張 慧，王加才，李 斌，張 娜，李 飛，王成森

（1.山東畜牧獸醫(yī)職業(yè)學(xué)院，山東濰坊 261061；2.青島大沽河流域國(guó)家農(nóng)業(yè)科技園發(fā)展服務(wù)中心，山東青島 266225）

19 世紀(jì)90 年代，隨著非甾體類(lèi)抗炎藥（NSAIDs）阿司匹林-乙酰水楊酸的研制成功，人類(lèi)化學(xué)合成抗炎藥的新紀(jì)元亦隨之到來(lái)。但多數(shù)此類(lèi)藥物在發(fā)揮抗炎鎮(zhèn)痛作用時(shí)，可抑制環(huán)氧合酶（COX）的兩種異構(gòu)體之一COX-1，從而引發(fā)毒理學(xué)反應(yīng)，如胃腸、肝臟及腎臟毒副作用等。為此，人們開(kāi)始轉(zhuǎn)向另一種異構(gòu)體——選擇性COX-2 抑制劑的開(kāi)發(fā)。臨床中，此類(lèi)藥物的胃腸道不良反應(yīng)等發(fā)生率顯著下降，這為其開(kāi)發(fā)應(yīng)用帶來(lái)了曙光。

美洛昔康是世界上第一個(gè)選擇性COX-2 抑制劑，于1996 年在德國(guó)率先上市，屬于烯醇酰胺類(lèi)新型NSAIDs。該藥因具有良好的消炎、解熱和止痛作用，且半衰期長(zhǎng)，安全性高，被廣泛應(yīng)用于犬、貓、豬、牛等動(dòng)物的臨床治療。近年來(lái)，在國(guó)外美洛昔康作為獸藥已不乏報(bào)道[1-2]，但國(guó)內(nèi)有關(guān)研究文章相對(duì)較少[3]。為促進(jìn)該藥在我國(guó)獸藥行業(yè)中的開(kāi)發(fā)研究，對(duì)美洛昔康做了較為全面的概述。

1 理化性質(zhì)和作用機(jī)理

美洛昔康化學(xué)名為4-羥基-2-甲基-N-（5-甲基-2-噻唑基）-2H-1,2-苯并噻嗪-3-甲酰胺1,1-二氧化物，分子式為C14H13N3O4S2，為淡黃色或黃色粉末，無(wú)味，幾乎不溶于甲醇、丙酮等有機(jī)溶劑，且不易溶于水，其在水中的溶解度與pH有關(guān)，在pH 為4 時(shí)最低，隨著pH 升高而升高，pH ＞8 時(shí)，可達(dá)到10～20 mg/mL 的臨床有效質(zhì)量濃度。該藥熔點(diǎn)較高，可達(dá)255 ℃左右，具有低溶解度和高滲透性特點(diǎn)，為兩性離子化合物。報(bào)道[4]稱(chēng)，美洛昔康存在熱不穩(wěn)定性，當(dāng)熱處理溫度高于熔點(diǎn)時(shí)會(huì)發(fā)生降解。美洛昔康結(jié)構(gòu)式如圖1 所示。

臨床上美洛昔康呈現(xiàn)良好的抗炎鎮(zhèn)痛作用，主要源自其對(duì)COX-2 的高度抑制。一般來(lái)說(shuō)，NSAIDs 通過(guò)抑制COX，阻斷花生四烯酸合成致炎物質(zhì)——前列腺素前體而發(fā)揮鎮(zhèn)痛和抗炎功效。COX-1 為細(xì)胞的固有酶，可產(chǎn)生多種前列腺素，發(fā)揮抗血栓和保護(hù)胃粘膜作用，阻止COX-1 的生成可引發(fā)潛在的副作用，包括消化道潰瘍及血凝時(shí)間延長(zhǎng)。而COX-2 是一種可誘導(dǎo)生成的酶，炎癥介質(zhì)的生成與其有關(guān)，可引起炎癥不良反應(yīng)，包括發(fā)熱和疼痛等。美洛昔康在病理生理?xiàng)l件下，優(yōu)先抑制COX-2，對(duì)維護(hù)正常生理需要的COX-1 抑制性較弱，副作用較小，具有很好的開(kāi)發(fā)應(yīng)用前景。

