趙 倩李勁草王 蕭*張有志*

(1.廣州中醫(yī)藥大學(xué)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中心,廣州 511400；2.軍事科學(xué)院軍事醫(yī)學(xué)研究院毒物藥物研究所,抗毒藥物與毒理學(xué)國(guó)家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,北京 100089)

失眠癥是指在睡眠時(shí)間充足、環(huán)境適宜的情況下發(fā)生入睡或睡眠維持困難,并導(dǎo)致日間功能障礙的神經(jīng)精神疾病,以入睡困難、頻繁覺(jué)醒、早醒和非恢復(fù)性睡眠為主要癥狀[1]。 作為最常見(jiàn)的睡眠障礙,失眠在我國(guó)發(fā)病率約為40%,其中6%～10%的人被確診為長(zhǎng)期失眠[2]。 臨床常用苯二氮卓類和非苯二氮卓類等化學(xué)藥物進(jìn)行治療,作用范圍有限且依賴性,無(wú)法從根本上治愈睡眠問(wèn)題,而天王補(bǔ)心丹具有治療廣泛、不易產(chǎn)生成癮性和耐藥性,在失眠防治上具有潛在獨(dú)特優(yōu)勢(shì)。

中醫(yī)對(duì)失眠的認(rèn)識(shí)和治療歷史悠久,中醫(yī)稱失眠為“不寐”、“不得臥”、“目不瞑”,認(rèn)為由心神失養(yǎng)或心神不安所致。 天王補(bǔ)心丹源起于宋代《校注婦人良方》,方可“寧心保神,益血固精……祛煩熱,除驚悸”,有補(bǔ)心安神,滋陰養(yǎng)血的功效,是治療陰虧血少,虛煩少寐的經(jīng)典名方[3]。 大量臨床及實(shí)驗(yàn)研究證實(shí),天王補(bǔ)心丹和方中生地,酸棗仁、五味子、茯苓等可顯著提高睡眠質(zhì)量,但發(fā)病機(jī)制尚不清楚,基于患者的臨床實(shí)驗(yàn)有一定的局限性,因此建立理想動(dòng)物模型十分必要。 理想動(dòng)物模型應(yīng)具備3 個(gè)原則,即表觀效度、結(jié)構(gòu)效度、預(yù)測(cè)效度,即疾病動(dòng)物模型應(yīng)與人類疾病具有相似的癥狀表現(xiàn)和病理生理機(jī)制,并且對(duì)經(jīng)典治療藥物產(chǎn)生相似的反應(yīng)性。 目前研究常用的失眠模型較為單一。 本文對(duì)近10 余年失眠動(dòng)物模型在天王補(bǔ)心丹中的應(yīng)用文獻(xiàn)進(jìn)行了匯總,從實(shí)驗(yàn)動(dòng)物種類、造模方法、評(píng)價(jià)指標(biāo)等方面總結(jié)天王補(bǔ)心丹在失眠動(dòng)物模型的研究進(jìn)展,為此方在治療失眠的基礎(chǔ)研究與臨床應(yīng)用中提供新的思路和方法。

1 文獻(xiàn)分析

通過(guò)3 大數(shù)據(jù)庫(kù),以“失眠”“模型”和“天王補(bǔ)心丹”為主題,時(shí)間設(shè)定為2010 年1 月～2021 年12月進(jìn)行檢索,其中CNKI 數(shù)據(jù)庫(kù)檢索到期刊文獻(xiàn)25篇,萬(wàn)方數(shù)據(jù)庫(kù)5 篇,維普數(shù)據(jù)庫(kù)0 篇,選擇研究失眠的全部動(dòng)物實(shí)驗(yàn)文獻(xiàn)、碩博論文、排除綜述類文獻(xiàn)及3 大數(shù)據(jù)庫(kù)中重復(fù)的文獻(xiàn),最終有12 篇文獻(xiàn)符合檢索要求。 同理,將“天王補(bǔ)心丹”替換為“地黃”“酸棗仁”“五味子”“茯苓”后依次有 3 篇、13 篇、7篇、3 篇文獻(xiàn)符合檢索要求。 筆者對(duì)其組方及方中單藥對(duì)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物種類、動(dòng)物模型、造模方法、評(píng)價(jià)指標(biāo)及模型使用頻次進(jìn)行整理如表1 和表2。

