼠肺部炎癥模型，并在給藥Sch B 后定量測(cè)定支氣管肺泡灌洗液中炎性介質(zhì)TNF?α、IL?1β和IL?6 的水平并同時(shí)監(jiān)測(cè)了超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽（GSH）、髓過(guò)氧化物酶（MPO）的含量與NF?E2相關(guān)因子2（Nrf2）和NF?κB 的表達(dá)。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，Sch B通過(guò)抑制支氣管肺泡灌洗液中炎癥介質(zhì)TNF?α、IL?1β和IL?6 的水平，降低了MPO 活性和丙二醛（MDA）含量，同時(shí)上調(diào)了SOD和GSH的指標(biāo)，抑制NF?κB活化并上調(diào)Nrf2和血紅素氧合酶?1（HO?1）的表達(dá)來(lái)發(fā)揮對(duì)小鼠肺部炎癥的抗炎作用。胡素珍等[28]通過(guò)香煙煙霧提取物聯(lián)合脂多糖（LPS）作用于肺上皮細(xì)胞A549，建立慢性阻塞性肺疾病（COPD）急性加重期體外模型后發(fā)現(xiàn)，Sch B 可以顯著改善香煙煙霧提取物聯(lián)合LPS 引起的肺上皮細(xì)胞炎癥。Lin 等[29]研究了Sch B在LPS 刺激的HUVEC 中的抗炎作用，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，Sch B 可通過(guò)激活Nrf2 信號(hào)傳導(dǎo)途徑來(lái)抑制HUVEC中LPS 誘導(dǎo)的炎癥。Xin 等[30]研究發(fā)現(xiàn)，Sch B 通過(guò)p53 信號(hào)通路以減輕成年大鼠創(chuàng)傷性脊髓損傷誘導(dǎo)的炎癥反應(yīng)、氧化應(yīng)激和細(xì)胞凋亡。

Sch B 也可以通過(guò)其抗炎活性達(dá)到抑菌的作用。Guo 等[31]發(fā)現(xiàn)，Sch B 可以抑制痤瘡丙酸桿菌感染的人髓系白血病單核細(xì)胞THP?1 中炎性小體NLRP3 的激活，繼而有效抑制IL?1β分泌和細(xì)胞凋亡，達(dá)到抑菌作用。其中，炎性小體3（NLRP3）在痤瘡丙酸桿菌介導(dǎo)的炎癥和細(xì)胞凋亡中起重要作用。

4.2 抗氧化

Ding等[32]發(fā)現(xiàn)，Sch B可以顯著改善叔丁基過(guò)氧化氫誘導(dǎo)人永生化表皮角質(zhì)細(xì)胞HaCaT 氧化損傷，引起的細(xì)胞死亡，增強(qiáng)抗氧化酶的表達(dá)，并通過(guò)調(diào)節(jié)其磷酸化途徑進(jìn)一步參與Nrf2 信號(hào)通路。研究表明，Sch B 可以通過(guò)增強(qiáng)內(nèi)源性抗氧化劑防御系統(tǒng)，進(jìn)而發(fā)揮一定程度的抗氧化作用。Zhu等[33]建立大鼠后肢缺血/再灌注（I/R）損傷模型前給藥Sch B 發(fā)現(xiàn)，其可以有效減少I(mǎi)/R 所引起的組織學(xué)改變和水腫。研究證實(shí)，Sch B通過(guò)減輕氧化應(yīng)激和炎癥來(lái)預(yù)防大鼠后肢I(xiàn)/R 骨骼肌損傷。吳靖等[34]研究發(fā)現(xiàn)，Sch B 可以顯著降低小膠質(zhì)細(xì)胞BV?2 的氧化應(yīng)激損傷。