2 藥理作用

2.1 抗炎作用

美洛昔康具有良好的抗炎作用。屈小平[5]曾發(fā)現(xiàn)，重癥急性胰腺炎早期即可出現(xiàn)腸黏膜屏障功能損害，而美洛昔康通過(guò)高度選擇性抑制COX-2的表達(dá)以及大量致炎因子的形成，能夠改善重癥急性胰腺炎時(shí)腸道黏膜的通透性，降低腸道屏障的損傷。另有試驗(yàn)[6-7]證明，美洛昔康對(duì)慢性鋁過(guò)負(fù)荷所致的雄性大鼠生殖損害和肝臟損傷均具有明顯保護(hù)作用，其機(jī)制可能是抑制COX-2 活性，減輕炎癥反應(yīng)，減輕氧化應(yīng)激損傷，或可能與重建PGE2-EPs-cAMP/PKA 信號(hào)通路平衡，減少肝組織炎癥反應(yīng)和氧化應(yīng)激損傷有關(guān)。

2.2 解熱、鎮(zhèn)痛作用

2018 年王雯潔[8]研究美洛昔康治療胰腺炎時(shí)得出，該藥能顯著降低急性胰腺炎模型犬C 反應(yīng)蛋白水平和脂肪酶水平，縮短恢復(fù)時(shí)間，緩解模型犬的疼痛，減少并發(fā)癥。2021 年P(guān)ereira 等[9]為評(píng)價(jià)美洛昔康對(duì)貓卵巢子宮切除術(shù)后的COX 抑制作用、不良反應(yīng)及鎮(zhèn)痛效果，對(duì)術(shù)后貓靜脈注射0.1 mg/kg 的美洛昔康，并在第一次鎮(zhèn)痛后24 h 內(nèi)測(cè)量生理變量以及疼痛和鎮(zhèn)靜數(shù)值。結(jié)果顯示：鎮(zhèn)痛后30 min 內(nèi)COX-1 活性接近于零，且在24 h 內(nèi)均顯著低于給藥前；同時(shí)COX-2 活性在30 min 內(nèi)也受到顯著抑制，抑制時(shí)間可達(dá)4 h。結(jié)果證明，美洛昔康可非選擇性地抑制COX-1 和COX-2 活性，并能有效鎮(zhèn)痛，而不會(huì)引起顯著的不良反應(yīng)或?qū)嶒?yàn)室檢測(cè)變化。

2.3 其他藥理作用

除具有抗炎、鎮(zhèn)痛作用外，美洛昔康的其他藥理作用也有一定的研究報(bào)道。有試驗(yàn)[10]發(fā)現(xiàn)，美洛昔康對(duì)全腦缺血/再灌注致大鼠腦損傷存在顯著保護(hù)作用，能夠顯著縮短全腦缺血/再灌注大鼠的尋找安全平臺(tái)所需的時(shí)間，降低海馬神經(jīng)元損傷和海馬組織核轉(zhuǎn)錄因子NF-kB p65 蛋白的表達(dá)，明顯阻遏大鼠海馬丙二醛含量的升高和超氧化物歧化酶活性的降低。李歡[11]在美洛昔康對(duì)糖尿病大鼠認(rèn)知功能障礙的保護(hù)作用及其保護(hù)作用機(jī)制研究中發(fā)現(xiàn)，糖尿病大鼠灌胃美洛昔康，相比于疾病模型組的血糖及血漿胰島素水平，血漿甘油三酯TG、血漿總膽固醇TC 無(wú)明顯變化。他通過(guò)Morris 水迷宮試驗(yàn)檢測(cè)發(fā)現(xiàn)：美洛昔康組大鼠能明顯提高糖尿病大鼠的空間學(xué)習(xí)記憶力；HE 染色后觀察大鼠海馬和皮層神經(jīng)元形態(tài)變化，顯示美洛昔康能減輕糖尿病大鼠的海馬和皮層神經(jīng)元損傷，從而證實(shí)其能夠保護(hù)糖尿病大鼠神經(jīng)元免受損傷。

