鄧 萍 黃 璇,2* 姚亞鈴 李 闖,2 張 旭,2 蔣桂韜,2 張永勇 戴求仲,2**

(1.湖南省畜牧獸醫(yī)研究所，動物營養(yǎng)與飼養(yǎng)技術(shù)研究室，長沙410131；2.湖南家禽安全生產(chǎn)工程技術(shù)研究中心，長沙410128；3.懷化市畜牧水產(chǎn)事務(wù)中心，懷化418000；4.邵陽縣畜牧水產(chǎn)事務(wù)中心，邵陽422000)

維生素E(vitamin E)是一種天然強效抗氧化劑，能清除自由基、阻斷脂質(zhì)過氧化反應(yīng)、消除氧化應(yīng)激等造成的不良影響[1]。硒(Se)是家禽必需的微量元素，與家禽生長、繁殖、免疫力及種蛋孵化等密切相關(guān)[2]。與無機硒相比，有機硒具有毒性低、吸收利用率高、抗氧化能力強等特點[3]，因此有機硒(酵母硒、硒代蛋氨酸等)已逐漸成為無機硒(亞硒酸鈉)的替代品[4]。研究表明，禽類缺乏硒同時伴隨維生素E供給不足，會導(dǎo)致滲出性素質(zhì)、腦軟化癥和白肌病等營養(yǎng)代謝性疾病發(fā)生[5]。另外有研究認為維生素E和硒之間存在協(xié)同增效作用[6]，飼糧中添加硒可適當(dāng)降低維生素E的添加水平，硒和維生素E同時使用可協(xié)同維持細胞膜完整性，保護細胞免受活性氧損傷，阻斷脂質(zhì)氧化，提高機體的抗氧化性能[7]。諸多研究表明，飼糧中添加適宜水平維生素E[8]和硒[4]可提高蛋雞的產(chǎn)蛋率、種蛋孵化率以及蛋中維生素E和硒含量。咸蛋腌制過程中常通過在泥料中添加茶多酚、蝦青素和酵母硒等抗氧化劑，從而降低食鹽腌漬造成的蛋黃脂質(zhì)氧化分解，減少硬心和白心等問題[9]。目前關(guān)于產(chǎn)蛋高峰期蛋鴨飼糧中維生素E和硒推薦量的研究發(fā)現(xiàn)，20～40 IU/kg維生素E和0.20 mg/kg硒可滿足其生產(chǎn)需要[10]，而對維生素E和硒的協(xié)同效應(yīng)以及高添加水平對蛋鴨抗氧化能力的研究較少，特別是飼糧中高添加水平的維生素E和硒聯(lián)用對后期咸蛋品質(zhì)的影響尚未見報道，因此有必要開展深入研究。鑒于此，本試驗以產(chǎn)蛋高峰期攸縣麻鴨作為試驗動物，研究飼糧中添加維生素E、有機硒及二者聯(lián)用對產(chǎn)蛋高峰期攸縣麻鴨產(chǎn)蛋性能、蛋品質(zhì)、血清抗氧化指標(biāo)及咸蛋蛋黃品質(zhì)的影響，為維生素E和硒在蛋鴨飼料生產(chǎn)中科學(xué)應(yīng)用提供理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗設(shè)計

選用200只健康的產(chǎn)蛋高峰期攸縣麻鴨，隨機分成4個組，每組5個重復(fù)，每個重復(fù)10只鴨?；A(chǔ)飼糧參照小型蛋鴨營養(yǎng)需要量并結(jié)合本研究室已確定的攸縣麻鴨營養(yǎng)需要量參數(shù)配制。對照組(Ⅰ組)飼喂基礎(chǔ)飼糧(含維生素E 4.87 IU/kg，硒0.12 mg/kg)，試驗組(Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ組)分別在基礎(chǔ)飼糧中添加50 IU/kg維生素E、0.2 mg/kg硒、0.2 mg/kg硒+50 IU/kg維生素E。在保持其他營養(yǎng)水平一致基礎(chǔ)上，維生素E和有機硒添加劑量等量替代預(yù)混料中的沸石粉。試驗期為63 d。試驗采用玉米-豆粕型基礎(chǔ)飼糧，基礎(chǔ)飼糧組成及營養(yǎng)水平見表1。試驗用維生素E為維生素E乙酸酯，有效含量為50%；有機硒為亞硒酸二葡萄糖酯，硒含量為2 000 mg/kg。

表1 基礎(chǔ)飼糧組成及營養(yǎng)水平(風(fēng)干基礎(chǔ))