Sch B通過(guò)其抗氧化作用也可以產(chǎn)生顯著的保肝作用。Feng 等[35]研究證明，Sch B 可被細(xì)胞色素P450（CYP450s）酶所代謝，生成在人和鼠肝微粒體中有修飾肽能力的碳烯活性代謝物，其可與Keap1結(jié)合激活Nrf2途徑從而減少肝的損傷。Cheng等[36]發(fā)現(xiàn)，Sch B 通過(guò)抑制內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激來(lái)抑制利福平誘導(dǎo)的肝細(xì)胞損傷。Chen等[37]建立四氯化碳（CCl4）誘導(dǎo)的大鼠肝纖維化模型，并在體外使用大鼠肝星狀細(xì)胞HSC?T6評(píng)價(jià)Sch B對(duì)HSC活化的影響。結(jié)果表明，Sch B 通過(guò)激活Nrf2 介導(dǎo)的抗氧化信號(hào)通路和抑制轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子?β（TGF?β）/Smad，抑制HSC的激活而減輕氧化應(yīng)激，從而發(fā)揮保肝作用。氯氮平（CLZ）在臨床上多用于治療精神分裂癥，但其在發(fā)揮治療作用的同時(shí)會(huì)導(dǎo)致一定程度的肝損傷。白慧媛等[38]通過(guò)建立CLZ 誘導(dǎo)的小鼠慢性肝損傷模型來(lái)評(píng)估Sch B 的保肝作用，結(jié)果表示，Sch B 可以通過(guò)劑量依賴性方式激活Nrf2/抗氧化反應(yīng)元件信號(hào)通路來(lái)預(yù)防CLZ誘導(dǎo)的肝損傷。

同時(shí)，Sch B也在抗衰老方面表現(xiàn)了強(qiáng)大的藥理活性。仲維莉等[39]為了探討Sch B 對(duì)高糖誘導(dǎo)HUVEC的抗衰老作用，采用β?半乳糖苷酶染色法測(cè)定其抗衰老功能，流式細(xì)胞儀測(cè)定細(xì)胞周期，并檢測(cè)HUVEC 中活性氧、一氧化氮含量。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，Sch B 可延緩高糖誘導(dǎo)的HUVEC 衰老進(jìn)程，且作用呈劑量依賴性。劉聰?shù)萚40]也發(fā)現(xiàn)，Sch B 能夠顯著延緩D?半乳糖誘導(dǎo)的小鼠腦衰老。

4.3 抗腫瘤

Nasser 等[41]采用流式細(xì)胞儀和蛋白質(zhì)印跡法檢測(cè)后發(fā)現(xiàn)，Sch B可以顯著抑制前列腺癌細(xì)胞的增殖并促進(jìn)DU145 和LNCaP 細(xì)胞凋亡及S 期細(xì)胞的停滯。其數(shù)據(jù)證明了Sch B 作為前列腺癌的有效藥物的抗腫瘤作用。Dai等[42]為了探究Sch B對(duì)三陰性乳腺癌的影響，采用了MDA?MB?231、BT?549、MDA?MB?468TNBC細(xì)胞和免疫缺陷小鼠，結(jié)果表明，Sch B通過(guò)誘導(dǎo)細(xì)胞周期停滯和觸發(fā)凋亡性死亡來(lái)抑制三陰性乳腺癌的發(fā)展。Wang 等[43]研究發(fā)現(xiàn)，Sch B 可以通過(guò)干預(yù)患者的2 種耐藥性機(jī)制進(jìn)而實(shí)現(xiàn)抗腫瘤作用，即影響藥物外排和抗凋亡作用。Sch B可以顯著提高耐阿霉素（DOX）的乳腺癌和卵巢癌細(xì)胞對(duì)DOX的敏感性，通過(guò)抑制P 糖蛋白的表達(dá)和活性來(lái)增加DOX 的胞內(nèi)積累，也可以明顯下調(diào)抗凋亡蛋白survivin的表達(dá)。彭朝陽(yáng)等[44]研究表明，Sch B可誘導(dǎo)肝癌細(xì)胞HCCLM3 凋亡，降低細(xì)胞侵襲及血管新生。李月靈等[45]提出，Sch B 可以抑制胃癌細(xì)胞SNU?1 細(xì)胞增殖和轉(zhuǎn)移。戴國(guó)梁等[46]發(fā)現(xiàn)，Sch B 可以通過(guò)影響結(jié)腸癌患者血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子（VEGF）信號(hào)通路來(lái)抑制細(xì)胞SW620 的活性和遷移。喬利峰等[47]認(rèn)為，Sch B 可減弱視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤移植癌裸鼠腫瘤生長(zhǎng)，提高存活率，降低VEGF的表達(dá)。

