許心婷，段群棚，何 穎，何文娜，郭 旋，趙 碩，蔣家霞，陳婷婷，陳忠偉，張 寧

（1.廣西壯族自治區(qū)獸醫(yī)研究所，廣西獸醫(yī)生物技術(shù)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，廣西南寧 530001；2.廣西大學(xué)動(dòng)物科學(xué)技術(shù)學(xué)院，廣西南寧 530005；3.廣西農(nóng)墾永新畜牧集團(tuán)金光有限公司，廣西南寧 530022；4.廣西農(nóng)墾永新畜牧集團(tuán)新興有限公司，廣西柳州 545000；5.廣西桂墾牧業(yè)有限公司，廣西南寧 530001）

隨著我國豬場(chǎng)規(guī)?；某掷m(xù)發(fā)展，豬病的預(yù)防和控制成為養(yǎng)豬業(yè)發(fā)展的重中之重。常見的豬病主要分為病毒性疫病、細(xì)菌性疫病和寄生蟲性疫病，其中對(duì)養(yǎng)豬業(yè)影響最大的是病毒性疫病，主要包括豬瘟（CSF）、豬繁殖與呼吸綜合征（PRRS）、口蹄疫（FMD）、豬圓環(huán)病毒病（PCVD）和偽狂犬?。≒R）。CSF 是由豬瘟病毒（CSFV）引起的急性、熱性和高接觸性傳染病[1]。PRRS 的特征是母豬出現(xiàn)流產(chǎn)、產(chǎn)死胎等繁殖障礙癥狀，斷奶仔豬出現(xiàn)呼吸道癥狀，其病原是豬繁殖與呼吸綜合征病毒（PRRSV）[2]。FMD 由口蹄疫病毒（FMDV）引起，被世界動(dòng)物衛(wèi)生組織（OIE）列為須通報(bào)動(dòng)物疫病，我國將其列為一類動(dòng)物疫病，要求實(shí)施強(qiáng)制免疫，其主要危害偶蹄動(dòng)物，引起感染動(dòng)物口舌黏膜、蹄叉皮膚等部位形成或發(fā)生水皰，嚴(yán)重者可死亡[3]。PCVD 的主要致病原是豬圓環(huán)病毒2 型（PCV2），可引起斷奶仔豬多系統(tǒng)衰竭綜合征（PMWS）、豬皮炎與腎病綜合癥（PDNS）等疾病[4]。PR 是由偽狂犬病病毒（PRV）引起的一種高度接觸性傳染病，引起妊娠母豬流產(chǎn)以及產(chǎn)死胎和木乃伊胎等癥狀，我國將其列為二類動(dòng)物疫病[5]。

本研究利用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）方法，對(duì)2015 年3 月至2021 年5 月廣西部分豬場(chǎng)送檢的24 263 份血清樣品進(jìn)行CSFV、PRRSV、FMDV、PCV2、PRV-gB 和PRV-gE 抗體檢測(cè)，以了解廣西地區(qū)這5 種疫病的免疫狀況以及PRV 野毒感染情況，為廣西豬場(chǎng)疫病防控提供參考。

1 材料和方法

1.1 材料

1.1.1 血清樣品 本次檢測(cè)的血清樣品均為主動(dòng)送檢樣品，經(jīng)豬前腔靜脈或耳緣靜脈無菌采集。2015 年3 月—2021 年5 月，廣西14 個(gè)地級(jí)市1 012 個(gè)豬場(chǎng)先后自主送檢血清樣品24 263 份。自主送檢豬場(chǎng)規(guī)模大小不一，母豬存欄量為50～8 000 頭，不同豬場(chǎng)送檢的樣品數(shù)量不一，且送檢項(xiàng)目由豬場(chǎng)根據(jù)豬只免疫情況確定，同一豬場(chǎng)送檢的項(xiàng)目不完全相同（表1）。

表1 2015—2021 年血清樣品送檢情況統(tǒng)計(jì)

