肖志國 王秀蘭 康學(xué)會 戴良 劉長有 陳嬋娟 郎宇奎 李冠穎

摘 要：為研究雜色杜父魚（Cottus poecilopus）馴化及規(guī)?；敝臣夹g(shù)，2021年開展了人工繁殖試驗(yàn)。選擇水泥池、投喂冰凍鹵蟲培育親魚，采用擠腹采卵法采卵、等滲液采精、等滲液載精授精的方法，利用玻璃鋼平列槽孵化受精卵，出苗階段采取降氧孵化措施。試驗(yàn)結(jié)果表明，親魚馴化成活率93%，采卵率100%，受精率95%;發(fā)眼積溫105～126 ℃·d，發(fā)眼率97%;降氧孵化出苗積溫為250～310 ℃·d，孵化率88%，試驗(yàn)共繁殖仔魚37萬尾。

關(guān)鍵詞：雜色杜父魚（Cottus poecilopus）;馴化;規(guī)?；敝?/p>

雜色杜父魚（Cottus poecilopus）又名花足杜父魚、大頭魚，隸屬鲉形目，杜父魚科，杜父魚屬，在中國僅分布于黑龍江、松花江、烏蘇里江、綏芬河、圖們江、鴨綠江、遼河支流渾河、太子河、遼東半島碧流河等，國外見于朝鮮北部、俄羅斯遠(yuǎn)東地區(qū)及北歐諸國。雜色杜父魚為喜低溫的底層魚類，以水生昆蟲及其幼蟲、河蝦、東北螯蝦、小魚為食[1]。雜色杜父魚的突出特點(diǎn)，一是肉質(zhì)細(xì)嫩，呈蒜瓣?duì)睿诟泻?，營養(yǎng)價值高;二是生存在無污染、水質(zhì)清澈的溪流中，生存環(huán)境綠色環(huán)保，是典型的綠色食品，符合當(dāng)前消費(fèi)者對健康飲食、綠色食品的需求，品質(zhì)優(yōu);三是頗受市場歡迎，且貨源奇缺，市場售價高達(dá)100～200元/kg，經(jīng)濟(jì)價值高，極具開發(fā)價值。2002年遼寧省進(jìn)行了簡單的小水面養(yǎng)殖[2]，2015年黑龍江水產(chǎn)研究所進(jìn)行了雜色杜父魚生物學(xué)初步研究[3]，但其資源利用的專項(xiàng)研究尚屬空白，為此，我們于2020年1月1日至6月27日進(jìn)行了雜色杜父魚馴化及規(guī)?；敝臣夹g(shù)的研究，旨在為冷水魚產(chǎn)業(yè)提供新的名貴養(yǎng)殖魚類，提高養(yǎng)殖效益。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)地點(diǎn)

試驗(yàn)于2021年1月1日至6月27日在臨江市金鯊冷水魚養(yǎng)殖農(nóng)民專業(yè)合作社進(jìn)行，水源為曝氣的涌泉水，水溫8.5 ℃，溶解氧9～11 mg/L，pH值8～8.3。

1.2 親魚培育

1.2.1 親魚來源 2020年1月1日至1月31日，在臨江市境內(nèi)七道溝電捕采集親魚4 386尾，平均規(guī)格22.8 g/尾，加冰、充氣運(yùn)輸。

1.2.2 親魚暫養(yǎng) 親魚采回后，在室內(nèi)利用玻璃鋼水槽暫養(yǎng)一周，暫養(yǎng)的第二天，將槽內(nèi)水位降至4～5 cm，用2%的食鹽止水消毒40 min;投喂冰凍鹵蟲，方法是在玻璃鋼槽上、進(jìn)水管下架設(shè)餌料筐，將冰凍鹵蟲放入，隨水流沖下投喂，以第二天略有剩餌為宜。

