楊勝良　黃龍武　戴紅　錢敏才　洪秀娟　沈仲夏

[關(guān)鍵詞] 單相抑郁;雙相抑郁;CD4+;CD8+

[中圖分類號] R749.42? ? ? ? ? [文獻(xiàn)標(biāo)識碼] A? ? ? ? ? [文章編號] 1673-9701（2021）18-0023-04

Characteristics of T lymphocyte subsets in patients with unipolar depression and bipolar depression

YANG Shengliang1? ?HUANG Longwu2? ?DAI Hong1? ?QIAN Mincai1? ?HONG Xiujuan3? ?SHEN Zhongxia1

1.Department of Psychosomatics， Huzhou Third People′s Hospital in Zhejiang Province， Huzhou? ?313000， China; 2.Department of Pathology， Huzhou Third People′s Hospital? in Zhejiang Province， Huzhou? ?313000， China; 3.Key Laboratory of Psychiatry， Huzhou Third People′s Hospital in Zhejiang Province， Huzhou? ?313000， China

[Abstract] Objective To compare the characteristics of peripheral blood T lymphocyte subsets in patients with unipolar depression and bipolar depression， to find immunological differential diagnosis indicators for unipolar and bipolar depression. Methods A prospective research method was used to select patients hospitalized in the Department of Psychosomatics in our hospital from June 2018 to October 2019. There were 600 patients in the unipolar depression group and 60 patients in the bipolar depression group. A total of 30 healthy people in the hospital were selected as the healthy control group. Blood samples were collected from the three groups. The counts of CD3+， CD4+， CD8+ and CD4+/CD8+ cell substes in peripheral blood were detected using CD series cell detection slides， and related analysis was performed. Results There were statistically significant differences in the counts of CD3+， CD4+ and CD8+ in peripheral blood among the unipolar depression group， the bipolar depression group and the healthy control group （P<0.001）. The counts of CD3+， CD4+ and CD8+ in the unipolar depression group were lower than those in the bipolar depression group and the healthy control group， with statistically significant differences（P<0.01）. The counts of CD3+ and CD8+ in the bipolar depression group were lower than those in the healthy control group， with statistically significant differences （P<0.01）. The counts of CD4+ in the bipolar depression group were lower than those in the healthy control group， but without statistically significant differences （P>0.05）. Conclusion Patients with unipolar depression and bipolar depression have abnormal distribution of T lymphocyte subsets. T lymphocyte subsets can be used to differentiate between unipolar depression and bipolar depression.

[Key words] Unipolar depression; Bipolar depression; CD4+; CD8+

抑郁癥是一種臨床上常見的慢性精神疾病，與抑郁癥相比，雙相障礙治療更困難，自殺風(fēng)險更大，1/3以上抑郁癥患者在10年后才被修正診斷為雙相障礙[1]。人體免疫系統(tǒng)與中樞神經(jīng)系統(tǒng)具有密切聯(lián)系[2-3]，情緒障礙和應(yīng)激事件可以影響免疫功能，而免疫功能的改變也可能成為抑郁障礙的病因[4-5]。調(diào)節(jié)性T細(xì)胞在雙相障礙患者中存在明顯的下降[6]，免疫功能失調(diào)可能是雙相情感障礙發(fā)病的重要機制之一[7]。T淋巴細(xì)胞計數(shù)及其亞群的改變可在很大程度上反映免疫水平的改變[8]，抑郁癥（單相抑郁）與雙相情感障礙抑郁發(fā)作（雙相抑郁）兩者之間T淋巴細(xì)胞亞群分布特征還不清楚。本研究通過T淋巴細(xì)胞（CD3+、CD4+、CD8+）計數(shù)的檢測，探討單相抑郁、雙相抑郁與健康人群三者之間T淋巴細(xì)胞變化，從而尋找單、雙相抑郁的免疫學(xué)鑒別診斷標(biāo)志物，現(xiàn)報道如下。

1 對象與方法

1.1 研究對象

所有研究對象為2018年6月至2019年10月我院心身科住院患者。納入標(biāo)準(zhǔn)：符合《國際疾病分類第十次修訂本精神和行為障礙診斷標(biāo)準(zhǔn)》ICD-10抑郁發(fā)作和雙相情感障礙抑郁發(fā)作診斷標(biāo)準(zhǔn)。排除標(biāo)準(zhǔn)：①類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、系統(tǒng)性紅斑狼瘡等免疫系統(tǒng)疾病者;②近1年內(nèi)未曾使用過免疫抑制劑者;③近半個月內(nèi)無感染性疾病者[7];④嚴(yán)重軀體疾病、酒精或藥物依賴者等。所有研究對象均被告知研究流程，同時簽署書面知情同意書，共收集入組單相抑郁組共600例，男146例，女454例，平均年齡（42.02±10.38）歲;雙相抑郁組共60例，男21例，女39例，平均年齡（41.27±11.89）歲;健康對照為來本院體檢合格人員共30例，男10例，女20例，平均年齡（40.50±11.64）歲，排除既往/現(xiàn)患精神疾病及感染性疾病。三組年齡比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義（F=2.472，P>0.05），具有可比性。

