劉建兵，林 風，林 軍，鄭秋霞，蘇瀚星，吳麗云

（福建省微生物研究所福建省紅曲微生物技術開發(fā)應用工程研究中心，福建 福州 350007）

蕪菁（Brassica rapaL.）別名蔓菁、芫根、盤菜、元根、圓根等，在藏藥中又叫“妞媽”（《四部醫(yī)典》）［1，2］。蕪菁是十字花科蕓苔屬一年或二年生草本植物，植株可以高達1 m，根、莖、葉均可食用，其塊根是重要的蔬菜，塊根肉質，圓球形、扁圓球形或短圓錐形，其外形圓似蘿卜，味甜，密實度高。蕪菁是藏區(qū)傳統(tǒng)的藥食兩用植物，《本草綱目》、《太平圣惠方》中早有記載：“其氣味苦，溫，無毒，具有美容、醒酒、促消化，增強體質等功效”，蕪菁還是一種味道鮮美，安全無毒的蔬菜，在藏區(qū)享有“小人參”美稱［3］?，F(xiàn)代藥理學研究也表明，蕪菁富含黃酮、多糖、三萜、硫代葡糖糖苷、脂肪酸等多種生物學活性成分，具有顯著的抗炎、抗氧化、抑菌、抗疲勞、免疫調(diào)節(jié)、抗腫瘤和降血脂等功效，在食品和醫(yī)藥領域正受到廣泛的關注［4］。Li 等［5］通過小鼠模型發(fā)現(xiàn)蕪菁多糖可調(diào)節(jié)炎癥因子和凋亡因子，降低四氯化碳誘導的小鼠急性肝損傷，提示蕪菁多糖具有開發(fā)成保肝藥的潛力；張發(fā)斌等［6］以糖尿病模型小鼠為研究對象，發(fā)現(xiàn)蕪菁正丁醇提取物可有效降血壓、降血脂、提高胰島素水平。

高脂血癥是一種在患者血漿內(nèi)一種或多種脂類異常超標的全身性疾病，可表現(xiàn)為血脂總膽固醇、三酰甘油、低密度脂蛋白膽固醇的異常。隨著經(jīng)濟水平的發(fā)展，生活水平的提高，人們的膳食營養(yǎng)日益增加，但高脂血癥患者數(shù)量也不斷增加，在我國血脂異?；颊咭堰_1.6 億人。高脂血癥是糖尿病、動脈粥樣硬化、冠心病、腦卒中等心腦血管疾病的主要誘因之一，因此預防和控制高脂血癥對于心血管疾病的預防有著重要的意義。目前，對高脂血癥主要通過飲食或藥物治療，其中他汀類藥物是應用最廣泛的降脂藥物，但是藥物治療停藥后很容易反彈，還會帶來一定的毒副作用，因此尋找一種安全有效的措施來預防和治療高脂血癥變得越來越重要［7］。

本文旨在通過體外膽酸鹽結合實驗和細胞模型評價蕪菁的降血脂活性，再利用網(wǎng)絡藥理學方法對蕪菁的降血脂作用機制進行分析，為蕪菁的降血脂作用研究及其功能性食品的開發(fā)利用提供理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 藥物及藥劑

蕪菁塊根樣品購于西藏林芝市；HepG2 細胞購自賽百慷（上海）生物技術股份有限公司。甘氨膽酸鈉、?；悄懰徕c和脫氧膽酸鈉購于上海麥克林生化科技有限公司；胃蛋白酶、胰蛋白酶、MTT、油紅O、油酸購買于北京索萊寶科技有限公司；RPMI-1640 培養(yǎng)基、胎牛血清、雙抗（青霉素/鏈霉素）、胰酶均購自美國Gibco 公司；甘油三酯（TG）和蛋白濃度測定試劑盒購自南京建成生物工程研究所；總膽固醇（TC）試劑盒購自浙江東甌診斷產(chǎn)品有限公司；NaOH、無水乙醇等其他試劑均購于中國國藥公司；Thermo Scientific Varioskan LUX 多功能酶標儀。