1.2.3 培育要點(diǎn) 培育池選擇在近水源處，面積20 m2（長2 m×寬10 m），池深0.8～1 m，進(jìn)、出水口設(shè)置攔魚網(wǎng)柵，出水口閘板控制水位，放魚前用10%的聚維酮碘溶液20 mg/L消毒24 h，沖洗干凈后，加水至0.3～0.5 m，隔斷成4個小池，將暫養(yǎng)的親魚按雌、雄（雄魚第一背鰭上緣具有黃線）和大、小分養(yǎng);餌料為冰凍鹵蟲，裝在5 cm×5 cm網(wǎng)目的聚乙烯袋中，吊在水體的中上部，每日07：00-08：00、15：00-16：00進(jìn)行馴化投喂，投餌率3%～5%，繁殖期前后投餌率1%;培育水溫7～8.5 ℃，溶解氧不低于6 mg/L，水體每1.5～2 h交換一次;及時清刷進(jìn)、出水口的攔魚網(wǎng)柵和培育池。每月用 0.1% 的雙氧水止水消毒親魚 15～20 min，預(yù)防和治療水霉病。

1.3 人工繁殖

1.3.1 產(chǎn)前室內(nèi)暫養(yǎng) 經(jīng)過3個月左右的培育，隨著親魚性腺接近成熟，食欲顯著減退，并于4月23日挑選親魚2 300尾，從室外培育池移入室內(nèi)玻璃鋼槽中，并按雌、雄和大、小分養(yǎng)。在進(jìn)水管下設(shè)置餌料筐，放入冰凍鹵蟲，隨水流沖下投喂，投喂量以第二天略有剩餌為宜。每天早晨清理暫養(yǎng)槽，保持水體的清潔衛(wèi)生。每周用 0.1% 濃度的雙氧水止水消毒親魚15～20 min，預(yù)防和治療水霉病。

1.3.2 親魚性成熟度檢查與分養(yǎng) 成熟的雄魚，輕壓泄殖腔，會有白色的精液流出。成熟的雌魚腹部柔軟，擠腹輕揉會有橙色或橘紅色卵粒流出。5月30日將雌魚按腹部柔軟程度（軟、較軟、不軟）進(jìn)行分養(yǎng)，并對腹部達(dá)到較軟程度的雌魚每三天檢查一次，餌料投喂和魚病預(yù)防同1.3.1。

1.3.3 采卵、采精和授精

1.3.3.1 配制等滲液 采卵和采精前，先配制等滲液，配制方法：取90.4 g 氯化鈉（分析純）、2.4 g氯化鉀（分析純）、2.6 g氯化鈣（分析純），充分溶解于10 L蒸餾水中。

1.3.3.2 注意事項(xiàng) 采卵和采精操作均在避光、防水的條件下進(jìn)行，操作時須戴醫(yī)用橡膠手套，并用干毛巾擦去雌、雄魚體表的水。

1.3.3.3 采卵、采精 用擠腹采卵法將2～3尾雌魚卵擠入干燥的適當(dāng)大小的采卵盆中。輕壓雄魚泄殖腔，至精液流出，用燒杯中的等滲液將精液沖入干燥的采精盆中，載精等滲液體積應(yīng)為待受精卵的體積的5～7倍。

1.3.3.4 授精 雌雄比（2～3）∶1，授精方法為等滲液載精授精，即將載有精液的等滲液倒入采卵盆中，使精、卵充分混合，攪拌5～10 s，靜置3～5 min。

1.3.4 受精卵孵化

1.3.4.1 孵化設(shè)施 采用規(guī)格為長為2.8 m×寬052 m×深0.22 m的玻璃鋼平列槽孵化，內(nèi)設(shè)規(guī)格為0.4 m×0.5 m×0.2 m的5個串聯(lián)的小槽。使用前，用10%的聚維酮碘溶液20 mg/L消毒24 h，并沖刷干凈。為使孵化用水自上而下流經(jīng)每個小槽，小槽的阻水板及側(cè)部用長80 cm、寬5 cm、厚2 cm的海綿帶密封，出水管設(shè)置高度為11～12 cm。

1.3.4.2 布卵與密度 受精卵布卵先從出水口處的小槽開始，貼著水面均勻傾灑，布卵密度約35 000～40 000粒/m2，每小槽7 000～8 000粒。

1.3.4.3 孵化條件 避光、防震，孵化水流量15～2 L/ min，孵化水深11～12 cm，孵化水溫7.5～10.5 ℃，水體溶解氧不低于6 mg/L。

1.3.5 孵化管理

1.3.5.1 受精卵消毒 受精卵孵化期用18%的溴硝丙二醇溶液滴定式流水消毒，消毒濃度035～0.4 g/L，消毒時間40～60 min，1次/d，直至出苗。

1.3.5.2 洗槽與移槽 仔魚孵出達(dá)0.3% 時進(jìn)行洗槽，關(guān)閉出水管，將孵化槽水位升至20 cm，再關(guān)閉進(jìn)水管，去除孵化槽的密封海綿，用清水輕輕沖洗孵化槽，將槽中的死卵和仔魚倒入盆中，經(jīng)過洗槽的孵化槽移入事先準(zhǔn)備好的平列槽主槽中，不密封，繼續(xù)孵化，每三天洗槽一次。