3 藥代動(dòng)力學(xué)

美洛昔康經(jīng)口服吸收完全，99%以上能與血漿蛋白結(jié)合，很少以原形從尿液及糞便中排出，主要通過(guò)羥基化以及噻唑部分甲基基團(tuán)的進(jìn)一步氧化，代謝成4 種無(wú)生物活性的代謝產(chǎn)物，最終約一半經(jīng)尿液排出，其余經(jīng)糞便排出。目前，國(guó)內(nèi)有關(guān)獸用美洛昔康的藥代動(dòng)力學(xué)研究報(bào)道相對(duì)較少，主要研究對(duì)象為犬。郝俊璽等[12]探索發(fā)現(xiàn)，相比于靜脈注射美洛昔康，以0.1 mg/kg 劑量?jī)?nèi)服美洛昔康片劑的絕對(duì)生物利用度為115.35%，說(shuō)明美洛昔康片劑內(nèi)服給藥吸收完全，且與袁震等[13]研究美洛昔康口服液在0.2 mg/kg 犬體內(nèi)的藥代動(dòng)力學(xué)參數(shù)相比，美洛昔康片劑消除速率更慢，半衰期更長(zhǎng)，體內(nèi)藥物作用時(shí)間更久。2017 年白潤(rùn)等[14]通過(guò)試驗(yàn)建立了RP-HPLC法測(cè)定比格犬體內(nèi)的血藥濃度，比較雙周期交叉試驗(yàn)設(shè)計(jì)研究自制的美洛昔康咀嚼片和國(guó)外參比片劑在比格犬體內(nèi)藥動(dòng)學(xué)特征和生物等效性，結(jié)果證實(shí)測(cè)試片劑與參比片劑具有生物等效性，平均相對(duì)生物利用度F 可達(dá)98.0%±9.76%。該結(jié)果與李士洋[15]的報(bào)道一致，表明國(guó)產(chǎn)美洛昔康咀嚼片與國(guó)外參比產(chǎn)品在臨床上可相互替代。

相較于國(guó)內(nèi)，國(guó)外獸用美洛昔康的藥代動(dòng)力學(xué)研究報(bào)道則較多，主要集中在犬、牛、豬、鼠。2020 年P(guān)ark 等[16]通過(guò)6 只健康比格公犬研究美洛昔康混懸液和口腔崩解膜（ODF）兩種制劑的等效性，發(fā)現(xiàn)ODF 優(yōu)于混懸液，可以用作混懸液制劑的替代物，用于治療炎性關(guān)節(jié)疾病和肌肉骨骼疾病。比較口服與皮下注射美洛昔康在泌乳早期奶牛體內(nèi)的藥代動(dòng)力學(xué)特性發(fā)現(xiàn)，二者的半衰期（12.5±2.0 vs.28.5±2.0 h）、Cmax（1.59±0.15 vs.1.95±0.16 μg/mL）、Tmax（5.33 vs.11.7 h）和AUC0→∞（39.6±7.4 vs.115.6±19 h·μg/mL）均顯著高于對(duì)照組，證明經(jīng)皮下或口服給藥，美洛昔康均可產(chǎn)生可觀的全身水平[17]。在豬身上，單次肌肉注射美洛昔康油懸液不同劑量后的豬體內(nèi)相對(duì)藥代動(dòng)力學(xué)研究[18]表明，懸浮液在豬體內(nèi)的滯留時(shí)間較長(zhǎng)，具有緩釋作用，是一種理想的新型載藥形式。以大鼠為模型動(dòng)物考察靜脈注射美洛昔康納米混懸液的體內(nèi)藥動(dòng)學(xué)特性研究[19]顯示，該藥可快速起效并持續(xù)釋放，相比于口服片劑，美洛昔康納米混懸液在大鼠體內(nèi)可以明顯加快釋放速率。