1.2 蕪菁水提物的制備

將干燥的蕪菁塊根樣品切成薄片，按3%的料液比加入蒸餾水，于90 ℃水浴鍋中提取1 h，抽濾，濾液先用旋轉蒸發(fā)儀濃縮10 倍后，再冷凍干燥即得蕪菁水提物。

1.3 蕪菁水提物對膽酸鹽吸附率測定

用以0.1 mol/L、pH＝6.3 的磷酸緩沖溶液分別配制不同濃度的甘氨膽酸鈉、?；悄懰徕c和脫氧膽酸鈉標準溶液（0.01、0.05、0.1、0.25、0.5、0.75、1 mmol/L），取1 mL 于具塞試管中，加入3 mL 質量分數(shù)60%的H2SO4溶液于70 ℃水浴20 min，取出冰浴5 min，在387 nm 波長處測定吸光度。以膽酸鹽含量為橫坐標，吸光度為縱坐標繪制標準曲線。

蕪菁水提物粉末加水復溶后，配制成2、5、7 g/L的蕪菁水提物樣品，分別取5 mL 于具塞試管中，以蒸餾水作為空白對照。再加入3 mL 10 g/L 胃蛋白酶，1 mL 0.01 mol/L 的HCl 溶液，在37 ℃條件下恒溫振蕩1 h，模擬胃部消化環(huán)境；再用NaOH 溶液調(diào)節(jié)pH 至6.3 后，加入4 mL 10 g/L 胰蛋白酶，在37 ℃條件下恒溫振蕩1 h，模擬腸道消化環(huán)境。每個樣品再分別加入4 mL 0.4 mmol/L 甘氨膽酸鈉、0.5 mmol/L ?；悄懰徕c和1 mmol/L 的脫氧膽酸鈉，在37 ℃條件下恒溫振蕩進行膽酸鹽結合實驗，1 h 后轉移至離心管中4 000 r./min 離心20 min，取1 mL上清液進行膽酸鹽含量檢測，由標準曲線求得樣液中膽酸鹽的濃度，每個樣品做3 個平行。膽酸鹽結合率＝（C0－C1）/C0×100，式中：C0為膽酸鹽加入量，C1為膽酸鹽剩余量。

1.4 MTT 實驗

HepG2 細胞用含有10%胎牛血清和1%雙抗的RPMI-1640 培養(yǎng)液，于37 ℃、5% 的CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。取對數(shù)生長期的HepG2 細胞接種于96 孔板中，每孔接種100 μL。培養(yǎng)過夜后吸棄上清，加入含不同濃度蕪菁水提物（0.10、0.35、0.70、1.00、1.40 g/L）的培養(yǎng)液，同時設置對照組、溶劑對照組和調(diào)零孔，每個處理6 個平行。繼續(xù)培養(yǎng)24 h 后，棄上清，加入10% MTT（5 g/L）100 μL，繼續(xù)培養(yǎng)4 h，加入二甲基亞砜（DMSO）150 μL，充分混勻5 min，在490 nm 波長處測各組OD 值。通過以下公式計算細胞存活率：細胞存活率＝（OD實驗組－OD調(diào)零孔）/（OD對照組－OD調(diào)零孔）×100%。

