宋麗娟，王昀

(中國藥科大學(xué)藥物科學(xué)研究院,江蘇 南京 211198)

腸上皮與食物抗原、化學(xué)物質(zhì)和共生微生物直接接觸，因此腸上皮屏障完整性與宿主健康狀況息息相關(guān)[1]。腸道內(nèi)不同位置含有多種先天免疫和適應(yīng)性免疫細(xì)胞，包括B細(xì)胞、T細(xì)胞、先天性淋巴細(xì)胞(innate lymphocyte cells，ILCs)、樹突狀細(xì)胞(dendritic cells，DCs)、巨噬細(xì)胞和肥大細(xì)胞，共同維持腸道上皮屏障穩(wěn)態(tài)[2]。腸道上皮屏障穩(wěn)態(tài)的破壞會導(dǎo)致多種腸道或者腸外疾病，例如炎癥性腸病(inflammatory bowel disease，IBD)、結(jié)直腸癌、心血管疾病和多種神經(jīng)退行性疾病[3-6]。

腸上皮細(xì)胞處于快速更新狀態(tài)，約3～5 d更新一次[7]。腸上皮細(xì)胞的快速更新依賴于腸隱窩底部表達(dá)富含亮氨酸重復(fù)序列的G蛋白偶聯(lián)受體5(leucine-rich repeat-containing G-protein coupled receptor 5，LGR5)的腸道干細(xì)胞[8](intestinal stem cells，ISCs)。ISCs可以不斷地進(jìn)行自我更新，產(chǎn)生的快速增殖細(xì)胞(transit amplifying cells，TA cells)沿著隱窩不斷向上移動，逐漸分化為所有類型的腸上皮細(xì)胞[9]。

ISCs生態(tài)位提供了維持ISCs自我更新和分化所需的微環(huán)境。生態(tài)位中多種細(xì)胞提供的分子信號網(wǎng)絡(luò)調(diào)控，在維持正常的腸上皮細(xì)胞更新外，還可阻止腫瘤的發(fā)生[10]。以往研究發(fā)現(xiàn)，基質(zhì)細(xì)胞和潘氏細(xì)胞(Paneth cells，PCs)提供復(fù)雜的旁分泌信號，包括Wnt、Notch、BMP和Hedgehog信號，共同維持ISCs穩(wěn)態(tài)。近年來，隨著類器官培養(yǎng)技術(shù)和單細(xì)胞測序技術(shù)的不斷發(fā)展，更多的數(shù)據(jù)證明了腸道內(nèi)免疫細(xì)胞除釋放細(xì)胞因子介導(dǎo)免疫反應(yīng)外，也作為ISCs生態(tài)位的成員調(diào)控ISCs的命運(yùn)——維持正常生理?xiàng)l件下腸上皮屏障穩(wěn)態(tài)和組織修復(fù)中腸上皮細(xì)胞的再生，但具體機(jī)制仍不清楚[11-12]。因此，闡明ISCs生態(tài)位中免疫細(xì)胞的特性、調(diào)控因子及其信號網(wǎng)絡(luò)，對了解腸上皮穩(wěn)態(tài)的維持和腸損傷后的修復(fù)至關(guān)重要。本文綜述了腸道內(nèi)免疫細(xì)胞(T細(xì)胞、ILCs、巨噬細(xì)胞和DCs)對于ISCs命運(yùn)調(diào)控的最新進(jìn)展，以期更好地理解腸道生理，為腸上皮屏障疾病的治療提供參考。

