王運盛，鄭常明，國欣欣，趙素芬，盧巖，張成林,*

(1.北京動物園，北京 100044；2.圈養(yǎng)野生動物技術(shù)北京市重點實驗室，北京 100044)

消化系統(tǒng)包括消化道與消化腺，其作用在于參與機體營養(yǎng)物質(zhì)的消化、吸收和排泄。在圈養(yǎng)的野生動物疾病中，消化系統(tǒng)疾病較為常見[1]，其中食草野生動物胰腺炎常有發(fā)生。而由于野生動物病理學(xué)診斷技術(shù)落后，相關(guān)動物胰腺炎病理診斷較為少見，可以作為診斷參考的病理學(xué)資料相對匱乏。本文對北京動物園旋角羚死亡組織樣本進行病理學(xué)觀察，并結(jié)合臨床診斷資料，得出死因為急性胰腺炎，為今后相關(guān)野生動物疾病的病理學(xué)診斷提供了參考依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 病料來源

北京動物園飼養(yǎng)的1只雌性旋角羚，2016年1月25日出現(xiàn)精神沉郁、四肢顫抖、站立困難、腹痛、全身肌肉緊張等癥狀，經(jīng)治療無效于2016年1月27日死亡。死亡后立即剖檢，取肝、胰、腸等組織，迅速投入到10%的福爾馬林液中進行病理組織切片前處理。

1.2 試驗方法

石蠟切片分別經(jīng)二甲苯Ⅰ、Ⅱ脫蠟5min，之后浸入無水乙醇/二甲苯(1∶1)混合液中5min，依次經(jīng)無水乙醇Ⅰ、無水乙醇Ⅱ、95%乙醇、85%乙醇、75%乙醇、50%乙醇梯度復(fù)水，下行至雙蒸水中，蘇木精染色 10min，1%鹽酸酒精分色數(shù)秒，水洗返藍15min，再依次通過50%乙醇、75%乙醇、85%乙醇、95%乙醇梯度脫水后，伊紅染色1min，95%乙醇洗滌3次，再經(jīng)無水乙醇Ⅰ、Ⅱ各5min，二甲苯Ⅰ、Ⅱ各透明5min，最后用中性樹膠封片。切片放置于37℃溫箱內(nèi)過夜烘干后鏡檢，光學(xué)顯微鏡下觀察組織病理學(xué)變化情況。

2 結(jié)果

2.1 剖檢結(jié)果

尸體被毛完整,尸僵不完全(圖1A)；肛門松弛，內(nèi)有大量顆粒糞便，肛門周圍黏膜充血(圖1B)。肝臟腫大，表面有明顯的出血斑(圖1C)；胰腺水腫，出血(圖1D)，胰腺周圍脂肪硬化，呈現(xiàn)污黃色(圖1E)。瘤胃內(nèi)充滿大量泡沫狀綠色液體；皺胃黏膜呈暗紅色；小腸段黏膜暗紅色(圖1F)。

圖1 旋角羚臨床剖檢觀察

2.2 組織病理學(xué)觀察結(jié)果

肝臟：低倍鏡下觀察肝包膜異常增厚，肝瘀血，肝竇內(nèi)部分區(qū)域充斥著大量紅細胞。肝臟邊緣除被膜增厚外，大量肝細胞壞死，壞死后的肝細胞僅殘存細胞輪廓，呈淡粉染無結(jié)構(gòu)樣(圖2A)。高倍鏡下肝臟中心區(qū)域肝索排列紊亂，肝竇中充滿紅細胞；肝組織瘀血現(xiàn)象嚴重。肝細胞顆粒變性、水泡變性明顯，部分區(qū)域肝細胞壞死、消失(圖2B)。

胰腺：低倍鏡下觀察胰腺組織內(nèi)大量腺細胞壞死，細胞間充斥著少量紅細胞(圖2C)。高倍鏡下可見胰腺壞死區(qū)域內(nèi)腺泡消失，由均質(zhì)粉紅染絮狀物代替；未發(fā)生壞死區(qū)域，腺細胞從基膜脫落，腺細胞內(nèi)酶原顆粒增多，同時腺細胞水泡變性，小葉間結(jié)締組織增生明顯，紅細胞充斥于腺細胞之間(圖2D)。