1.5 油紅O 染色實驗

實驗設置空白對照組（control group）、模型組（model group）、陽性對照組（lovastatin）和不同濃度的蕪菁水提物干預組（WET）。取對數(shù)生長期的HepG2 細胞接種于96 孔板中，每孔接種100 μL。培養(yǎng)過夜后吸棄上清，除空白對照組加入完全培養(yǎng)液外，其余各組加入含0.3 mmol/L 油酸的培養(yǎng)液處理24 h，造模成功后模型組換成完全培養(yǎng)液，陽性對照組加含100 mg/L 洛伐他汀的培養(yǎng)液處理，不同濃度的蕪菁水提物干預組分別添加含不同濃度（0.10、0.35、0.70、1.00、1.40 g/L）蕪菁水提物的培養(yǎng)液處理。處理細胞24 h 后，棄去培養(yǎng)基，PBS 清洗，用體積分數(shù)為10%的中性甲醛溶液固定20 min 后，再以PBS 清洗3 遍，油紅避光染色40 min。染色完成后，以體積分數(shù)為60%的異丙醇溶液快速清洗，加PBS二次清洗，于顯微鏡20 倍下觀察細胞形態(tài)。觀察過后，加入體積分數(shù)為60%的異丙醇溶液，室溫靜置40 min，振板10 min，在528 nm 處檢測吸光值，根據(jù)下式計算脂變率：脂變率＝（OD給藥組－OD調(diào)零組）/（OD對照組－ OD調(diào)零組）×100%。

1.6 細胞內(nèi)TG、TC 水平測定

取對數(shù)生長期的HepG2 細胞接種于6 孔板中，每孔接種1 mL。實驗分組及給藥同油紅O 染色實驗，細胞給藥處理完后加胰酶消化，收集至1.5 mL離心管中，用PBS 清洗2 遍，最后加入250 μL PBS，用超聲破碎細胞，按照試劑盒說明書操作測定總蛋白、TG、TC 含量。

1.7 統(tǒng)計學處理

采用SPSS20.0 軟件進行單因素方差分析（ANOVA）、t-檢驗和LSD 檢驗，P＜0.05 為差異具有統(tǒng)計學意義。

1.8 蕪菁活性成分和靶點的篩選

通過檢索PubMed、中國知網(wǎng)、等數(shù)據(jù)庫文獻收集蕪菁塊根中的活性成分，并將活性成分的canonical SMILES 導入至admetSAR 平臺（http：//lmmd.ecust.edu.cn/admetsar2/）進行分子性質預測，篩選符合類藥五原則［（1）分子量小于500；（2）氫鍵給體數(shù)目小于5；（3）氫鍵受體數(shù)目小于10；（4）脂水分配系數(shù)小于5；（5）可旋轉鍵的數(shù)量不超過10 個］的活性成分進行下一步分析。將活性成分的結構文件導入 SwissTargetPrediction （http：//www.swisstargetprediction. ch/）和 SEA Search Server（https：//sea.bkslab.org/）平臺進行反向分子對接靶點預測，限定物種為“Homo sapiens（Human）”，將靶點導入Uniprot 數(shù)據(jù)庫進行靶基因注釋，并校正為官方名稱（Official symbol），取并集得到蕪菁的活性成分作用的相關靶點。

1.9 高血脂相關靶點檢索與篩選

以“hyperlipidemia”為關鍵詞在GeneCards 數(shù)據(jù)庫（http：//www.genecards.org/）中檢索高血脂相關靶點，物種限定為“Homo sapiens”。選擇“Relevance score”值大于2 的靶點作為高血脂相關靶點。

1.10 “化合物－靶點”網(wǎng)絡的構建

高血脂相關靶點與蕪菁的活性成分作用的相關靶點取交集，并將數(shù)據(jù)導入到Cytoscape3.6.1 軟件中構建“化合物-靶點”相互作用網(wǎng)絡并做網(wǎng)絡分析。

1.11 GO 和KEGG 通路的富集分析

將靶點導入DAVID 數(shù)據(jù)庫（https：//david.ncifcrf.gov/），進行基因本位論（GO）和京都基因與基因組百科全書（KEGG）通路富集分析。GO 富集分析，包含生物過程（BP），分子功能（MF）和細胞組成（CC）3 個部分，根據(jù)（false discovery rate，F(xiàn)DR）分別選擇排名前10 條的結果繪制柱狀圖。KEGG通路分析結果以P＜0.01，Count＞3 為顯著信號通路。

1.12 蛋白互作網(wǎng)絡（PPI）的構建與分析

將交集靶點上傳至String 數(shù)據(jù)庫（https：//string-db.org/），物種選為Homo sapiens，設置“Minimum required interaction score”為0.7（高可信度）。并將數(shù)據(jù)導入到Cytoscape3.6.1 軟件中構建網(wǎng)絡并做網(wǎng)絡分析。