1 腸干細(xì)胞

Cheng等[13]在19世紀(jì)70年代使用電子顯微鏡發(fā)現(xiàn)在隱窩底部的PCs中穿插著更為瘦長的細(xì)胞，這些細(xì)胞被他們稱為隱窩基底柱狀細(xì)胞(crypt-base columnar cells,CBCs)。并通過化學(xué)放射標(biāo)記進(jìn)行譜系追蹤，Cheng等[13]證明CBCs可以分化成為4種不同類型的腸上皮細(xì)胞，這是ISCs的首次提出。ISCs的特異分子標(biāo)記對于識別和研究具有至關(guān)重要的意義，但受限于當(dāng)時的技術(shù)，未能鑒定出特異性標(biāo)志物。隨著單細(xì)胞測序和小鼠譜系追蹤模型的逐漸成熟，2007年Barker等[8]鑒定出了Lgr5作為CBCs的特異性標(biāo)志物，并且通過Lgr5敲入小鼠進(jìn)行譜系追蹤，證明了CBCs確實(shí)處在不斷的自我更新中，且可以分化成為4種不同的細(xì)胞，進(jìn)一步驗(yàn)證了Cheng和Leblond的發(fā)現(xiàn)。其他新發(fā)現(xiàn)的腸上皮細(xì)胞類型，如Tuft細(xì)胞和M細(xì)胞，也同樣被證明來自LGR5+CBCs[14-15]。且從小鼠體內(nèi)分離出的單個Lgr5+CBC可以在體外生成包含所有腸上皮細(xì)胞類型的腸類器官。腸類器官維持自我更新能力的同時，也形成類隱窩-絨毛的結(jié)構(gòu)，進(jìn)一步證明Lgr5是CBCs的特異性標(biāo)記[16]。Lgr5與其配體R-spondin結(jié)合，可激活經(jīng)典的WNT/β-catenin信號通路，對CBCs的自我更新起到至關(guān)重要的作用[17]。

但缺失Lgr5+CBCs的小鼠腸上皮穩(wěn)態(tài)未見顯著變化，提示腸道內(nèi)存在其他類型的ISCs[18]。實(shí)驗(yàn)證明，在隱窩的+4位置存在Bmi1+的儲備干細(xì)胞，在CBCs缺失或腸道輻射損傷后的修復(fù)過程中起到至關(guān)重要的作用。轉(zhuǎn)錄組學(xué)和譜系追蹤證明位于“+4”儲備干細(xì)胞與Lgr5+CBCs雖都屬于ISCs，但對WNT和輻射損傷存在不同的敏感性，Lgr5+CBCs對WNT信號存在更強(qiáng)的響應(yīng)，而對輻射損傷敏感[19]。但是腸道損傷后的再生修復(fù)又依賴于CBCs，因此儲備干細(xì)胞的動員和不同類型ISCs間的相互轉(zhuǎn)換，甚至部分上皮祖細(xì)胞去分化重新獲得干性的過程可能是腸道損傷后修復(fù)的關(guān)鍵。但總體而言，這些干細(xì)胞都處于隱窩內(nèi)，均受到干細(xì)胞生態(tài)位信號的調(diào)節(jié)。

2 腸干細(xì)胞生態(tài)位

腸干細(xì)胞生態(tài)位是維持ISCs自我更新和增殖能力的微環(huán)境，包含多種分泌局部信號的細(xì)胞，在形成有效的腸上皮屏障和細(xì)胞過度生長的信號間維持平衡[20]。這些細(xì)胞既可以是上皮細(xì)胞，例如PCs，又可以是非上皮細(xì)胞，如間充質(zhì)細(xì)胞，包括肌成纖維細(xì)胞、平滑肌細(xì)胞和內(nèi)皮細(xì)胞，也包括免疫細(xì)胞和神經(jīng)元。腸干細(xì)胞生態(tài)位內(nèi)經(jīng)典的調(diào)控通路包括Wnt、Notch、BMP和Hippo/YAP等信號，此外，飲食、炎癥、微生物及其代謝產(chǎn)物，例如次生脂肪酸和短鏈脂肪酸，也可對ISCs命運(yùn)進(jìn)行調(diào)控[10]。