1.2 方法

對研究對象和健康對照組人員抽取清晨空腹靜脈血2 mL（以EDTA為抗凝劑），送湖州市第三人民醫(yī)院病理科進(jìn)行淋巴細(xì)胞亞群檢測，包括CD3+、CD4+、CD8+T淋巴細(xì)胞，采用CD系列（CD3+/4+/8+）細(xì)胞檢測玻片，所用玻片均購于上海匯中細(xì)胞生物科技有限公司。

采用CD系列細(xì)胞檢測玻片進(jìn)行檢測，具體方法如下：加380 μL緩沖液于2 mL圓底管中并標(biāo)記樣本編號，加20 μL搖勻血樣于緩沖液中，即刻混勻稀釋血樣，吸取5 μL稀釋血樣滴入玻片各抗體包被區(qū)中央，孵育40 min后，按序插入染色架，即刻放入緩沖液中旋轉(zhuǎn)提拉至無色透明，立即放入過氧化物酶染色液中靜置1 min，取出稍加瀝干，放入新鮮過氧化氫工作溶液中，靜置4 min。將染色架放入400 mL75%乙醇染液缸中，旋轉(zhuǎn)提拉至無色透明，干燥儀下干燥6 min，將染色架放入血細(xì)胞分析用染色液，靜置1 min，再轉(zhuǎn)入500 mL純水染液缸中，靜置30 s，提拉3～5下，干燥后用顯微鏡自動計數(shù)。

1.3觀察指標(biāo)及評價標(biāo)準(zhǔn)

T淋巴細(xì)胞計數(shù)可反映免疫水平[8]，本研究采用CD系列細(xì)胞檢測玻片檢測外周血中CD3+、CD4+、CD8+、CD4+/CD8+細(xì)胞亞群計數(shù)，CD3+、CD4+、CD8+正常值標(biāo)準(zhǔn)分別為（770～2860）個細(xì)胞/μL、（414～1440）個細(xì)胞/μL、（238～1250）個細(xì)胞/μL。

1.4 統(tǒng)計學(xué)方法

應(yīng)用 SPSS 19.0統(tǒng)計學(xué)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，計量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（x±s）表示，組間比較采用t檢驗;計數(shù)資料以[n（%）]表示，組間比較采用χ2檢驗，P<0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 三組CD3+、CD4+、CD8+數(shù)值及CD4+/CD8+比值比較

單相抑郁組、雙相抑郁組與健康對照組三組CD3+、CD4+、CD8+數(shù)值比較，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.001），三組CD4+/CD8+比值相比，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.01）。見表1。

2.2 三組間CD3+、CD4+、CD8+計數(shù)兩兩比較

2.2.1 CD3+計數(shù)組間比較? 單相抑郁組顯著低于健康對照組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.01）;雙相抑郁組同樣低于健康對照組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P=0.01）;單相抑郁組顯著低于雙相抑郁組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.01）。見圖1。

2.2.2 CD4+計數(shù)組間比較? 單相抑郁組顯著低于健康對照組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.01）;但雙相抑郁組與健康對照組比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P=0.324）;單相抑郁組顯著低于雙相抑郁組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P=0.001）。見圖2。

2.2.3 CD8+計數(shù)組間比較? 單相抑郁組顯著低于健康對照組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.01）;雙相抑郁組同樣低于健康對照組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.01）;同時單相抑郁組顯著低于雙相抑郁組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P=0.002）。見圖3。

3 討論

本研究通過比較抑郁癥患者外周T細(xì)胞亞群特征性變化，結(jié)果顯示單相抑郁組CD3+、CD4+和CD8+計數(shù)均顯著低于健康對照組（P<0.01），而雙相抑郁組CD3+和CD8+計數(shù)均顯著低于健康對照組（P<0.01），單相抑郁組CD3+、CD4+、CD8+計數(shù)低于雙相抑郁組（P<0.01）;單相抑郁組和雙相抑郁組CD4+/CD8+比值均高于健康對照組（P<0.01），但單相抑郁組和雙相抑郁組CD4+/CD8+比值比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05）。