2 結果

2.1 蕪菁提取物膽酸鹽結合能力分析

人體內(nèi)膽固醇的主要分解途徑是轉變成膽酸鹽，膽酸鹽又可以經(jīng)過腸道-肝臟進行回收，所以通過結合消化道中膽酸鹽，以此有效排除體內(nèi)膽汁酸，間接降低膽固醇含量，達到降低血脂的目標［8］。如圖1 所示，蕪菁水提物對甘氨膽酸鈉、?；悄懰徕c和脫氧膽酸鈉3 種膽酸鹽都有一定的結合能力，且隨著蕪菁濃度的增加而增強。在添加7 g/L 時對這3 種膽酸鹽結合達到最大，分別為36.01%、28.93%、78.55%。

圖1 蕪菁提取物體外結合甘氨膽酸鈉、?；悄懰徕c和脫氧膽酸鈉能力Fig 1 Effect of Brassica rapa aqueous extract（BRAE）on bile salt-binding capacity（sodium glycylcholate，sodium taurocholate and sodium deoxycholate）

2.2 蕪菁對油酸誘導的脂肪肝細胞的降血脂作用

2.2.1 蕪菁對細胞活力的影響 采用MTT 法評估蕪菁提取物作用下的細胞毒性，見圖2A。結果表明，蕪菁提取物在0.10～1.40 g/L 濃度下對HepG2細胞活力無顯著影響（P＞0.05），細胞活力均在90%以上，說明蕪菁提取物無顯著細胞毒性，并具有良好的細胞相容性。

2.2.2 蕪菁取物對細胞內(nèi)脂質堆積的影響 油酸可通過影響肝細胞的糖脂代謝的平衡，造成糖脂代謝的紊亂，形成脂滴堆積而發(fā)生一系列的病變，利用油酸作為誘導劑，復制肝細胞脂肪變性模型是研究脂肪肝、肥胖等一些代謝性疾病的一種重要手段。通過油紅染色觀察（圖2C）和半定量檢測（圖2B）分析不同劑量的蕪菁提取物對細胞內(nèi)脂質堆積的影響，結果顯示經(jīng)油酸誘導后的模型組內(nèi)所有細胞均可見密集的紅色脂滴，顯著的高于空白對照組（P＜0.01），說明建模成功。經(jīng)不同劑量（0.10～1.40 g/L）的蕪菁提取液干預后，紅色脂滴的密度均有不同程度的減少，且隨著劑量的增加脂滴越少，1.40 g/L 的劑量組（g）與陽性對照洛伐他汀組（h）的效果相當。

圖2 蕪菁提取物對油酸誘導后細胞內(nèi)脂質堆積的影響Fig 2 Effect of Brassica rapa aqueous extract（BRAE）on intracellular lipid accumulation induced by oleinic acid

2.2.3 蕪菁提取物對細胞內(nèi)TG、TC 水平的影響

TG、TC 水平是臨床上用來診斷高血脂的常用指標。本文以蕪菁提取液1.40 g/L 的濃度處理為例，分析其對油酸誘導的高脂細胞內(nèi)的TG（A）和TC（B）水平的影響。由圖3 可以看出，模型組細胞內(nèi)的TG（圖3A）和TC（圖3B）水平均顯著的高于空白對照組（P＜0.01），而經(jīng)過蕪菁提取液干預組，TG 和TC 水平均顯著降低（P＜0.01），尤其是TC 水平，與空白對照組相比，差異無統(tǒng)計學意義（P＞0.05）。

圖3 蕪菁提取物對油酸誘導后細胞內(nèi)TG（A）和TC（B）含量的影響Fig 3 Effect of BRAE on TG and TC Levels in HepG2 cells