1.1.2 主要試劑 CSFV 間接ELISA 抗體檢測(cè)試劑盒、PRRSV 抗體檢測(cè)試劑盒、PRV-gB 抗體檢測(cè)試劑盒和PRV-gE 抗體檢測(cè)試劑盒，均購自美國愛德士（IDEXX）公司；PCV2 抗體檢測(cè)試劑盒，購自武漢科前動(dòng)物生物制品有限公司；O 型FMDV 抗體檢測(cè)試劑盒，購自韓國金諾JBT 公司。

1.2 方法

1.2.1 血清樣品制備 將無菌采集的非抗凝血液樣本5 mL，室溫靜置2～4 h 后，3 000 r/min 離心3～5 min，取上清置于滅菌離心管中，置-20 ℃保存?zhèn)溆谩?/p>

1.2.2 抗體檢測(cè)方法 檢測(cè)操作步驟及結(jié)果判定均按照各抗體檢測(cè)試劑盒說明書進(jìn)行。

1.2.3 數(shù)據(jù)處理與分析 用Excel 軟件對(duì)2015—2021 年5 種病原的抗體檢測(cè)結(jié)果按不同年份、季節(jié)、地區(qū)和生長(zhǎng)階段進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。春季為3—5月，夏季為6—8 月，秋季為9—11 月，冬季為12月—次年2 月；豬只生長(zhǎng)階段劃分為6 個(gè)，即哺乳仔豬（1～4 周齡）、保育豬（4～8 周齡）、育肥豬（9 周齡及以上）、種公豬、后備母豬及生產(chǎn)母豬。應(yīng)用SPSS 19.0 統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件，對(duì)不同年份和不同季節(jié)的抗體陽性率進(jìn)行卡方檢驗(yàn)，統(tǒng)計(jì)分析其差異性，P＜0.05 表示差異顯著，P≥0.05 表示差異不顯著。

2 結(jié)果

2.1 不同年份

由表2 可知，2015—2021 年廣西豬場(chǎng)CSFV、PRRSV、FMDV、PCV2、PRV-gB 和PRV-gE 抗體的場(chǎng)總陽性率分別為99.19%、96.09%、99.48%、99.71%、100%和49.87%，個(gè)體陽性率均在70%以上。

2.1.1 CSFV 個(gè)體陽性率介于76.67%～85.22%，其中2019—2021 年均保持在85%左右，場(chǎng)陽性率連續(xù)7 年保持在97%以上。

2.1.2 PRRSV 個(gè)體總陽性率介于70.37%～82.15%，平均為76.51%，僅2020 年超過80%，各年場(chǎng)陽性率均在91%以上。

2.1.3 FMDV 個(gè)體陽性率除2021 年（77.27%）外，其他年份均在80%以上；場(chǎng)陽性率除2016 年（95.83%）外，其他年份均達(dá)到100%。

2.1.4 PCV2 個(gè)體總抗體陽性率2015 年最低（70.26%），其余年份均在86%以上，平均為89.43%，多數(shù)年份的場(chǎng)陽性率為100%。

2.1.5 PRV PRV-gB 抗體個(gè)體陽性率除2019 年為88.71%外，其余年份均在90%以上，場(chǎng)陽性率連續(xù)7 年為100%；PRV-gE 抗體陽性率基本呈下降趨勢(shì)，場(chǎng)陽性率由2015 年的61.4%，下降至2021年的21.05%，個(gè)體陽性率由2016 年的30.35%下降至2021 年的4.96%，差異均顯著（P＜0.05）。

2.2 不同季節(jié)

2.2.1 CSFV 由表3 可知，四季的場(chǎng)陽性率分別為99.60%、99.52%、98.62%、98.62%，差異不顯著；個(gè)體陽性率分別為83.04%、82.79%、79.02%、73.99%，春夏季間和秋冬季間差異不顯著，但春夏兩季與秋冬兩季之間差異顯著。

2.2.2 PRRSV 春、夏、秋、冬四季的個(gè)體陽性率分別為80.08%、76.11%、73.29%、74.47%，其中春季個(gè)體抗體陽性率顯著高于其他季節(jié)，不同季節(jié)間的場(chǎng)陽性率差異不顯著。

2.2.3 FMDV 春、夏、冬3 個(gè)季節(jié)的場(chǎng)陽性率均為100%，秋季為97.78%；4 個(gè)季節(jié)的個(gè)體陽性率分別為88.06%、82.95%、81.48%、84.16%，春季顯著高于其他季節(jié)，而其他3個(gè)季節(jié)間無顯著差異。

