汪陳才

摘要：HPLC法也叫做高效液相色譜法，該方法在檢測(cè)農(nóng)產(chǎn)品藥殘中的應(yīng)用十分廣泛，是保障農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全的重要手段。近年來(lái)，隨著HPLC法的完善，其自動(dòng)化水平以及所應(yīng)用的儀器設(shè)備性能更高，因此檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性也隨之大幅度提升。但是受多方面因素的影響，檢測(cè)誤差依然存在，主要一種在樣品前處理過(guò)程之中?；诖?，本文分析了影響HPLC法測(cè)定農(nóng)產(chǎn)品藥殘結(jié)果的主要因素，并對(duì)降低檢測(cè)誤差的相關(guān)措施提出建議，僅供大家參考。

關(guān)鍵詞：HPLC法;農(nóng)產(chǎn)品藥殘;影響因素;建議

引言：HPLC法具有靈敏度高以及自動(dòng)化水平高等方面的特點(diǎn)，因此在農(nóng)產(chǎn)品藥殘測(cè)定過(guò)程中的應(yīng)用十分廣泛。但是在HPLC法的應(yīng)用過(guò)程中會(huì)受到多方面因素的干擾，影響測(cè)定結(jié)果的準(zhǔn)確性。雖然在新技術(shù)以及新設(shè)備的支持下，檢測(cè)誤差幾率大幅度降低，但是在抽樣以及樣品前處理及標(biāo)準(zhǔn)品配置等方面依然容易出現(xiàn)誤差。針對(duì)這種情況，需要我們?nèi)娣治鱿嚓P(guān)的影響因素，并積極探索更加有效的措施，提升HPLC法的應(yīng)用效果。

1抽樣與楊平前處理過(guò)程中的影響因素分析

1.1抽樣過(guò)程中的影響因素

農(nóng)產(chǎn)品是一個(gè)廣泛的概念，不單單指種植業(yè)產(chǎn)品，而且還包含著動(dòng)物產(chǎn)品以及微生物產(chǎn)品等，因?yàn)檗r(nóng)產(chǎn)品種類繁多，使得抽樣工作更具復(fù)雜性，并且抽樣的數(shù)量以及抽樣的方法等都會(huì)對(duì)最終的測(cè)定結(jié)果產(chǎn)生影響。針對(duì)不同的農(nóng)產(chǎn)品有著不同的抽樣標(biāo)準(zhǔn)方法，除此之外，抽樣所應(yīng)用的器皿、抽樣的時(shí)節(jié)以及楊平的封存、儲(chǔ)運(yùn)等也會(huì)對(duì)最終的分析結(jié)果產(chǎn)生重要影響。

1.2樣品預(yù)處理過(guò)程中的影響因素

樣品備制以及對(duì)樣品中待測(cè)物質(zhì)進(jìn)行提取、凈化等環(huán)節(jié)統(tǒng)稱為樣品前處理，進(jìn)行樣品前處理，可以消除基質(zhì)干擾，有助于提升分析結(jié)果的可靠性與準(zhǔn)確性。在應(yīng)用HPLC法進(jìn)行農(nóng)產(chǎn)品藥殘測(cè)定過(guò)程中，樣品前處理是重要環(huán)節(jié)之一，并且會(huì)占用絕大部分時(shí)間，同時(shí)大約有60%左右的實(shí)驗(yàn)誤差均產(chǎn)生在該階段。由此可見，樣品前處理過(guò)程是影響HPLC法測(cè)定結(jié)果的主要因素。具體來(lái)講，其影響因素主要包括以下幾個(gè)方面：

首先，樣品備制過(guò)程中的影響因素。對(duì)樣品的粉碎、縮分等環(huán)節(jié)統(tǒng)稱為樣品備制，其中各個(gè)環(huán)節(jié)所應(yīng)用方法是否正確是影響檢測(cè)結(jié)果的主要因素。例如樣品的粉碎度不達(dá)標(biāo)，樣品粒度過(guò)大，則會(huì)影響到提取率。

