鮑明隆 孫心怡 梁 梅 巨向紅 雍艷紅 馬興斌 于志超 郭依瑩 劉曉曦

(廣東海洋大學(xué)濱海農(nóng)業(yè)學(xué)院動物醫(yī)學(xué)系，湛江524000)

斷奶應(yīng)激會導(dǎo)致仔豬出現(xiàn)腹瀉，影響其腸道健康和生長性能，嚴(yán)重的甚至?xí)?dǎo)致仔豬死亡，對我國養(yǎng)豬業(yè)的發(fā)展有著重大影響[1]。仔豬斷奶應(yīng)激發(fā)生后常伴隨著腸道炎癥反應(yīng)和氧化應(yīng)激，進(jìn)而引起腸道損傷[2-4]，而氧化平衡狀態(tài)對于維持腸道黏膜完整性、調(diào)節(jié)腸黏膜的再生修復(fù)有著重要作用[5]。研究顯示，核因子-κB(NF-κB)信號通絡(luò)的激活與炎癥反應(yīng)密不可分[6]，核因子-E2相關(guān)因子2(Nrf2)信號通路的激活可通過促進(jìn)機(jī)體抗氧化酶的表達(dá)發(fā)揮抗氧化作用[7]。因此，維持腸道結(jié)構(gòu)的完整性、降低腸道炎癥反應(yīng)和氧化應(yīng)激，對防治仔豬斷奶應(yīng)激和保護(hù)機(jī)體健康起到了關(guān)鍵作用。

黃芩苷(baicalin，C21H18O11)是從黃芩的干燥根中提取的一種黃酮類化合物，其在治療雞的肝臟、肺臟損傷，小鼠的肺臟炎癥和輸卵管氧化應(yīng)激損傷等方面具有積極作用[8-9]。已知黃芩苷可通過抑制NF-κB信號通路對急性胰腺炎模型大鼠發(fā)揮抗炎作用[10]，通過激活Nrf2信號通路對膽汁淤積小鼠發(fā)揮抗氧化作用[11]。黃芩水提取物對于小鼠空腸損傷具有治療效果[12]，但黃芩苷對腸炎模型小鼠空腸的調(diào)節(jié)作用及分子機(jī)制尚不明確。因此，本研究通過給空腸炎癥模型小鼠灌胃黃芩苷，從空腸組織形態(tài)、炎性因子表達(dá)、抗氧化酶活性、炎癥和氧化應(yīng)激相關(guān)信號通路關(guān)鍵蛋白表達(dá)等方面，探討黃芩苷對于小鼠空腸炎癥的修復(fù)作用機(jī)制及黃芩苷的最佳劑量，為黃芩苷治療仔豬斷奶應(yīng)激提供相應(yīng)的理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

黃芩苷購于湖北某生物科技有限公司，純度為85%；試驗(yàn)用小鼠為C57BL/6小鼠，購于斯貝福(北京)生物技術(shù)有限公司；脂多糖(LPS)購于Sigma公司(L2880)。

1.2 主要試劑

試驗(yàn)所用主要試劑見表1。

表1 主要試劑

ELISA：酶聯(lián)免疫吸附測定 enzyme-linked immunosorbent assay；IL-6：白細(xì)胞介素-6 interleukin-6；IL-1β；白細(xì)胞介素-1β interleukin-1β；TNF-α：腫瘤壞死因子-α tumor necrosis factor-α；ROS：活性氧 reactive oxygen species；SOD：超氧化物歧化酶 superoxide dismutase；MDA：丙二醛 malondialdehyde；BCA：二喹啉甲酸 bicinchoninic acid；SDS-PAGE：十二烷基硫酸鈉-聚丙烯酰胺凝膠電泳 sodium dodecyl sulfate polyacrylamide gel electrophoresis；P-P65：磷酸化P65 phosphorylated P65；IκBα：核因子-κB抑制蛋白α inhibitor of nuclear factor-kappa Bα；P-IκBα：磷酸化核因子-κB抑制蛋白α phosphorylated inhibitor of nuclear factor-kappa Bα；Nrf2：核因子-E2相關(guān)因子2 nuclear factor E2-related factor 2；β-actin：β-肌動蛋白；HO-1：血紅素氧合酶-1 heme oxygenase-1。