表1 天王補(bǔ)心丹常用實(shí)驗(yàn)動(dòng)物種類、動(dòng)物模型、造模方法及評(píng)價(jià)指標(biāo)Table 1 Animal models, modeling methods and evaluation indexes of common experimental animals of TWBXD

表2 天王補(bǔ)心丹中單味藥-地黃、酸棗仁、五味子、茯苓的常用實(shí)驗(yàn)動(dòng)物種類、動(dòng)物模型、藥物劑量及模型使用頻次Table 2 Common experimental animal species, animal model, drug dose and model use frequency of single drug in Tianwang Buxin Dan-rehmannia glutinosa, jujube seed, schisandra fruit and tuckahoe

2 PCPA 模型

對(duì)氯苯丙氨酸(PCPA) 作為 5-羥色胺(5-hydroxytryptamine,5-HT)合成抑制劑,在失眠模型中應(yīng)用廣泛。 戊巴比妥鈉閾上或閾下劑量協(xié)同實(shí)驗(yàn)是評(píng)價(jià)藥物鎮(zhèn)靜催眠的常用方法。 給予實(shí)驗(yàn)動(dòng)物PCPA 后一般可出現(xiàn)持續(xù)48 h 的失眠,表現(xiàn)為白日活動(dòng)量增加,攝食減少,晝夜節(jié)律消失,此模型優(yōu)點(diǎn)是可以模擬完全睡眠剝奪表型,準(zhǔn)確定位改變腦內(nèi)神經(jīng)遞質(zhì),但還可以產(chǎn)生其他病理癥狀及代謝失衡[12],且因PCPA 藥性難溶制備困難,藥效難以保證,對(duì)操作者技術(shù)要求較高,現(xiàn)今文獻(xiàn)報(bào)到多使用阿拉伯樹(shù)膠與蓖麻油作為促溶劑,采用腹腔注射的方法最利于吸收,常使用200～220 g SD 大鼠和18～22 g 多種品系成年小鼠制備此失眠模型[13]。

2.1 PCPA 模型在天王補(bǔ)心丹方劑研究中的應(yīng)用

謝光璟等[4]利用該模型研究天王補(bǔ)心丹加減方對(duì)氧化應(yīng)激通路的作用。 向大鼠腹腔內(nèi)注射150 mg/kg 的PCPA 溶液7 d,利用戊巴比妥鈉協(xié)同催眠實(shí)驗(yàn)對(duì)模型評(píng)估,當(dāng)大鼠發(fā)生睡眠時(shí)翻正反射消失,覺(jué)醒時(shí)大鼠在1 min 之內(nèi)連續(xù)完成3 次自主翻轉(zhuǎn)視為翻正反射恢復(fù),15 min 內(nèi)模型組大鼠較正常對(duì)照組大鼠的睡眠潛伏期延長(zhǎng)、睡眠持續(xù)時(shí)間縮短、睡眠發(fā)生率降低,證明造模成功。 給予天王補(bǔ)心丹后發(fā)現(xiàn),模型組大鼠的SOD 與GSH-Px 活性增加、MDA 表達(dá)下降、硫氧環(huán)蛋白2 含量增加而硫氧環(huán)蛋白還原酶2 含量減少,其晝夜節(jié)律紊亂現(xiàn)象明顯改善。 每天8:00 使用400 mg/kg PCPA 混懸液注射2 d,也可使大鼠出現(xiàn)晝夜節(jié)律紊亂表現(xiàn)。 劉珊等[11]利用此模型研究天王補(bǔ)心丹調(diào)控炎癥因子的作用,發(fā)現(xiàn)其可以調(diào)節(jié)大鼠的TLR4、MyD88 表達(dá),使外周血核因子 NF-κB、TRIF、TNF-α、IL-1 水平下降,證實(shí)天王補(bǔ)心丹的鎮(zhèn)靜安神作用機(jī)制可能與調(diào)節(jié)炎癥因子,改善機(jī)體免疫力有關(guān)。

