徐 飛 王國棟 孫 楊 傅兆水 梁作敏

(南京紅山森林動(dòng)物園，南京，210028)

鶴鴕(Cassowary)這個(gè)詞源自巴布亞語kasu(角)和weri(頭)，意為長角的頭，分布于新幾內(nèi)亞和澳大利亞北部的雨林中，能奔跑，善跳躍，性機(jī)警且兇猛[1]。雙垂鶴鴕(Casuariuscasuarius)在圈養(yǎng)條件下自然繁殖一直很困難，人工孵化更少之又少，南京紅山森林動(dòng)物園近幾年一直在不斷嘗試和改進(jìn)其自然繁殖和育雛技術(shù)[1-4]，2019年再次突破人工孵化難點(diǎn)，通過人工孵化技術(shù)，成功繁殖5只幼雛，現(xiàn)將掌握的人工孵化技術(shù)做簡要的總結(jié)介紹。由于中國動(dòng)物園圈養(yǎng)雙垂鶴鴕數(shù)量較少，能夠產(chǎn)卵繁殖的更加稀少，導(dǎo)致試驗(yàn)樣本數(shù)量及數(shù)據(jù)較少，筆者僅總結(jié)南京地區(qū)的經(jīng)驗(yàn)，試驗(yàn)結(jié)論的可復(fù)制性有待進(jìn)一步驗(yàn)證。

1 孵化前的準(zhǔn)備

1.1 孵化器的選擇

人工孵化采用德國原裝進(jìn)口的Grumbach孵化器S84，其優(yōu)點(diǎn)為精確度和穩(wěn)定性高，體積小，靜音，能耗低，水平滾軸翻卵可以根據(jù)卵的大小靈活地自由調(diào)節(jié)滾軸間距，具有自動(dòng)晾卵功能。

1.2 孵化室消毒

孵化工作開始前，需要對(duì)整個(gè)孵化室進(jìn)行1次環(huán)境消毒。先用按要求配比好的消毒水，對(duì)整個(gè)孵化室進(jìn)行噴灑消毒，并用消毒水對(duì)孵化器進(jìn)行擦拭，隔天后孵化室內(nèi)按每立方米30 mL甲醛和15 g高錳酸鉀的比例對(duì)整個(gè)孵化室進(jìn)行密閉熏蒸消毒，熏蒸結(jié)束后，開窗通風(fēng)。

2 卵的處理

2.1 卵的保存

卵的表面被糞便等污染有可能會(huì)攜帶病菌，應(yīng)盡可能保持卵的清潔。

卵儲(chǔ)存環(huán)境溫度保持12—20℃，相對(duì)濕度50%—70%，通風(fēng)，避免陽光直射。卵的保存時(shí)間建議在1周內(nèi)[5]。卵保存時(shí)應(yīng)當(dāng)氣室朝上，豎立保存，如果保存時(shí)間不超過1周不需要翻卵。

2.2 卵的稱重

在收卵后當(dāng)天對(duì)卵稱重，記錄卵鮮重；入孵時(shí)再次對(duì)卵稱重，記錄入孵卵重量；入孵后每5 d對(duì)卵稱重1次，每次稱重的時(shí)間相對(duì)固定，記錄卵在孵化過程中重量的變化，從而計(jì)算失重比。

3 孵化技術(shù)

3.1 卵體消毒

所有的消毒形式對(duì)入孵卵都存在風(fēng)險(xiǎn)并帶來有限益處[5]，因此不建議在入孵前對(duì)卵體使用消毒水進(jìn)行消毒，消毒水的濃度或溫度都有可能直接影響卵的孵化成功率。目前，較為安全并推薦的消毒形式是干燥清潔，即對(duì)卵體進(jìn)行簡單的擦拭去污即可，但擦拭時(shí)需控制好力度，不可用力過度，避免角質(zhì)層被破壞，防止感染。