1.3.5.3 仔魚暫養(yǎng) 暫養(yǎng)槽為玻璃鋼槽，在出水管前設(shè)置30目防逃網(wǎng)，將盆中的死卵用清水漂洗干凈，將仔魚倒入玻璃鋼槽中，暫養(yǎng)水深10～12 cm，水流量2.5～3 L/min，隨著暫養(yǎng)仔魚數(shù)量的增多，水流量調(diào)整為4～5 L/min。

1.3.5.4 降氧孵化 出苗達(dá)1%時，當(dāng)天16：00—17：00，先關(guān)閉出水管，提高水位至20 cm，再關(guān)閉進(jìn)水管，第二天當(dāng)溶解氧降至6.5～7 mg/L時，進(jìn)行洗槽和仔魚暫養(yǎng)。上述做法，每天連續(xù)進(jìn)行，至出苗結(jié)束。

1.3.6 仔魚開口 仔魚孵出一周，能夠正常游動，具有捕食能力，投喂豐年蟲無節(jié)幼體開食馴化。1.3.7 親魚產(chǎn)后培育 親魚產(chǎn)后第二天用01%的雙氧水止水消毒15～20 min，投喂適量的冰凍鹵蟲，以每天略有剩餌為宜。親魚在室內(nèi)暫養(yǎng)一周后，移入室外水泥池中進(jìn)行產(chǎn)后培育，培育水溫5～15 ℃，方法同親魚培育。

2 結(jié)果

雜色杜父魚馴化培育成活率93%，試驗(yàn)共采雌魚1 273尾，采卵率100%，采卵45.6萬粒，孵化積溫100 ℃·d時測定的受精率為95%;發(fā)眼積溫105～126 ℃·d，發(fā)眼率97%;降氧孵化的出苗積溫為250～310 ℃·d，孵化率88%，仔魚畸形率01%，獲得仔魚37萬尾。雜色杜父魚年齡、懷卵量、性成熟系數(shù)（性腺重/空殼重×100%）見表1。

3 討論

3.1 水源、培育池和藥物選擇

雜色杜父魚的養(yǎng)殖水源須充分曝氣，因?yàn)橛咳缓瑲怏w，如不經(jīng)曝氣，易得氣泡病。雜色杜父魚喜清水，且易感染三代蟲和車輪蟲，因此，培育池應(yīng)選擇在近水源處。雜色杜父魚為小型魚類， 培育池宜小不宜大，便于馴化。雜色杜父魚為無鱗魚，對金屬制劑藥物較為敏感，培育池和暫養(yǎng)槽在消毒時應(yīng)選擇刺激性小的非金屬制劑藥物。

3.2 雜色杜父魚馴化培育條件及餌料分析

雜色杜父魚喜暗，強(qiáng)光線會嚴(yán)重影響其攝食，因此，投喂時間以每天07：00-08：00和15：00-16：00為宜。雜色杜父魚在水溫5～15 ℃、溶解氧不低于6 mg/L條件下，能正常攝食和生長。雜色杜父魚在自然水域主要以灰紋石蛾和鉤蝦為食[3]，而本試驗(yàn)的餌料為雜色杜父魚喜食的鹵蟲，鹵蟲富含蛋白質(zhì)、脂肪和高度不飽和脂肪酸[4]，本試驗(yàn)中馴化培育的成活率為93%，采卵率達(dá)100%，說明在雜色杜父魚培育中選擇鹵蟲是可行的，能夠滿足其生長發(fā)育的需求。

