羅雪峰 唐玉麟 黃 川 吳慧蘭 周文珺 范立青， 朱文兵，**

1. 中南大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院生殖與干細(xì)胞工程研究所；2. 中信湘雅生殖與遺傳?？漆t(yī)院

引 言

據(jù)世界衛(wèi)生組織最新數(shù)據(jù)顯示，全球不育癥患者達(dá)1.1 億，占世界人口總數(shù)的1.5%。隨著輔助生殖技術(shù)的發(fā)展，供精人工授精使部分不育癥夫婦實(shí)現(xiàn)了生育夢(mèng)想，而2019 年底的新冠肺炎（coronavirus disease 2019, COVID-19） 疫情給人類生殖健康帶來了巨大沖擊。陳立雪等[1]對(duì)疫情期間北京12 家輔助生殖機(jī)構(gòu)的調(diào)查結(jié)果顯示，北京市輔助生殖技術(shù)服務(wù)量明顯下降,但服務(wù)質(zhì)量保持穩(wěn)定。此外，國(guó)內(nèi)21 家人類精子庫也因疫情暫停了對(duì)外業(yè)務(wù)[2]。隨著國(guó)家嚴(yán)格的疫情防控，國(guó)內(nèi)新冠疫情也逐漸趨于平緩，湖南省人類精子庫也在2020 年4 月17 日后重新開始供精招募。本文通過比較疫情前后湖南省人類精子庫供精招募情況，闡述新冠疫情給人類精子庫供精招募帶來的影響，并為后疫情時(shí)期供精招募工作提供建議。

資料與方法

一、研究對(duì)象

分別調(diào)取2019 年1 月1 日至2019 年12 月31 日（疫情前期） 和2020 年4 月17 日至2021 年4 月16 日（后疫情時(shí)期），在湖南省人類精子庫進(jìn)行捐精的所有供精者的數(shù)據(jù)資料。供精者納入標(biāo)準(zhǔn)為身高168cm 以上，年齡20~45 歲，具有高中以上學(xué)歷。所有供精者均已登記在冊(cè)并簽署捐精知情同意書。本研究經(jīng)中南大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院倫理委員會(huì)批準(zhǔn)通過（2021-KT49）。

二、精液標(biāo)本采集

所有捐精志愿者禁欲2~7 天，消毒生殖器后，手淫法采集標(biāo)本，精液射入一次性無菌排精杯中，放入37℃水浴箱中液化。

三、篩查標(biāo)準(zhǔn)

（一）精液質(zhì)量

參照《WHO 人類精液檢查與處理實(shí)驗(yàn)室手冊(cè)》第5版進(jìn)行分析。供精者初篩合格標(biāo)準(zhǔn)為精液液化時(shí)間＜60min，體積＞2ml，精液濃度＞60×106/ml，前向活率＞60%，前向運(yùn)動(dòng)精子冷凍復(fù)蘇率不低于60 %。

（二）實(shí)驗(yàn)室檢查

捐精志愿者初篩合格后，需進(jìn)行一系列實(shí)驗(yàn)室檢查，包括支原體、淋球菌、衣原體、乙肝、丙肝、梅毒、HIV、血常規(guī)、血型、G6PD、TORCH、染色體核型、地中海貧血，篩查合格后方可繼續(xù)捐精。捐精結(jié)束六個(gè)月后抽血復(fù)查血HIV，完成整個(gè)捐獻(xiàn)流程。

（三）病史篩查和體格檢查

對(duì)捐精者既往病史、精神病史、性傳播病史、家族遺傳病史和心理狀態(tài)進(jìn)行評(píng)估。體格檢查由專門的醫(yī)生進(jìn)行，包括皮膚、外生殖器等。

四、統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

使用SPSS 25.0 軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行描述性分析，初篩合格率比較采用聯(lián)列表的卡方檢驗(yàn)，年齡、禁欲天數(shù)、精液濃度、活率等采用非參數(shù)的秩和檢驗(yàn)，數(shù)值采用中位數(shù)（四分位數(shù)間距）表示，P＜0.05 為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

結(jié) 果

一、疫情前后初篩供精者的合格率、精液濃度、活率及基線資料比較

相較于疫情前期，后疫情時(shí)期初篩供精者的合格率、精液濃度及精子活力均顯著下降（P＜0.05）。同時(shí)，疫情前后的初篩供精者在年齡、禁欲天數(shù)和身體質(zhì)量指數(shù)（BMI）方面存在顯著差異，如表1 所示。

表1 疫情前后初篩供精者的合格率、精液濃度、活率及基線資料比較

二、疫情前后不同年齡段初篩供精合格率比較

在20~24 歲、25~29 歲和30~34 歲三組中，后疫情時(shí)期初篩供精者合格率均顯著低于疫情前（P＜0.05），而在≥35 歲年齡組的供精者中，其合格率在疫情前后無顯著差異（表2）。