胰腺周圍脂肪：低倍鏡下觀察，脂肪組織出血、壞死明顯。出血區(qū)域的脂肪組織內(nèi)紅細胞大量瘀積，部分紅細胞進入脂肪細胞內(nèi)，同時由于脂肪細胞內(nèi)紅細胞破裂，部分脂肪細胞內(nèi)出現(xiàn)含鐵血紅素(圖2E)。壞死脂肪細胞僅存留細胞輪廓，脂肪細胞內(nèi)原有“空泡樣”結(jié)構(gòu)變?yōu)榈廴拘鯛?圖2F)。

小腸：低倍鏡下觀察小腸絨毛固有層出血嚴重，部分腸絨毛脫落于腸腔中，同時固有層脫離于黏膜肌層(圖2G)，高倍鏡觀察小腸絨毛固有層可見大量淋巴細胞及中性粒細胞浸潤，結(jié)締組織增生明顯(圖2H)。

圖2 旋角羚臟器病理學(xué)觀察

3 診斷

經(jīng)臨床剖檢與組織病理學(xué)觀察，發(fā)現(xiàn)死亡旋角羚肝、胰腺、腸道病變明顯，肝臟出現(xiàn)細胞壞死、纖維化，呈胰腺急性炎癥表現(xiàn)，小腸急性出血，最后導(dǎo)致旋角羚死亡。診斷該旋角羚為急性胰腺炎致死。

4 討論

胰腺炎(pancreatitis)屬于消化系統(tǒng)疾病，多見于胰蛋白酶的自身消化引起，常呈急性經(jīng)過，本病常見于各種屬動物，而草食動物多發(fā)。胰腺炎通常由胰導(dǎo)管阻塞和胰液回流導(dǎo)致，胰液被膽汁和腸激酶作用后轉(zhuǎn)變?yōu)榛钚砸鹊鞍酌?，引起胰腺組織壞死、溶解。同時胰液外溢后可引發(fā)急性腹膜炎及胰腺周圍脂肪壞死[2]。

臨床表現(xiàn)上，眼觀胰腺腫大、充血，嚴重時可見滲出性出血、質(zhì)地變硬、切面多汁；鏡檢可見腺泡水腫壞死，間質(zhì)充血、出血、水腫顯著，有時可見少量嗜中性粒細胞和單核細胞等炎性細胞浸潤，在病變明顯病例中，有時可發(fā)生局限性脂肪壞死。脂肪壞死后會形成鈣皂導(dǎo)致低血鈣癥出現(xiàn)，進而導(dǎo)致低血鉀和低血鈉，嚴重時可引起死亡[2]。

在本病例中，旋角羚生前各項體征均眼觀良好，而發(fā)病、死亡時間在1月下旬，所以，本次旋角羚急性胰腺炎的發(fā)生很可能是由氣溫驟降引起。根據(jù)病理診斷發(fā)現(xiàn)該旋角羚肝臟出現(xiàn)纖維化，表明肝臟病變已持續(xù)一段時間，肝臟的持續(xù)性病變導(dǎo)致旋角羚消化系統(tǒng)功能障礙、體質(zhì)下降，而氣溫驟降則導(dǎo)致急性胰腺炎發(fā)生，胰腺炎發(fā)生后機體消化系統(tǒng)功能遭到進一步破壞，導(dǎo)致急性腸炎的出現(xiàn)。本病例也反映出野生動物疾病診治的難點，即野生動物耐受性較高，尤其是大中型圈養(yǎng)野生動物，患病后的潛伏期較長，潛伏期內(nèi)臨床表現(xiàn)不明顯或不表現(xiàn)，導(dǎo)致患病動物臨床癥狀明顯后迅速死亡。

因此，在處理沒有明顯臨床表現(xiàn)而突然死亡的野生動物時，盡快辨明死亡原因，并根據(jù)死因確定后續(xù)防治工作，顯得尤為重要。該病例診斷結(jié)束后，及時對旋角羚生活環(huán)境采取了保溫、升溫，加強飼養(yǎng)管理，其余旋角羚未發(fā)病，均平穩(wěn)過冬。

5 結(jié)論

本研究采用病理學(xué)技術(shù)，對北京動物園突發(fā)死亡旋角羚進行病理學(xué)診斷，分析得出旋角羚死于急性胰腺炎，此病例的完成，為今后野生動物急性胰腺炎的病理學(xué)診斷提供了較為可靠的基礎(chǔ)資料。