1.3 動物分組及處理、樣品采集

將36只C57BL/6雄性小鼠隨機(jī)分為6組，即對照組、陰性對照組、模型組以及黃芩苷低、中、高劑量組，每組6只。適應(yīng)性生長7 d后開始試驗(yàn)。對照組小鼠不作處理，陰性對照組和模型組小鼠每天灌胃0.2 mL磷酸鹽緩沖液(PBS)，黃芩苷組小鼠每天灌胃黃芩苷藥液0.2 mL(根據(jù)小鼠體重計(jì)算用藥量，低劑量組為100 mg/kg BW，中劑量組為200 mg/kg BW，高劑量組為400 mg/kg BW)，連續(xù)灌胃7 d，第7天對照組和陰性對照組小鼠不做其他處理，模型組、黃芩苷組小鼠腹腔注射0.2 mL LPS(3.5 mg/kg BW)。注射LPS 24 h后脫臼處死小鼠并剖檢，取空腸組織，分為3段，用生理鹽水洗凈后其中2段凍于液氮中，30 min后轉(zhuǎn)移至-80 ℃冰箱中保存?zhèn)溆?，另一段空腸置于10 mL福爾馬林溶液中保存?zhèn)溆谩?/p>

1.4 組織切片及蘇木精-伊紅(HE)染色

將置于福爾馬林溶液中的空腸固定72 h后，制作組織切片，HE染色，中性樹膠封片。光鏡下觀察各組小鼠空腸結(jié)構(gòu)形態(tài)的變化情況，觀察后用Olympus Image Analysis System圖像分析系統(tǒng)拍照，用Image-proplus6.0軟件測量視野內(nèi)空腸絨毛高度和隱窩深度，計(jì)算絨毛高度與隱窩深度的比值。

1.5 酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)

每組空腸樣本切取相同重量的組織樣本，加入一定量的PBS(pH 7.4)用勻漿器將樣本充分勻漿，3 000 r/min離心20 min后收集上清。根據(jù)試劑盒廠商說明書使用白細(xì)胞介素-6(IL-6)、白細(xì)胞介素-1β(IL-1β)、腫瘤壞死因子-α(TNF-α)、超氧化物歧化酶(SOD)、活性氧(ROS)、丙二醛(MDA)ELISA試劑盒進(jìn)行相應(yīng)指標(biāo)的測定。

1.6 RNA提取、反轉(zhuǎn)錄及實(shí)時(shí)熒光定量PCR

每組空腸樣本切取相同重量的組織樣本，根據(jù)廠商的說明書使用Trizol試劑從腸道組織中提取RNA。使用EasyScript One-Step gDNA Removal and cDNA Synthesis SuperMix將分離出的RNA反轉(zhuǎn)錄為cDNA，使用EasyScript Green qPCR SuperMix和特異性引物擴(kuò)增cDNA。使用實(shí)時(shí)熒光定量PCR儀通過其特異性引物擴(kuò)增目的基因mRNA(實(shí)時(shí)定量PCR引物序列如表2所示)。每個(gè)目的基因mRNA樣本利用β-肌動蛋白(β-actin)作為其平行對照進(jìn)行數(shù)據(jù)分析。

表2 實(shí)時(shí)熒光定量PCR引物

1.7 蛋白質(zhì)印跡(Western Blot)

空腸樣本切取相同重量的組織樣本，加入RIPA裂解液，根據(jù)廠商的說明書提取組織全蛋白或組織胞漿胞核蛋白。蛋白提取后使用BCA試劑盒測定蛋白濃度，通過十二烷基硫酸鈉-聚丙烯酰胺凝膠電泳(SDS-PAGE)分離蛋白，經(jīng)轉(zhuǎn)膜儀轉(zhuǎn)移至0.22 μm聚偏氟乙烯(PVDF)膜上后用快速封閉液封閉。然后使用1∶1 000稀釋的一抗與膜孵育。TBST中洗滌，使用1∶1 000稀釋的辣根過氧化物酶(HRP)標(biāo)記二抗與膜孵育，使用ECL檢測系統(tǒng)顯現(xiàn)印跡，并使用ChemiDoc XRS+圖像分析儀定量目的蛋白。

1.8 統(tǒng)計(jì)分析

使用SPSS 12.0軟件采用單因素方差分析(one-way ANOVA)程序?qū)?shù)據(jù)進(jìn)行分析，采用Tukey法進(jìn)行多重比較檢驗(yàn)，結(jié)果以平均值±標(biāo)準(zhǔn)誤表示，P<0.05表示差異顯著。