4.4 改善腎功能

Qin 等[48]為了探討Sch B 在膜增生性腎?。↖gA）大鼠模型中的作用，通過(guò)尿中的紅細(xì)胞、尿蛋白、血尿素氮和肌酐的水平來(lái)評(píng)估腎功能，結(jié)果發(fā)現(xiàn)Sch B可以降低尿中的紅細(xì)胞、尿蛋白、血尿素氮和肌酐的水平，顯著改善IgA 腎病大鼠的腎功能。Mou等[49]發(fā)現(xiàn)，口服Sch B可以顯著減輕糖尿病小鼠高血糖引起的腎損傷，維持尿肌酐和白蛋白水平，表明Sch B 可能是糖尿病腎病的潛在治療劑。Cao等[50]研究證實(shí)Sch B也可以潛在地用于腎小管間質(zhì)纖維化的治療。順鉑（DDP）的腎毒性限制了其臨床應(yīng)用。田妮等[51]研究發(fā)現(xiàn)，Sch B 對(duì)DDP 引起的人類近端腎小管上皮細(xì)胞HK?2 損傷具有保護(hù)作用。Liu 等[52]研究表明，Sch B 通過(guò)激活細(xì)胞外信號(hào)調(diào)節(jié)激酶和NF?κB信號(hào)傳導(dǎo)以誘導(dǎo)抗凋亡蛋白survivin表達(dá)，改善DDP引起的腎功能損傷，從而擴(kuò)大DDP的臨床應(yīng)用價(jià)值。Lai 等[53]研究證實(shí)，Sch B 可以通過(guò)抑制氧化應(yīng)激、細(xì)胞凋亡和自噬，防止活性氧（ROS）積累，減輕免疫抑制劑環(huán)孢霉素A 的腎毒性?？诅鞯萚54]提出，Sch B 對(duì)腎缺血再灌注所致急性腎損傷小鼠的腎功能、病理?yè)p傷及細(xì)胞凋亡情況有一定程度的改善作用。

4.5 中樞神經(jīng)系統(tǒng)

4.5.1 抗阿爾茨海默病 Zhang等[55]發(fā)現(xiàn)，Sch B可以通過(guò)抑制β淀粉樣蛋白誘導(dǎo)所引起的SH?SY5Y 神經(jīng)細(xì)胞系損傷，且此過(guò)程可能與DNA 甲基化有關(guān)。該研究也為Sch B 在阿爾茨海默病潛在治療中的應(yīng)用提供了數(shù)據(jù)支持。楊擎等[56]經(jīng)實(shí)驗(yàn)研究后發(fā)現(xiàn)，Sch B可以靶向β蛋白樣蛋白（Aβ）配體并有效促進(jìn)Aβ寡聚體解聚，抑制神經(jīng)元的凋亡。Wu 等[57]研究證實(shí)，Sch B 可能是潛在的抗氧化應(yīng)激相關(guān)治療劑，可能的機(jī)制是通過(guò)增強(qiáng)抗氧化劑活性進(jìn)行神經(jīng)保護(hù)。

4.5.2 鎮(zhèn)靜催眠 Sch B 對(duì)中樞神經(jīng)系統(tǒng)還存在一定程度的鎮(zhèn)靜催眠作用。Li等[58]觀察了Sch B對(duì)小鼠鎮(zhèn)靜和催眠作用并探究其機(jī)制，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，Sch B可以上調(diào)小鼠大腦皮質(zhì)，海馬和下丘腦中GABAARα1和GABAARγ2基因的表達(dá)，并顯著提高小鼠外周血及大鼠大腦皮質(zhì)、海馬、下丘腦中γ?氨基丁酸（GABA）的水平，降低谷氨酸（Glu）的水平，從而導(dǎo)致GABA/Glu比例增加。

4.6 I/R損傷

Zhao 等[59]采用冠狀動(dòng)脈左前降支結(jié)扎術(shù)建立大鼠I/R損傷模型，測(cè)定心肌梗死面積、心肌梗死血清標(biāo)志物、心肌細(xì)胞凋亡指數(shù)和絲氨酸/蘇氨酸激酶（Akt）表達(dá)，發(fā)現(xiàn)Sch B 可以通過(guò)磷酸肌醇3 激酶（PI3K）/Akt 信號(hào)通路保護(hù)大鼠心肌組織免受I/R 損傷。Zhang 等[60]建立大鼠I/R 損傷模型，測(cè)試了肌酸激酶、乳酸脫氫酶、MDA 和總SOD 的水平，并采用蛋白印跡法測(cè)定了內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激相關(guān)蛋白的表達(dá)，發(fā)現(xiàn)Sch B 可通過(guò)減少氧化反應(yīng)并減弱內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激誘導(dǎo)的細(xì)胞凋亡，從而對(duì)心肌細(xì)胞起到保護(hù)作用。

