翟明，王祥潤，吳漫婷，林大都，李俊芳，李蘭芳

(嘉應(yīng)學(xué)院醫(yī)學(xué)院，廣東 梅州 514031)

藥用植物標(biāo)本是在沒有新鮮植物的情況下供辨認(rèn)、教學(xué)、參觀等的最理想資料。目前,應(yīng)用最廣泛的實(shí)物標(biāo)本是臘葉標(biāo)本、浸制標(biāo)本、覆膜標(biāo)本和樹脂標(biāo)本。其中，臘葉標(biāo)本又稱壓制標(biāo)本，供教學(xué)和研究使用,臘葉標(biāo)本操作簡便,成本低且環(huán)保,易于查閱和攜帶,應(yīng)用范圍最廣,是資源普查的主要實(shí)物標(biāo)本[1]。為確保標(biāo)本的完整性和美觀性，臘葉標(biāo)本的制作過稱尤為重要。其他研究者[2-5]也總結(jié)了植物標(biāo)本制作的研究概況及制作方法，但未按植物特性具體區(qū)分，本研究是根據(jù)全國第四次中藥資源普查—廣東省梅縣區(qū)、大埔縣、興寧市、梅江區(qū)四個(gè)縣市區(qū)的普查工作，積累了大量藥用植物標(biāo)本詳細(xì)制作的經(jīng)驗(yàn)，以期為后續(xù)蠟葉標(biāo)本的規(guī)范化制作提供參考。

1 植物的采集

在外出采集植物前，需提前規(guī)劃好本次工作的路 線和時(shí)間，安排并準(zhǔn)備好必須的物品，如干糧、水、便藥、鉛筆、記錄本、標(biāo)本袋、枝剪、照相機(jī)等。采集前要先拍照，植物的照片要包括其單獨(dú)的整體照片、具有辨認(rèn)特征的局部照片及其生長環(huán)境的照片。采集標(biāo)本時(shí)，選擇無蟲蛀、生長狀態(tài)良好的植株，并盡量采集能代表該植物本身形態(tài)特征的完整標(biāo)本，如植物的花、果實(shí)、種子等。每一個(gè)物種采集3～5份標(biāo)本，防止制作過程中損壞而無法彌補(bǔ)，但對于野外珍稀物種，一般只取一株或只拍照不采集。不同類別的植物的采集見表1。有些植物的特殊器官也是分類鑒定時(shí)的重要依據(jù),如百合科、蘭科、天南星科、石蒜科等某些藥用植物的地下部分,寄生藥用植物的寄主,蕨類藥用植物應(yīng)采集地下部分、營養(yǎng)葉、孢子葉及具有孢子囊群和孢子的植株[6]。

表1 不同類別的植物的采集及實(shí)時(shí)記錄

2 植物的修剪及清洗

清洗植物時(shí)主要洗去植物根部的泥沙和葉子上的蟲卵等雜物，清洗時(shí)動(dòng)作要輕柔，防止葉子、花、果實(shí)的部位脫落，根部泥沙難以清洗時(shí)可用刷子輕輕將泥沙刷掉，清洗完畢后用吸水紙將植株上殘留的水分吸干。修剪的原則是保留植株的主要辨認(rèn)特征，并且使之美觀，植物的大小可根據(jù)臺紙的大小進(jìn)行修剪，葉子較多可根據(jù)實(shí)際情況修剪去一部分葉子，花、果實(shí)等的修剪亦是如此。

3 植物的壓制

標(biāo)本壓制的一般步驟為：(1)在標(biāo)本夾上鋪上一層瓦楞板和3～4層吸水紙后，將標(biāo)本平鋪在吸水紙上展開。(2)標(biāo)本的葉子應(yīng)確保有正反兩面，一般只需反2～4片葉子即可。(3)壓制時(shí)盡量將根、葉子、花、果實(shí)等展開壓制，盡量不要重疊，以免影響鑒定。若是某一部位太高，可用硬紙板將植株整體墊高。(4)如果植株過大，可以折成“N”形或“V”形，也可以剪成上、中、下三段，然后進(jìn)行拼接，但不能破壞植株的主要辨認(rèn)特征[7]。一份標(biāo)本壓制完畢后，在其上方鋪3～4張吸水紙，重復(fù)以上操作，最后蓋上瓦楞板和標(biāo)本夾，用繩子綁緊。

