李光磊 張美美 白海鑫 張永根

(東北農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物科學(xué)技術(shù)學(xué)院，哈爾濱150030)

隨著現(xiàn)代肉牛養(yǎng)殖業(yè)的發(fā)展與肉牛品種的改良，良種肉牛生產(chǎn)潛力的發(fā)揮越發(fā)依賴于飼糧的能量密度，在飼糧當(dāng)中脂肪是能量密度最高的一種營(yíng)養(yǎng)元素[1]。提高飼糧中脂肪的含量是增加飼糧能量密度的一種常用手段，同時(shí)也能夠增加機(jī)體對(duì)于脂溶性維生素(維生素A、維生素D、維生素E和維生素K)的吸收，改善適口性[2]并增加日增重[3]。隨著飼糧中脂肪添加量的不斷提高，如何提高肉牛對(duì)于脂肪的消化能力逐漸成為了一個(gè)研究熱點(diǎn)。磷脂在被磷脂酶水解后脫去1條脂肪酸鏈所得到的產(chǎn)物就是溶血磷脂，是包括溶血磷脂酰膽堿、溶血磷脂酰乙醇胺、溶血磷脂酸和溶血磷脂酰肌醇等一系列化合物在內(nèi)的統(tǒng)稱，其相較于磷脂具有更好的穩(wěn)定性和乳化性能[4]。有學(xué)者發(fā)現(xiàn)溶血磷脂可以通過(guò)自身的乳化特性來(lái)增加脂肪的吸收[5]，并能通過(guò)調(diào)節(jié)小腸上皮細(xì)胞的基因表達(dá)來(lái)影響腸道中營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的吸收[6]，進(jìn)而對(duì)畜禽的生產(chǎn)性能產(chǎn)生積極影響。溶血磷脂在雞、豬等常見(jiàn)的非反芻動(dòng)物上已經(jīng)有了較為廣泛的研究與應(yīng)用，而針對(duì)肉牛的研究還鮮有報(bào)道。Lee等[7]的研究表明，溶血磷脂能夠有效地提高奶牛的產(chǎn)奶量，改善養(yǎng)分消化率，同時(shí)不會(huì)對(duì)瘤胃內(nèi)環(huán)境造成負(fù)面影響。依據(jù)以上研究結(jié)論進(jìn)行推測(cè)，在脂肪含量較高的肉牛飼糧中添加溶血磷脂可以得到相似的結(jié)果。因此，本研究旨在明確在含過(guò)瘤胃脂肪飼糧中添加溶血磷脂對(duì)肉牛生長(zhǎng)性能、養(yǎng)分表觀消化率及血清生化指標(biāo)的影響，為溶血磷脂在安格斯肉牛生產(chǎn)中更好的應(yīng)用提供科學(xué)理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)設(shè)計(jì)

選用健康且體重[(450.2±22.9) kg]相近的安格斯公牛12頭，隨機(jī)分為2組，每組6頭。其中，對(duì)照組飼喂基礎(chǔ)飼糧，基礎(chǔ)飼糧配方設(shè)計(jì)參照NRC(2001)進(jìn)行，其組成及營(yíng)養(yǎng)水平見(jiàn)表1；溶血磷脂組飼喂試驗(yàn)飼糧[在基礎(chǔ)飼糧中額外添加0.05%(干物質(zhì)基礎(chǔ))溶血磷脂]。試驗(yàn)期為74 d，其中前14 d為預(yù)試期，后60 d為正試期。

1.2 飼養(yǎng)管理

試驗(yàn)牛單欄飼養(yǎng)，單槽飼喂，圍欄大小為1.5 m×2.5 m并鋪有木質(zhì)墊床，飼喂時(shí)間為每日06:00和18:00，試驗(yàn)期間肉牛自由采食、自由飲水。定時(shí)對(duì)牛舍進(jìn)行清掃，確保舍內(nèi)衛(wèi)生，干凈。