2.2.4 PCV2 春、夏、秋3 個(gè)季節(jié)的場(chǎng)陽性率均為100%，冬季為98.57%，四季間的場(chǎng)陽性率無顯著差異；夏季的個(gè)體陽性率為92.04%，顯著高于其他3 個(gè)季節(jié)，而其他3 個(gè)季節(jié)間無顯著差異。

2.2.5 PRV 春、夏、秋、冬四季的PRV-gB 抗體場(chǎng)陽性率均為100%，個(gè)體陽性率分別為95.98%、95.38%、96.52%、90.07%，其中冬季個(gè)體陽性率最低，與其他3 個(gè)季節(jié)差異顯著。夏季的PRV-gE抗體場(chǎng)陽性率為59.05%，顯著高于秋冬兩季，而與春季差異不顯著；冬季個(gè)體陽性率為15.50%，顯著低于其他季節(jié)，而其他3 個(gè)季節(jié)間無顯著差異。

2.3 不同地區(qū)

2.3.1 CSFV 由表4 可知，14 個(gè)地級(jí)市送檢的樣品中，除賀州市（68.56%）外，其他市的個(gè)體陽性率均達(dá)到70%以上，其中百色市最高，達(dá)到91.53%；除玉林市（99.07%）、南寧市（98.51%）、北海市（92.86%）外，其余各市的場(chǎng)陽性率均為100%。

表4 不同地區(qū)豬場(chǎng)主要病毒抗體檢測(cè)結(jié)果 %

2.3.2 PRRSV 欽州、來賓的個(gè)體陽性率較低，分別為43.72%、48.84%；玉林、賀州、梧州、百色較高，均在80%以上；其他市的個(gè)體陽性率介于68.57%～78.46%。14 個(gè)地級(jí)市的場(chǎng)陽性率均在87.50%以上，其中貴港、河池和梧州場(chǎng)陽性率達(dá)到100%。

2.3.3 FMDV 14 個(gè)地級(jí)市中，百色市未檢測(cè)FMDV 抗體。其他13 個(gè)市中，北海（66.25%）、防城港（68.84%）、來賓（58.72%）個(gè)體抗體陽性率未達(dá)到70%，其余均在77.18%以上，其中南寧、賀州超過了90%。場(chǎng)陽性率除南寧市為98.72%外，其余均為100%。

2.3.4 PCV2 14 個(gè)地級(jí)市的個(gè)體陽性率均在81.92%以上，其中南寧、玉林、北海、崇左、河池、賀州、來賓超過了90%；場(chǎng)陽性率除防城港為93.75%外，其余均為100%。

2.3.5 PRV 14 個(gè)地級(jí)市的PRV gB 抗體個(gè)體陽性率均在84.85%以上，其中12 個(gè)市均在92.75%以上，場(chǎng)陽性率均為100%。14 個(gè)地級(jí)市均檢出PRV-gE 抗體陽性，其中欽州、河池、防城港陽性率較低，個(gè)體陽性率和場(chǎng)陽性率分別介于3.91%～7.47%和14.29%～28.57%，而玉林、貴港、百色較高，個(gè)體陽性率和場(chǎng)陽性率分別介于31.59%～41.35%和62.50%～66.15%。

2.4 不同生長(zhǎng)階段

由表5 可知：在不同生長(zhǎng)階段的豬群中，保育豬CSFV 抗體個(gè)體陽性率偏低（60.10%），其余均在70%以上；PRRSV 抗體個(gè)體陽性率介于66.11%～88.36%，其中后備母豬、哺乳仔豬、保育豬未超過70%；保育豬和育肥豬的FMDV 抗體個(gè)體陽性率較低，分別為46.27%和69.71%，其余階段均達(dá)80%以上；PCV2 抗體的個(gè)體陽性率均超過了70%，其中保育豬和育肥豬略低，分別為76.76%和79.78%，其他階段均在86%以上；PRV-gB 抗體個(gè)體陽性率均超過了70%，其中公豬、經(jīng)產(chǎn)母豬、哺乳仔豬、保育豬均在94%以上；不同生長(zhǎng)階段豬群均存在PRV-gE 抗體陽性，其中后備母豬最低（9.51%）、哺乳仔豬最高（31.99%）。