壓制時(shí)應(yīng)根據(jù)植物不同器官的實(shí)際情況采用不同的壓制方法。如植物葉片的質(zhì)地包括革質(zhì)、紙質(zhì)、草質(zhì)、膜質(zhì)和肉質(zhì)，其中革質(zhì)和紙質(zhì)葉片質(zhì)地較硬，需要用硬紙板先將葉片固定，再鋪3～4層吸水紙，防止葉片干燥后失水翹起，容易損壞和影響美觀；草質(zhì)、膜質(zhì)葉片質(zhì)地較柔軟，無需用硬紙板壓制，可直接鋪上吸水紙；需要特別注意的是，肉質(zhì)葉片含水量較高，其壓制和干燥必須單獨(dú)進(jìn)行，以免其自身水分干燥不完全而損壞其他標(biāo)本。但對于含水量較多的果實(shí)、種子等，應(yīng)做好標(biāo)記后與標(biāo)本分開干燥，以免干燥不完全，植物不同器官的壓制方法見表2,不同質(zhì)地的植物葉片壓制方法見表3。

表2 不同種類植物器官的壓制

表3 不同質(zhì)地的植物葉片的壓制

4 標(biāo)本的干燥與保色

目前改良的標(biāo)本干燥保色方法有電熨斗熨燙快速干燥保色法、微波干燥保色法、烘箱干燥保色法、低溫脫水干燥保色法、硫酸銅試劑法等。其中使用較多的是烘箱干燥法，該方法相比于其他方法而言操作簡單，可同時(shí)干燥多份標(biāo)本，且可以控制溫度和時(shí)間；但由于不同質(zhì)地的葉片干燥的時(shí)間和溫度不同，需要分批烘干，一般使用的溫度是45 ℃，20～26 h；此方法對革質(zhì)和肉質(zhì)葉片的保色效果較差。目前保色效果較好的是硫酸銅試劑法，葉綠體卟啉環(huán)中的鎂原子可被銅離子、鋅離子等金屬離子置換，若銅離子置換葉綠素中鎂離子，則使葉片內(nèi)形成性質(zhì)穩(wěn)定的深綠色，這是硫酸銅試劑法的主要原理[8]，該方法保色效果較明顯，適用于革質(zhì)、紙質(zhì)葉片的保色，但是不適用于膜質(zhì)、草質(zhì)葉片的保色，因?yàn)槿~片經(jīng)浸泡煮制后變軟，像苧麻等表面有柔毛的葉片，撈出后葉片還會緊貼在一起，很難再將其展開；另外，該方法保色速度慢，適用于實(shí)驗(yàn)室或者數(shù)目較小的標(biāo)本保色，不適于大量標(biāo)本的保色。不同植物標(biāo)本干燥保色方法比較研究。孫立嬌[9]等通過對紫花藥用植物臘葉標(biāo)本的保色研究，提出經(jīng)保色處理后的植物標(biāo)本有利于長期保存。本研究也嘗試過不同方法處理植物，比較不同方法的保色優(yōu)缺點(diǎn)。如表4。