3.3 按雌雄、大小和熟度進(jìn)行分養(yǎng)，是提高親魚成活率的關(guān)鍵措施

雜色杜父魚具有殘食同類的習(xí)性，魚體受傷后易發(fā)生水霉病甚至死亡。人工繁殖時，由于雄魚精液量小，為避免精液的浪費(fèi)，不進(jìn)行成熟度檢查。因此在親魚培育和人工繁殖時，一定要按雌雄、大小進(jìn)行分養(yǎng)。而按成熟度對雌魚進(jìn)行分養(yǎng)，可避免因檢查次數(shù)過多造成雌魚的受傷，進(jìn)而導(dǎo)致水霉病的發(fā)生，這是雜色杜父魚馴化培育和人工繁殖過程中提高親魚成活率的關(guān)鍵措施。

3.4 雜色杜父魚的繁殖生物學(xué)

雜色杜父魚在吉林省的繁殖期為4月下旬至6月上旬，2齡性成熟，繁殖水溫7～11 ℃。卵圓形，粒徑2～3.5 mm，橙色或橘紅色，黏性。從表1可見，雜色杜父魚的絕對懷卵量為54～1 002粒，隨著年齡的增加而增大;相對懷卵量為15.6～32粒/g，性成熟系數(shù)為30.9%～54%，均呈不規(guī)律性。雜色杜父魚雄魚的精液特別少，在進(jìn)行人工授精時，不能直接將精液擠到卵上，須借助等滲液采精;雜色杜父魚的卵為黏性，遇水迅速粘結(jié)在一起，無法授精，但能游離于等滲液中，因此，在進(jìn)行雜色杜父魚人工繁殖時，必須采用等滲液采精及載精授精。性成熟的雜色杜父魚腹部柔軟，應(yīng)及時采卵，避免流產(chǎn)。

3.5 受精卵適宜的消毒時間節(jié)點(diǎn)

在魚類人工繁殖過程中，對魚類受精卵進(jìn)行消毒處理，可以很大程度上預(yù)防各種病原對受精卵的危害，防止病原體的垂直傳播[5]，消毒劑對受精卵上附著菌具有抑制和清除作用[6-8]，但也會破壞受精卵的滲透壓、卵膜、卵質(zhì)，導(dǎo)致孵化率低，甚至產(chǎn)生畸變等一系列問題[9]，但使用得當(dāng)，可以獲得較高的孵化率[10]。本試驗(yàn)中受精卵消毒持續(xù)至出苗期，與2020年筆者所做試驗(yàn)中消毒持續(xù)至發(fā)眼期相比，孵化率提高10%～15%，而畸形率相當(dāng)，說明受精卵的適宜消毒節(jié)點(diǎn)為持續(xù)至出苗期。

3.6 降氧孵化是提高雜色杜父魚孵化率的有效手段

降氧孵化實(shí)為環(huán)境脅迫，即在出苗階段，通過人為降低孵化水體的溶解氧，刺激出苗，顯著縮短出苗時間，降低發(fā)眼卵感染水霉的風(fēng)險。本試驗(yàn)出苗階段采用降氧孵化，與2020年筆者試驗(yàn)中的正常孵化相比，雜色杜父魚可提前出苗5～7 d，孵化率也相應(yīng)提高。

3.7 為吉林省冷水魚產(chǎn)業(yè)提供名貴養(yǎng)殖品種，提高養(yǎng)殖效益

吉林省冷水魚產(chǎn)業(yè)養(yǎng)殖魚類以虹鱒、金鱒、美洲紅點(diǎn)鮭和白點(diǎn)鮭為主，養(yǎng)殖品種較為單一，生產(chǎn)旺季產(chǎn)品滯銷，養(yǎng)殖效益較低，而雜色杜父魚售價高，每公斤100～200元，且供不應(yīng)求。提高雜色杜父魚人工規(guī)模化繁殖水平，可為吉林省冷水魚產(chǎn)業(yè)提供新的養(yǎng)殖品種，并可通過調(diào)整養(yǎng)殖結(jié)構(gòu)，改善養(yǎng)殖現(xiàn)狀，提高養(yǎng)殖效益。

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（收稿日期：2021-11-18）

基金項(xiàng)目：吉林省科技發(fā)展計劃項(xiàng)目（20190301035NY）。

作者簡介：肖志國（1965-），男，正高級工程師，研究方向：水產(chǎn)養(yǎng)殖技術(shù)。E-mail：381996804@qq.com。