3.2 孵化模式

人工孵化分為3個(gè)不同的模式：模式1，4枚卵放入國產(chǎn)孵化機(jī)中，孵化溫度36.7—37.3℃，相對(duì)濕度60%—70%。模式2，2枚卵前38 d在進(jìn)口機(jī)器中進(jìn)行孵化，孵化溫度36.1—36.7℃，相對(duì)濕度50%—60%，38 d后換到國產(chǎn)孵化機(jī)中進(jìn)行孵化，孵化溫度35.9—36.3℃，相對(duì)濕度50%—55%。模式3，5枚卵全程進(jìn)口孵化機(jī)中孵化，孵化溫度36.1—36.3℃，相對(duì)濕度55%—65%。

3.3 翻卵

人工孵化采用的孵化器為水平滾軸翻卵，但由于雙垂鶴鴕卵體較大，機(jī)器自動(dòng)翻卵角度無法達(dá)到180°，所以采取機(jī)器自動(dòng)翻卵與手動(dòng)翻卵相結(jié)合的方式，每日保證5次手動(dòng)翻卵，翻蛋角度達(dá)到180°，翻卵要順時(shí)針和逆時(shí)針交替進(jìn)行，不可向同一方向連續(xù)翻卵。保持每日翻卵次數(shù)為基數(shù)，可以有效地避免連續(xù)兩晚卵被翻轉(zhuǎn)到同一側(cè)，從而防止卵黃與卵殼膜粘連。

3.4 涼卵

涼卵方案見表1，環(huán)境溫度在25℃左右。

表1 雙垂鶴鴕人工孵化涼卵方案Tab.1 Egg cooling scheme of Casuarius casuarius artificial incubation

3.5 驗(yàn)卵

由于雙垂鶴鴕卵殼較厚，前期照卵還可以觀察到胚胎的發(fā)育情況，但是中后期就很難看清胚胎情況了，所以在驗(yàn)卵時(shí)，采取照卵和觀察胎動(dòng)相結(jié)合的方式。氣室的變化可以反映胚胎的發(fā)育情況，每次照卵需將整個(gè)氣室進(jìn)行標(biāo)注。根據(jù)資料可知，雙垂鶴鴕的孵化周期為46—52 d[6]，所以大致將整個(gè)孵化期分為4個(gè)時(shí)間段：1/4段、1/2段、3/4段和出雛(表2)

表2 雙垂鶴鴕不同階段胚胎發(fā)育情況Tab.2 Embryonic development of Casuarius casuarius

3.6 失重監(jiān)測

失重的監(jiān)測可以直觀地反應(yīng)孵化濕度是否合適，鳥類孵化失重約為(15±3)%[5]，所以從入孵后第5天開始，每5 d選擇同一時(shí)間點(diǎn)，對(duì)卵進(jìn)行稱重，并同時(shí)計(jì)算失重，直至記錄至第45天。在此次人工孵化中，只是將(15±3)%作為一個(gè)參考標(biāo)準(zhǔn)，并沒有刻意按照此標(biāo)準(zhǔn)對(duì)孵化濕度不斷地進(jìn)行調(diào)整。

4 孵化結(jié)果

4.1 孵化溫度和濕度

合適的孵化溫度是整個(gè)人工孵化的成功關(guān)鍵，只有適宜的孵化溫度，才能保證卵的胚胎正常發(fā)育和生長。過高的孵化溫度會(huì)導(dǎo)致胚胎發(fā)育過快，出現(xiàn)胚胎前期死亡，孵化后期溫度過高同樣會(huì)導(dǎo)致胚胎死亡或幼雛直接悶死在卵中。過低的孵化溫度又會(huì)導(dǎo)致胚胎生長發(fā)育緩慢，孵化期延長，卵黃吸收不佳或不能吸收，最后死亡。經(jīng)過不斷的摸索和試驗(yàn)，最終確定36.1—36.3℃為最適宜的孵化溫度，整個(gè)孵化期相對(duì)穩(wěn)定，出雛后幼雛生長發(fā)育良好。

自然狀況下，鶴鴕處在高濕度的地區(qū)，它們的卵容易受干燥影響而引起過度的失水。本次人工孵化相對(duì)濕度控制在55%—65%，出雛成功，其幼雛發(fā)育良好。