表2 疫情前后不同年齡段供精合格率比較

三、疫情前后初篩供精者特征分布

在人員構(gòu)成方面，不論是疫情前期還是后疫情時(shí)期，在校大學(xué)生依然是供精者招募的主要人群；在年齡分布上，招募的初篩供精者以20~24 歲年齡段的占比最高；在淘汰類型方面，精液質(zhì)量不合格仍然是供精志愿者淘汰的主要類型（圖1）。

圖1 疫情前后初篩供精者人員構(gòu)成、年齡分布及淘汰類型特征

四、疫情后招募初篩供精者的分布特征

在后疫情時(shí)期招募的初篩供精者中，學(xué)生2857 名（60.12%），社會(huì)人員1895 名（39.88%），兩組間的初篩合格率無顯著差異（20.02% vs 19.16%，P＞0.05），并且，年齡因素和學(xué)歷高低不會(huì)影響初篩供精者的合格率（P＞0.05）。然而，供精者的首次捐獻(xiàn)時(shí)節(jié)對(duì)初篩合格率存在顯著影響，在3~5 月和9~11 月首次來精子庫的供精志愿者，其合格率顯著高于12、1~2 月的初篩合格率，見表3。

表3 后疫情招募初篩供精者的分布特征

討 論

新冠肺炎疫情的爆發(fā)和流行給人類生殖健康帶來了巨大的挑戰(zhàn)，湖南省人類精子庫在疫情初期暫停了供精志愿者招募工作。隨著新冠疫情的日趨穩(wěn)定，湖南省人類精子庫嚴(yán)格按照疫情防控要求，遵循《新型冠狀病毒肺炎疫情防控常態(tài)化下人類輔助生殖機(jī)構(gòu)和精子庫應(yīng)對(duì)管理專家共識(shí)》[3]，及時(shí)做好工作人員及捐精者管理，控制每日捐精人數(shù)，捐精室徹底消毒，使得2020年捐精志愿者招募工作得以順利完成。在前期研究中發(fā)現(xiàn)，湖南省人類精子庫2020 年疫情初始及復(fù)工時(shí)收集的健康供精者冷凍精液樣本中不含SARS- CoV-2，可用于后期外供[4]。

精液參數(shù)是評(píng)估供精志愿者合格與否的重要指標(biāo)。在本研究中，不管是疫情前還是后疫情時(shí)期，精液質(zhì)量不合格仍然是供精者淘汰的主要原因。而且相比于疫情前期，后疫情時(shí)期供精志愿者初篩合格率顯著下降，且主要反映在精液濃度和精子活力的顯著減少。眾所周知，很多因素都會(huì)影響精液參數(shù)，如供精者的年齡、禁欲天數(shù)和BMI 等。大量文獻(xiàn)表明，禁欲時(shí)間的長(zhǎng)短對(duì)精液參數(shù)有顯著影響[5]，禁欲時(shí)長(zhǎng)與精液濃度成正相關(guān)[6-7]。本研究中后疫情時(shí)期精液濃度的顯著降低主要是由禁欲時(shí)間的縮短導(dǎo)致，而非疫情本身。這可能歸因于后疫情時(shí)期學(xué)生線上上課，有更多的時(shí)間來進(jìn)行捐獻(xiàn)，使得禁欲時(shí)間縮短，這提示精子庫招募工作應(yīng)更多的告知第一次來的捐獻(xiàn)者，在WHO 5th 建議參考范圍內(nèi)，盡量延長(zhǎng)禁欲時(shí)長(zhǎng)，可能有助于提高精子庫初篩合格率。另一方面，捐獻(xiàn)者的年齡是精子庫招募工作的重要影響因素。本研究中，不管是在疫情前還是后疫情時(shí)期，20~24 歲青年男性仍然是供精招募的主要群體。雖然關(guān)于年齡對(duì)精液質(zhì)量的影響國(guó)內(nèi)外依然有爭(zhēng)議[8-9]，但有研究表明19歲到29 歲的男性精子數(shù)量保持相對(duì)穩(wěn)定[10]，且張欣宗等[11]研究也發(fā)現(xiàn)20-24 歲組篩查合格率高于其他年齡段組。本研究中疫情后期捐獻(xiàn)者的年齡相比于疫情前期有所降低，同時(shí)后疫情時(shí)期各年齡段組的供精合格率均顯著低于疫情前期，但是捐獻(xiàn)者年齡的影響可能也不是引起疫情前后精子參數(shù)下降的主要原因。進(jìn)一步提示精子庫招募工作仍然應(yīng)以相對(duì)年輕男性（20-30 歲）為主要群體，可能有助于提高精子庫初篩合格率。