2 結(jié) 果

2.1 空腸形態(tài)學(xué)觀察

正常情況下，小鼠空腸絨毛結(jié)構(gòu)完整，排列有序，隱窩結(jié)構(gòu)正常(圖1-A和圖1-B)。與對照組相比，模型組小鼠空腸絨毛結(jié)構(gòu)受到嚴(yán)重破壞，絨毛從底部斷裂(圖1-C)，絨毛高度顯著降低(圖1-G，P<0.05)，絨毛高度與隱窩深度的比值顯著降低(圖1-I，P<0.05)，小鼠空腸固有層損傷明顯，提示炎癥模型構(gòu)建成功。與模型組相比，黃芩苷低劑量組小鼠空腸絨毛結(jié)構(gòu)仍然受到嚴(yán)重破壞(圖1-D)，絨毛高度與隱窩深度的比值并沒有顯著變化(圖1-I，P>0.05)；黃芩苷中劑量組小鼠空腸絨毛結(jié)構(gòu)相比于模型組有所修復(fù)，但仍有部分絨毛結(jié)構(gòu)受到明顯破壞(圖1-E)，而絨毛高度與隱窩深度的比值已經(jīng)有了顯著提高(圖1-I，P<0.05)；黃芩苷高劑量組小鼠空腸絨毛分布較為整齊，有絨毛包裹成團(tuán)脫落至腸腔，絨毛和隱窩結(jié)構(gòu)相比于模型組有明顯改善(圖1-E)，與模型組相比黃芩苷高劑量組的絨毛長度與隱窩深度的比值顯著升高(圖1-G，P<0.05)，且未出現(xiàn)明顯病理損傷。

A～F分別為對照組、陰性對照組、模型組、黃芩苷低劑量組、黃芩苷中劑量組、黃芩苷高劑量組小鼠空腸形態(tài)。紅色箭頭為絨毛斷裂處，綠色箭頭為絨毛成團(tuán)脫落處。

2.2 空腸炎癥相關(guān)因子mRNA表達(dá)量和炎性因子含量變化

與對照組相比，模型組空腸中IL-6、IL-1β、TNF-α的mRNA表達(dá)量顯著提高(圖2-B、圖2-C、圖2-D，P<0.05)。與模型組相比，低、中、高劑量的黃芩苷可以顯著抑制空腸中因LPS刺激提高的IL-6和TNF-α的mRNA表達(dá)量(圖2-B和圖2-C，P<0.05)；與模型組相比，中和高劑量的黃芩苷可以顯著抑制空腸中因LPS刺激提高的IL-1β的mRNA表達(dá)量(圖2-D，P<0.05)。Toll樣受體4(TLR4)是細(xì)胞膜表面的重要受體，與炎癥反應(yīng)有著密切的關(guān)系。與對照組相比，模型組空腸中TLR4的mRNA表達(dá)量顯著升高(圖2-A，P<0.05)，而黃芩苷處理會逆轉(zhuǎn)這一趨勢，顯著抑制空腸中TLR4 mRNA的表達(dá)(P<0.05)，且呈現(xiàn)劑量依賴性(圖2-A)。

圖2 黃芩苷對LPS誘導(dǎo)小鼠空腸炎癥相關(guān)因子mRNA表達(dá)量的影響

與對照組相比，模型組空腸中IL-6、IL-1β、TNF-α的含量顯著提高(圖3-A、圖3-B、圖3-C，P<0.05)。與模型組相比，中和高劑量的黃芩苷可以顯著降低空腸中因LPS誘導(dǎo)升高的IL-6和IL-1β含量(圖3-A和圖3-B，P<0.05)。與模型組相比，黃芩苷可以顯著降低空腸中因LPS誘導(dǎo)升高的TNF-α含量(P<0.05)，并呈現(xiàn)劑量依賴性(圖3-C)。

2.3 空腸抗氧化指標(biāo)變化

與對照組相比，模型組空腸中ROS和MDA的含量顯著提高(圖4-A和圖4-B，P<0.05)。與模型組相比，黃芩苷可以顯著抑制空腸中因LPS刺激而升高的ROS和MDA含量(P<0.05)，并呈現(xiàn)劑量依賴性(圖4-A和圖4-B)。與對照組相比，模型組空腸中SOD的活性顯著降低(圖4-C，P<0.05)。與模型組相比，高劑量的黃芩苷可以顯著升高空腸中因LPS刺激而降低的SOD活性(圖4-C，P<0.05)。