潘氏細(xì)胞(Paneth cells，PCs)位于小腸隱窩底部，與ISCs交錯排列，提示PCs對ISCs可能存在直接調(diào)控作用[21]。PCs表達(dá)大量的EGF、Wnt3和DLL4以維持干細(xì)胞功能。在體外類器官的培養(yǎng)中，僅用ISCs生成的類器官數(shù)量很少，但是向培養(yǎng)體系中加入PCs后，類器官的形成能力大幅增加。并且外源性Wnt3的加入可達(dá)到與PCs類似的效果，提示PCs可能主要通過分泌Wnt配體以維持干細(xì)胞功能[21]。但是在小鼠中去除PCs卻不影響小鼠隱窩結(jié)構(gòu)和Lgr5+ISCs的數(shù)量和功能，提示PCs并不是維持小腸ISCs功能的唯一細(xì)胞[22]。結(jié)腸組織中雖然沒有PCs，但是存在深隱窩分泌細(xì)胞，其在結(jié)腸干細(xì)胞生態(tài)位中被普遍認(rèn)為發(fā)揮著類似PCs的調(diào)節(jié)作用[23]。

腸干細(xì)胞生態(tài)位中的間充質(zhì)細(xì)胞，包括成纖維細(xì)胞、肌成纖維細(xì)胞、內(nèi)皮細(xì)胞和平滑肌細(xì)胞，為ISCs提供結(jié)構(gòu)支持以外，也被認(rèn)為是Wnt配體的主要來源。缺失Foxl1+或Gli1+的間充質(zhì)細(xì)胞會導(dǎo)致Wnt信號缺失進(jìn)而導(dǎo)致ISCs功能異常，最終導(dǎo)致腸道衰竭[24-25]。

3 免疫細(xì)胞對腸干細(xì)胞的調(diào)控

腸上皮屏障中含有多種免疫細(xì)胞，包括固有免疫和適應(yīng)性免疫細(xì)胞，其是腸黏膜免疫系統(tǒng)的重要組成部分。以往研究很大程度上集中于黏膜免疫系統(tǒng)在病原體防御和腸道炎癥中的作用。隨著體外腸道類器官培養(yǎng)和單細(xì)胞測序技術(shù)的發(fā)展，ISCs和免疫細(xì)胞之間的調(diào)控關(guān)系被逐步揭示，許多細(xì)胞因子已被證明對ISCs命運(yùn)具有調(diào)控作用[12]。最近研究表明，免疫細(xì)胞及其分泌的細(xì)胞因子與ISCs命運(yùn)、腸道的發(fā)育和腸損傷后的修復(fù)再生有關(guān)。

3.1 T細(xì)胞 胃腸道是造血干細(xì)胞移植的首要受累器官，供體的T細(xì)胞攻擊受體的腸上皮細(xì)胞，造成ISCs和PCs數(shù)量的顯著減少，引起嚴(yán)重的移植物抗宿主病(graft versus host disease，GVHD)。供體T細(xì)胞表面的α4β7受體與血管內(nèi)皮表達(dá)的MAdCAM-1結(jié)合，直接靶向腸隱窩位置并釋放IFN-γ促進(jìn)ISCs死亡，且該過程早于PCs的缺失，但絨毛區(qū)域浸潤的供體T細(xì)胞數(shù)量很少[26]。小鼠骨髓移植模型也證明供體T細(xì)胞的浸潤部位與造血干細(xì)胞前處理和移植方式無關(guān)，提示T細(xì)胞可能與ISCs存在獨(dú)特的親和力，并存在PCs非依賴的直接調(diào)控作用[27]。Chen等[28]采用T細(xì)胞和腸道類器官共培養(yǎng)模型進(jìn)一步證明，T細(xì)胞對ISCs命運(yùn)的調(diào)控依賴于細(xì)胞間的直接接觸，而非分泌的細(xì)胞因子。T細(xì)胞表達(dá)的αEβ7與ISCs或TA細(xì)胞表面的E-鈣粘素結(jié)合，促進(jìn)E-鈣粘素的內(nèi)吞，激活Wnt信號并抑制Notch信號，維持正常的ISCs穩(wěn)態(tài)。阻斷αEβ7與E-鈣粘素的結(jié)合則會導(dǎo)致ISCs分化缺陷，且該過程可能是TCR類型特異的。因?yàn)樵讦?-/-小鼠隱窩內(nèi)TCRαβ+T數(shù)量明顯減少，而TCRγδ+T的數(shù)量沒有變化，回輸WT小鼠的CD4+和CD8+T均可逆轉(zhuǎn)b7-/-小鼠體內(nèi)ISCs的分化異常。因此T細(xì)胞對ISCs命運(yùn)的調(diào)控可能依賴于抗原識別過程。的確，T細(xì)胞對ISCs命運(yùn)的調(diào)控也被證明與ISCs表達(dá)的MHC分子有關(guān)。ISCs同時表達(dá)MHC-Ⅰ和MHC-Ⅱ分子，可向腸固有層遞呈腔內(nèi)抗原誘導(dǎo)免疫耐受[29]。自我更新活躍的ISCs與相對靜止的干細(xì)胞相比，MHC-Ⅰ分子表達(dá)更高，通過抗原遞呈并激活CD8+T細(xì)胞，從而受到攻擊，引起GVHD[30]。腸干細(xì)胞中特異性敲除MHC-Ⅱ的小鼠體內(nèi)ISCs數(shù)量增加，且相關(guān)干性基因表達(dá)上調(diào)。同時隱窩處CD4+T細(xì)胞浸潤明顯減少，T細(xì)胞激活基因例如Tcf7、Ifng、Ctla4、Tigit等顯著上調(diào)，而絨毛區(qū)域浸潤的CD4+T細(xì)胞未見明顯改變[31]。因此，T細(xì)胞對ISCs的調(diào)控可能與ISCs的抗原遞呈功能相關(guān)，但具體機(jī)制仍需進(jìn)一步研究。