2.2 PCPA 模型在單味藥研究中的應(yīng)用

天王補(bǔ)心丹組方復(fù)雜,其廣泛的治療效用與多靶點(diǎn)的藥理作用是建立在單藥的基礎(chǔ)之上的。 藥理學(xué)研究表明地黃的中樞神經(jīng)抑制作用研究最早見(jiàn)于1989 年[14],利用PCPA 與戊巴比妥鈉協(xié)同催眠實(shí)驗(yàn)證實(shí)地黃和酸棗仁可作用于腦內(nèi)5-HT、去甲腎上腺素(norepinephrine,NE)、多巴胺(dopamine,DA)等神經(jīng)遞質(zhì)發(fā)揮中樞神經(jīng)抑制作用。 向小鼠腹腔注射35 mg/kg 戊巴比妥鈉溶液,利用翻正反射驗(yàn)證是否造模成功,從開(kāi)始注射到翻正反射消失時(shí)間為入睡潛伏期,翻正反射消失到恢復(fù)時(shí)間為睡眠時(shí)間。 以翻正反射消失達(dá)1 min 為入睡標(biāo)志,30 s 內(nèi)連續(xù)翻轉(zhuǎn)3 次為睡眠結(jié)束標(biāo)志。 記錄30 min 內(nèi)入睡只數(shù)、入睡潛伏期及睡眠時(shí)間,計(jì)算睡眠發(fā)生率。王婷婷等[15]給予模型組小鼠腹腔注射40 mg/100 g PCPA,連續(xù)2 d,實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示地黃與酸棗仁的潛伏期和睡眠持續(xù)時(shí)間相似,而睡眠發(fā)生率地黃組明顯高于酸棗仁組,提示在臨床應(yīng)用中,酸棗仁、地黃對(duì)睡后易醒的失眠患者療效最佳,而不適用于入睡困難的失眠患者。 劉彥飛[16]利用該模型評(píng)價(jià)證明了地黃各部位均有不同程度的鎮(zhèn)靜催眠作用。 武錦春等[17]使用該模型發(fā)現(xiàn)酸棗仁中的主要物質(zhì)斯皮諾素、阿魏酸等物質(zhì)可以作用于NE 能系統(tǒng)和5-HT能系統(tǒng)發(fā)揮鎮(zhèn)靜作用。

研究證實(shí)五味子木質(zhì)素可以下調(diào)腦中5-HT、γ氨基丁酸(gamma-aminobutyric acid,GABA)與谷氨酸(glutamate,Glu)比例以及其受體水平發(fā)揮鎮(zhèn)靜作用。 利用戊巴比妥鈉協(xié)同催眠實(shí)驗(yàn),在小鼠腹腔注射PCPA 混懸液24 h 后給予五味子素灌胃,30 min后進(jìn)行戊巴比妥協(xié)同催眠實(shí)驗(yàn),以1min小鼠翻正反射消失率為模型成功標(biāo)準(zhǔn)[18-19]。 賈穎等[20]基于此模型的基礎(chǔ)上利用超臨界CO2萃取方法制備酸棗仁揮發(fā)油,發(fā)現(xiàn)含有油酰胺等內(nèi)源性睡眠誘導(dǎo)物可以增加動(dòng)物模型的慢波睡眠,且酸棗仁油的鎮(zhèn)靜催眠作用優(yōu)于皂苷。 徐飛飛等[21]發(fā)現(xiàn)棗仁-茯苓-黨參水提物也可以調(diào)節(jié)GABA/Glu 比例。 徐煜彬等[22]進(jìn)一步研究,證實(shí)其主要成分茯苓粗多糖能顯著縮短50 mg/kg 及80 mg/kg 戊巴比妥鈉誘導(dǎo)的小鼠睡眠潛伏期,延長(zhǎng)小鼠睡眠持續(xù)時(shí)間。 王天合等[23]使用茯苓水提物連續(xù)灌胃7 d 后,給予戊巴比妥鈉,發(fā)現(xiàn)其麻醉時(shí)間與小鼠睡眠持續(xù)時(shí)間增加,以豬苓酸C 等10 種成分與鎮(zhèn)靜催眠藥效密切相