2.3 基于網(wǎng)絡藥理學對蕪菁降血脂的機制分析

2.3.1 蕪菁活性成分篩選 本研究共確定了21 個有效成分（表1）。

表1 蕪菁活性成分信息Tab 1 Information of active components of Brassica rapa

2.3.2 蕪菁活性成分潛在降血脂靶點篩選 利用Swiss Target Prediction 和SEA Search Server 平臺預測蕪菁活性成分的靶點，去除重復后共獲得活性成分的潛在靶點682 個，與高血脂相關靶點取交集，整理合并后得交集靶點共55 個。蕪菁21 個有效成分中與高血脂相關靶點有互作關系的有15 個，包括6 個糖苷類化合物（芐基α-D-果糖呋喃糖苷、正戊基β-D-果糖呋喃糖苷、芐基-β-D-吡喃葡萄糖苷、2-C-β-D-吡喃葡萄糖基-1-甲氧基吲哚-3-乙腈、乙酮-1-C-β-D-吡喃葡萄糖苷、乙基β-D-吡喃葡萄糖苷），3 個黃酮類化合物（甘草素、4，4'-二羥基-3'-甲氧基查耳酮、利可考酮A），2 個酚類化合物（6-姜酮酚、6-姜烯酚），2 個異硫氰酸鹽類（2-苯乙基異硫氰酸酯、異硫氰酸芐酯）和2 個其他類化合物（石竹烯、吲哚乙腈）。由“合物-靶點”網(wǎng)絡圖（圖4）可以看出，該網(wǎng)絡由71 個節(jié)點和137 條邊構成，其中6-姜酮酚（6-paradol）、6-姜烯酚（6-shogaol）、芐基-β-D-吡喃葡萄糖苷（benzyl-beta-D-glucopyranoside）、芐基α-D-果糖呋喃糖苷（benzyl-alpha-D-fructofuranoside）和甘草素（liquiritigenin）的度值（degree）較高，均與10 個以上靶點互作，由此可以推測其是蕪菁降血脂的主要活性成分。

圖4 化合物-靶點網(wǎng)絡圖Fig 4 Compound-target network

2.3.3 蕪菁活性成分潛在降血脂靶點PPI 蛋白互作網(wǎng)絡構建與分析 將55 個交集靶點上傳至STRING 數(shù)據(jù)庫，得到蛋白互作網(wǎng)絡圖，如圖5 所示。此網(wǎng)絡中的靶點相互作用產(chǎn)生了118 條邊，平均最短路徑長度為1.979，平均聚類系數(shù)為0.250，平均度值為5.2。主要靶點包括VEGFA、IL6、EGFR、PPARG、MMP9、MPO、F2、SERPINE1、TLR4、MGAM 等，其中度值≥10 的有4 個，VEGFA（度值＝18）、IL-6（度值＝17）、EGFR（度值＝13）、PPARG（度值＝12），推測這些靶點是蕪菁降血脂的關鍵靶點。

圖5 蕪菁活性成分潛在降血脂靶點PPI 蛋白互作網(wǎng)絡Fig 5 PPI network of potential lipid-lowering targets of active ingredientsof Brassica rapa

2.3.4 蕪菁活性成分潛在降血脂靶點GO 富集分析 GO 富集分析結果如圖6 所示，包括生物學過程（BP），細胞組分（CC），分子功能（MF），其中富集到172 個BP 條目，占比69.35%。根據(jù)FDR（false discovery rate）分別列出了排名前10 條的結果，主要涉及carbohydrate metabolic process、glycogen catabolic process、cholesterol homeostasis、cholesterol metabolic process 等生物學過程，extracellular space、extracellular exosome、extracellular region 等細胞組分和steroid hormone receptor activity、steroid binding、glycogen phosphorylase activity 等分子功能。表明蕪菁能通過參與體內(nèi)多種生物學調(diào)控過程以發(fā)揮降血脂作用。

圖6 蕪菁活性成分潛在降血脂靶點GO 富集分析Fig 6 Analysis of GO enrichment of potential targets for lowering blood lipid in active ingredients of Brassica rapa

