■陳秀梅 高東旭 李祖洋 劉俊含 隋坤岳 張 月 鄭孝偉 王桂芹*

(1.吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物科學(xué)技術(shù)學(xué)院，吉林 長(zhǎng)春 130118；2.吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物生產(chǎn)及產(chǎn)品質(zhì)量安全教育部重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，吉林長(zhǎng)春 130118；3.吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)吉林省動(dòng)物營(yíng)養(yǎng)與飼料科學(xué)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，吉林 長(zhǎng)春 130118）

黃顙魚（Pelteobagrus fulvidraco）肉質(zhì)細(xì)嫩，味道鮮美，無肌間刺，營(yíng)養(yǎng)價(jià)值高，深受消費(fèi)者青睞，是我國(guó)“十三五”特色淡水養(yǎng)殖品種。在池塘集約化養(yǎng)殖模式下，由于養(yǎng)殖密度過大，當(dāng)飼料中色素物質(zhì)供給不足時(shí)，極易造成黃顙魚體色異常，出現(xiàn)“體色消退”、“黑身”現(xiàn)象，進(jìn)而影響黃顙魚品質(zhì)。因此，通過飼料途徑添加色素改善黃顙魚體色是常用的措施，市場(chǎng)上色素添加劑品種眾多，品質(zhì)不一，養(yǎng)殖戶往往過量投喂，導(dǎo)致喂養(yǎng)出來的黃顙魚容易出現(xiàn)“香蕉魚”“花斑”等現(xiàn)象。基于以上問題現(xiàn)狀，尋找一種合適的體色改良飼料添加劑尤為重要。蝦青素是類胡蘿卜素的一種，又名變胞藻黃素、蝦紅素，主要來自微生物（如微藻、酵母和細(xì)菌等）和海洋生物（蝦、蟹、鮭科魚類等）。研究表明，蝦青素被普遍應(yīng)用于水產(chǎn)動(dòng)物的體色改善，如觀賞魚類、東星斑（Plectropomus leopardus）、蝦蟹類等品種。隨著研究的深入，蝦青素在其他方面也發(fā)揮相應(yīng)的功能，蝦青素在提高水產(chǎn)動(dòng)物存活率，促進(jìn)機(jī)體生長(zhǎng)、繁殖和發(fā)育等方面同樣具有功效。有關(guān)蝦青素對(duì)黃顙魚的生長(zhǎng)、體色及抗氧化等影響的研究較少。本試驗(yàn)以黃顙魚為研究對(duì)象，探究蝦青素不同添加水平對(duì)黃顙魚生長(zhǎng)、體色及抗氧化的影響，進(jìn)而為黃顙魚養(yǎng)殖產(chǎn)業(yè)的健康發(fā)展提供基礎(chǔ)數(shù)據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)魚

黃顙魚幼魚，購(gòu)買長(zhǎng)春市某水產(chǎn)市場(chǎng)于同一批次，經(jīng)肉眼觀察確認(rèn)體表無明顯外傷、游動(dòng)活潑，在吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)水產(chǎn)養(yǎng)殖實(shí)驗(yàn)室養(yǎng)殖系統(tǒng)中暫養(yǎng)15 d，使其適應(yīng)試驗(yàn)養(yǎng)殖環(huán)境。暫養(yǎng)期間，投喂基礎(chǔ)飼料，每天2次（9：00，16：00），以適應(yīng)試驗(yàn)飼料。養(yǎng)殖期間定時(shí)換水，水溫保持在23～25 ℃，溶解氧保持≥5 mg/L，pH維持在（7.1±0.1）左右，氨氮＜0.5 mg/L。