4 不良反應(yīng)

4.1 一般毒性

臨床研究發(fā)現(xiàn)，美洛昔康的不良反應(yīng)基本呈現(xiàn)無(wú)毒或低毒特性。為系統(tǒng)評(píng)價(jià)美洛昔康的急性毒性反應(yīng)，有研究[20]將美洛昔康分別對(duì)大鼠、小鼠經(jīng)口灌胃和腹腔注射兩種途徑給藥發(fā)現(xiàn)：美洛昔康對(duì)小鼠灌胃給藥的LD50為840 mg/kg，腹腔注射為143.9 mg/kg；對(duì)大鼠灌胃給藥的LD50為219.9 mg/kg，腹腔注射為116.4 mg/kg。依據(jù)急性毒性劑量分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)[21]，該藥屬于低等毒性物質(zhì)。但2020 年Ben等[22]對(duì)SD 大鼠腹部皮下注射美洛昔康或無(wú)菌生理鹽水后觀察注射部位反應(yīng)時(shí)發(fā)現(xiàn)，無(wú)菌生理鹽水組大鼠未發(fā)生病變，而所有美洛昔康組大鼠均發(fā)生腫脹，組織病理學(xué)特征顯示為局部炎癥伴中央壞死和外周纖維化。考慮到以上SD 大鼠局部皮膚反應(yīng)的高發(fā)生率和嚴(yán)重性試驗(yàn)結(jié)果，提醒臨床應(yīng)用美洛昔康鎮(zhèn)痛時(shí)應(yīng)慎重考慮。

4.2 靶動(dòng)物毒性

目前，美洛昔康靶動(dòng)物毒性的研究對(duì)象主要有兔、犬、豬、牛。有研究[23]對(duì)美洛昔康貼劑的用藥安全性進(jìn)行考察，結(jié)果發(fā)現(xiàn)其對(duì)新西蘭兔皮膚刺激性分值為0，皮膚致敏反應(yīng)分值亦為0，表明美洛昔康貼劑對(duì)動(dòng)物皮膚無(wú)刺激性和致敏性，用藥安全。陳珊[24]研究發(fā)現(xiàn)，用不同劑量美洛昔康分別刺激犬正常軟骨細(xì)胞24 h 和48 h，結(jié)果未發(fā)現(xiàn)有促凋亡作用，提示該藥對(duì)正常的軟骨細(xì)胞副作用極小，因而為臨床安全使用美洛昔康提供了一定依據(jù)。2017 年國(guó)外學(xué)者Ben 等[25]研究了長(zhǎng)期服用美洛昔康對(duì)生豬的影響，從48 日齡到110 日齡連續(xù)每天口服美洛昔康0.4 mg/kg，安樂(lè)死后解剖收集距骨和脛骨遠(yuǎn)端等樣本進(jìn)行骨微結(jié)構(gòu)、骨剛度、生長(zhǎng)板形態(tài)等分析，結(jié)果發(fā)現(xiàn)美洛昔康對(duì)成骨、軟骨發(fā)育未造成不良反應(yīng)，有效減輕了美洛昔康在幼齡仔豬體內(nèi)長(zhǎng)期應(yīng)用的擔(dān)憂。近年來(lái)，研究[26]證實(shí)，單次給產(chǎn)犢后奶牛皮下注射美洛昔康（0.5 mg/kg），可起到產(chǎn)后鎮(zhèn)痛作用，同時(shí)也未增加胎盤(pán)殘留發(fā)生率。