關(guān)。 方中其它中藥柏子仁、人參、遠(yuǎn)志也采用此模型所以并未一一闡述[24-27]。 綜上所述,利用PCPA失眠模型證實(shí)天王補(bǔ)心丹中的生地、酸棗仁、五味子、茯苓等單味藥可能通過(guò)對(duì)神經(jīng)遞質(zhì)的調(diào)控而發(fā)揮鎮(zhèn)靜安神作用。

3 多平臺(tái)水環(huán)境模型

多平臺(tái)水環(huán)境模型是實(shí)現(xiàn)非快速眼動(dòng)睡眠剝奪(REM)的常用模型。 現(xiàn)今研究實(shí)驗(yàn)動(dòng)物多為大、小鼠,大鼠常采用直徑6.5 cm 柱臺(tái)[28],而小鼠以4.5 cm～5.0 cm 居多[29],其原理是根據(jù)大、小鼠畏水的天性,無(wú)法在充滿水的環(huán)境中進(jìn)入完全睡眠狀態(tài),實(shí)驗(yàn)動(dòng)物可以在各柱臺(tái)間自由活動(dòng)、飲水、攝食,當(dāng)其進(jìn)入深睡眠時(shí)由于肌張力降低而落入水中,迅速驚醒進(jìn)而剝奪其REM 睡眠,此模型相對(duì)保留慢波睡眠,但小鼠死亡率高,常因落入水中后體力不支浸泡在水中失溫溺水而亡。 常用18～22 g 的C57BL/6 雄性小鼠或180～220 g SD 雄性大鼠。

黃曉宇等[5]使用該模型探究天王補(bǔ)心丹加減方與能量代謝、糖代謝及脂質(zhì)代謝的關(guān)系。 將大鼠放置在箱中的柱臺(tái)上,水面在柱臺(tái)下1 cm 處,箱子上方放置充足的水和飼料,連續(xù)睡眠剝奪7 d,每天20 h,以腦電植入子圖譜顯示的總睡眠時(shí)間和慢波睡眠時(shí)間減少作為模型成功的標(biāo)準(zhǔn),結(jié)果顯示天王補(bǔ)心丹可使此模型大鼠的MAPK 信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路中的調(diào)節(jié)因子(如雙特異性磷酸酶1)表達(dá)水平恢復(fù)正常,激活p38 MAPK 信號(hào)通路,改善睡眠質(zhì)量。 將上述造模時(shí)間延長(zhǎng)至28 d,將腦電芯片植入皮層下,根據(jù)腦電特征分析大鼠的睡眠時(shí)相,模型組大鼠較正常對(duì)照組的總睡眠時(shí)間和慢波睡眠時(shí)間皆減少時(shí),則造模成功。 該模型證明天王補(bǔ)心丹通過(guò)調(diào)節(jié)單核細(xì)胞趨化因子-1(MCP-1)、腫瘤壞死因子-α(TNF-α)和促炎因子白細(xì)胞介素-1β(IL-1β)等炎癥因子水平,增加慢波睡眠時(shí)長(zhǎng)進(jìn)而改善學(xué)習(xí)記憶力[6]。將剝奪時(shí)間延長(zhǎng)至56 d,每天剝奪18 h,并于造模28 d 后開(kāi)始給藥,發(fā)現(xiàn)天王補(bǔ)心丹加減方可以降低模型組小鼠下丘腦中食欲素表達(dá),降低血糖值及甘油三酯(TG)、總膽固醇(TCH)和游離脂肪酸(FFA)的含量,證明此方在調(diào)控睡眠的同時(shí)可以影響糖代謝與脂質(zhì)代謝[5]。 單藥使用該模型較少,趙翠等[30]利用水平臺(tái)連續(xù)造模4 d,發(fā)現(xiàn)酸棗仁提取物可以調(diào)節(jié)T 淋巴細(xì)胞亞群平衡,使CD4+T 淋巴細(xì)胞比例升高,CD8+T 淋巴細(xì)胞比例降低,抑制 TNF-α、IL-6、IL-2、IL-1β 炎癥因子表達(dá),增強(qiáng)免疫功能,即“正氣存內(nèi),邪不可干”,“氣充則神旺”。