1.2 試驗(yàn)飼料的配方及制備

試驗(yàn)所用蝦青素由西安澤邦生物科技有限公司提供，蝦青素主要提取于雨生紅球藻，濃度為2%。以魚粉和玉米蛋白粉為主要蛋白源配置基礎(chǔ)飼料，主要原料組成及營(yíng)養(yǎng)水平如表1 所示。分別向基礎(chǔ)飼料中添加0、50、100、150、200 mg/kg的蝦青素，按照姚金明等（2019）方法人工制作飼料，最終配制出5種試驗(yàn)飼料，保存、備用。

表1 試驗(yàn)飼料配方及營(yíng)養(yǎng)水平（干物質(zhì)基礎(chǔ)）

1.3 試驗(yàn)設(shè)計(jì)及日常管理

15 d暫養(yǎng)結(jié)束后，挑選規(guī)格一致的450尾初重約為8 g左右的黃顙魚，稱量體重后隨機(jī)分到15個(gè)養(yǎng)殖桶中，每個(gè)桶30尾，隨機(jī)分成5組，每組3個(gè)重復(fù)，每個(gè)桶做好標(biāo)記。禁食24 h后，分別飼喂制作好的5種試驗(yàn)飼料，試驗(yàn)期8周。每天手工投餌2次（9：00、16：00），采用飽食投喂的方式，具體投喂量根據(jù)攝食量情況及時(shí)調(diào)整。試驗(yàn)期間換水頻率、水溫、溶解氧、pH 及氨氮條件同暫養(yǎng)期間保持一致。

1.4 樣品收集和指標(biāo)測(cè)定

飼養(yǎng)試驗(yàn)開始前及結(jié)束時(shí)均以桶為單位進(jìn)行稱重，根據(jù)記錄的黃顙魚初重、末重及每天記錄的攝食量，按照姚金明等（2019）方法計(jì)算平均增重率、特定生長(zhǎng)率、飼料效率及蛋白質(zhì)效率。

隨后，每個(gè)重復(fù)隨機(jī)抽取5 尾黃顙魚，擦干體表水分，用色差儀（CR-400）分別測(cè)量黃顙魚背部和腹部皮膚的色度值，記錄亮度（L*）、紅度（a*）和黃度（b*）。

色度值測(cè)完后，尾靜脈抽血，靜置取血清測(cè)抗氧化指標(biāo)，采用試劑盒（南京建成生物工程研究所）檢測(cè)血清總超氧化物歧化酶（T-SOD）和過氧化氫酶（CAT）活性及谷胱甘肽（GSH）和丙二醛（MDA）水平。

最后冰上解剖，取黃顙魚背部和腹部皮膚測(cè)定總類胡蘿卜素含量?？傤惡}卜素測(cè)定方法按照姚金明等（2019）方法進(jìn)行。

1.5 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)

所有數(shù)據(jù)記錄在Excel表格中，利用SPSS 20.0軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行單因素分析各個(gè)試驗(yàn)組間的差異顯著性（顯著水平設(shè)定P＜0.05）。所有試驗(yàn)數(shù)據(jù)采用“平均值±標(biāo)準(zhǔn)差”表示。

2 結(jié)果與分析

2.1 蝦青素對(duì)黃顙魚生長(zhǎng)性能的影響（見表2）

表2 蝦青素對(duì)黃顙魚生長(zhǎng)性能的影響

如表2所示，100、150 mg/kg組及200 mg/kg組的黃顙魚末重顯著高于對(duì)照組（P＜0.05），150 mg/kg 組及200 mg/kg組的黃顙魚末重顯著高于對(duì)照組和50 mg/kg組（P＜0.05）。100、150 mg/kg組及200 mg/kg組黃顙魚平均增重率和特定生長(zhǎng)率顯著高于對(duì)照組和50 mg/kg組（P＜0.05）。100、150 mg/kg 組及200 mg/kg 組黃顙魚飼料效率及蛋白質(zhì)效率均顯著高于對(duì)照組（P＜0.05），150 mg/kg組及200 mg/kg組黃顙魚飼料效率及蛋白質(zhì)效率顯著高于對(duì)照組和50 mg/kg組（P＜0.05）。