表4 常用的植物標(biāo)本干燥保色法

5 標(biāo)本修剪及上臺紙

標(biāo)本上臺紙前必須進(jìn)行修剪，盡量將植物的各個(gè)器官平展，修剪大小以適應(yīng)臺紙大小，且邊緣留約1 cm。將標(biāo)本置于臺紙(40 cm×30 cm)的光滑面，調(diào)整到適當(dāng)位置，左上角和右下角應(yīng)留有空余的地方以便貼上記錄簽(13 cm×9 cm)和鑒定簽(10 cm×7.5 cm)，粘貼時(shí)在鑒定簽的右下角和記錄簽的左上角涂上適量白乳膠，與臺紙的右下角和左上角相應(yīng)邊角對齊后進(jìn)行粘貼，不可超出臺紙，左下角和右上角分別蓋上省章和縣章?？p制標(biāo)本時(shí)一般采用膠粘裝訂法(白乳膠)和細(xì)線裝訂法(細(xì)棉線)，標(biāo)本的根莖用棉線固定，一般采用三針固定，根、莖、花各一針，枝條多的標(biāo)本也可以多固定幾針，盡量用植物的根莖將針孔遮住，以保證標(biāo)本的美觀[10]；葉片、花、果實(shí)等可用白乳膠固定，需將整個(gè)葉片或花瓣涂滿一層白乳膠，防止葉緣和花瓣邊緣翹起，但需特別注意的是，膠水不可涂太厚，否則會導(dǎo)致臺紙彎曲；葉片盡量不要相互遮擋，影響鑒定；標(biāo)本粘貼完畢后在枝條上綁上掛簽(如圖1所示)；另外，烘干或容易掉落的果實(shí)、種子可用密封袋保存，固定于該標(biāo)本右側(cè)。

圖1 藥用植物蠟葉標(biāo)本圖

6 標(biāo)本的鑒定

標(biāo)本上臺紙后需進(jìn)行鑒定、核對學(xué)名，對其進(jìn)行分科、分屬、分種，這是至關(guān)重要的一步，關(guān)乎該植物標(biāo)本的準(zhǔn)確性，參照中國植物志、廣東植物志等植物工具書，由具有植物學(xué)專業(yè)的老師進(jìn)行鑒定，每份標(biāo)本至少經(jīng)不同人鑒定2次。除對照實(shí)物標(biāo)本外，必要時(shí)需結(jié)合采集時(shí)拍的植物圖片，認(rèn)真核對每一種植物的信息，鑒定完畢后打印出鑒定簽(10 cm×7.5 cm)，在鑒定簽的右側(cè)涂上白乳膠貼于標(biāo)本右下角。此處不能完全貼住，以防止標(biāo)本鑒別有誤，可再次鑒定后補(bǔ)更正后的鑒定簽，與鑒定簽對齊，從右往左對齊。為了保護(hù)標(biāo)本的完整，一般鑒定后需放置一層硫酸紙以減少標(biāo)本與外界環(huán)境的接觸：在硫酸紙左邊邊緣位置涂上適量白乳膠粘于臺紙背面，再將硫酸紙折回臺紙正面，可對標(biāo)本起保護(hù)作用。

7 標(biāo)本的拍照

蠟葉標(biāo)本的電子信息存儲對科研、教師、學(xué)生的的隨時(shí)檢索、查詢提供了極大的方便，因此，所有蠟葉標(biāo)本的制作完成后對標(biāo)本的及時(shí)拍照亦十分重要。臘葉標(biāo)本進(jìn)行拍照前，需檢查該標(biāo)本是否合格：檢查有無采集簽、鑒定簽、掛簽、縣章、省章和標(biāo)本是否完整等。拍照時(shí)需特別注意：(1)在標(biāo)本左側(cè)放標(biāo)尺，將標(biāo)本擺放平整，盡量不留下陰影，掛簽不可擋住標(biāo)本。(2)臘葉標(biāo)本充滿畫面，多余的區(qū)域裁掉。(3)燈光明暗一致，可使用燈管四面打光。(4)照片邊緣整齊，標(biāo)本清晰。(5)相機(jī)像素為1 000萬。拍照完成后進(jìn)行后期處理：將照片上的陰影、斑點(diǎn)和雜質(zhì)去除以及將照片多余區(qū)域裁掉。