2.4 空腸Nrf2信號通路關(guān)鍵因子mRNA表達(dá)量變化

與對照組相比，模型組空腸中HO-1和醌氧化還原酶-1(NQO-1)的mRNA表達(dá)量無顯著變化(圖5-A和圖5-B，P>0.05)。與模型組相比，中和高劑量的黃芩苷可以顯著增加空腸中HO-1的mRNA表達(dá)量(P<0.05)，同時(shí)黃芩苷還可以顯著增加空腸中NQO-1的mRNA表達(dá)量(P<0.05)，且呈現(xiàn)劑量依賴性(圖5-A和圖5-B)。

2.5 空腸NF-κB信號通路關(guān)鍵蛋白表達(dá)量變化

與對照組相比，LPS刺激對于空腸中IκBα和P65的蛋白表達(dá)量并沒有顯著影響(圖6-B和圖6-E，P>0.05)。與對照組相比，模型組空腸中P-IκBα和P-P65的蛋白表達(dá)量顯著提高(圖6-C和圖6-F，P<0.05)；與模型組相比，低、中、高劑量的黃芩苷可以顯著抑制空腸中因LPS刺激而升高的P-IκBα和P-P65蛋白表達(dá)量(圖6-C和圖6-F，P<0.05)。與對照組相比，模型組小鼠空腸中P-IκBα/IκBα比值顯著升高(圖6-D，P<0.05)；與模型組相比，低、中、高劑量的黃芩苷可以顯著抑制這一比值的升高(圖6-D，P<0.05)。與對照組相比，模型組空腸中P-P65/P65比值顯著升高(圖6-G，P<0.05)；與模型組相比，黃芩苷顯著降低這一比值(P<0.05)，且呈現(xiàn)劑量依賴性(圖6-G)。

圖3 黃芩苷對LPS誘導(dǎo)小鼠空腸炎性因子含量的影響

圖5 黃芩苷對LPS誘導(dǎo)小鼠空腸Nrf2信號通路關(guān)鍵因子mRNA表達(dá)量的影響

IκBα：核因子-κB抑制蛋白α inhibitor of nuclear factor-kappa Bα；P-IκBα：磷酸化核因子-κB抑制蛋白α phosphorylated inhibitor of nuclear factor-kappa Bα；P-P65：磷酸化P65 phosphorylated P65；β-actin：β-肌動蛋白；protein expression level：蛋白表達(dá)量。

2.6 空腸Nrf2/HO-1信號通路關(guān)鍵蛋白表達(dá)量變化

與對照組相比，模型組空腸中HO-1的蛋白表達(dá)量顯著降低(圖7-B，P<0.05)；與模型組相比，中、高劑量的黃芩苷會顯著提高空腸中HO-1的蛋白表達(dá)量(圖7-B，P<0.05)。與對照組相比，模型組空腸中胞漿Nrf2的蛋白表達(dá)量無顯著變化(圖7-C，P>0.05)，空腸中胞核Nrf2的蛋白表達(dá)量也沒有顯著變化(圖7-D，P>0.05)；但是與模型組相比，低、中、高劑量的黃芩苷會顯著提高空腸中胞核Nrf2的蛋白表達(dá)量(圖7-D，P<0.05)。