2.2 蝦青素對(duì)黃顙魚體色的影響（見表3、表4）

表3 蝦青素對(duì)黃顙魚皮膚色度值的影響

表4 蝦青素對(duì)黃顙魚皮膚總類胡蘿素含量的影響（mg/kg）

如表3 所示，150 mg/kg 組及200 mg/kg 組黃顙魚背部皮膚亮度和紅度顯著高于對(duì)照組（P＜0.05）。100 mg/kg組、150 mg/kg組及200 mg/kg組黃顙魚背部皮膚黃度顯著高于對(duì)照組（P＜0.05）。100、150 mg/kg組及200 mg/kg組黃顙魚腹部皮膚亮度和黃度顯著高于對(duì)照組（P＜0.05）。150 mg/kg 組及200 mg/kg 組黃顙魚腹部皮膚紅度顯著高于對(duì)照組（P＜0.05）。

100、150 mg/kg 組及200 mg/kg 組黃顙魚背部皮膚總類胡蘿卜素含量顯著高于對(duì)照組（P＜0.05）。150 mg/kg 組及200 mg/kg 組黃顙魚腹部皮膚總類胡蘿卜素含量顯著高于對(duì)照組（P＜0.05）。

2.3 蝦青素對(duì)黃顙魚抗氧化指標(biāo)的影響（見表5）

如表5所示，150 mg/kg組黃顙魚血清T-SOD活性顯著高于對(duì)照組（P＜0.05）。150 mg/kg組和200 mg/kg組黃顙魚血清CAT 活性和GSH 水平顯著高于對(duì)照組（P＜0.05）。100、150 mg/kg 組及200 mg/kg 組黃顙魚血清MDA含量顯著低于對(duì)照組（P＜0.05）。

表5 蝦青素對(duì)黃顙魚血清抗氧化指標(biāo)的影響

3 討論

3.1 蝦青素對(duì)黃顙魚生長(zhǎng)的影響

在本試驗(yàn)條件下，100 mg/kg 組、150 mg/kg 組及200 mg/kg組黃顙魚的生長(zhǎng)性能和飼料利用均顯著得到改善，表明100～200 mg/kg 的蝦青素對(duì)黃顙魚的生長(zhǎng)有顯著的促進(jìn)作用。飼料中添加蝦青素可提高大鱗副泥鰍（Paramisgurnus dabryanus）平均增重率和特定生長(zhǎng)率。類似的報(bào)道有很多，在卵形鯧鲹（Trachinotus ovatus）幼魚、七彩神仙魚（Symphysodon aequifasciata）、血鸚鵡（Amphilophus citrinellus×Cichlasoma synspilum）等魚類上均證明蝦青素的促生長(zhǎng)作用。同時(shí)，在蝦類上也得到驗(yàn)證，在南美白對(duì)蝦（Penaeus vannamei）、羅氏沼蝦（Macrobrachium rosenbergii）、斑節(jié)對(duì)蝦（Penaeus monodon）等上均有蝦青素促生長(zhǎng)的報(bào)道。但是不同魚類關(guān)于蝦青素適宜添加水平的研究結(jié)果存在差異，如在大鱗副泥鰍和七彩神仙魚上蝦青素最適添加水平均是50 mg/kg，卵形鯧鲹的研究表明蝦青素最適宜的添加水平是200 mg/kg，血鸚鵡上蝦青素的適宜添加水平則是100～150 mg/kg，分析原因可能存在劑量依賴關(guān)系，與物種種類、生長(zhǎng)階段、養(yǎng)殖環(huán)境以及蝦青素的來源差異有關(guān)，但還需要進(jìn)一步分析。