4.2 孵化周期

在2019年整個(gè)雙垂鶴鴕的人工孵化過程中，對(duì)收集到的11枚卵進(jìn)行了鮮重的稱量，統(tǒng)計(jì)結(jié)果見表3。由表3可見，最大卵重752 g，最小卵重607 g，平均重量698 g。從孵化成功的5枚卵來看：鮮卵重709—752 g，孵化溫度36.1—36.3℃，孵化期46—49 d，平均47.5 d。孵化時(shí)間最長為48.47 d，最短為45.97 d。

表3 雙垂鶴鴕人工孵化周期Tab.3 Incubation period of Casuarius casuarius

4.3 出雛率

模式1孵化時(shí)，除1組2號(hào)卵未受精外，另外3枚卵均出現(xiàn)前期死胚。模式2孵化時(shí)，轉(zhuǎn)入國產(chǎn)機(jī)器第4天，2枚卵的胚胎均死亡。模式3出雛率100%，5枚卵全程在進(jìn)口孵化機(jī)中孵化，孵化溫度36.1—36.3℃，相對(duì)濕度55%—65%。

4.4 出雛時(shí)長

雙垂鶴鴕的人工孵化從破殼到完全出雛時(shí)長最長為1 213 min，最短為185 min。5枚卵中4枚正常出雛的卵，出雛時(shí)長都在180 min以上。出雛時(shí)間最長的幼雛，由于其在卵體的銳端處破殼，且小雛體質(zhì)較弱，所以采取了人工助產(chǎn)。

4.5 失重

雙垂鶴鴕人工孵化45 d內(nèi)不同時(shí)期的失重是以入孵時(shí)重量為參照計(jì)算的。平均每日最大失重為1.71 g，最小為1.33 g，總體平均每日失重約1.54 g。

依據(jù)失重計(jì)算失重比(表4)，計(jì)算失重比時(shí)孵化期以48 d為標(biāo)準(zhǔn)。從失重比來看，最大失重比為11.1%，最小失重比為9.0%，平均失重比為10.18%，均低于(15±3)%，雖然從孵化結(jié)果上看均孵化成功，但在孵化濕度上有向下調(diào)整的空間。

表4 雙垂鶴鴕人工孵化失重比Tab.4 Weight loss of Casuarius casuarius incubation %

在出雛后對(duì)幼雛和殘余部分進(jìn)行稱重。出雛的幼雛最大體重509 g，占鮮卵重的69.1%，最小的雛重為476g，占鮮卵重的66.7%(表5)。

表5 雙垂鶴鴕人工孵化雛重和殘余重量統(tǒng)計(jì)Tab.5 Nestling and residues weight of Casuarius casuarius incubation

5 結(jié)論與討論

5.1 孵化溫度和濕度的控制

雙垂鶴鴕卵的孵化溫度，不同地方數(shù)據(jù)有一定差異，低的為35.5℃，高的為36.7℃，多數(shù)介于36.1—36.7℃。本研究雙垂鶴鴕的人工孵化共采取了3種模式，模式1和模式2均未成功，而模式3孵化溫度36.1—36.3℃，相對(duì)濕度55%—65%，全程恒溫恒濕，孵化成功率達(dá)到了100%，由此可以看出，雙垂鶴鴕在人工孵化中，似乎對(duì)溫度和濕度的穩(wěn)定有著極高的要求，一些細(xì)微的變化都會(huì)影響孵化的成功率。

5.2 孵化環(huán)境

雙垂鶴鴕的孵化環(huán)境應(yīng)盡可能地保持涼爽通風(fēng)，環(huán)境溫度不宜超過28℃，環(huán)境濕度不宜超過60%，否則可能會(huì)影響孵化器的工作精度。所以空調(diào)和抽濕機(jī)是必備的設(shè)備。

5.3 驗(yàn)卵經(jīng)驗(yàn)

