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銀白魚人工繁殖受精卵附著介質(zhì)篩選

2022-03-22 09:50:44范姝云肖勇田敏曲品楊劍虹安莉
水產(chǎn)科技情報(bào) 2022年2期
關(guān)鍵詞:銀白紗窗受精率

范姝云 肖勇 田敏 曲品 楊劍虹 安莉

(昆明市水產(chǎn)科學(xué)研究所,云南昆明 650021)

銀白魚(Anabariliusalburnops)隸屬于鯉科、鲌亞科、白魚屬,是白魚屬中個(gè)體較大的種類,其營養(yǎng)豐富、肉質(zhì)鮮嫩肥美,是滇池特有的土著魚種,一直以來深受廣大昆明市民的青睞,二十世紀(jì)七十年代以前是滇池主要的經(jīng)濟(jì)魚類[1]。后隨著昆明城市化、工業(yè)化的發(fā)展以及大規(guī)模圍湖造田,破壞了水生生物繁殖棲息場所,加之外來物種侵入、酷漁濫捕等因素,導(dǎo)致滇池水生態(tài)環(huán)境遭到破壞,水質(zhì)逐漸惡化至Ⅳ類[2-3],銀白魚在滇池中的生存空間遭到擠占,產(chǎn)卵場面積縮小,種群幾近消失,現(xiàn)已被《中國瀕危動(dòng)物紅皮書——魚類》《中國紅色名錄》《IUCN紅色名錄》列為瀕危種類,同時(shí)也被列入云南省特有珍稀保護(hù)動(dòng)物名錄[3]。

銀白魚體長而側(cè)扁,頭后背部隆起,背包平直,腹緣呈弧形,體高略小于頭長。吻端尖,吻長大于眼徑而微微小于眼間距,口端位或次上位,下頜略突出,其前端的小突起嵌入上頜的凹陷處,口裂斜向上,后端伸達(dá)鼻孔前緣的正下方,無須。腹棱自腹鰭基后延伸至肛門。銀白魚生活于水體的中上層,常在水草叢中覓食。該魚食性雜,在不同生長階段所攝取的食物組成不同:體長110~170 mm時(shí),以枝角類為主,其次是絲狀藻、小魚和蝦等;體長171~335 mm時(shí),以小魚和蝦為主[1-2]。銀白魚為小型魚類,生長較慢,1冬齡魚可達(dá)到性成熟,產(chǎn)卵盛期為2月至3月中旬,卵為黏性。據(jù)觀察,銀白魚多選擇滇池邊礫石較多的湖灣產(chǎn)卵。

開展銀白魚人工繁殖及孵化研究是銀白魚種群恢復(fù)的關(guān)鍵技術(shù)手段。目前,對銀白魚人工繁殖及孵化的研究極少,幾乎沒有可供查證的學(xué)術(shù)資料,故亟須系統(tǒng)地開展人工繁殖和孵化各基本參數(shù)的研究。本試驗(yàn)為銀白魚人工繁殖探索性試驗(yàn),旨在篩選出最利于受精卵孵化的附著介質(zhì),提高孵化效率,保障孵化質(zhì)量,為今后開展銀白魚人工增養(yǎng)殖提供基礎(chǔ)數(shù)據(jù)。

1 材料和方法

1.1 試驗(yàn)場地

試驗(yàn)在昆明市尋甸縣境內(nèi)水產(chǎn)科學(xué)研究所土著魚繁育實(shí)驗(yàn)室的鋼架大棚內(nèi)進(jìn)行,大棚面積為667 m2,水源采用地下井水,棚內(nèi)設(shè)有工廠化循環(huán)水養(yǎng)殖設(shè)施1套,包含生物凈化、紫外線殺菌、增氧等設(shè)施設(shè)備。另準(zhǔn)備足量的授精攪拌器皿、注射器、塑料方形箱、塑料漏水方框、充氧泵、10 mL量杯、鐵絲、白瓷盤等。

1.2 親魚來源

親魚是由2017—2019年在滇池收集到的銀白魚馴化后人工繁殖得到的子一代養(yǎng)成而來。

1.3 試驗(yàn)方法

試驗(yàn)選用4種受精卵附著介質(zhì),分別為尼龍紗窗網(wǎng)、棕片、礫石(工業(yè)用)、瓦片。尼龍紗窗網(wǎng)和棕片為魚類人工繁殖中常用的介質(zhì)。采用礫石和板瓦是為了模擬銀白魚自然產(chǎn)卵場的沙礫和岸邊巖石環(huán)境。礫石平均粒徑約2 cm,均勻置于底面積為20 cm×30 cm的矩形塑料漏水筐中。瓦片大小為16 cm×16 cm,鉆孔,以方便用鐵絲固定。紗窗網(wǎng)的網(wǎng)目大小為1 mm×1 mm,剪裁為50 cm×50 cm的網(wǎng)片。棕片除去硬質(zhì)部分,用手撕拉至松軟。另外單獨(dú)準(zhǔn)備1塊30 cm×30 cm的紗窗網(wǎng)片,用于計(jì)算受精率。