表5 不同生長(zhǎng)階段豬群抗體個(gè)體陽性率統(tǒng)計(jì)結(jié)果 %

3 討論

3.1 CSFV

2015—2021 年CSFV 抗體場(chǎng)陽性率均達(dá)到95%以上，個(gè)體陽性率均在70%以上，可見廣西14 個(gè)市送檢豬場(chǎng)的CSF 免疫效果較為理想。4 個(gè)季節(jié)中，春夏兩季CSFV 抗體場(chǎng)陽性率和個(gè)體陽性率高于秋冬兩季，這可能和秋冬兩季天氣多變有關(guān)，此時(shí)應(yīng)加強(qiáng)飼養(yǎng)管理，提前安排補(bǔ)免，降低CSF發(fā)生風(fēng)險(xiǎn)。從不同地區(qū)來看，賀州的CSFV 抗體個(gè)體陽性率較低，僅為68.56%，因此該地豬場(chǎng)應(yīng)引起重視，提高CSF 免疫水平。在不同生長(zhǎng)階段豬群中，除保育豬外，其余生長(zhǎng)階段豬群CSFV 抗體陽性率均在70%以上，其中公豬群、后備母豬群和經(jīng)產(chǎn)母豬群的抗體陽性率均在85%以上，保護(hù)力較高。研究[6]表明，豬群CSFV 抗體平均合格率達(dá)到85%以上才能有效預(yù)防CSF 發(fā)生。因此，養(yǎng)殖戶還需堅(jiān)持對(duì)CSF 進(jìn)行免疫，使抗體陽性率保持85%以上，以達(dá)到保護(hù)豬群的目的。

3.2 PRRSV

2015—2021 年P(guān)RRSV 抗體場(chǎng)總陽性率為96.09%，個(gè)體總陽性率為76.51%，不同年份的PRRSV 抗體個(gè)體陽性率均在70%以上，整體免疫效果較好。但柳州、來賓、欽州的個(gè)體陽性率較低，這些地區(qū)需要加強(qiáng)PRRS 免疫與防控。育肥豬群的免疫效果較為理想，而后備母豬、哺乳仔豬、保育豬未達(dá)到70%，提示養(yǎng)殖戶需關(guān)注不同生長(zhǎng)階段豬群的免疫水平，合理調(diào)整免疫計(jì)劃。PRRSV 不同基因型疫苗毒株間的交叉保護(hù)力較弱，且變異和重組速度較快，可導(dǎo)致疫苗免疫效果下降[7-9]。因此，應(yīng)當(dāng)明確當(dāng)?shù)鼗虮緢?chǎng)流行的優(yōu)勢(shì)毒株，有針對(duì)性地選擇疫苗，同時(shí)加強(qiáng)管理，合理調(diào)整免疫程序，提高免疫效果[10]。

3.3 FMDV

2015—2021 年共檢測(cè)來自191 個(gè)場(chǎng)的6 117份血清樣品，發(fā)現(xiàn)除2021 年個(gè)體陽性率為77.27%外，其余年份均在80%以上，免疫效果較好。春、夏、秋3 個(gè)季節(jié)的個(gè)體陽性率依次遞減，冬季有所回升。這可能與秋冬季節(jié)養(yǎng)殖戶為了應(yīng)對(duì)天氣變化給豬只免疫力帶來影響，適時(shí)在冬季到來之前進(jìn)行補(bǔ)免有關(guān)。柳州和賀州的免疫效果較為理想，場(chǎng)陽性率均為100%，個(gè)體陽性率在90%以上。而北海、防城港和來賓的場(chǎng)陽性率雖然也達(dá)到100%，但個(gè)體陽性率未達(dá)到70%，說明存在漏免或免疫不合格現(xiàn)象，應(yīng)加強(qiáng)管理，及時(shí)開展免疫。保育豬和育肥豬的個(gè)體陽性率低于國家最低標(biāo)準(zhǔn)（70%），建議優(yōu)化免疫程序，提高免疫合格率，以降低口蹄疫發(fā)生的概率。