其次，分離提取中的影響因素。在樣品分離提取過(guò)程中需要應(yīng)用到提取劑，而提取的方法、提取劑的純度以及提取過(guò)程中的溫度等均會(huì)對(duì)最終的檢測(cè)結(jié)果產(chǎn)生影響。最后，提取溶劑方面的影響。要結(jié)合不同的樣品合理選擇提取溶劑，如果提取溶劑選擇不當(dāng)，則必然會(huì)對(duì)檢測(cè)結(jié)果造成不利影響。與此同時(shí)，應(yīng)用不同性質(zhì)的提取劑也會(huì)產(chǎn)生不同的提取效果。以乙烷為例，如果提取的樣品中脂肪以及色素的含量不高，則乙烷能夠發(fā)揮有效的作用，但是應(yīng)用乙烷進(jìn)行提取的提取率則相對(duì)較低。再以丙酮為例，應(yīng)用丙酮進(jìn)行提取，可以實(shí)現(xiàn)對(duì)大部分農(nóng)藥的溶解，但是在此過(guò)程中也會(huì)溶解大量的色素和油脂，這會(huì)給后續(xù)的凈化工作帶來(lái)不利影響。由此可見，提取溶劑會(huì)對(duì)檢測(cè)結(jié)果產(chǎn)生較大的影響，在應(yīng)用HPLC法測(cè)定農(nóng)產(chǎn)品藥殘過(guò)程中，應(yīng)結(jié)合樣品的特點(diǎn)和性質(zhì)，合理選擇提取溶劑。

除了以上影響因素之外，提取方式也是重要影響因素之一。在農(nóng)藥殘留提取過(guò)程中，所應(yīng)用的方法有多種，以往以液液分配萃取、固液萃取以及沉淀、離心等方法為主。傳統(tǒng)提取方法存在多方面的弊端與不足，如工作量大，所應(yīng)用的有機(jī)溶液較多，容易造成環(huán)境污染，并且傳統(tǒng)提取方法效率低，誤差率高。為此，在傳統(tǒng)提取方法的基礎(chǔ)上，開發(fā)研制了新型提取方法，如固相萃取法、膜萃取法、加速溶劑提取法等，新型提取方法的作用更為顯著，提取效果更佳，但是新型提取方法所需的儀器設(shè)備較多，因此成本高，同時(shí)還對(duì)操作人員提出了更高的要求。在提取方法的選用過(guò)程中，應(yīng)結(jié)合被測(cè)藥物的性質(zhì)以及檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)等，但受操作人員技術(shù)水平以及資金等因素的限制，往往只能采用成本較低的提取方法，這種現(xiàn)象在縣、鄉(xiāng)的農(nóng)殘檢測(cè)過(guò)程中表現(xiàn)得尤為突出。提取方法受限，避免會(huì)對(duì)提取效果以及最終的檢測(cè)結(jié)果等產(chǎn)生影響。另外，提取溫度也是主要影響因素之一，特別是酶促反應(yīng)，溫度低反應(yīng)不完會(huì)，導(dǎo)致提取率及檢測(cè)結(jié)果低，甚至出現(xiàn)假陽(yáng)性或檢測(cè)失敗，溫度過(guò)高影響酶活性可能導(dǎo)致假陰性率提高。

最后，凈化濃縮過(guò)程中的影響因素。針對(duì)待測(cè)物的凈化，應(yīng)保障凈化劑的純度，否則將會(huì)嚴(yán)重影響凈化效果。另外凈化劑的選擇也會(huì)對(duì)凈化結(jié)果產(chǎn)生重要影響，凈化劑選擇不當(dāng)也會(huì)對(duì)凈化結(jié)果產(chǎn)生不利影響。而對(duì)于濃縮而言，在濃縮過(guò)程中所應(yīng)用的方法，以及濃縮過(guò)程中的溫度以及壓力等也是重要的影響因素。

2應(yīng)用HPLC法測(cè)定農(nóng)產(chǎn)品藥殘的建議

2.1規(guī)范抽樣操作

要結(jié)合相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)要求規(guī)范抽取受檢樣品，并在樣品的運(yùn)輸和儲(chǔ)存環(huán)節(jié)結(jié)合樣品的性質(zhì)合理選擇方式方法。要確保各個(gè)環(huán)節(jié)中樣品不會(huì)遭受污染、不會(huì)發(fā)生變質(zhì)等情況。與此同時(shí)還要保證樣品的原始性、代表性，這樣才能為后續(xù)的檢測(cè)工作奠定基礎(chǔ)。