續(xù)表1項目 Items含量 Content營養(yǎng)水平 Nutrient levels2)代謝能 ME/(MJ/kg)10.58粗蛋白質(zhì) CP17.62鈣 Ca3.56總磷 TP0.65有效磷 AP0.29賴氨酸 Lys0.89蛋氨酸 Met0.43蛋氨酸+半胱氨酸 Met+Cys0.69蘇氨酸 Thr0.62硒 Se/(mg/kg)0.12維生素E VE/(IU/kg)4.87

1.2 飼養(yǎng)管理

試驗在湖南省畜牧獸醫(yī)研究所試驗鴨場進行，采用雙層籠上飼養(yǎng)。試驗全期自由采食和飲水(計量不限量)，按常規(guī)方法進行飼養(yǎng)管理。

1.3 樣品采集及指標(biāo)測定

1.3.1 產(chǎn)蛋性能

試驗期間每天按重復(fù)記錄產(chǎn)蛋總數(shù)、總蛋重、采食量，以組為單位統(tǒng)計平均蛋重、日產(chǎn)蛋重、產(chǎn)蛋率和平均日采食量，并計算料蛋比。

料蛋比=平均日采食量/日產(chǎn)蛋重。

1.3.2 蛋品質(zhì)

每組抽取接近平均蛋重的鴨蛋15枚(每個重復(fù)3枚)，4 ℃保存，在24 h之內(nèi)測定蛋黃比率(蛋黃重/蛋重)、蛋白比率、蛋殼厚度(蛋殼厚度測定儀)、蛋殼強度(蛋殼強度測定儀)、蛋形指數(shù)(游標(biāo)卡尺測量，蛋縱徑/蛋橫徑)、蛋黃顏色(蛋黃比色卡)及蛋白高度(蛋白高度測定儀)，并計算哈氏單位，計算公式為：

哈氏單位=100×log(H-1.7W0.37+7.57)。

式中：H為蛋白高度(mm)；W為蛋重(g)。

試驗結(jié)束時，每個重復(fù)收集2枚鴨蛋，利用氫化物-原子熒光光譜法(GB 5009.93—2017)測定飼糧和蛋黃中硒含量，利用高效液相色譜法(NY/T 1598—2008)測定飼糧和蛋黃中維生素E含量。

1.3.3 咸蛋蛋黃品質(zhì)

試驗結(jié)束時，每個重復(fù)選100枚新鮮鴨蛋，先將其放入黃泥漿中(含鹽率20.00%)浸泡，使蛋殼粘滿鹽泥，取出后滾上草木灰套上塑料袋置于竹簍碼放，腌制溫度控制在(20±5) ℃。腌制35 d后，每個重復(fù)隨機選取4枚咸蛋，參照GB/T 12457—2008測定蛋黃含鹽率，參照何美[11]的方法測定蛋黃出油率，參照GB 5009.3—2010測定蛋黃含水量。每個重復(fù)隨機取30枚咸蛋，煮熟后對半切開，統(tǒng)計硬心和白心的數(shù)量，硬心率和白心率分別為硬心和白心咸蛋個數(shù)與咸蛋總數(shù)(30枚)的比值。采用質(zhì)構(gòu)分析儀(CTX，博勒飛，美國)測定煮熟后的蛋黃質(zhì)構(gòu)性質(zhì)(硬度和咀嚼性)。

1.3.4 血清生化指標(biāo)

在試驗結(jié)束時，每個重復(fù)隨機選取體重相近的試驗鴨2只，空腹12 h后，翅下靜脈采血5 mL，靜置30 min后，3 000 r/min離心15 min，分離血清，-20 ℃保存。用全自動生化分析儀(URIT-8000，優(yōu)利特，美國)檢測血清中總蛋白(TP)、白蛋白(ALB)、尿酸(UA)、總膽固醇(TC)、甘油三酯(TG)、葡萄糖(GLU)、高密度脂蛋白(HDL)、低密度脂蛋白(LDL)含量以及堿性磷酸酶(ALP)活性。采用比色法檢測血清中超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-Px)、過氧化氫酶(CAT)活性和丙二醛(MDA)、谷胱甘肽(GSH)含量以及總抗氧化能力(T-AOC)。試劑盒均購自南京建成生物工程研究所。

1.4 數(shù)據(jù)處理

試驗數(shù)據(jù)利用Excel 2019初步處理，并用SPSS 19.0軟件進行單因素方差分析，然后通過Duncan氏法進行多重比較。試驗結(jié)果用平均值和均值標(biāo)準(zhǔn)誤(SEM)表示，P<0.05為差異顯著，P<0.01為差異極顯著。