在小鼠腸道常駐CD4+T細(xì)胞中，Treg在結(jié)腸中占25%～35%。IBD患者中循環(huán)和炎癥部位浸潤的Treg數(shù)量減少，且減少的程度與疾病的嚴(yán)重程度一致[32]。提示Treg在腸道穩(wěn)態(tài)中起到至關(guān)重要的作用。在共培養(yǎng)體系中，iTreg和IL-10促進(jìn)類器官生長且上調(diào)ISCs相關(guān)干性基因。然而，在Foxp3-DTR小鼠中，Treg的缺失不僅導(dǎo)致ISCs增殖增加，而且還促進(jìn)ISCs向Tuft細(xì)胞和杯狀細(xì)胞分化[33]。體內(nèi)外實(shí)驗(yàn)結(jié)果的差異可能來自體外Na?ve T細(xì)胞經(jīng)TGF-β誘導(dǎo)成Treg與體內(nèi)Treg細(xì)胞存在異質(zhì)性，也可能是體內(nèi)復(fù)雜的免疫微環(huán)境中其他細(xì)胞存在間接調(diào)控作用。

3.2 先天性淋巴細(xì)胞 ILCs是一群在胎兒時期就定植于腸道中，并且表現(xiàn)出顯著組織駐留能力的免疫細(xì)胞，可幫助胎兒適應(yīng)出生后富含微生物的環(huán)境。根據(jù)ILCs產(chǎn)生的細(xì)胞因子、表型和發(fā)育途徑，可將其分為三類：ILC1、ILC2、ILC3[11]。不同亞類的ILCs似乎與腸上皮細(xì)胞亞群之間形成了不同的模塊，從而支持腸道適應(yīng)不斷改變的宿主環(huán)境。ILCs在穩(wěn)態(tài)下即產(chǎn)生不同的細(xì)胞因子，其中許多可直接影響上皮細(xì)胞的功能，最典型的就是IL-22。IL-22是上皮穩(wěn)態(tài)的關(guān)鍵調(diào)節(jié)因子，與上皮屏障功能和多種腸道疾病有關(guān)[30,34]。ILC3作為小腸中IL-22的主要來源之一，在腸道穩(wěn)態(tài)中也顯示出重要的作用。一些研究已經(jīng)證明ILC3分泌的IL-22可調(diào)控ISCs的維持和分化，并對DNA損傷具有保護(hù)作用[35]。腸上皮表面經(jīng)常與基因毒性化合物接觸，基因組完整性在很大程度上依賴于DNA損傷反應(yīng)(DNA damage response，DDR)。十字花科蔬菜中含有的硫代葡萄糖苷的代謝物是常見的基因毒性物質(zhì)。這些代謝物通過結(jié)合ILC3表面的芳香烴受體，促進(jìn)ILC3釋放IL-22，激活I(lǐng)SCs中的STAT3/ATM/γH2AX信號通路，驅(qū)動DDR反應(yīng)，從而促進(jìn)ISCs的凋亡并誘導(dǎo)細(xì)胞周期阻滯，減輕硫代葡萄糖苷的基因毒作用[36]。