4.7 其他作用

經(jīng)研究發(fā)現(xiàn)，Sch B有良好的調(diào)節(jié)脂質(zhì)代謝的作用。Kwan 等[61]研究發(fā)現(xiàn)，Sch B 可以顯著降低飲食誘導(dǎo)肥胖（DIO）小鼠脂肪細(xì)胞3T3?L1 和皮下脂肪細(xì)胞甘油酯的含量，激活激素敏感性脂肪酶（HSL）發(fā)揮脂解作用，同時(shí)促進(jìn)脂肪酸氧化基因的表達(dá)，表明Sch B可能對(duì)于肥胖癥具有潛在的治療價(jià)值。

Sch B 同時(shí)也有改善性功能的藥理作用。Liu等[62]通過(guò)雙側(cè)海綿體壓迫神經(jīng)損傷建立勃起功能障礙大鼠模型，給藥后對(duì)陰莖海綿體內(nèi)壓（ICP）、環(huán)磷酸腺苷（cAMP）、環(huán)磷酸鳥(niǎo)苷（cGMP）、內(nèi)皮型一氧化氮合酶（eNOS）和神經(jīng)元NOS（nNOS）定量測(cè)定發(fā)現(xiàn)，ICP 研究中，Sch B 以劑量依賴的方式改善勃起功能障礙（ED）。中高質(zhì)量濃度Sch B治療組中eNOS 和nNOS 的表達(dá)相對(duì)較高，除此之外，Sch B 也可以顯著提高cAMP 和cGMP 的表達(dá)水平。結(jié)果表明Sch B 能夠通過(guò)NO?cGMP 和cAMP?蛋白激酶A（PKA）途徑改善大鼠ED。

最新研究發(fā)現(xiàn)，Sch B對(duì)糖尿病視網(wǎng)膜病變有很大的治療潛力。劉青[63]提出，Sch B 可以通過(guò)Cdc42/p38 通路改善鏈脲佐菌素誘導(dǎo)的糖尿病視網(wǎng)膜病變（DR）。此外，F(xiàn)an 等[64]采用大鼠大腦中動(dòng)脈閉塞再灌注模型，證實(shí)了Sch B 對(duì)大鼠腦缺血再灌注損傷的治療作用。

5 總結(jié)與展望

隨著祖國(guó)傳統(tǒng)醫(yī)學(xué)的發(fā)展，中藥開(kāi)始逐步走上了世界的舞臺(tái)，越來(lái)越多的學(xué)者開(kāi)始關(guān)注其更為深入的藥用價(jià)值和潛在作用機(jī)制，但由于中藥種類的多樣性和成分的復(fù)雜性，對(duì)中藥的研究也不僅局限于復(fù)方配伍應(yīng)用，中藥單體也日漸成為新型藥物研發(fā)的熱點(diǎn)。Sch B作為五味子常見(jiàn)木脂素類成分，具有抗炎、抗氧化、改善腎功能、抗腫瘤、作用于中樞神經(jīng)系統(tǒng)和心血管系統(tǒng)等藥理活性，目前已被廣泛應(yīng)用于臨床，活躍于醫(yī)療保健市場(chǎng)。隨著現(xiàn)代科技手段的不斷發(fā)展，近年來(lái)研究熱點(diǎn)不僅局限于抗炎、抗氧化、抗腫瘤等常見(jiàn)藥理活性，其在調(diào)節(jié)脂質(zhì)代謝、改善性功能及治療糖尿病視網(wǎng)膜病變等方面的研究也值得深入挖掘。

目前，現(xiàn)代提取工藝已經(jīng)極大改善了傳統(tǒng)提取方法能耗大、提取率低等缺陷，但仍存在局限性，如何開(kāi)發(fā)更為高效、穩(wěn)定、便捷、環(huán)保、經(jīng)濟(jì)的新興提取工藝和檢測(cè)手段就顯得尤為重要。本文對(duì)現(xiàn)階段Sch B 的提取工藝、檢測(cè)方法和藥理作用的研究進(jìn)展進(jìn)行總結(jié)，為Sch B 未來(lái)創(chuàng)新型藥物的研發(fā)及中藥材質(zhì)量的評(píng)定提供參考。