表1 基礎(chǔ)飼糧組成及營(yíng)養(yǎng)水平(干物質(zhì)基礎(chǔ))

續(xù)表1項(xiàng)目 Items含量 Content粗蛋白質(zhì) CP9.24粗脂肪 EE6.61中性洗滌纖維 NDF26.13酸性洗滌纖維 ADF15.87鈣 Ca0.66總磷 TP0.35

1.3 樣品采集、測(cè)定指標(biāo)和方法

1.3.1 生長(zhǎng)性能的測(cè)定

在試驗(yàn)期第1天、第44天和第74天進(jìn)行連續(xù)2 d空腹稱重并取平均值記為體重，其中第1天記為始重；在每日晨飼前將料槽內(nèi)的剩料取出并稱重用以計(jì)算前1 d的采食量。根據(jù)體重和采食量數(shù)據(jù)計(jì)算平均日增重(ADG)和平均日采食量(ADFI)。

1.3.2 養(yǎng)分表觀消化率測(cè)定

在第42～44天和第72～74天每日05:00和17:00待肉牛排便后立即收集糞便。將收集的糞便混勻后取200 g糞樣加入10%濃度的稀硫酸20 mL混勻用以測(cè)定粗蛋白質(zhì)(CP)含量，另取300 g糞樣分開(kāi)保存用于測(cè)定干物質(zhì)(DM)、粗脂肪(EE)、中性洗滌纖維(NDF)、酸性洗滌纖維(ADF)和酸不溶灰分(AIA)含量。加酸糞樣于55 ℃烘48 h，未加酸糞樣于65 ℃烘48 h，待2份糞樣烘干后分別用粉碎機(jī)粉碎并過(guò)40目篩作為待測(cè)樣。CP含量使用FOSS 8100凱氏定氮儀測(cè)定，EE含量使用ANKOM XT15全自動(dòng)脂肪提取儀測(cè)定，DM含量測(cè)定按《飼料分析及飼料質(zhì)量檢測(cè)技術(shù)》[8]進(jìn)行，NDF和ADF含量的測(cè)定參照Van Soest等[9]的方法進(jìn)行，AIA含量的測(cè)定參照《飼料中鹽酸不溶灰分的測(cè)定》(GB/T 23742—2009)進(jìn)行。飼糧中相關(guān)養(yǎng)分含量的測(cè)定方法與糞便相同。采用AIA法計(jì)算養(yǎng)分表觀表觀消化率，計(jì)算公式如下：

養(yǎng)分表觀消化率(%)=100-[(M2n×M1m)/
(M1n×M2m)]×100。

式中：M1m為飼糧中AIA含量(%)；M2m為糞便中AIA含量(%)；M1n為飼糧中某養(yǎng)分含量(%)；M2n為糞中養(yǎng)分含量(%)。

1.3.3 血清生化指標(biāo)測(cè)定

在第44天和第74天早晨飼喂前進(jìn)行尾根采血，并立即將采到的血液放入離心機(jī)中以3 500 r/min離心15 min。待離心完成后提取上層血清并置于-20 ℃保存用于測(cè)定血清生化指標(biāo)。

本試驗(yàn)所測(cè)血清代謝指標(biāo)包括總蛋白(TP)、白蛋白(ALB)、球蛋白(ALB)、甘油三酯(TG)、總膽固醇(TCHO)、高密度脂蛋白膽固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白膽固醇(LDL-C)、尿素氮(UN)含量及丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(ALT)、天門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(AST)和堿性磷酸酶(ALP)活性，由黑龍江省哈爾濱市電力醫(yī)院協(xié)助檢測(cè)，試劑盒購(gòu)于北京中生北控生物科技股份有限公司，測(cè)定儀器為AU680貝克曼庫(kù)爾特生化分析儀(上海貝克曼庫(kù)爾特企業(yè)有限公司)。血清抗氧化指標(biāo)測(cè)定所用試劑盒均購(gòu)于南京建成生物工程研究所，分別采用Fe3+還原法、硫代巴比妥酸法、微量酶標(biāo)法和羥胺法測(cè)定總抗氧化能力(T-AOC)、丙二醛(MDA)含量、谷胱甘肽過(guò)氧化物(GSH-Px)和超氧化物歧化酶(SOD)活性，具體操作步驟均按說(shuō)明書進(jìn)行。