5 臨床應(yīng)用

5.1 犬、貓

美洛昔康是美國(guó)食品藥品管理局（FDA）唯一批準(zhǔn)的貓用非甾體類(lèi)抗炎藥，目前在犬貓等寵物臨床疾病治療中得到了廣泛應(yīng)用。Roswitha[27]報(bào)道，美洛昔康配合其他藥物治療貓梗阻性特發(fā)性膀胱炎，連續(xù)用藥5 d，第1 天劑量為0.1 mg/kg，第2～5 天劑量減半，結(jié)果發(fā)現(xiàn)尿道梗阻復(fù)發(fā)率（22%）低于對(duì)照組（26%），貓食欲增加，排便行為改善，腹部觸診疼痛感顯著降低。2020 年張?jiān)片F(xiàn)[28]等提到，美洛昔康能有效緩解犬貓術(shù)后疼痛以及關(guān)節(jié)損傷等引起的疼痛。2015 年林紅等[29]研究發(fā)現(xiàn)，美洛昔康注射液可明顯緩解自然發(fā)病的犬髖關(guān)節(jié)發(fā)育不良引起的疼痛。之后有研究[30]證實(shí)，推薦劑量范圍內(nèi)使用美洛昔康片劑對(duì)靶動(dòng)物比格犬是安全的。2020 年李秀春[31]通過(guò)美洛昔康聯(lián)合針灸技術(shù)治療寵物犬退行性關(guān)節(jié)病，結(jié)果療效確切，且不良反應(yīng)小，從而為今后臨床推廣應(yīng)用提供了可靠依據(jù)。

5.2 牛

美洛昔康對(duì)牛的許多疾病引起的疼痛表現(xiàn)出治療作用。例如：能夠明顯緩解帶狀閹割和外科閹割犢牛的疼痛行為和生理反應(yīng)，顯著減少閹割犢牛的陰囊炎癥[32]；犢牛脫角后使用美洛昔康能夠降低皮質(zhì)醇、前列腺素E2 濃度，從而減緩疼痛[33]；產(chǎn)前給藥能夠提高奶牛產(chǎn)奶品質(zhì)，緩解難產(chǎn)疼痛[34]。2011 年有研究[35]證明，美洛昔康輔助抗生素治療急性乳房炎能有效縮短治愈時(shí)間，且試驗(yàn)組產(chǎn)奶恢復(fù)速度明顯高于對(duì)照組；2021 年Caldeira[36]進(jìn)一步研究證實(shí)，美洛昔康用于急性乳房炎的輔助治療時(shí)，對(duì)乳腺免疫系統(tǒng)亦無(wú)影響。

5.3 豬

目前，有關(guān)豬的美洛昔康臨床應(yīng)用研究非常少，僅在2017 年有研究報(bào)道[37]：分娩前母豬口服美洛昔康，可降低母豬炎癥發(fā)生率，緩解疼痛，更利于母豬哺乳行為，提高仔豬初乳攝取量，明顯增加斷奶仔豬體重；與對(duì)照組母豬所產(chǎn)仔豬相比，口服給藥組所產(chǎn)仔豬在出生后48 h 內(nèi)IgG 水平顯著較高。

6 小結(jié)

美洛昔康具有抗炎、解熱、鎮(zhèn)痛作用，相比同類(lèi)藥物，其抗炎作用更強(qiáng)，胃腸道刺激性更小，解熱鎮(zhèn)痛效果更明顯，臨床適應(yīng)癥更廣，可對(duì)動(dòng)物疾病防治發(fā)揮重要作用。但皮下注射用藥后局部會(huì)出現(xiàn)炎癥伴中央壞死和外周纖維化現(xiàn)象，提示在給藥方式選擇時(shí)仍應(yīng)慎重。目前獸用美洛昔康劑型較為單一，主要有片劑、混懸液、注射液等，且臨床應(yīng)用靶動(dòng)物種類(lèi)較少，多見(jiàn)于對(duì)小動(dòng)物如犬、貓使用，而對(duì)豬、羊等大動(dòng)物的臨床研究明顯較少。因此未來(lái)需開(kāi)發(fā)更多劑型，同時(shí)應(yīng)增加不同靶動(dòng)物的臨床應(yīng)用研究等。