2.2加強(qiáng)檢測(cè)過(guò)程的溫度把控

鑒于上文分析可知，溫度是影響HPLC法測(cè)定農(nóng)產(chǎn)品藥殘結(jié)果的主要因素之一，因此在檢測(cè)過(guò)程中應(yīng)加強(qiáng)對(duì)溫度的把控。要將實(shí)驗(yàn)室溫度控制在18-25攝氏度范圍之內(nèi)，具體來(lái)講，溫度控制應(yīng)在保證樣品與待測(cè)物性質(zhì)盡可能完好的前提下，獲得盡可能高的提取率和工作效率。

2.3科學(xué)選用檢測(cè)試劑

為提升溶解度，檢測(cè)試劑的選用應(yīng)確保其與待測(cè)物及其代謝物極性相近。要想達(dá)到理想效果，在選用檢測(cè)試劑過(guò)程中，應(yīng)結(jié)合試樣的狀況以及溶劑的性質(zhì)等方面因素，同時(shí)還要注重試劑的純度以及試劑的揮發(fā)性等方面的因素。為進(jìn)一步提升提取效率，在待測(cè)物提純過(guò)程中，可以采用多種提取劑混合應(yīng)用的方式，甚至結(jié)合實(shí)際情況還可以在提取劑中適量加入無(wú)機(jī)鹽，這些方式都有助于提升提取效率。另外，還要確保試劑的純度，通常情況下，進(jìn)口試劑的純度更高，但是需要加大的成本投入，而國(guó)產(chǎn)試劑雖然價(jià)格更加親民，但是其純度不足。通常情況下，在應(yīng)用國(guó)產(chǎn)試劑的時(shí)需要對(duì)其進(jìn)行凈化處理才能應(yīng)用。

2.4科學(xué)選用操作方法

在提取過(guò)程中，應(yīng)結(jié)合待測(cè)物的性質(zhì)以及成本投入等因素合理選用提取方法，所選用的提取方法不能導(dǎo)致待測(cè)物出現(xiàn)氧化、變形以及分解等現(xiàn)象，以免影響提取效果。另外，在凈化以及濃縮等環(huán)節(jié)也要科學(xué)選用操作方法，要結(jié)合萃取劑的溶解性以及自身的性質(zhì)，同時(shí)還要充分考慮待測(cè)物以及基質(zhì)組分的性質(zhì)等，在此基礎(chǔ)上才能保障所選用的方法的科學(xué)性。

結(jié)束語(yǔ)：HPLC法是主要的測(cè)定農(nóng)產(chǎn)品藥殘的方法之一，在保障農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全方面發(fā)揮著十分重要的作用。但在HPLC法的應(yīng)用過(guò)程中依然會(huì)受到多方面因素的影響，導(dǎo)致檢測(cè)結(jié)果缺乏可靠性，需要我們積極探索更加有效的措施來(lái)規(guī)避不利影響因素，保障HPLC法的作用發(fā)揮，提升測(cè)定結(jié)果的準(zhǔn)確性。

參考文獻(xiàn)：

[1]湯彩云，王濤，屠潔，劉冠卉，黎鵬，趙靜.?比色法與HPLC法對(duì)比測(cè)定桑葉茶中γ-氨基丁酸的含量[J].?食品科學(xué)，2018，39（24）：256-260.

[2]王棘，潘雪妍，楊宏偉.?HPLC法和氨基酸分析儀（AAA）法測(cè)定腸外營(yíng)養(yǎng)注射液（25）中18種氨基酸的含量的比較[J].?藥物分析雜志，2012，32（06）：1085-1089.

[3]石林娟，曹磊，宋玉，王健，劉超，李珂昕.?HPLC法和Berthelot比色法測(cè)定發(fā)芽糙米中γ-氨基丁酸的含量[J].?糧食與飼料工業(yè)，2015，（01）：61-65.