但另一項(xiàng)研究發(fā)現(xiàn)，在甲氨蝶呤誘導(dǎo)的腸損傷模型中，小鼠體內(nèi)IL-22信號的缺失雖然影響ISCs的數(shù)量，但腸上皮結(jié)構(gòu)正常，不會加重甲氨蝶呤誘導(dǎo)的腸損傷。該效應(yīng)與缺失ILC3的小鼠一致，證明ILC3通過IL-22信號維持ISCs的數(shù)量。但是缺失ILC3的小鼠體內(nèi)ISCs的增殖能力明顯下調(diào)，進(jìn)一步研究表明ILC3通過GP130促進(jìn)YAP/TEAD結(jié)合后的核轉(zhuǎn)位，從而調(diào)控ISCs的增殖和分化，促進(jìn)損傷后的修復(fù)。使用PP2阻斷YAP1/TEAD的結(jié)合則會抑制ILC3對ISCs的調(diào)控，此過程并不依賴于IL-22信號[37]。因此ILC3對于ISCs的維持和再生存在不同的調(diào)控途徑。與之一致的是， Zwarycz等[38]使用IL-22處理腸道類器官，發(fā)現(xiàn)ISCs干性基因表達(dá)下調(diào)且類器官形成能力顯著下降，但是類器官的體積顯著增加。作者進(jìn)一步通過分析IL-22RA1的表達(dá)，發(fā)現(xiàn)其在TA細(xì)胞中表達(dá)量最高。高表達(dá)IL-22的轉(zhuǎn)基因小鼠試驗(yàn)證明，IL-22促進(jìn)TA細(xì)胞增殖而不促進(jìn)ISCs增殖。進(jìn)一步提示IL-22在ISCs和TA細(xì)胞之間具有不同的調(diào)控作用。IL-22也可作用于腸干細(xì)胞生態(tài)位中的其他細(xì)胞起到間接調(diào)控作用。額外給予IL-22或ISCs特異性敲除IL-22的小鼠體內(nèi)未見PCs數(shù)量的改變，但是PCs特異性敲除IL-22RA1后，抗菌肽的分泌顯著減少。此外IL-22信號負(fù)調(diào)控WNT配體的分泌，缺失IL-22會導(dǎo)致WNT6和WNT9表達(dá)增加，但是盡管WNT配體表達(dá)水平增加，Lgr5+ISCs增殖及其標(biāo)志物未見明顯上調(diào)。有趣的是，PCs特異性敲除IL-22RA1小鼠的腸道類器官在單獨(dú)使用WNT3和DLL4刺激下未見顯著的促生長作用，但在IL-22重組蛋白存在下，WNT3和DLL4顯著刺激類器官生長[39]。證明IL-22與WNT和Notch信號通路存在復(fù)雜的調(diào)控機(jī)制?？傊琁L-22既可直接調(diào)控ISCs，也可作用于腸干細(xì)胞生態(tài)位中其他細(xì)胞起到間接調(diào)控作用。