雙垂鶴鴕由于卵壁較厚，對(duì)照卵要求很高，且不易清楚地觀察胚胎發(fā)育情況。所以照卵需要1支強(qiáng)光手電，并需要1間絕對(duì)的暗室。從本次人工孵化的經(jīng)驗(yàn)來看，夜晚在暗室中進(jìn)行照卵效果最佳。驗(yàn)卵需要關(guān)注幾個(gè)時(shí)間點(diǎn)：一是整個(gè)孵化期的1/4時(shí)間段左右，這個(gè)時(shí)間點(diǎn)可以確定胚胎的發(fā)育情況，此階段已經(jīng)可以清楚地看見蛛網(wǎng)狀的血管；二是整個(gè)孵化期的1/2時(shí)間段左右，此階段需每日進(jìn)行照卵，從而確定胚胎合攏時(shí)間，以便推算孵化期的時(shí)間，并可以確定胚胎發(fā)育是否存在過緩或過快的情況，從而調(diào)整孵化方案；三是孵化期的3/4時(shí)間段左右，此階段驗(yàn)卵的方式可采用晾卵時(shí)觀察卵體是否有晃動(dòng)，來確定胚胎的發(fā)育情況；四是在出雛期臨近時(shí)，通過晾卵時(shí)看和聽，來確定是否要出雛。前兩個(gè)階段可通過照卵了解。

5.4 失重

鳥類人工孵化失重控制在(15±3)%，孵化成功率最高[5]，但是本次雙垂鶴鴕的人工孵化將失重放寬至(15±5)%。本次人工孵化是首次嘗試，在整個(gè)孵化過程中，通過每個(gè)階段的驗(yàn)卵發(fā)現(xiàn)，卵的發(fā)育情況均符合預(yù)期，所以在對(duì)其進(jìn)行失重監(jiān)測的同時(shí)，并沒有刻意根據(jù)失重來調(diào)整孵化濕度。雖然本次孵化較為成功，但是在孵化濕度上，仍有優(yōu)化空間。

5.5 出雛行為

人工孵化至47 d，晾卵時(shí)可聽見明顯的幼雛叫聲，且可以清楚聽見幼雛喙部啄殼的聲音。聲音隨著時(shí)間的推移，越來越頻繁，敲擊聲也越來越頻繁。破殼時(shí)一般由氣室中部的一個(gè)點(diǎn)開始向周圍擴(kuò)裂，隨著幼雛掙脫得越來越劇烈，約整個(gè)卵體的1/3部分全部裂開，幼雛逐漸掙脫卵殼，直至完全出雛。

5.6 人工助產(chǎn)

通過人工助產(chǎn)，可以很好地提高人工孵化的成功率，但一定要把握好人工助產(chǎn)的方式方法，要盡可能通過人工助產(chǎn)輔助，讓小雛自主出雛。

當(dāng)小雛明顯過破殼時(shí)間而沒有破殼跡象時(shí)，可以用錐子或剪刀尖頭破孔。操作應(yīng)小心，不能讓卵殼破裂，只是開個(gè)小孔，讓新鮮空氣進(jìn)去。再放進(jìn)孵化器中，讓幼雛自己破殼。破孔應(yīng)靠近雛鳥頭的位置。胎位不正時(shí)，幼雛啄破卵殼，但因轉(zhuǎn)不動(dòng)身體，不能從里面將卵殼頂開，保持裂縫狀態(tài)，這時(shí)可以用鑷子沿著裂縫剝開一個(gè)小孔，同時(shí)應(yīng)注意避開卵膜上的血管。然后放進(jìn)孵化器，讓其自主破殼。

在雙垂鶴鴕的人工孵化過程中，2組2號(hào)由卵的小頭破殼，由人工助產(chǎn)完成出雛。2組2號(hào)破殼時(shí)只有一個(gè)點(diǎn)，在破殼5 h后，破殼處并沒有任何擴(kuò)大，遂開始進(jìn)行人工助產(chǎn)，用鑷子的鈍頭由破殼點(diǎn)進(jìn)行敲擊，不可用力過大，擴(kuò)大破殼點(diǎn)后，再放入孵化器中繼續(xù)孵化出雛。在第1次助產(chǎn)5 h后，幼雛依舊沒有能夠自主出雛的跡象，開始進(jìn)行第2次人工助產(chǎn)，在確定幼雛頭部位置后，開始用鑷子小心剝開幼雛頭部的部分卵殼，讓其可以呼吸到新鮮空氣，放回孵化器繼續(xù)孵化出雛。在破殼15 h后，小雛依舊不能自主出雛，再次擴(kuò)大破口，使其足部可以露出，再放回孵化器中，繼續(xù)孵化出雛，小雛開始頻繁掙脫，最后出雛成功。