2 結(jié) 果

2.1 飼糧中添加維生素E和有機硒對攸縣麻鴨產(chǎn)蛋性能的影響

由表2可知，飼糧中添加維生素E和有機硒對試驗鴨的平均日采食量和平均蛋重均無顯著影響(P>0.05)。Ⅱ、Ⅲ和Ⅳ組的產(chǎn)蛋率和日產(chǎn)蛋重均顯著高于對照組(P<0.05)。Ⅱ、Ⅲ和Ⅳ組的料蛋比均顯著低于對照組(P<0.05)，其中Ⅳ組料蛋比最低。

表2 飼糧中添加維生素E和有機硒對攸縣麻鴨產(chǎn)蛋性能的影響

2.2 飼糧中添加維生素E和有機硒對攸縣麻鴨蛋品質(zhì)及蛋黃中維生素E和硒含量的影響

由表3可知，飼糧中添加維生素E和有機硒對試驗鴨蛋殼強度、蛋殼厚度、蛋黃比例、蛋形指數(shù)、蛋黃顏色、哈夫單位和蛋白高度均無顯著影響(P>0.05)。Ⅲ和Ⅳ組的蛋黃硒含量顯著高于對照組(P<0.05)。Ⅱ和Ⅳ組的蛋黃維生素E含量顯著高于對照組(P<0.05)。

表3 飼糧中添加維生素E和有機硒對攸縣麻鴨蛋品質(zhì)及蛋黃中維生素E和硒含量的影響

2.3 飼糧中添加維生素E和有機硒對攸縣麻鴨血清生化指標(biāo)的影響

由表4可知，飼糧中添加維生素E和有機硒對試驗鴨血清中GLU、TG、TC、HDL、LDL、TP、ALB、UA含量和ALP、CAT、SOD活性以及T-AOC均無顯著影響(P>0.05)。Ⅱ、Ⅲ和Ⅳ組的血清中MDA含量顯著低于對照組(P<0.05)。Ⅱ、Ⅲ和Ⅳ組的血清中GSH含量和GSH-Px活性均顯著高于對照組(P<0.05)。

表4 飼糧中添加維生素E和有機硒對攸縣麻鴨血清生化指標(biāo)的影響

2.4 飼糧中添加維生素E和有機硒對咸蛋蛋黃品質(zhì)的影響

由表5可見，飼糧中添加維生素E和有機硒對試驗鴨咸蛋蛋黃含鹽率、出油率、水分含量、硬度、咀嚼性、白心率均無顯著影響(P>0.05)。Ⅱ、Ⅲ和Ⅳ組的咸蛋蛋黃硬心率顯著低于對照組(P<0.05)，Ⅳ組硬心率顯著低于Ⅱ和Ⅲ組(P<0.05)。

表5 飼糧中添加維生素E和有機硒對咸蛋蛋黃品質(zhì)的影響

3 討 論

3.1 飼糧中添加維生素E和有機硒對攸縣麻鴨產(chǎn)蛋性能和蛋品質(zhì)的影響

諸多研究表明，飼糧中添加硒對蛋禽平均日采食量、日產(chǎn)蛋量和平均蛋重均無顯著影響[12-15]。然而也有報道指出，當(dāng)飼糧硒含量低于蛋禽最低需要量時，其對產(chǎn)蛋性能才有顯著影響[2]。張宏馨[16]研究發(fā)現(xiàn)，0～80 IU/kg維生素E對海蘭褐種母雞產(chǎn)蛋性能無顯著影響，但飼糧中添加160和320 IU/kg維生素E可顯著提高產(chǎn)蛋率。另外關(guān)于飼糧中同時添加維生素E和硒的飼用效果，石慧芹等[17]報道飼糧中添加50 IU/kg維生素E、0.5 mg/kg酵母硒及二者聯(lián)用可顯著提高海蘭灰蛋雞的平均蛋重。本試驗結(jié)果顯示，飼糧中添加50 IU/kg維生素E、0.2 mg/kg有機硒和二者聯(lián)用可顯著提高產(chǎn)蛋率和日產(chǎn)蛋重，且顯著降低料蛋比，但對平均日采食量和平均蛋重?zé)o顯著影響。本試驗結(jié)果與上述的結(jié)果存在一定差異，分析其原因可能是本試驗飼糧中維生素E和有機硒均為高添加水平，均高于我國《肉鴨飼養(yǎng)標(biāo)準(zhǔn)》(NY/T 2122—2012)中肉蛋兼用型鴨維生素E(20 IU/kg)和硒(0.2 mg/kg)的推薦水平，且有機硒利用效率高于亞硒酸鈉，所以試驗鴨表現(xiàn)出產(chǎn)蛋率顯著提高和料蛋比顯著降低。