4 中醫(yī)陰虛證的復(fù)合模型

中醫(yī)理論認(rèn)為不寐的病因病機(jī)復(fù)雜多端,如思慮勞倦則耗傷心脾；心膽氣虛則心神不安；心腎不交則水火不濟(jì)；陰虛火旺則肝陽(yáng)上擾等。 在不寐眾多證型中,以陰虛火旺型不寐最為常見(jiàn),約占20.2%[31]。 模擬臨床陰虛火旺的證型對(duì)失眠的研究具有重大意義。 大小鼠作為最常見(jiàn)的模型制備哺乳類動(dòng)物,與人類具有睡眠相似狀態(tài),適應(yīng)于中醫(yī)陰虛證型的研究。 多使用Wistar 或SD 成年雄性大鼠制備此類模型[32]。

實(shí)驗(yàn)動(dòng)物研究中常用環(huán)磷酰胺或咖啡因建立中醫(yī)陰虛證型,研究顯示注射環(huán)磷酰胺后,實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的大部分體征符合中醫(yī)陰虛體質(zhì)的臨床表現(xiàn),包括精神不振,毛粗黃、掉毛、攝食量減少、消瘦、易被激怒等,生理指標(biāo)則顯示其紅細(xì)胞(RBC)、血紅細(xì)胞(HGB)、血小板(PLT)數(shù)量均減少[33]。 咖啡因作為腺苷受體拮抗劑,與抑制性神經(jīng)遞質(zhì)腺苷A2A 受體結(jié)合進(jìn)而抑制睡眠增強(qiáng)覺(jué)醒。 在多平臺(tái)水環(huán)境模型的基礎(chǔ)上聯(lián)合咖啡因注射組成慢性復(fù)合型睡眠剝奪,可以更好地模擬陰虛不寐患者的臨床表型。 該模型常用于探究天王補(bǔ)心丹對(duì)下丘腦視交叉上核(SCN)中各種參與晝夜節(jié)律調(diào)節(jié)的肽能神經(jīng)元的表達(dá),如血管活性腸肽(VIP)、精氨酸加壓素(AVP)[8]。 提示天王補(bǔ)心丹可以用來(lái)治療輪班工作睡眠障礙及對(duì)咖啡因依賴的患者,但目前對(duì)于天王補(bǔ)心丹節(jié)律調(diào)控的研究較少,需要更深入的探討。 咖啡因、環(huán)磷酰胺與多平臺(tái)水環(huán)境的復(fù)合模型考察天王補(bǔ)心丹影響大鼠海馬區(qū)記憶與學(xué)習(xí)的功能,采用腹腔注射60 mg/kg 的咖啡因及100 mg/kg環(huán)磷酰胺,連續(xù)7 d 后進(jìn)行多平臺(tái)水環(huán)境睡眠剝奪,共剝奪14 d,每天18 h。 結(jié)果表明天王補(bǔ)心丹可以調(diào)節(jié)腦源性神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子(BDNF)、神經(jīng)生長(zhǎng)因子(NGF)表達(dá)[9]。