2.3.5 蕪菁活性成分潛在降血脂靶點KEGG 通路富集分析 KEGG 通路分析結果顯示，蕪菁降血脂的潛在靶點共涉及36 條信號通路。圖7 列出了P＜0.01 且通路中靶個數(shù)（Count）＞3 的為顯著信號通路，主要包括淀粉和蔗糖代謝、半乳糖代謝、胰島素抵抗、胰島素信號通路、HIF-1 信號通路、PI3K-Akt信號通路等。

圖7 蕪菁活性成分潛在降血脂靶點KEGG 通路富集分析Fig 7 Enrichment analysis of KEGG pathway of potential target for blood lipid-lowering active ingredients in Brassica rapa

3 討論

蕪菁在我國有悠久的栽培應用歷史，作為味道鮮美的蔬菜被大量種植，隨著對蕪菁研究的不斷深入，其越來越多的功效作用被人們發(fā)現(xiàn)，比如抗炎、抗氧化、抑菌、抗疲勞、免疫調(diào)節(jié)、抗腫瘤和降血脂等。其中，蕪菁的降脂減肥作用越來越多的被人們關注，陳志鵑等［16］研究了蕪菁的總皂苷提取物的降脂減肥作用，給高脂飲食誘導的肥胖大鼠模型灌胃蕪菁總皂苷提取物45 d 后，其血清中超氧化物歧化酶、谷胱甘肽過氧化物酶、脂蛋白脂酶和肝脂酶的活性相比于模型組均不同程度的升高了，而丙二醛、游離脂肪酸、痩素的含量顯著的降低了。皮寧寧等［17］研究了蕪菁乙醇提取物的降血脂作用，結果顯示，蕪菁乙醇提取物能夠顯著的降低高血脂癥大鼠血清中甘油三酯和總膽固醇水平，還能夠顯著升高高密度脂蛋白膽固醇（HDL-C）水平，其效果比陽性對照物地奧脂必妥片更好。本研究通過體外膽酸鹽結合實驗和細胞模型評價了蕪菁的降血脂活性，實驗結果表明蕪菁水提物在體外有很好的降血脂效果，蕪菁水提物對甘氨膽酸鈉、?；悄懰徕c和脫氧膽酸鈉都有一定的結合能力，在7 g/L 時結合率分別為36.01%、28.93%和78.55%。蕪菁水提物對油酸誘導的HepG2 脂肪變性細胞有顯著的脂肪堆積抑制效果，1.4 g/L 的抑制效果與陽性對照物洛伐他汀的效果相當，其還能顯著降低細胞內(nèi)TG、TC 水平，這與文獻報道的結果相一致。

網(wǎng)絡藥理學是一種從系統(tǒng)生物學角度，結合生物學數(shù)據(jù)庫和生物信息學方法分析藥物對疾病作用機制的新方法，它能更全面地認識藥物與機體之間的相互作用關系［18］。相比于傳統(tǒng)“一個藥物、一個基因、一種疾病”的藥物開發(fā)模式，網(wǎng)絡藥理學更能契合中藥“多成分-多靶點-多通路”發(fā)揮整體協(xié)同作用的特點，以多維化視角闡明中醫(yī)藥所蘊含的內(nèi)涵，已成為中醫(yī)藥深入發(fā)展的一個得力助推手。

本研究利用網(wǎng)絡藥理學方法，進一步對蕪菁降血脂作用的機制進行了探討。收集到蕪菁塊根中符合類藥五原則的活性成分21 個，并通過構建的“化合物-靶點”網(wǎng)絡圖分析出蕪菁中的糖苷類和酚類類化合物在發(fā)揮降血脂功效中起到了重要作用，其中核心成分為6-姜酮酚、6-姜烯酚、芐基-β-D-吡喃葡萄糖苷、芐基α-D-果糖呋喃糖苷和甘草素。6-姜酮酚和6-姜烯酚是常見于生姜中的活性成分，具有抗炎、抗腫瘤、抗氧化、降血脂，以及心血管和神經(jīng)保護等活性，Wu 等［14］從新鮮的蕪菁塊根中，用硅膠柱、Sephadex LH-20 柱多次反復層析分離出6-姜酮酚和6-姜烯酚。6-姜酮酚是由6-姜烯酚在樣品干制、加工過程中轉化而來，是蕪菁辛辣感的主要來源物質［19］。Wei 等［20］經(jīng)細胞和動物實驗證實，6-姜酮酚是由6-姜烯酚具有降脂降血糖功效，其可以通過增強AMPK 酶的磷酸化作用，來提高3T3-L1 脂肪細胞和C2C12 肌管細胞對葡萄糖的利用率，也能顯著降低肥胖小鼠的體重、膽固醇和血糖指標。