圖7 黃芩苷對LPS誘導(dǎo)小鼠空腸Nrf2/HO-1信號通路關(guān)鍵蛋白表達(dá)量的影響

3 討 論

空腸是哺乳動物體內(nèi)重要的營養(yǎng)物質(zhì)吸收器官，腸道炎癥和氧化應(yīng)激的發(fā)生會導(dǎo)致腸道屏障功能惡化，可能會使得有害物質(zhì)或病原進(jìn)入血液，導(dǎo)致消化系統(tǒng)的疾病[13]。LPS是革蘭氏陰性菌細(xì)胞壁的成分，可以誘導(dǎo)腸道的炎癥反應(yīng)[14]，用LPS注射小鼠腹腔后還能誘導(dǎo)空腸發(fā)生損傷[15]。黃芩苷對于LPS誘導(dǎo)的多器官急性損傷、肝臟細(xì)胞和H9c2細(xì)胞的炎癥反應(yīng)有較好的治療效果[16-18]。因此，本文采用腹腔注射LPS構(gòu)建小鼠空腸炎癥模型，使用黃芩苷預(yù)處理作為治療組。本研究中陰性對照組與對照組基本無顯著差異，故不單獨(dú)討論陰性對照組情況。與對照組相比，模型組小鼠空腸組織結(jié)構(gòu)炎癥受損，這與前人研究結(jié)果[19]一致，表明空腸炎癥反應(yīng)誘發(fā)了結(jié)構(gòu)損傷。相對于模型組，低、中、高劑量黃芩苷組小鼠空腸結(jié)構(gòu)得到改善，尤其是高劑量黃芩苷組的小鼠空腸絨毛結(jié)構(gòu)趨于完整，表明黃芩苷對于LPS誘導(dǎo)的小鼠空腸組織損傷具有保護(hù)作用。黃芩苷可以促進(jìn)豬腸上皮細(xì)胞的增殖[20-21]，這可能是黃芩苷維持小鼠空腸結(jié)構(gòu)完整性的潛在作用機(jī)制。

IL-6、IL-1β、TNF-α是重要的細(xì)胞炎性因子，在小鼠腸道炎癥反應(yīng)中起著關(guān)鍵作用。TLR4-NF-κB信號通路是重要的炎癥反應(yīng)通路[22]，也是IL-6、IL-1β和TNF-α等炎性因子的上游通路，其中TLR4是細(xì)胞膜表面重要的識別受體[23]。一般情況下，非活化NF-κB復(fù)合物(包括功能性亞基P65和抑制性亞基IκBα)位于細(xì)胞質(zhì)中[24]，當(dāng)TLR4受到外源刺激時(shí)，抑制性亞基IκBα發(fā)生磷酸化，與功能性亞基P65解離[25]，解離的功能性亞基P65磷酸化后進(jìn)入細(xì)胞核誘導(dǎo)炎性因子IL-6、IL-1β和TNF-α等分泌[26]，進(jìn)而導(dǎo)致組織的炎癥反應(yīng)。結(jié)果顯示，相對于對照組，模型組小鼠空腸中炎性因子在mRNA和蛋白水平的表達(dá)量均顯著升高，這表明LPS刺激使小鼠空腸發(fā)生炎癥反應(yīng)。相比于對照組，模型組小鼠空腸NF-κB信號通路關(guān)鍵蛋白的表達(dá)量顯著升高；相比于模型組，中、高劑量的黃芩苷顯著抑制了小鼠空腸NF-κB信號通路關(guān)鍵蛋白的表達(dá)量，與感染產(chǎn)腸毒素大腸桿菌(ETEC)的豬腸道上皮細(xì)胞的反應(yīng)[27]相一致，以上結(jié)果表明黃芩苷通過阻斷LPS激活的NF-κB信號通路降低炎癥反應(yīng)。王歡[28]研究發(fā)現(xiàn)，小鼠空腸NF-κB信號通路激活后會誘導(dǎo)炎癥反應(yīng)的產(chǎn)生，進(jìn)而破壞空腸腸道黏膜屏障的完整性。因此，黃芩苷通過發(fā)揮抗炎作用有助于維持小鼠空腸黏膜屏障的完整性。