大量研究報告抑郁癥存在T細(xì)胞缺陷[9]，目前抑郁癥與雙相情感障礙生物學(xué)因素仍有待明確，發(fā)病機制可能涉及遺傳、環(huán)境及社會心理等多種因素，傳統(tǒng)的單胺功能異常假說受到越來越多的挑戰(zhàn)，而以神經(jīng)炎癥為核心的神經(jīng)免疫因素成為目前的研究熱點[10-11]，包括細(xì)胞因子、免疫細(xì)胞數(shù)量、比例的異常均可導(dǎo)致神經(jīng)、內(nèi)分泌和免疫系統(tǒng)紊亂[12-13]。T淋巴細(xì)胞可分為CD3+、CD4+和CD8+等亞群，CD3+代表總T淋巴細(xì)胞，其數(shù)量直接反映機體的免疫活性;CD4+為T輔助細(xì)胞，可促進(jìn)B淋巴細(xì)胞分泌抗體;CD8+為T殺傷細(xì)胞，直接參與病毒清除過程[14]。CD3+、CD4+、CD8+是T細(xì)胞信號傳導(dǎo)的主要分化群，在外周血免疫細(xì)胞循環(huán)功能中起到關(guān)鍵作用[15]，CD4+、CD8+計數(shù)以及CD4+/CD8+比值可以一定程度反映中樞神經(jīng)免疫功能狀態(tài)和平衡。

目前臨床缺乏有效的工具鑒別單相和雙相抑郁，國外研究發(fā)現(xiàn)高達(dá)60%的雙相障礙被誤診為單相抑郁[16]，而國內(nèi)相關(guān)研究結(jié)果顯示，雙相障礙及其亞型雙相障礙Ⅰ型、Ⅱ型被誤診為抑郁癥的比例分別為20.8%、7.9%和12.8%[17]，單雙相抑郁可能存在不同的免疫特征，目前直接比較單相抑郁和雙相抑郁患者T細(xì)胞亞群計數(shù)的研究尚不多見。本研究結(jié)果顯示，單相抑郁與雙相抑郁患者T淋巴細(xì)胞亞群數(shù)量均較健康人群減少，三組CD3+、CD4+、CD8+數(shù)值比較，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.001），單相抑郁比雙相抑郁CD3+、CD4+、CD8+數(shù)值更低（P<0.01），提示單相抑郁和雙相抑郁患者均存在一定的免疫失衡，單相抑郁T細(xì)胞的表達(dá)水平下降更嚴(yán)重。與馬永能等[18]研究結(jié)果相似。抑郁癥組 CD4+/CD8+比值低于健康對照組，抑郁癥存在免疫功能紊亂。本研究結(jié)果顯示，雙相抑郁患者CD3+、CD8+數(shù)值均低于健康對照組（P<0.01），CD4+數(shù)值也低于健康對照組，但差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05）。鄭亞麗[19]研究顯示，雙相障礙抑郁組外周血細(xì)胞毒性T細(xì)胞（CD3+、CD8+）表達(dá)明顯低于健康對照組，與本研究結(jié)果一致。Pietruczuk 等[20]研究發(fā)現(xiàn)，所有雙相障礙患者CD3+/CD4+和CD3+/CD8+細(xì)胞百分率均低于正常人。Becking等[21]研究結(jié)果顯示，抑郁癥患者CD4T輔助細(xì)胞缺乏，而雙相障礙患者CD4T輔助細(xì)胞水平正常甚至升高，也與本研究結(jié)果類似。進(jìn)一步證實單、雙相抑郁患者細(xì)胞免疫功能低下，致使神經(jīng)-內(nèi)分泌-免疫之間的協(xié)調(diào)性破壞，造成內(nèi)環(huán)境失衡，單相抑郁T細(xì)胞數(shù)值更低，免疫失衡更嚴(yán)重。

綜上所述，單相抑郁、雙相抑郁患者均存在T淋巴細(xì)胞表達(dá)水平下降，且單、雙相抑郁間的差異較明顯，T淋巴細(xì)胞亞群可作為臨床單、雙相抑郁診斷的參考依據(jù)，可以嘗試用于單、雙相抑郁鑒別。抑郁癥和雙相障礙的病因復(fù)雜，神經(jīng)-內(nèi)分泌-免疫系統(tǒng)之間相互交錯，各細(xì)胞因子間如何相互影響、如何發(fā)揮作用等，還有待進(jìn)一步研究，同時本研究樣本量不平衡，未能排除年齡等混雜因素進(jìn)行分層研究，也是本研究的局限性所在。

[參考文獻(xiàn)]

[1] 陸林.沈漁邨精神病學(xué)[M].6版.北京：人民衛(wèi)生出版社，2018：344.

