王福厚,張進(jìn)隆*,唐文雅,楊紅梅,張瀟文
(1.甘肅畜牧工程職業(yè)技術(shù)學(xué)院,甘肅 武威 733006;2.西北民族大學(xué),甘肅 蘭州 730030)
豬瘟、豬繁殖與呼吸障礙綜合征、豬圓環(huán)病毒病、豬偽狂犬病是豬場(chǎng)重點(diǎn)防控的傳染病,免疫接種是規(guī)?;i場(chǎng)預(yù)防和控制主要傳染病的重要途徑,免疫抗體水平測(cè)定是為了監(jiān)測(cè)接種豬群的免疫效果,并根據(jù)免疫效果合理地調(diào)整免疫程序,是指導(dǎo)與制定免疫程序的重要參考依據(jù)。
北京普朗酶標(biāo)分析儀,型號(hào)DNM9602。豬偽狂犬病病毒酶標(biāo)抗體試劑盒、豬瘟病毒酶標(biāo)抗體試劑盒、豬繁殖與呼吸障礙綜合征病毒酶標(biāo)抗體試劑盒、豬圓環(huán)病毒Ⅱ型酶標(biāo)抗體試劑盒購(gòu)自上海博研生物科技公司。
選擇5個(gè)規(guī)?;i場(chǎng)育肥豬作為試驗(yàn)對(duì)象,隨機(jī)抽樣,豬耳靜脈或前腔靜脈采血2 mL,不加抗凝劑,靜置讓血液自然凝固,待血清析出后,分離血清,留待檢查。
在待測(cè)樣本孔先加樣本稀釋液40 μL,然后再加待測(cè)樣本10 μL,輕輕晃動(dòng)混勻,用封板膜封板后置37 ℃溫育30 min,小心揭掉封板膜,棄去液體,拍干,每孔加滿洗滌液,靜置30 s后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。每孔加入酶標(biāo)試劑50 μL,空白孔除外,用封板膜封板后置37 ℃溫育30 min,洗滌5次,拍干。每孔加入顯色劑A 50 μL,再加入顯色劑B 50 μL,輕輕震蕩混勻,37 ℃避光顯色15 min,每孔加終止液50 μL,終止反應(yīng)。以空白孔調(diào)零,450 nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光度(OD值)。
豬群豬瘟病毒抗體陽(yáng)性率平均為83.6%,符合農(nóng)業(yè)部印發(fā)的《2013年國(guó)家動(dòng)物疫病強(qiáng)制免疫計(jì)劃》指示中70%的合格率,且高于80%最低保護(hù)率的臨界值,整體豬瘟疫苗免疫效果比較理想(表1)。
豬繁殖與呼吸障礙綜合征病毒抗體陽(yáng)性率平均為74.4%,有3家豬場(chǎng)抗體陽(yáng)性率超過(guò)80.0%,有1家豬場(chǎng)抗體陽(yáng)性率只有43.0%,陽(yáng)性率較低(表2)。
豬圓環(huán)病毒Ⅱ型抗體陽(yáng)性率平均為71.3%,有3家豬場(chǎng)抗體陽(yáng)性率超過(guò)80.0%,抗體水平較高,有1家豬場(chǎng)只有40.0%,抗體陽(yáng)性率較低(表3)。
豬偽狂犬病病毒抗體陽(yáng)性率平均為81.8%,有4家豬場(chǎng)抗體陽(yáng)性率達(dá)到85.0%以上,總體免疫效果符合要求,只有1家豬場(chǎng)抗體陽(yáng)性率為43.0%,抗體水平較低,沒(méi)有達(dá)標(biāo)(表4)。
豬瘟病毒抗體水平保持了相對(duì)較高水平,平均水平符合我國(guó)豬瘟免疫合格標(biāo)準(zhǔn),從不同豬場(chǎng)的檢測(cè)數(shù)據(jù)來(lái)看,規(guī)?;i場(chǎng)抗體合格率高,主要與免疫重視程度、免疫程序方案有很大關(guān)系,部分豬場(chǎng)的豬瘟病毒免疫抗體水平不高,需要分析可能存在的原因。
豬繁殖與呼吸障礙綜合征病毒的抗體水平高低不一,4家豬場(chǎng)達(dá)到了國(guó)家規(guī)定的抗體水平,但整體水平不容樂(lè)觀,這可能與疫苗的保護(hù)性有關(guān)。豬繁殖與呼吸障礙綜合征沒(méi)有特效治療措施,接種疫苗是其主要防控手段。
豬圓環(huán)病毒病由于臨床類型比較復(fù)雜,造成的影響和威脅比較大。豬圓環(huán)病毒抗體水平在不同豬場(chǎng)之間差異較大,需要分析原因,補(bǔ)齊短板,提高整體免疫水平,提高防御能力。
預(yù)防豬偽狂犬病使用的是高質(zhì)量的gE基因缺失苗,免疫后要及時(shí)進(jìn)行抗體監(jiān)測(cè),豬群要保持穩(wěn)定、較高的抗體水平,避免免疫的空窗期。
造成免疫效果不佳的原因有免疫程序、免疫抑制病、霉菌毒素、疫苗質(zhì)量等。豬場(chǎng)在選擇疫苗時(shí)應(yīng)重點(diǎn)關(guān)注疫苗的質(zhì)量,如抗原含量、免疫期等。