3.4 PCV2

2015—2021 年P(guān)CV2 抗體場(chǎng)總陽性率為99.71%，個(gè)體總陽性率除2015 年為70.26%外，其余年份均在85%以上。14 個(gè)地市送檢豬場(chǎng)的場(chǎng)陽性率均達(dá)到90%以上，個(gè)體陽性率都在80%以上，與賀會(huì)利等[11]的研究結(jié)果基本一致。不同生長(zhǎng)階段的豬群中，PCV2 抗體陽性率最低的是保育豬，為76.76%，亦超過了國家最低標(biāo)準(zhǔn)（70%）?？傮w來看，送檢豬場(chǎng)的PCV2 免疫情況較為理想。

3.5 PRV

2015—2021 年P(guān)RV-gB 抗體陽性率總體保持在一個(gè)較高水平，連續(xù)7年個(gè)體合格率在85%以上，場(chǎng)合格率一直保持在100%。育肥豬和后備母豬的個(gè)體合格率雖然低于其他生長(zhǎng)階段豬群，但也高于70%的國家最低標(biāo)準(zhǔn)?？傮w來看，廣西送檢豬場(chǎng)的PRV 免疫效果較為理想，但仍需跟蹤監(jiān)視育肥豬和后備母豬群體免疫效果，抗體水平較低時(shí)及時(shí)補(bǔ)免。

2015—2021 年共對(duì)來自780 個(gè)豬場(chǎng)的18 821份進(jìn)行PRV-gE 抗體檢測(cè)，結(jié)果發(fā)現(xiàn)場(chǎng)總陽性率為49.87%，個(gè)體總陽性率為20.58%，并且不同年份、不同地市、不同生長(zhǎng)階段豬群均檢測(cè)出PRV-gE 抗體，提示PRV 野毒感染較為普遍。2018—2021年P(guān)RV-gE 抗體陽性率呈現(xiàn)逐年下降趨勢(shì)，相較于袁淑萍等[12]報(bào)道的2017—2019 年河南省PRVgE 抗體陽性率52.53%、曹明珠等[13]報(bào)道的2018年山東省PRV-gE 抗體陽性率61.74%、雷宇等[14]報(bào)道的2019 年上半年福建省PRV-gE 抗體陽性率30.73%，廣西送檢豬場(chǎng)的血清樣品PRV-gE 抗體陽性率偏低。這可能與2019 年非洲豬瘟疫情導(dǎo)致廣西生豬存欄量銳減，特別是中小規(guī)模豬場(chǎng)為了應(yīng)對(duì)非洲豬瘟疫情大量淘汰已經(jīng)感染PRV 野毒豬群有關(guān)。此外，非洲豬瘟疫情發(fā)生后養(yǎng)殖戶普遍提高防范意識(shí)，加強(qiáng)生物安全管理。PRV 野毒可通過垂直傳播造成哺乳仔豬、保育豬帶毒，且母豬在豬場(chǎng)飼養(yǎng)的時(shí)間較長(zhǎng)，一經(jīng)感染，可長(zhǎng)期帶毒排毒，造成持續(xù)感染[15]。因此，建議豬場(chǎng)應(yīng)加強(qiáng)引種前檢測(cè)，優(yōu)化免疫程序，完善日常飼養(yǎng)管理，及時(shí)淘汰PRV-gE 抗體陽性豬，以達(dá)到凈化該病的目的[13]。

4 結(jié)論

檢測(cè)結(jié)果表明，廣西各地的CSF、FMD、PCVD、PRRS 和PR 等5 種疫病的免疫效果總體較為理想，但PRRS 的免疫合格率還需繼續(xù)提高，此外豬群中也存在一定的PRV 野毒感染，且不同生長(zhǎng)階段豬群以及不同季節(jié)的免疫水平有一定差異。因此，應(yīng)對(duì)上述5 種疫病制定科學(xué)的免疫程序，并持續(xù)進(jìn)行免疫和監(jiān)測(cè)，及時(shí)淘汰PRV 野毒感染豬，以降低上述5 種疫病的發(fā)生風(fēng)險(xiǎn)。