[2] Osimo EF，Pillinger T，Rodriguez IM，et al. Inflammatory markers in depression：A meta-analysis of mean differences and variability in 5，166 patients and 5，083 controls[J].Brain Behavior and Immunity，2020，87：901-909.

[3] Benedetti M，Anyonucci D，Pascali SAD，et al.Crosstalk between endocannabinoid and immune systems：A potential dysregulation in depression？[J].Psychopharmacology，2016，233（9）：1-14.

[4] 鄧亞潔，劉雨佳，何漪，等. 抑郁癥患者Th17免疫調(diào)節(jié)相關(guān)炎性細(xì)胞因子與抑郁嚴(yán)重程度的相關(guān)性[J]. 中華行為醫(yī)學(xué)與腦科學(xué)雜志，2021，30（5）：420-425.

[5] Russo S. Individual differences in immune-brain interface promotes stress vulnerability：Implications for the study of depression[J]. Biological Psychiatry，2020，87（9）：S2-S3.

[6] Ashari NSM，Sanusi SNFM，Yasin MAM，et al. Major depressive disorder patients on antidepressant treatments display higher number of regulatory T cells[J]. The Malaysian Journal of Pathology，2019，41（2）：169-176.

[7] Lee Y，Mansur RB，Brietzke E，et al. Peripheral inflammatory biomarkers define biotypes of bipolar depression[J].Molecular Psychiatry，2021，89（9）：S156.

[8] Ko FY，Tsai SJ，Yang AC，et al.Association of CD8 T cells with depression and anxiety in patients with liver cirrhosis[J].International Journal of Psychiatry in Medicine，2013，45（1）：15-29.

[9] Patas K，Willing A，Demiralay C，et al. T cell phenotype and T cell receptor repertoire in patients with major depressive disorder[J].Front Immunol，2018（9）：291.

[10] Uintl，Bastos GM，Thurow HS，et al. Increased levels of plasma IL-1b and BDNF can predict resistant depression patients[J].Rev Assoc Med Bras，2019，65（3）：361-369.

[11] 錢曉娟，陳國強，周新明，等.雙相障礙患者治療前后血清白介素6（IL-6）等細(xì)胞因子水平的變化[J].國際精神病學(xué)雜志，2017，44（3）：401-403.

[12] Filiano AJ，Xu Y，Tustison NJ，et al. Unexpected role of interferon- γ in regulating neuronal connectivity and social behaviour[J].Nature，2016，535（7612）： 425-429.

[13] 卜琴芳，陳方斌，張李婉，等. 氟西汀對抑郁癥患者血清CD3、CD4和CD8細(xì)胞水平和糖脂代謝的影響[J].西部醫(yī)學(xué)，2017，29（11）：1520-1523.

[14] Lynall ME，Turner L，Bhatti J，et al. Peripheral blood cell-stratified subgroups of inflamed depression[J]. Biological Psychiatry，2020，88（2）：185-196.

[15] 趙劍華，張靜霞，彭曉明，等. 改良中醫(yī)情緒療法聯(lián)合帕羅西汀在抑郁癥患者中的療效觀察及對外周血T淋巴細(xì)胞亞群的影響研究[J]. 中國免疫學(xué)雜志，2019， 35（11）：1314-1319.

[16] Fears SC，Reus VI，Dunn W.Bipolar disorder[M]. Rosenberg′s Molecular and Genetic Basis of Neurological and Psychiatric Disease （Sixth Edition），2020：633-652.

[17] 方貽儒，汪作為，陳俊. 中國雙相障礙的研究現(xiàn)狀與展望[J]. 中華精神科雜志，2015，48（3）：141-146.

[18] 馬永能，何芳，張潔，等. 抑郁癥患者淋巴細(xì)胞亞群免疫表型分析[J]. 四川精神衛(wèi)生，2018，31（4）：339-343.

[19] 鄭亞麗.雙相障礙抑郁相患者T細(xì)胞免疫功能的研究[D].杭州：浙江大學(xué)醫(yī)學(xué)院，2017.

[20] Pietruczuk K，Lisowska KA，Grabowski K，et al. Peripheral blood lymphocyte subpopulations in patients with bipolar disorder type Ⅱ[J]. Scientific Reports，2019，9 （1）：5869.

[21] Becking Karlijn，Haarman Bartholomeus CM，Grosse Laura，et al. The circulating levels of CD4 t helper cells are higher in bipolar disorder as compared to major depressive disorder[J]. Journal of Neuroimmunology，2018，319：28-36.

（收稿日期：2021-03-19）