ILC2和ILC1也對ISCs存在重要調(diào)控作用。ILC2分泌IL-13，結(jié)合IL-13R磷酸化下游STAT6，從而激活WNT/β-catenin信號通路促進(jìn)ISCs的自我更新。該過程受到非編碼RNA的調(diào)控。circ-PAN3和KSRP通過競爭性結(jié)合mRNA以調(diào)節(jié)IL-13R的穩(wěn)定性，進(jìn)而調(diào)節(jié)ISCs的增殖[40]。并且ILC2通過IL-13與Tuft細(xì)胞形成調(diào)控環(huán)路。蠕蟲感染后，Tuft細(xì)胞分泌的IL-25進(jìn)一步激活I(lǐng)LC2分泌IL-13，IL-13反過來作用于ISCs促進(jìn)其向Tuft細(xì)胞和杯狀細(xì)胞的分化，以清除蠕蟲感染[41]。ILC1表達(dá)IFN-γ來清除細(xì)胞內(nèi)病原體，并在IBD患者的炎癥部位富集，但是ILC1與上皮細(xì)胞亞群的特異性相互作用仍缺乏研究。一項(xiàng)研究使用ILC1和小腸類器官共培養(yǎng)發(fā)現(xiàn)，ILC1促進(jìn)小腸類器官的增殖，通過分泌TGF-β1誘導(dǎo)p38γ的磷酸化，激活β-catenin并與CD44v6形成正反饋環(huán)路從而促進(jìn)腸上皮增殖[42]。但I(xiàn)LC2和ILC1對腸干細(xì)胞生態(tài)位的調(diào)節(jié)仍不明確。

3.3 巨噬細(xì)胞 巨噬細(xì)胞也存在于腸道固有層，有助于先天免疫，從而維持腸道內(nèi)環(huán)境穩(wěn)定。腸道類器官與巨噬細(xì)胞共培養(yǎng)體系的成功建立也已成功證明巨噬細(xì)胞對ISCs的調(diào)控。巨噬細(xì)胞對ISCs的調(diào)控作用依賴于其分泌的不同細(xì)胞因子，如IL-6、IL-8、IFN-γ和TGF-β1已被證明有助于巨噬細(xì)胞促進(jìn)腸道上皮細(xì)胞成熟和物理屏障增厚[43]。正常生理狀態(tài)下，巨噬細(xì)胞即分布于隱窩區(qū)域，細(xì)胞外基質(zhì)中的透明質(zhì)酸激活巨噬細(xì)胞的TLR4，促進(jìn)巨噬細(xì)胞分泌PGE2，反式激活I(lǐng)SCs中的EGFR信號，促進(jìn)ISCs增殖和隱窩分裂，促進(jìn)生命早期腸道的延長。并且在該研究中，氯磷酸酯耗盡巨噬細(xì)胞后，ISCs的增殖顯著下降，但未發(fā)現(xiàn)SOX9+的儲備干細(xì)胞的增加[44]。而在另一項(xiàng)使用成年小鼠的研究中，長期給予小鼠CSF1R抗體耗盡巨噬細(xì)胞后，Lgr5+ISCs的數(shù)量顯著減少且增殖下降，但是SOX9+Bmi1+的儲備干細(xì)胞增殖增加。這可能反映了在新生小鼠和成年小鼠體內(nèi)不同的調(diào)控效應(yīng)。該研究還顯示，巨噬細(xì)胞的缺失不影響PCs的數(shù)量，但是減少Wnt3和Wnt3a的表達(dá)。且體外培養(yǎng)腸類器官發(fā)現(xiàn)CSF1R缺失不影響ISCs和PCs的數(shù)量及標(biāo)志物的表達(dá)，證明巨噬細(xì)胞在體內(nèi)的作用可完全被類器官培養(yǎng)基所替代。進(jìn)一步微陣列分析研究證明小腸巨噬細(xì)胞特異性表達(dá)Wnt4和R-spondin，維持ISCs的穩(wěn)態(tài)。提示CSF1R依賴的巨噬細(xì)胞對ISCs的調(diào)控可能依賴于WNT信號通路[45]。同樣的，Saha等[46]的研究證明，巨噬細(xì)胞釋放的含有WNT配體的囊泡是輻射腸損傷后ISCs活性維持及組織損傷后修復(fù)的關(guān)鍵。