使用前,所有介質(zhì)經(jīng)高錳酸鉀溶液浸泡消毒。使用時(shí),將介質(zhì)分別置于80 cm×60 cm×50 cm(長×寬×高)的長方形塑料箱中。對銀白魚人工授精完成后,用量筒分別裝10 mL受精卵布設(shè)到面積基本相同的4種介質(zhì)上,靜置20 min,待受精卵產(chǎn)生黏性附著牢固后,再將箱中的介質(zhì)取出分別移入4口培育缸中,使其處于培育缸的中上部以方便觀察。

1.3.1 人工授精及受精率計(jì)算

銀白魚授精采用干法授精。授精前用干毛巾擦拭親魚泄殖孔周圍,確保精液與卵子在獲取過程中不沾水。人工授精的雌雄比為1∶2,精子與卵子接觸后,加入適量0.85%的生理鹽水,用羽毛充分?jǐn)嚢?~3 min。隨后用少量水沖洗多次,均勻攪拌,直至受精卵開始出現(xiàn)輕微的黏附現(xiàn)象時(shí),用量杯分別取10 mL受精卵布設(shè)在放有不同介質(zhì)的長方形箱中。

與此同時(shí),另取2個(gè)10 mL量筒(分別編號為1號、2號)。1號量筒取2 mL受精卵,倒入白瓷盤中統(tǒng)計(jì)受精卵的數(shù)量,以便計(jì)算各介質(zhì)附著魚卵的平均數(shù)。2號量筒取5 mL受精卵均勻布在30 cm×30 cm的紗窗網(wǎng)上,用作統(tǒng)計(jì)受精率,并觀察受精卵的孵化和發(fā)育情況。在不同發(fā)育時(shí)段,隨機(jī)取出一定量受精卵置于顯微鏡下觀察,當(dāng)觀察到發(fā)育至原腸期的卵子后,取50粒受精卵進(jìn)行鏡檢,當(dāng)超過60%的受精卵發(fā)育到原腸期后,開始計(jì)算受精率(%)。

受精率=原腸期卵數(shù)/總卵數(shù)×100

(1)

1.3.2 銀白魚魚卵孵化管理

試驗(yàn)前對提水、增氧、紫外線殺菌、凈水等設(shè)施設(shè)備進(jìn)行檢查調(diào)試,保證試驗(yàn)期間設(shè)備運(yùn)行正常。試驗(yàn)期間水溫保持在11~16 ℃,每天定時(shí)觀察受精卵的孵化情況,及時(shí)將發(fā)白、發(fā)霉的魚卵取出并記錄數(shù)量,記錄銀白魚受精卵的孵化時(shí)間,計(jì)算其孵化率(%)。

孵化率=出膜仔魚數(shù)/受精卵數(shù)×100

(2)

2 試驗(yàn)結(jié)果

2.1 人工繁殖受精率

統(tǒng)計(jì)1號量筒中的受精卵數(shù)量可知,2 mL約有1 000粒受精卵,平均為500粒/mL。通過分時(shí)段觀測30 cm×30 cm紗窗網(wǎng)上布設(shè)的5 mL受精卵,達(dá)到原腸期的受精卵約有2 270粒。經(jīng)計(jì)算,本次試驗(yàn)的受精率約為90%。鏡檢觀察,受精卵卵徑為1 973.67~2 787.15 μm,卵黃直徑為1 218.93~1 843.89 μm。

2.2 不同介質(zhì)受精卵的孵化情況

定期觀測各培育缸中受精卵的孵化情況,直到全部孵化,統(tǒng)計(jì)出膜仔魚數(shù)量,記錄出膜時(shí)間,計(jì)算孵化率和孵化時(shí)長(見表1)。結(jié)果表明,4種介質(zhì)試驗(yàn)組的孵化率由高到低依次為:棕片組、紗窗網(wǎng)組、礫石組、瓦片組。棕片組孵化率最高,為80%,比紗窗網(wǎng)組高10%左右,比最低的瓦片組高了50%以上,且孵化時(shí)長也相較其他介質(zhì)要短。

