劉月新，鄒茜，袁園，廖穎妍

(湖南中醫(yī)藥大學(xué)藥學(xué)院， 湖南 長沙 410208)

中藥玉竹又名葳蕤、萎蕤、女萎，為百合科(Liliaceae)黃精屬植物玉竹[Polygonatumodoratum(Mill.) Druce]的干燥根莖[1-3]，是一種具有藥食兩用價值的中藥材。其具有降血糖、抗腫瘤、抗衰老、調(diào)節(jié)糖脂代謝以及促進人體自身免疫調(diào)節(jié)等多種藥理活性，并且無任何毒副作用，在醫(yī)藥、功能性食品等眾多領(lǐng)域有著廣泛的應(yīng)用，具有廣闊的開發(fā)前景[4-6]。

現(xiàn)代醫(yī)學(xué)研究表明，金屬元素對人的身體健康、生長、發(fā)育和疾病防治有著密切關(guān)系[7]。金屬元素同樣具有藥用活性，被認(rèn)為是藥效物質(zhì)基礎(chǔ)。金屬元素應(yīng)作為衡量藥材質(zhì)量的指標(biāo)之一。本文采用火焰原子吸收分光光度法測定Fe、Mg、K、Cu、Mn 5種元素的含量，探討其差異性。此外，中藥的傳統(tǒng)劑型是水煎劑，水煎液中的物質(zhì)才是最終進入人體起效的物質(zhì)。因此，研究金屬元素的水溶特性對于研究玉竹的物質(zhì)基礎(chǔ)也具有重要意義。本文旨在從金屬元素的角度認(rèn)識玉竹功效的物質(zhì)基礎(chǔ)，并對玉竹藥材質(zhì)量進行初步評價，豐富和發(fā)展玉竹多指標(biāo)質(zhì)量評價體系。

1 試驗材料

1.1 儀器設(shè)備 Thermo Scientific iCE 3000原子吸收光譜儀(英國Thermo公司)；Fe、Mg、K、Cu、Mn空心陰極燈(英國Thermo公司)；RT-04A 型高速粉碎機(香港泓荃制藥機械公司)；P60-CW國之源超純水機(科爾頓水務(wù)有限公司)；SQP型電子分析天平(賽多利科學(xué)儀器北京有限公司)。

1.2 試劑 硝酸(GR，湖南株洲開發(fā)區(qū)石英化玻有限責(zé)任公司試劑廠)；70%過氧化氫(GR,國藥集團化學(xué)試劑有限公司)；Fe、Mg、K、Cu、Mn標(biāo)準(zhǔn)溶液(含量均為1 000 mg·L-1，國家環(huán)境保護總局標(biāo)準(zhǔn)樣品研究所)；試驗用水為超純水，其他試劑均為分析純。所用玻璃儀器均用10%硝酸浸泡過夜，去離子水洗滌備用。

1.3 試藥 市售17批玉竹藥材飲片分別購自黑龍江、湖南、安徽、湖北和陜西各地，經(jīng)湖南中醫(yī)藥大學(xué)藥學(xué)院王智教授鑒定為百合科(Liliaceae)黃精屬植物玉竹[Polygonatumodoratum(Mill.) Druce]的干燥根莖，以上樣品置于105 ℃烘箱內(nèi)烘干，經(jīng)中藥粉碎機粉碎，過50目篩，保存?zhèn)溆?。各樣品來源信息見?。

表1 樣品來源信息表

2 方法與結(jié)果

2.1 工作條件 本試驗采用空氣-乙炔火焰原子吸收光譜法進行測定。儀器最佳工作條件通過試驗最終確定(見表2)。

表2 儀器工作條件

2.2 玉竹供試品溶液的制備 分別精密稱取各玉竹樣品粉末1.000 0 g，置于聚四氟乙烯消解罐中，各加入混酸溶液(硝酸∶過氧化氫=4∶1)10 mL，搖勻，加蓋，靜置過夜。次日，將其置于通風(fēng)櫥內(nèi)加熱板上緩慢加熱消解，保持微沸至冒白煙，溶液蒸發(fā)至近干，呈澄清透明或微黃色為止，冷卻至室溫，加入超純水定容至100 mL容量瓶，搖勻備用。同法制備空白溶液。