3.2 蝦青素對(duì)黃顙魚體色的影響

在本試驗(yàn)條件下，隨著蝦青素添加水平的增加，黃顙魚背部及腹部皮膚亮度、紅度和黃度均顯著增加，背部、腹部皮膚總類胡蘿卜素含量也顯著增加，這表明蝦青素在改善黃顙魚體色方面有顯著的效用。在對(duì)大鱗副泥鰍的研究中，同樣發(fā)現(xiàn)蝦青素添加水平為100～200 mg/kg時(shí)魚體體色得到顯著改善。在金曼龍魚（Trichogaster microlepis）飼料中添加100 mg/kg蝦青素后，其著色效果最佳，且進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn)色素主要沉積在魚皮、魚鱗和魚鰭表面。在對(duì)中國(guó)金魚（Carassius auratus）的研究中發(fā)現(xiàn)，色素累積存在劑量依賴效應(yīng)，即隨著蝦青素添加濃度的增加，魚體所含色素量也逐漸增多。對(duì)血鸚鵡的研究中，牟文燕等（2014）、孫學(xué)亮等（2017）、李小慧等（2008）、張曉紅等（2009）均發(fā)現(xiàn)飼料中添加適量的蝦青素可顯著增加血鸚鵡體內(nèi)色素沉積量，改善魚體著色效果，但不同添加方式效果也存在差異。對(duì)粉白、紅斑、黑斑紅羅非魚（Oreochromis Niloticus）體色方面的研究結(jié)果也表明蝦青素添加對(duì)體色沉積存在一定的組織器官差異性，通過聚類分析，認(rèn)為紅羅非魚的鰭中類胡蘿卜素沉積率最高，接下來依次為鰓、眼球，最低沉積率出現(xiàn)在皮膚和肌肉組織中?？傊鲜鲅芯烤砻魑r青素對(duì)水產(chǎn)動(dòng)物具有體色改善的功能，這歸功于其本身就是類胡蘿卜素的一種，但不同的種類、不同的添加方式以及不同器官之間，色素沉積存在差異，具體的原因尚需進(jìn)一步研究分析。

3.3 蝦青素對(duì)黃顙魚抗氧化指標(biāo)的影響

適宜的蝦青素添加量能促進(jìn)黃顙魚的生長(zhǎng)，推測(cè)可能與其改善機(jī)體抗氧化能力有關(guān)。天然蝦青素是效率高的天然抗氧化劑。魚類在養(yǎng)殖過程中會(huì)受到各種因素誘導(dǎo)的氧化應(yīng)激，致使生產(chǎn)性能下降，提高機(jī)體的抗氧化能力有助于促進(jìn)魚體的生長(zhǎng)。目前，機(jī)體抗氧化能力一般通過一些抗氧化相關(guān)的酶或物質(zhì)來評(píng)價(jià)。本試驗(yàn)條件下，150 mg/kg 組黃顙魚血清T-SOD 活性、CAT 活性和GSH 水平顯著高于對(duì)照組，MDA 含量顯著低于對(duì)照組，表明蝦青素的添加確實(shí)促進(jìn)了黃顙魚機(jī)體的抗氧化能力。50～100 mg/kg 的蝦青素可顯著提高烏鱧（Channa argus）幼魚的抗氧化能力、免疫力及抗病力。同時(shí)，大黃魚（Larimichthys crocea）親魚機(jī)體總超氧化物歧化酶、谷胱甘肽過氧化物酶及總抗氧化能力等指標(biāo)隨著蝦青素水平升高而呈升高的趨勢(shì)。但目前關(guān)于蝦青素調(diào)控水產(chǎn)動(dòng)物抗氧化的研究?jī)H僅只是涉及抗氧化酶等相關(guān)指標(biāo)的研究，其具體機(jī)制仍需深入。

4 結(jié)論

本試驗(yàn)條件下，當(dāng)飼料中蝦青素添加水平為150～200 mg/kg 時(shí)可有效提高黃顙魚生長(zhǎng)性能、改善其體色并提高機(jī)體抗氧化能力。