1.4 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)

使用Excel 2010對(duì)試驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行初步處理后，使用SAS 9.4軟件中的GLM模塊進(jìn)行顯著性檢驗(yàn)，多重比較采用Duncan氏法進(jìn)行，結(jié)果以平均值±標(biāo)準(zhǔn)差表示結(jié)果，當(dāng)P<0.10時(shí)為有顯著趨勢(shì)，P<0.05時(shí)為差異顯著，P<0.01時(shí)為差異極顯著。

2 結(jié) 果

2.1 溶血磷脂對(duì)肉牛生長(zhǎng)性能的影響

由表2可知，第1～44天，溶血磷脂組的ADG顯著高于對(duì)照組(P<0.05)，且第44天體重有高于對(duì)照組的趨勢(shì)(P=0.078)，但ADFI與對(duì)照組沒(méi)有顯著差異(P>0.05)。在第1～74天時(shí)，溶血磷脂組的ADG顯著高于對(duì)照組(P<0.05)，且第74天體重有高于對(duì)照組的趨勢(shì)(P=0.066)，但對(duì)ADFI與對(duì)照組沒(méi)有顯著差異(P>0.05)。

表2 溶血磷脂對(duì)肉牛生長(zhǎng)性能的影響

2.2 溶血磷脂對(duì)肉牛養(yǎng)分表觀消化率的影響

由表3可知，在第44天，與對(duì)照組相比，溶血磷脂極顯著提高了EE的表觀消化率(P<0.01)，顯著提高了CP的表觀消化率(P<0.05)，而DM、NDF和ADF的表觀消化率均未出現(xiàn)顯著變化(P>0.05)。在第74天，與對(duì)照組相比，溶血磷脂極顯著提高了EE的表觀消化率(P<0.01)，顯著提高了CP的表觀消化率(P<0.05)，其余各項(xiàng)指標(biāo)均未出現(xiàn)顯著變化(P>0.05)。

2.3 溶血磷脂對(duì)肉牛血清抗氧化指標(biāo)的影響

由表4可知，在第44天的血清抗氧化指標(biāo)中，與對(duì)照組相比，溶血磷脂顯著降低了血清MDA含量(P<0.05)，但并未對(duì)其余指標(biāo)產(chǎn)生顯著影響(P>0.05)。在第74天的血清抗氧化指標(biāo)中，溶血磷脂顯著降低了血清MDA含量(P<0.05)，但并未對(duì)其余指標(biāo)產(chǎn)生顯著影響(P>0.05)。

表3 溶血磷脂對(duì)肉牛養(yǎng)分表觀消化率的影響

表4 溶血磷脂對(duì)肉牛血清抗氧化指標(biāo)的影響

2.4 溶血磷脂對(duì)肉牛血清代謝指標(biāo)的影響

由表5可知，在第44天時(shí)，與對(duì)照組相比，溶血磷脂能顯著降低血清TCHO含量(P<0.05)，且會(huì)使血清ALP活性表現(xiàn)出升高的趨勢(shì)(P=0.086)，對(duì)其余血清代謝指標(biāo)則無(wú)顯著影響(P>0.05)。在第74天時(shí)，溶血磷脂能顯著降低血清TCHO含量(P<0.05)，且會(huì)使血清ALP活性表現(xiàn)出升高的趨勢(shì)(P=0.061)，對(duì)其余血清代謝指標(biāo)則無(wú)顯著影響(P>0.05)。