根據(jù)構建的PPI 蛋白互作網(wǎng)絡圖，分析得出VEGFA、IL-6、EGFR、PPARG 4 個靶點的度值≥10，可能是蕪菁降血脂的關鍵靶點。VEGFA（血管內(nèi)皮生長因子，vascular endothelial growth factor），是一個重要的促進血管生長因子，對修復和維持血管內(nèi)皮細胞功能具有重要的作用，并且被證實參與多種疾病的發(fā)生發(fā)展過程，包括冠心病、腫瘤、糖尿病及血脂異常等。多篇文獻報道VEGFA 與血脂異常密切相關，其可以通過抑制內(nèi)皮脂酶、LPL 和固醇調(diào)節(jié)元件結合蛋白-2 等基因的表達，來達到降血脂效果。通過本研究中的“化合物-靶點”可以看出，蕪菁中的6 個糖苷類化合物和2 個黃酮類化合物（甘草素、4，4'-二羥基-3'-甲氧基查耳酮）均與VEGFA 靶點有互作關系。IL-6（Interleukin-6）是一種由巨噬細胞、脂肪細胞和T 細胞分泌的重要促炎癥因子，能介導細胞增殖、血管炎癥過程和調(diào)節(jié)多種炎癥反應的進展［21］。高血脂患者一般都伴隨著低級慢性全身炎癥，有文獻指出IL-6 與血脂異常密切相關，并且在調(diào)節(jié)血脂和體重的過程中發(fā)揮著重要作用，其可以通過抑制腫瘤壞死因子-α（tumor necrosis factor-alpha，TNF-α），降低胰島素抵抗，從而調(diào)節(jié)機體的血糖血脂水平［22］。蕪菁中的6-姜酮酚和甘草素可PPARG 靶點產(chǎn)生互作，PPARG 是肪組織中調(diào)控脂肪酸代謝的關鍵轉錄因子，也是臨床上當作治療脂肪酸紊亂的靶基因［23］。

綜上所述，本研究通過體外實驗得出蕪菁水提物具有很好的降血脂效果，其能顯著的降低細胞內(nèi)TG、TC 水平和脂肪堆積。并應用網(wǎng)絡藥理學探討了蕪菁的降血脂機制，蕪菁中的6-姜酮酚、6-姜烯酚、芐基-β-D-吡喃葡萄糖苷、芐基α-D-果糖呋喃糖苷和甘草素等活性成分，與VEGFA、IL-6、EGFR、PPARG 等靶點進行互作，調(diào)控淀粉和蔗糖代謝、胰島素抵抗、HIF-1、PI3K-Akt 等信號通路來達到降血脂效果，這體現(xiàn)了其多成分-多靶點-多途徑的整體協(xié)同作用。本文為深入研究蕪菁的藥理機制提供了理論依據(jù)，但預測結果不能完全證明其正確性，還需要根據(jù)本研究結果開展系統(tǒng)嚴謹?shù)纳飳W驗證。

作者貢獻度說明：

劉建兵：課題設計、實施及撰寫全文；林風：課題設計，提供實驗材料及理論指導；林軍：實施部分實驗內(nèi)容；鄭秋霞：實施部分實驗內(nèi)容；蘇瀚星：實施部分實驗內(nèi)容；吳麗云：課題設計及理論指導。