8 標(biāo)本的保存

臘葉標(biāo)本制作完畢后，需對其進(jìn)行一系列措施用以防止蟲蛀和發(fā)霉，這也是標(biāo)本保色中至關(guān)重要的一步，空氣中的水分、氧氣、還有光線等因素都會加速葉片變色的速度。將標(biāo)本置于密封袋中，放入干燥劑和樟腦丸防潮防蟲，后擠出密封袋中的空氣，但不可用真空機(jī)防止標(biāo)本變形，在密封箱中加入變色硅膠或鋪一層生石灰，蓋上瓦楞板后將密封袋放入密封箱中，密封后在空調(diào)低溫下保存。將制作好的標(biāo)本進(jìn)行整理，按植物分類等級進(jìn)行排列，本研究中的臘葉標(biāo)本按照恩格勒系統(tǒng)排序置于箱中有序保存，外箱側(cè)面貼上所存標(biāo)本目錄,如圖1。溫帶娣[11]，李志奇[12]等用氰化鉀、臭氧熏或低溫儲藏方式僅適用于少量標(biāo)本短期內(nèi)存放，除此之外，需隔一段時(shí)間開箱檢查變色硅膠或生石灰是否需要更換和標(biāo)本是否蟲蛀發(fā)霉。

9 討論

臘葉標(biāo)本的制作研究過程仍需每一位普查隊(duì)員和專業(yè)人士的改進(jìn)，以便標(biāo)本的長期保存，為其研究、教學(xué)提供極大幫助。如膜質(zhì)、草質(zhì)葉片和植物的花沾水容易皺縮，果實(shí)、種子等沾水后不易干燥，甚至容易發(fā)生霉變，故清洗時(shí)盡量避開這些器官。壓制標(biāo)本時(shí)需要時(shí)刻壓緊，以免葉片發(fā)生重疊。通過硫酸銅試劑法進(jìn)行標(biāo)本保色過程中，可用溫度計(jì)維持溶液的溫度，并隨時(shí)觀察葉片顏色變化，避免加熱用烘箱干燥標(biāo)本時(shí)，應(yīng)注意干燥時(shí)間和溫度，避免標(biāo)本過度失水或者干燥不完全，可采用計(jì)時(shí)開關(guān)控制干燥時(shí)間，定時(shí)檢查標(biāo)本干燥程度。標(biāo)本制作完畢后，若發(fā)現(xiàn)標(biāo)本霉變，可用酒精輕輕擦拭。在蠟葉標(biāo)本拍照過程中，若出現(xiàn)光線不均的現(xiàn)象，在翻拍臺上置一塊透明的玻璃，可基本去除陰影，大大的提高拍照的效率。

10 總結(jié)

蠟葉標(biāo)本的規(guī)范化制作是一項(xiàng)細(xì)致的工作，要求所有參與過的人員都必須耐心、細(xì)致，處理好每一個(gè)過程。一份完美的蠟葉標(biāo)本也體現(xiàn)了團(tuán)隊(duì)的合作精神和專業(yè)化水平。本研究是基于全國第四次中藥資源普查隊(duì)梅江區(qū)、梅縣區(qū)和大埔區(qū)資源調(diào)查過程中對植物臘葉標(biāo)本的主要研究內(nèi)容，臘葉標(biāo)本制作過程的每一步都要細(xì)細(xì)把關(guān)，需要極大的耐心和細(xì)心才能保證最終標(biāo)本的美觀和完整。采集盡量保證植株的完整，盡量采集處于花期果期的植物；清洗修剪要耐心，將泥沙和蟲卵全部清除，保證標(biāo)本美觀及完整性；壓制需注意不同植物采取不同的壓制方法，并及時(shí)做好記錄；確保標(biāo)本完全干燥后，才能上臺紙；標(biāo)本制作完成后，需要密封保存，并經(jīng)常查看有無發(fā)霉蟲蛀。