3 討 論

3.1 溶血磷脂對(duì)肉牛生長(zhǎng)性能的影響

目前，有很多研究報(bào)道表明在飼糧中添加乳化劑能夠?qū)π笄莸纳L(zhǎng)性能產(chǎn)生積極的影響。黃寶銀等[10]研究發(fā)現(xiàn)，在西門塔爾肉牛飼糧中添加30 g/d的硬脂酰乳酸鈉能夠有效增加ADG，降低料重比。夏誠(chéng)[11]研究表明，在新疆褐牛飼糧中添加大豆磷脂可以提高肉牛的生長(zhǎng)性能。本試驗(yàn)結(jié)果表明，溶血磷脂能夠顯著提高安格斯肉牛的ADG。溶血磷脂提高生長(zhǎng)性能的作用是通過(guò)自身的多種特性實(shí)現(xiàn)的：一方面，溶血磷脂可以通過(guò)本身的乳化特性將飼糧中的脂肪在腸道中乳化為微小的乳糜微粒來(lái)促進(jìn)吸收[12]；另一方面，溶血磷脂可以促進(jìn)腸道中脂蛋白主要組成成分載脂蛋白B(ApoB)基因的表達(dá)，進(jìn)而提高腸道消化酶的活性[13]。本試驗(yàn)中，溶血磷脂可能是在二者的協(xié)同作用下改善了機(jī)體對(duì)養(yǎng)分的利用效率，從而提高了安格斯肉牛的生長(zhǎng)性能。

表5 溶血磷脂對(duì)肉牛血清代謝指標(biāo)的影響

3.2 溶血磷脂對(duì)肉牛養(yǎng)分表觀消化率的影響

機(jī)體對(duì)飼糧中養(yǎng)分的吸收可以通過(guò)表觀消化率得到一個(gè)直觀的體現(xiàn)，對(duì)動(dòng)物的生長(zhǎng)有著重要的影響。Melegy等[14]研究表明，溶血磷脂能夠有效地提高肉雞的飼料利用效率。Xing等[15]在含5%豬油的斷奶仔豬飼糧中添加0.02%溶血磷脂后發(fā)現(xiàn)，飼糧中EE和CP的表觀消化率得到了顯著的提高，這與本研究結(jié)果基本一致。本試驗(yàn)中，在安格斯肉牛飼糧中添加溶血磷脂可以顯著提高EE和CP的表觀消化率。出現(xiàn)該結(jié)果的原因可能是，溶血磷脂在腸道中可以形成更細(xì)小的乳糜微粒并促進(jìn)了消化酶的分泌[16]，或刺激了腸道上皮細(xì)胞中一些與養(yǎng)分吸收有關(guān)的通道蛋白[17]，增強(qiáng)了上皮細(xì)胞對(duì)于養(yǎng)分的吸收能力。

3.3 溶血磷脂對(duì)肉牛血清生化指標(biāo)的影響

在通常情況下畜禽能夠較好地應(yīng)對(duì)體內(nèi)自由基產(chǎn)生的傷害，機(jī)體抵御自由基的能力可以通過(guò)各項(xiàng)血清抗氧化指標(biāo)來(lái)體現(xiàn)。MDA是體內(nèi)脂類物質(zhì)被氧化后得到的最終產(chǎn)物，其在血清中的含量是衡量機(jī)體氧化損傷程度的指標(biāo)之一。SOD和GSH-Px則是體內(nèi)主要的抗氧化酶，可以清理氧自由基。T-AOC常用于衡量機(jī)體抗氧化的綜合能力。本試驗(yàn)中，溶血磷脂顯著降低了肉牛血清MDA含量，說(shuō)明溶血磷脂能夠有效地減少體內(nèi)脂質(zhì)過(guò)氧化物的含量，發(fā)揮一定的抗氧化作用。但是溶血磷脂對(duì)于血清其他抗氧化指標(biāo)均無(wú)顯著影響，這可能是由于溶血磷脂可以參與到細(xì)胞膜的修復(fù)過(guò)程中[18]，增強(qiáng)了細(xì)胞對(duì)自由基的抵抗能力，而不是通過(guò)調(diào)控抗氧化酶活性發(fā)揮作用；也可能是因?yàn)槿苎字ㄟ^(guò)自身較強(qiáng)的乳化能力，及時(shí)的清理了體內(nèi)過(guò)氧化的脂類物質(zhì)。