巨噬細(xì)胞還介導(dǎo)間充質(zhì)干細(xì)胞對ISCs的調(diào)控。間充質(zhì)干細(xì)胞(mesenchymal stromal cells，MSCs)已被證明可以緩解IBD，部分可能由于MSCs可以歸巢于受損組織并原位分化為功能細(xì)胞以替代受損細(xì)胞[47]。然而，移植的MSCs僅有部分細(xì)胞在體內(nèi)存活并且遷移到受傷的組織中。提示MSCs介導(dǎo)的治療效果可能更大程度上與其分泌途徑有關(guān)[48]。事實(shí)上，MSCs的無細(xì)胞條件培養(yǎng)基和MSCs的分泌組(包含細(xì)胞外囊泡和外泌體)在各種疾病中呈現(xiàn)有益的作用。但是MSCs分泌組中的有效組成成分和作用機(jī)制仍不明確[49]。Liu等[50]證明MSCs外泌體的抗炎和免疫調(diào)節(jié)機(jī)制部分依賴于炎癥部位的巨噬細(xì)胞。作者發(fā)現(xiàn)MSCs外泌體在DSS誘導(dǎo)的小鼠結(jié)腸炎模型中被巨噬細(xì)胞吞噬，誘導(dǎo)巨噬細(xì)胞向M2型極化，下調(diào)IL-1β、IL-6和TNF-α的表達(dá)，但上調(diào)IL-10的表達(dá)，增強(qiáng)對CD4+T細(xì)胞的抑制能力。進(jìn)一步機(jī)制研究發(fā)現(xiàn)MSCs外泌體中的金屬硫蛋白-2通過抑制巨噬細(xì)胞中的NF-κB通路，促進(jìn)其向M2極化。

3.4 樹突狀細(xì)胞 DCs作為腸道中的專職抗原遞呈細(xì)胞，負(fù)責(zé)遞呈抗原，這對腸道免疫激活和免疫耐受的誘導(dǎo)至關(guān)重要。腸上皮細(xì)胞與DCs之間存在密切的聯(lián)系，DCs對上皮細(xì)胞的調(diào)控目前已經(jīng)報(bào)道。Jones等[51]證明骨髓來源的樹突狀細(xì)胞釋放的細(xì)胞因子可以通過NF-κB信號通路調(diào)節(jié)腸道屏障完整性、腸道細(xì)胞增殖和細(xì)胞死亡。IL-36已被證明可以促進(jìn)DSS誘導(dǎo)的結(jié)腸炎中組織修復(fù)，且該效應(yīng)依賴于分泌IL-23的CD11b+CD103+DCs[52]。此外一項(xiàng)研究表明，缺失腫瘤壞死因子α誘導(dǎo)蛋白3(tumor necrosis factor alpha-induced protein 3，TNFAIP3)的BMDCs與小腸類器官共培養(yǎng)，發(fā)現(xiàn)TNFAIP3的缺失會顯著上調(diào)小腸類器官的Reg3β和Reg3γ的表達(dá)。在DCs特異性敲除TNFAIP3小鼠體內(nèi)也發(fā)現(xiàn)PCs效應(yīng)蛋白Reg3β、Reg3γ、溶菌酶和Pla2g2的表達(dá)顯著上調(diào)[53]。因此DCs對PCs的成熟可能存在直接調(diào)控，但是DCs在腸干細(xì)胞生態(tài)位中的作用仍缺乏研究。

4 結(jié)語

盡管這些研究初步揭示了免疫細(xì)胞對ISCs命運(yùn)的調(diào)控，但是腸干細(xì)胞生態(tài)位中存在多種細(xì)胞，除免疫細(xì)胞對ISCs的直接調(diào)控外，免疫細(xì)胞之間、免疫細(xì)胞與上皮細(xì)胞和免疫細(xì)胞與基質(zhì)細(xì)胞之間可能存在更加復(fù)雜的調(diào)控網(wǎng)絡(luò)。最新研究也表明ISCs和ISCs生態(tài)位內(nèi)的細(xì)胞均存在異質(zhì)性[54-55]，且ISCs分化成為成熟的腸上皮細(xì)胞可能不經(jīng)過經(jīng)典的分化路徑[56]。這些發(fā)現(xiàn)都可能導(dǎo)致研究結(jié)果的差異。

免疫細(xì)胞不僅調(diào)控感染和損傷的急性反應(yīng)和損傷后修復(fù)過程，且在正常腸道發(fā)育和生理穩(wěn)態(tài)的維持中也很重要。因此進(jìn)一步研究免疫細(xì)胞對ISCs的調(diào)控機(jī)制，可以為炎癥性腸病的發(fā)生和治療提供新的思路。