健康狀態(tài)的組織處于ROS和抗氧化酶之間的平衡狀態(tài)，而當(dāng)這一平衡狀態(tài)被打破時(shí)，過量的ROS及抗氧化酶活性或表達(dá)量降低會導(dǎo)致組織氧化應(yīng)激的發(fā)生[29]。氧化應(yīng)激會引起細(xì)胞發(fā)生死亡和不可修復(fù)的氧化損傷[30]。本研究中，LPS誘導(dǎo)小鼠空腸TLR4的mRNA表達(dá)量顯著升高，并誘導(dǎo)空腸發(fā)生炎癥反應(yīng)。TLR4的激活可以誘導(dǎo)過量的ROS產(chǎn)生[31]，LPS刺激雞HD11巨噬細(xì)胞也能產(chǎn)生過量的ROS，發(fā)生氧化應(yīng)激[32]。腎炎模型小鼠中因炎癥反應(yīng)產(chǎn)生的炎性因子會破壞細(xì)胞內(nèi)氧化還原的平衡狀態(tài)，誘導(dǎo)產(chǎn)生氧化應(yīng)激[33]，炎癥反應(yīng)活化中性粒細(xì)胞會持續(xù)產(chǎn)生過量的ROS。因此作者推測，LPS會誘導(dǎo)小鼠空腸產(chǎn)生過量的ROS，誘發(fā)氧化應(yīng)激。SOD是一種重要的抗氧化酶，其對于維持氧化還原平衡有著重要的意義[34]，當(dāng)SOD活性異常降低時(shí)組織可能會發(fā)生氧化應(yīng)激。本研究中，LPS抑制了抗氧化酶的表達(dá)量，提高了ROS和MDA的含量，表明LPS刺激引起小鼠空腸組織的氧化應(yīng)激。正常情況下Kelch樣環(huán)氧氯丙烷相關(guān)蛋白-1(Keap1)與Nrf2形成復(fù)合體處于細(xì)胞質(zhì)中，當(dāng)發(fā)生氧化應(yīng)激時(shí)，Keap1與Nrf2解離，Nrf2進(jìn)入細(xì)胞核內(nèi)與DNA上相應(yīng)靶位點(diǎn)相結(jié)合，誘導(dǎo)相應(yīng)的解毒酶和抗氧化酶的合成[35]，而HO-1和NQO-1是Nrf2信號通路所激活的重要抗氧化酶，HO-1和NQO-1的活性對于維持氧化平衡狀態(tài)有著重要意義[36]。在雞的支原體病毒感染過程中，黃芩苷也可以激活脾臟的Nrf2信號通路及其下游蛋白的表達(dá)[37]。本試驗(yàn)中，黃芩苷通過激活小鼠空腸的Nrf2信號通路促進(jìn)抗氧化酶HO-1和NQO-1 mRNA的表達(dá)以抑制氧化應(yīng)激，避免了氧化應(yīng)激造成的結(jié)構(gòu)損傷。

藥物的治療效果與劑量有關(guān)[38]。本試驗(yàn)中黃芩苷在反映抗炎、抗氧化效果的各項(xiàng)指標(biāo)如炎性因子、抗氧化酶表達(dá)等上均表現(xiàn)出劑量依賴性。中和高劑量的黃芩苷都可提高空腸絨毛高度和隱窩深度的比值，但高劑量的黃芩苷提高的更為顯著。P-P65蛋白與IL-6、IL-1βmRNA的表達(dá)量結(jié)果都顯示中劑量黃芩苷組和高劑量黃芩苷組較模型組有顯著降低，且2組間差異不顯著。在氧化應(yīng)激中空腸SOD的活性只有高劑量黃芩苷組相比于模型組有顯著提高，其余氧化因子及Nrf2信號通路關(guān)鍵蛋白的表達(dá)量都呈現(xiàn)劑量依賴性。小鼠在灌胃200和400 mg/kg BW黃芩苷后炎癥和氧化應(yīng)激等各項(xiàng)指標(biāo)得到顯著改善。綜合考慮作為飼料添加劑的成本問題，黃芩苷的推薦劑量是200 mg/kg BW。LPS刺激斷奶仔豬后，血清中炎性因子IL-6、IL-8和ROS的含量升高，表明機(jī)體產(chǎn)生了較強(qiáng)的應(yīng)激反應(yīng)[39]，小鼠腹腔注射LPS后其空腸也發(fā)生了炎癥反應(yīng)和氧化應(yīng)激，所以小鼠空腸炎癥模型可模擬仔豬的斷奶應(yīng)激反應(yīng)。本研究證實(shí)黃芩苷對空腸炎癥小鼠可以通過抑制NF-κB信號通路發(fā)揮抗炎癥作用，通過激活Nrf2信號通路發(fā)揮抗氧化作用，因此，黃芩苷可作為斷奶仔豬應(yīng)激綜合征的潛在治療藥物。

4 結(jié) 論

在腹腔注射LPS構(gòu)建的小鼠空腸炎癥模型中，黃芩苷在適宜劑量內(nèi)可以通過抑制NF-κB信號通路發(fā)揮抗炎癥作用，通過激活Nrf2信號通路發(fā)揮抗氧化作用，推薦劑量是200 mg/kg BW。