血清中ALT和AST的活性能在一定程度上反映肝細(xì)胞的損傷程度和蛋白質(zhì)合成能力，是肝功能檢測(cè)當(dāng)中的一項(xiàng)重要指標(biāo)，而血清中UN的含量則可以在側(cè)面反映出機(jī)體氮代謝的情況，進(jìn)而使飼糧中蛋白質(zhì)的利用情況得到一定的了解[19]。血清ALP活性與脂肪代謝有關(guān)，也能在一定程度上反映畜禽的生長(zhǎng)速度[20]。本試驗(yàn)結(jié)果顯示，溶血磷脂組與對(duì)照組相比，除ALP活性有升高趨勢(shì)以外，其余上述指標(biāo)均無(wú)顯著差異。這可能是由于溶血磷脂使肝功能得到了改善，進(jìn)而提高了ALP的活性[21]。據(jù)黃寶銀等[10]報(bào)道，在西門塔爾肉牛飼糧中添加30 g/d的硬脂酰乳酸鈉能顯著降低血清中AST的活性。這與本試驗(yàn)結(jié)果不一致，原因可能是使用的乳化劑材料不同。

血清中TP是由ALB和GLB共同組成的，與機(jī)體的免疫相關(guān)。本試驗(yàn)結(jié)果顯示，這3個(gè)指標(biāo)在溶血磷脂組和對(duì)照組之間均無(wú)顯著差異。侯炳剛等[22]報(bào)道，將大豆磷脂加入到奶牛飼糧中后未對(duì)血清中TP、ALB和GLB含量產(chǎn)生影響，與本試驗(yàn)結(jié)果基本一致。

在畜禽體內(nèi)脂肪通常經(jīng)由肝臟合成后以TG的形式貯存在體內(nèi)，并與機(jī)體對(duì)脂肪的動(dòng)員有直接關(guān)系。本試驗(yàn)結(jié)果顯示，溶血磷脂未對(duì)血清中TG含量造成顯著影響。陳紅等[23]報(bào)道，在奶牛飼糧中以1.0%、2.5%或4.0%的量添加大豆磷脂可使血清中TG含量得到顯著提升。這與本試驗(yàn)結(jié)果不同，這可能是由大豆磷脂添加量不同或乳化劑種類不同所引起的。TCHO也和機(jī)體的脂肪代謝有關(guān)，血清中的HDL-C會(huì)對(duì)TCHO造成影響，通常HDL-C含量升高會(huì)導(dǎo)致TCHO含量的降低，而LDL-C則是體內(nèi)膽固醇轉(zhuǎn)運(yùn)的主要形式[24]。本試驗(yàn)結(jié)果顯示，在飼糧中添加溶血磷脂后使血清中TCHO含量顯著降低，但并沒(méi)有使血清中HDL-C和LDL-C含量發(fā)生顯著改變。楊丹丹等[13]研究發(fā)現(xiàn)，在肉仔雞飼糧中添加溶血磷脂可降低血清中LDL-C含量，同時(shí)血清中HDL-C含量也出現(xiàn)了較為顯著的上升趨勢(shì)。Kim等[25]研究發(fā)現(xiàn)，飼糧中添加卵磷脂能有效降低育肥豬血清中LDL-C和TC含量，與本試驗(yàn)得到的結(jié)果有所不同，具體原因還有待研究。

4 結(jié) 論

溶血磷脂可以提高安格斯肉牛的ADG，增加其對(duì)飼糧中脂肪和蛋白質(zhì)的吸收能力，加強(qiáng)膽固醇在體內(nèi)的代謝，同時(shí)還能提高機(jī)體的抗氧化能力，緩解應(yīng)激。