根據(jù)中醫(yī)陰陽(yáng)學(xué)說(shuō)理論,老年人多血虛陰虧,由D-半乳糖制備的衰老模型體征符合上述中醫(yī)陰血虧虛的辨證要點(diǎn)。 黃攀攀等[10]將大鼠頸背部皮下注射D-半乳糖60 mg/kg 持續(xù)28 d,于第21 天開(kāi)始疊加腹腔注射30 mg/kg 咖啡因至第28 天,第29天時(shí)利用多平臺(tái)水環(huán)境法連續(xù)睡眠剝奪7 d,每天12 h。 根據(jù)大鼠體重減輕、力竭性游泳時(shí)間減少等指標(biāo)反應(yīng)大鼠乏力,同時(shí)大鼠心率加快、血壓升高、耳溫升高證明陰虛發(fā)熱的中醫(yī)癥狀表現(xiàn),口唇爪甲耳顏色淺淡以及血象特征表明其同時(shí)出現(xiàn)血虛的表現(xiàn)。 張舜波等[34]給予模型組大鼠相同劑量的D-半乳糖16 周、環(huán)磷酰胺5 d 后再注射50 mg/kg 氫化可的松5 d,置于箱內(nèi)連續(xù)剝奪48 h,證實(shí)酸棗仁總皂苷可以調(diào)節(jié)老年失眠大鼠皮層及海馬部位的Glu、GABA 神經(jīng)遞質(zhì)及受體含量,對(duì)臨床老年失眠患者意義重大。

5 光照節(jié)律紊亂模型

光照模型是通過(guò)擾亂實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的光周期,達(dá)到睡眠剝奪的目的,常應(yīng)用于睡眠節(jié)律紊亂研究。 常見(jiàn)的模型動(dòng)物有斑馬魚(yú)、黑腹果蠅等[35]。 果蠅的光照模型日趨成熟,當(dāng)果蠅在第1 天晚上被睡眠剝奪時(shí),第2 天白天則會(huì)出現(xiàn)睡眠代償,與年幼果蠅相比,日齡越大的果蠅擁有更多的片段化睡眠和較少的睡眠持續(xù)時(shí)間,這與人類睡眠極為相似,且與人類基因高度同源[36],被廣泛使用。 楊波等[37]使用果蠅光照模型證明酸棗仁皂苷A 與B 的作用機(jī)制不同,皂苷B 可以顯著減少白天睡眠時(shí)間。 選用5～7 日齡野生型Canton S 果蠅,早7 點(diǎn)至晚7 點(diǎn)為正常光照,晚8 點(diǎn)開(kāi)始,每小時(shí)光照10 min 至第2 天早7 點(diǎn),光照強(qiáng)度設(shè)置為650 lx,通過(guò)間斷性光照使果蠅睡眠片段化達(dá)到睡眠剝奪的目的。 當(dāng)果蠅靜止?fàn)顟B(tài)超于5 min 時(shí)發(fā)生睡眠。 以睡眠時(shí)間、次數(shù)和深度指數(shù)等作為果蠅睡眠評(píng)價(jià)指標(biāo)。

6 總結(jié)

天王補(bǔ)心丹對(duì)失眠的防治有較好的作用,作為中醫(yī)臨床經(jīng)典方劑一直沿用至今。 比較分析失眠模型特征發(fā)現(xiàn),環(huán)磷酰胺聯(lián)合多平臺(tái)水環(huán)境睡眠剝奪等復(fù)合模型可以更加準(zhǔn)確的模擬中醫(yī)陰虛的證候體征,也常用于其他中醫(yī)方劑治療失眠的模型制備[38]。 注射環(huán)磷酰胺后導(dǎo)致免疫缺陷,即中醫(yī)理論的正氣不足,氣虛日久累及到陰血,可以復(fù)刻陰虛證型。 中醫(yī)陰陽(yáng)體質(zhì)學(xué)說(shuō)認(rèn)為“陰虛則熱”“耗傷津血”,則出現(xiàn)消瘦、煩熱等癥狀與模型動(dòng)物的攝食減少,毛發(fā)枯槁,抓取時(shí)反抗強(qiáng)烈相對(duì)應(yīng),血液虧虛則表現(xiàn)為貧血,反映在血小板、紅細(xì)胞等生理指標(biāo)的數(shù)量減少。