石慧芹等[17]研究表明，飼糧中添加50 IU/kg維生素E可提高蛋黃顏色，但飼糧中添加0.50 mg/kg酵母硒對蛋雞的蛋黃顏色、哈氏單位和蛋殼厚度等蛋品質(zhì)指標(biāo)均無顯著影響。另外有研究發(fā)現(xiàn)，蛋雞飼糧中添加不同水平的酵母硒[18](0.20～1.00 mg/kg)或維生素E[12](0～400 IU/kg)對蛋品質(zhì)無顯著影響。本試驗顯示，飼糧中添加維生素E和有機硒對攸縣麻鴨的蛋殼強度、蛋殼厚度、哈夫單位、蛋黃顏色、蛋白高度等均無顯著影響。本試驗結(jié)果與Mohiti-Asli等[13]和Pan等[18]的報道基本一致，提示高添加水平維生素E、有機硒以及二者聯(lián)用對蛋品質(zhì)無顯著影響。

3.2 飼糧中添加維生素E和有機硒對攸縣麻鴨咸蛋蛋黃品質(zhì)的影響

為解決咸蛋蛋黃硬心、白心和出油出沙的比例不高等問題，常在泥料中添加茶多酚、維生素C和酵母硒等抗氧化劑來改善[9]。維生素E和有機硒均具有良好抗氧化作用，可應(yīng)用于食品保鮮。諸多研究認為飼糧中添加維生素E和硒可提高蛋中維生素E和硒的含量，延長其貨架期[13-15,17]。本試驗研究發(fā)現(xiàn)，在相同腌制條件下，飼糧中添加維生素E和有機硒可顯著降低咸蛋蛋黃硬心率，且二者聯(lián)用組硬心率最低，顯著低于其他3組。這可能與飼糧中高添加水平的維生素E和有機硒提高了其在蛋中沉積量，從而降低蛋黃在腌制過程中脂質(zhì)過氧化物的形成，增加蛋黃脂質(zhì)的穩(wěn)定性，促使蛋黃在腌制過程中出油均勻，從而降低蛋黃的硬心和白心的發(fā)生，而二者聯(lián)用對蛋黃脂肪酸氧化的抑制可起到協(xié)同增效作用。另外，從血清中MDA含量來看，維生素E、有機硒以及二者聯(lián)用時試驗鴨血清中MAD含量顯著降低，說明維生素E和有機硒可減少機體自由基作用于脂質(zhì)發(fā)生過氧化反應(yīng)。

3.3 飼糧中添加維生素E和有機硒對攸縣麻鴨血清生化指標(biāo)的影響

硒具有脂蛋白調(diào)節(jié)功能，機體缺硒血清中TC和TG含量會升高[19]。Dou等[20]研究表明，在糖尿病模型大鼠高能飼糧中添加750 IU/kg維生素E可顯著降低血清中TC和LDL含量。在本試驗條件下，飼糧中添加維生素E、有機硒以及二者聯(lián)用對攸縣麻鴨血清中TP、GLU、UA、TC、TG、HDL和LDL等含量均無顯著影響。因此，我們認為基礎(chǔ)飼糧(含維生素E 4.87 IU/kg，硒0.12 mg/kg)即可平衡機體氮和脂質(zhì)代謝，可滿足攸縣麻鴨生產(chǎn)需要。

維生素E廣泛分布于機體組織中，其抗氧化功能主要作用在生物膜上[1]；硒參與GSH-Px的合成，GSH-Px催化GSH清除自由基保護細胞膜[3]。有研究認為，在抗氧化功能方面，維生素E和微量元素硒具有協(xié)同增效作用[6,21]。本研究中，飼糧中添加維生素E和有機硒可顯著提高血清中GSH含量和GSH-Px活性，降低血清中MDA含量。雖二者聯(lián)用時血清中GSH含量以及GSH-Px活性最高，血清中MDA含量最低，但與單獨添加維生素E和有機硒組相比，二者聯(lián)用未見顯著協(xié)同作用。因此從本試驗結(jié)果來看，維生素E和有機硒可能通過提高血清中GSH-Px活性，保護細胞膜免受氧化損傷，防止機體細胞膜脂質(zhì)結(jié)構(gòu)遭到破壞。這一結(jié)果與Sun等[22]和Ghanaatparast-Rashti等[23]的研究結(jié)果基本一致，然而維生素E和有機硒互作關(guān)系和作用機理還有待進一步研究。

4 結(jié) 論

① 飼糧中添加維生素E、有機硒以及二者聯(lián)用可提高產(chǎn)蛋高峰期攸縣麻鴨的產(chǎn)蛋性能和抗氧化能力。

② 飼糧中添加維生素E、有機硒可顯著降低咸蛋蛋黃硬心率，且二者聯(lián)用存在協(xié)同增效作用。