2.3 玉竹水煎液供試品溶液的制備 分別精密稱取玉竹樣品粉末10 g，加超純水250 mL，浸泡40 min，煮沸后文火保持微沸45 min，紗布過濾，再用少量熱水淋洗，得濾液；同法，藥渣再加水150 mL，煎煮35 min，合并兩次濾液，減壓濃縮，超純水稀釋調(diào)整為20 g，備用。精密稱取各玉竹水煎液1.800 0 g，置于聚四氟乙烯消解罐中，按照“2.2”項下消解方法處理各個樣品，即得各玉竹水煎液供試品溶液。

2.4 對照品溶液的制備 分別將1 000 mg·L-1的Fe、Mg、K、Cu、Mn標(biāo)準(zhǔn)溶液稀釋10倍，成100 mg·L-1。各精密移取0、1、2、5、10、20、30 mL于50 mL容量瓶中，用1%硝酸稀釋定容至刻度。得到一系列濃度分別為0、2、4、10、20、40、60 mg·L-1的Fe、Mg、K、Cu、Mn標(biāo)準(zhǔn)液。

2.5 線性關(guān)系考察 5種元素均采用校準(zhǔn)曲線法進行含量測定，按照“2.1”項下儀器最佳工作條件，以吸光度為縱坐標(biāo)(Y)，濃度為橫坐標(biāo)(X)，繪制各元素標(biāo)準(zhǔn)曲線。結(jié)果表明，各元素在0～60 mg·L-1范圍內(nèi)線性關(guān)系良好。相關(guān)系數(shù)見表3。

表3 線性回歸方程和相關(guān)系數(shù)

2.6 金屬元素含量和水溶特性的測定 按照“2.2”“2.3”項下方法處理各個樣品，“2.1”項下儀器最佳工作條件進行測定，每份樣品平行測定3次得平均值。測得各玉竹藥材飲片供試品和水煎液中金屬元素的含量，并得各元素在水煎液中的提取效率，結(jié)果見表4～5。

表4 玉竹藥材各元素含量測定結(jié)果

表5 玉竹水煎液元素水溶特性測定結(jié)果

2.7 方法學(xué)考察

2.7.1 精密度試驗 精密稱取玉竹樣品粉末1.008 3 g，按“2.6”項下的方法進行操作，連續(xù)進樣5次，測定5種元素的含量，計算各元素的RSD值，各元素的RSD值在1.21%～3.67%，表明儀器的精密度良好，其中Fe為3.67%，Mg為2.89%，K為3.06%，Cu為1.60%，Mn為1.21%。

2.7.2 重復(fù)性試驗 精密稱取玉竹藥材粉末1.000 6 g，按“2.6”項下方法操作，平行制備5份供試品溶液，測定5種元素的含量。計算各元素的RSD值，各元素的RSD值在1.03%～4.86%，其中Fe為1.27%，Mg為2.75%，K為4.86%，Cu為1.96%，Mn為1.03%，表明該方法的重復(fù)性良好。

2.7.3 穩(wěn)定性試驗 精密稱取玉竹樣品粉末1.001 2 g，按“2.6”項下方法操作，制備供試品溶液，分別于制樣后0、2、8、12和24 h進樣，測定5種元素的含量。各元素的RSD值在1.34%～5.17%，其中Fe為1.67%，Mg為5,17%，K為3.58%，Cu為2.04%，Mn為1.34%，表明各元素在24 h內(nèi)穩(wěn)定性良好。