天王補(bǔ)心丹中單味藥生地、酸棗仁、五味子、茯苓等常使用PCPA 與戊巴比妥鈉協(xié)同催眠實(shí)驗(yàn)探究其對(duì)中樞神經(jīng)抑制作用,適用于神經(jīng)遞質(zhì)的研究。藥理學(xué)研究已證實(shí)以上中藥使模型動(dòng)物的曠場(chǎng)、水迷宮等行為學(xué)發(fā)生改變,認(rèn)知和學(xué)習(xí)能力得到提高[21-22,30]。 中醫(yī)理論認(rèn)為“陰為血,陽(yáng)為氣”,生地、酸棗仁、五味子均為滋陰之藥,通過(guò)滋生陰液而補(bǔ)充血液,而“血養(yǎng)神”“血主濡之”,《靈樞·營(yíng)衛(wèi)生會(huì)》曰“血者,神氣也”。 血有濡養(yǎng)和化神的作用,是神志活動(dòng)的物質(zhì)基礎(chǔ),血液充盈,則精力充沛,思維敏捷,認(rèn)知與學(xué)習(xí)能力正常。 若血液虧虛,則神志不安,出現(xiàn)不寐、健忘、驚悸、夢(mèng)遺等癥狀[39]。 現(xiàn)代研究也證實(shí),睡眠與記憶都是大腦的基本功能,失眠則會(huì)影響GABA、NE 等與記憶認(rèn)知密切相關(guān)的神經(jīng)遞質(zhì)[40]。

多平臺(tái)水環(huán)境模型作為失眠的經(jīng)典模型,腦電分析證實(shí)其結(jié)構(gòu)效度較為理想,實(shí)驗(yàn)動(dòng)物表現(xiàn)出的大部分表型與中醫(yī)陰虛證相符,但還存在心理應(yīng)激等影響因素。 光照模型在此方劑的研究中應(yīng)用較少,但果蠅的分子遺傳學(xué)優(yōu)勢(shì)明顯、飼養(yǎng)成本低、壽命短,且模型的表觀效度與人類睡眠高度相似性,適用于睡眠節(jié)律的研究。

失眠的發(fā)病機(jī)制十分復(fù)雜,研究已證實(shí)其發(fā)病機(jī)制與炎癥因子、氧化應(yīng)激及神經(jīng)遞質(zhì)密切相關(guān)[41],天王補(bǔ)心丹及單藥可以作用于以上通路發(fā)揮鎮(zhèn)靜安神作用。 失眠動(dòng)物模型根據(jù)其自身特點(diǎn)被應(yīng)用于不同研究,但實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的生理、病理、解剖結(jié)構(gòu)始終與人存在著差異。 并非人類所有致病因素均能在動(dòng)物模型中復(fù)制,如喜怒憂思悲恐驚七情而導(dǎo)致的情志內(nèi)傷難以在動(dòng)物模型中有所體現(xiàn)。 應(yīng)采用多種因素復(fù)合的造模方法,充分模擬失眠復(fù)雜的臨床發(fā)病機(jī)制,同時(shí)重點(diǎn)關(guān)注模型動(dòng)物一般行為和生理指標(biāo)與中醫(yī)證候之間的聯(lián)系,建立符合中醫(yī)辨證理論的失眠動(dòng)物模型,實(shí)現(xiàn)對(duì)中藥復(fù)方失眠治療作用的針對(duì)性評(píng)價(jià)。