雖然本研究也發(fā)現(xiàn)疫情后捐獻(xiàn)者BMI 有所增加，但多數(shù)捐獻(xiàn)者均在正常體重范圍內(nèi)。且研究報(bào)道，單純的BMI 增加對(duì)精液質(zhì)量沒有影響[12]，當(dāng)男性BMI＞25 kg/m2時(shí)，精子活力顯著下降[13-14]。因此，BMI 的改變可能也不是引起疫情前后精子參數(shù)變化的主要原因。反而諸如環(huán)境污染、抽煙、喝酒、生活學(xué)習(xí)壓力等習(xí)慣的改變，可能是影響男性精液質(zhì)量的潛在因素。近年來，男性精液質(zhì)量下降日趨凸顯[15-16]。大量的研究報(bào)導(dǎo)，健康的生活方式與男性精液質(zhì)量密切相關(guān)，保持規(guī)律的運(yùn)動(dòng)方式能顯著提高男性精液質(zhì)量[17-18]。運(yùn)動(dòng)干預(yù)和膳食補(bǔ)充是提高男性精子質(zhì)量行之有效且簡(jiǎn)單易行的措施[19]。而在疫情期間，戶外運(yùn)動(dòng)時(shí)間減少，久坐時(shí)間相對(duì)延長(zhǎng)。久坐不動(dòng)會(huì)使得精子DNA 損傷的風(fēng)險(xiǎn)增加一倍[20]，同時(shí)也可能是導(dǎo)致疫情后捐獻(xiàn)者BMI 增加的原因之一，進(jìn)而影響精子活力。其次，后疫情時(shí)期招募的供精志愿者中，20-24 年齡段的比例高于疫情前期。該年齡段的青年男性正處于大學(xué)階段，熬夜等不良習(xí)慣的比例可能更高。經(jīng)常熬夜的男性精液濃度和精子活力均顯著低于正常作息男性[21]，睡眠不足與精液濃度、精子總數(shù)、活動(dòng)精子百分比和形態(tài)正常精子百分比呈倒U形關(guān)聯(lián)[22]。雖然本研究中欠缺了生活習(xí)慣的數(shù)據(jù)，無法評(píng)估疫情前后捐獻(xiàn)者生活習(xí)慣是否發(fā)生改變，但是仍然提示精子庫招募工作應(yīng)積極向供精者宣傳健康的生活方式，注重戶外運(yùn)動(dòng)和充足睡眠，以期改善供精志愿者精液質(zhì)量，可能有助于提高精子庫初篩合格率。

后疫情時(shí)期招募的供精志愿者中，在校大學(xué)生占初篩總?cè)藬?shù)的60.12%，學(xué)生初篩合格率與陳伊等[23]研究結(jié)果相符。在本研究中，學(xué)生和社會(huì)人員的初篩合格率無顯著差異，此結(jié)果與滕若冰等[24]研究一致。同時(shí)，不同學(xué)歷供精者人群的合格率雖然沒有顯著差異，但本科生捐精合格率最高，具有研究生學(xué)歷的供精者人群合格率相對(duì)最低。在全部初篩供精者中，?？茖W(xué)歷以上占比90.07%，是供精志愿者的主要人群來源，也是精子庫高素質(zhì)捐獻(xiàn)者的主要保障。

本研究還發(fā)現(xiàn)不同時(shí)節(jié)的初篩捐精合格率有明顯差異，3-5 月和9-11 月的捐精合格率顯著高于12、1-2月，因此，外部環(huán)境溫度可能影響供精者的初篩合格率。Zhou 等[25]對(duì)10802 名捐精者共計(jì)41689 份精液分析顯示，與最佳溫度相比，較低和較高的環(huán)境溫度暴露均與精液質(zhì)量下降顯著相關(guān)，環(huán)境溫度與所有精液質(zhì)量參數(shù)之間呈倒U 型。Santi 等[26]也發(fā)現(xiàn)男性精液參數(shù)有季節(jié)性變化，其波動(dòng)與溫度和日照時(shí)間有關(guān)。提示精子庫可在氣溫適宜的季節(jié)，如春秋季加大供精招募宣傳力度，號(hào)召更多的青年男性來進(jìn)行捐獻(xiàn)。此外，后疫情時(shí)期初篩合格供精者中自愿放棄的比例為0.08%，相較于疫情前明顯下降，這得益于精子庫供精接待過程中關(guān)于相關(guān)政策的詳細(xì)解答，建議各精子庫應(yīng)與供精志愿者進(jìn)行心理溝通，解答他們的疑惑和焦慮，減少合格供精者的流失。

綜上所述，雖然新冠肺炎疫情給全國(guó)輔助生殖機(jī)構(gòu)帶來了巨大的挑戰(zhàn)，但是在國(guó)家嚴(yán)防嚴(yán)控的政策下精子庫的工作得以順利開展。本研究分析了后疫情時(shí)期國(guó)內(nèi)精子庫的招募情況，并建議在后疫情時(shí)期精子庫供精者招募應(yīng)以在校大學(xué)生為主體，并積極向供精者宣傳健康的生活方式，同時(shí)告知捐獻(xiàn)者，盡量延長(zhǎng)禁欲時(shí)長(zhǎng)可提高合格率。同時(shí)，建議精子庫在氣溫適宜的時(shí)節(jié)，加大供精宣傳力度，關(guān)注供精者心理健康。

利益沖突: 所有作者均聲明不存在利益沖突。