表1 不同受精卵附著介質(zhì)孵化情況

3 討論

3.1 銀白魚受精卵的孵化時(shí)長

與同屬的其他種類相比,銀白魚孵化過程較長[4-6],在水溫11~16 ℃條件下,仔魚出膜時(shí)長為282~300 h。究其原因,一方面可能是受到銀白魚產(chǎn)卵季節(jié)氣候條件的限制,此時(shí)水溫較低;另一方面可能是由銀白魚自身的生物特性決定的。此外,采用不同附著介質(zhì)受精卵的孵化時(shí)間也有差異。試驗(yàn)顯示,棕片組和紗窗網(wǎng)組仔魚的出膜時(shí)長相對于礫石組和瓦片組要短。結(jié)合銀白魚自然產(chǎn)卵場的產(chǎn)卵環(huán)境及條件分析,可能是棕片和紗窗網(wǎng)材質(zhì)柔韌度較高,在培育缸中可隨著水流擺動(dòng),對受精卵產(chǎn)生較強(qiáng)的流水刺激,從而能加快受精卵的發(fā)育。此外,有研究發(fā)現(xiàn),魚卵孵化所需的氧氣主要是通過擴(kuò)散得到的[7],礫石和瓦片上的受精卵受流水?dāng)_動(dòng)較弱,溶解氧擴(kuò)散不充分,因而會導(dǎo)致發(fā)育較慢。

3.2 不同產(chǎn)卵介質(zhì)條件下的孵化率比較分析

本試驗(yàn)結(jié)果顯示,銀白魚卵在4種介質(zhì)上均能很好地附著,但其孵化率有較大差異。孵化率由高到低的順序?yàn)樽仄?、紗窗網(wǎng)、礫石、瓦片,這很可能是由于介質(zhì)材質(zhì)不同造成的。棕片經(jīng)過撕拉后,具有張力強(qiáng)、立體性好、摩擦力大的特點(diǎn),使得受精卵黏附程度高,在水下具有良好的透水性,能使受精卵在流水中擺動(dòng),接觸更多的清潔水,溶解氧更充足。此外,柔韌的棕絲及其松散的結(jié)構(gòu)使人工剔除病變受精卵更加方便,有效地避免了交叉感染水霉的危險(xiǎn),故孵化率較其他3種介質(zhì)高。紗窗網(wǎng)具有均勻統(tǒng)一的網(wǎng)狀結(jié)構(gòu),材質(zhì)細(xì)軟,但容易受水的張力和流水沖擊的影響,且網(wǎng)片容易粘在一起導(dǎo)致通透性變差。此外,如果受精卵感染水霉后較難將之從網(wǎng)片上剔除,因此孵化率低于棕片。與瓦片相比,礫石表面更為粗糙,且紋理不規(guī)則,能提供比瓦片更多的水體接觸面積,但因二者與受精卵表面接觸面積過大,受精卵布設(shè)在礫石及瓦片上時(shí)分布都不均勻,容易附著成團(tuán),透水、透氣性很低。礫石、瓦片的物理輪廓還會影響水流方向,產(chǎn)生水流沖擊死角,水體溶解氧分布不均勻,導(dǎo)致受精卵水霉病發(fā)生的概率增加,從而降低孵化率。綜合分析比較,棕片透水、透氣性好,具有立體結(jié)構(gòu),采購成本低,便于運(yùn)輸及操作,適用于銀白魚規(guī)模化人工繁殖。

3.3 人工繁殖的必要性

經(jīng)過多年的實(shí)地調(diào)查,銀白魚產(chǎn)卵場受滇池湖岸環(huán)境變化影響較大,目前僅分布于滇池西部一小塊狹長的區(qū)域。雖然目前偶爾還可在滇池中捕獲銀白魚個(gè)體,但是數(shù)量極其有限。由于在自然界中銀白魚產(chǎn)卵季節(jié)水溫偏低,受精卵孵化時(shí)間較長,以及滇池水質(zhì)污染、外來魚類擠占其生存空間等因素,導(dǎo)致銀白魚在自然環(huán)境條件下繁殖越來越困難,成功孵化并成活的數(shù)量非常少,很難通過自然繁殖來擴(kuò)大種群數(shù)量。采用人工繁殖技術(shù)可以調(diào)控繁育環(huán)境條件,快速擴(kuò)大銀白魚的種群數(shù)量,為增殖放流恢復(fù)銀白魚種群數(shù)量提供基礎(chǔ),是促進(jìn)滇池魚類生物多樣性及水生態(tài)系統(tǒng)穩(wěn)定的有效途徑。

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