2.7.4 加樣回收試驗 精密稱取已知含量的玉竹樣品粉末1.000 7 g，共6份，分別精密加入一定量各元素相應(yīng)的對照品溶液，依照“2.3”項下供試品溶液配制方法及“2.1”項下儀器工作最佳條件進行測定，計算各測定元素的回收率及RSD值。其中各元素的平均回收率在89.58%～102.43%，RSD值在1.01%～4.97%，表明該方法回收率良好。

3 討論

本文采用火焰原子吸收分光光度法對不同產(chǎn)地中藥玉竹飲片及其水煎液進行5種微量元素的含量測定，研究其元素含量的變化及水溶特性。

玉竹中各元素含量測定結(jié)果表明，5種元素的含量差別顯著，其中玉竹飲片中各元素含量大小依次為：K>Mg>Fe>Mn>Cu。而在玉竹水煎液中各元素含量大小依次為：K>Mg>Mn>Fe>Cu。并不呈現(xiàn)對應(yīng)關(guān)系。在玉竹水煎液中，5種元素的水溶特性測定結(jié)果表明，不同元素的提取率差別很大，Mg、K的提取率較高，Mn、Cu的提取率次之，而Fe的提取率最低，僅平均為1.46%，影響了它在水煎液中的含量，原因可能是各元素在水煎液中存在形式不同，一些元素在水中以離子形式存在而易溶于水，而Fe在水煎液中可能與玉竹中有機分子結(jié)合形成穩(wěn)定的金屬配合物，導(dǎo)致其溶出度低。

本研究測定不同產(chǎn)地玉竹的金屬元素含量，結(jié)果表明，玉竹中不僅含有豐富的K、Mg等常量元素，還含有Fe、Mn、Cu等微量元素，在測定的5種元素中，K的含量最高，平均達(dá)到4 399.14 μg·g-1，比其他測定元素含量高出2～3個數(shù)量級。Cu的含量最低，平均為2.82 μg·g-1，其中湖南產(chǎn)玉竹中的Fe、Mn含量高于其他產(chǎn)地玉竹。陜西產(chǎn)玉竹中K、Cu的含量高于其他產(chǎn)地。分析原因，可能與玉竹地域、生長環(huán)境、土壤、肥料等因素有關(guān)[8-9]。

不同金屬元素在人體會產(chǎn)生不同的功效。K、Mg元素是人體必需的常量元素，主要生理作用是維持細(xì)胞的新陳代謝，在保護人體心血管，預(yù)防心臟病等方面具有積極作用[10-11]。K參與糖類、蛋白質(zhì)的正常代謝。支持健康的血壓，這有助于降低中風(fēng)和心血管疾病的風(fēng)險。

Fe、Mn、Cu是人體內(nèi)必須微量元素。Fe對血液的生成起著非常重要的作用。它是血紅蛋白的重要部分，還是許多酶和免疫系統(tǒng)化合物的成分。Mn參與多種酶的合成與激活，參與造血過程，調(diào)節(jié)內(nèi)分泌，參與機體糖、脂肪的代謝，也是超氧化物歧化酶的重要組成部分，可以有效清除體內(nèi)過剩的自由基，提高機體免疫功能。Cu元素可改善造血功能、降低膽固醇、增加酶的活性及降低血管脆性[12-13]。在今后的研究中我們會繼續(xù)研究玉竹所含金屬元素與其養(yǎng)陰潤燥，保健抗衰，鎮(zhèn)靜強心，降血脂、血糖等功效的相關(guān)性。分析金屬元素對玉竹藥性和藥效影響機制的研究。

本研究開展了金屬元素水溶特性及含量差異性的研究，從金屬元素含量差異性角度探討不同產(chǎn)地玉竹藥材質(zhì)量差距較大的原因。本研究為全面控制玉竹藥材質(zhì)量提供參考依據(jù)，對豐富和發(fā)展玉竹質(zhì)量評價體系具有重要意義，并有助于進一步闡明玉竹的藥效物質(zhì)基礎(chǔ)。