何立楠，石金巧，張榮全，羅桂洪，袁 騰，樊 榮,3，尹顯慧,3，吳小毛,3，龍友華,3

(1.貴州大學(xué)獼猴桃工程研究中心, 貴州貴陽 550025；2.水城縣東部農(nóng)業(yè)產(chǎn)業(yè)園區(qū)管理委員會(huì), 貴州六盤水 553000；3.貴州大學(xué)作物保護(hù)研究所, 貴州貴陽 550025)

獼猴桃作為我國新興的經(jīng)濟(jì)林樹種之一，近年來得到了快速發(fā)展[1]，然而隨著生產(chǎn)規(guī)模逐漸擴(kuò)大，各種病害也接踵而來。其中由葡萄座腔菌(Botryosphaeria dothidea)引起的獼猴桃軟腐病在陜西、四川、貴州、江西、湖南等主產(chǎn)區(qū)均有發(fā)生，且發(fā)病率高達(dá)35%以上[2]。軟腐病的發(fā)生嚴(yán)重影響獼猴桃果實(shí)的品質(zhì)及口感，給獼猴桃產(chǎn)業(yè)帶來巨大的經(jīng)濟(jì)損失[3]。目前，獼猴桃軟腐病的防控主要依賴化學(xué)藥劑[4-6]，如5%己唑醇ME、10%苯醚甲環(huán)唑WG、50%咪酰胺錳鹽WP、50%異菌脲SC及80%甲基硫菌靈WP等藥劑對(duì)葡萄座腔菌菌絲及孢子均具有較好的毒殺作用[4-6]，但是長期使用單一化學(xué)藥劑易使病菌產(chǎn)生抗藥性。為了預(yù)防和減緩抗藥性的產(chǎn)生，開發(fā)和應(yīng)用混配藥劑是重要手段之一。

戊唑醇屬三唑類殺菌劑，具有低毒、高效、低殘留、持效期長、內(nèi)吸性強(qiáng)等特點(diǎn)，其通過破壞真菌體內(nèi)的麥角甾醇生物合成影響細(xì)胞膜的流動(dòng)性和滲透性，從而導(dǎo)致真菌細(xì)胞死亡[8-10]。吳文能等[11]研究發(fā)現(xiàn)戊唑醇對(duì)獼猴桃軟腐病主要致病菌葡萄座腔菌表現(xiàn)出較強(qiáng)的抑菌活性，莫飛旭等[12]研究發(fā)現(xiàn)戊唑醇和四霉素以質(zhì)量比2∶1混配可用于獼猴桃軟腐病防控。氨基寡糖素提取自富含甲殼素的海洋生物外殼，具有誘導(dǎo)植物產(chǎn)生防御反應(yīng)、激活植物的系統(tǒng)性獲得免疫反應(yīng)等功能，是一種新型海洋生物源農(nóng)藥[13]，在棉花抗早衰、提高產(chǎn)量及西瓜幼苗生長等方面有顯著的促進(jìn)作用[14-15]。應(yīng)用氨基寡糖素對(duì)改善杧果品質(zhì)和貯藏保鮮作用顯著，同時(shí)還可作為替代殺菌劑用于冰葡萄霜霉病的防治[16-17]。基于以上特點(diǎn)，本研究通過室內(nèi)毒力測定及田間防效驗(yàn)證，探究戊唑醇和氨基寡糖素復(fù)配對(duì)獼猴桃軟腐病的控制效果，以期為制定防控該病的用藥方案提供參考。

1 材料與方法

1.1 供試材料

供試菌種：葡萄座腔菌(Botryosphaeria dothidea)，由貴州大學(xué)獼猴桃工程技術(shù)研究中心保藏提供。

供試藥劑：98%戊唑醇原藥(湖南比德生化科技股份有限公司)；85%氨基寡糖素原藥(海南正業(yè)中農(nóng)高科股份有限公司)；20%丁子香酚EW (江蘇劍牌農(nóng)化股份有限公司)；125 g/L氟環(huán)唑SC (巴斯夫植物保護(hù)(江蘇)有限公司)；500 g/L氟啶胺SC (浙江禾田華工有限公司)；80%戊唑醇WG (陜西美邦農(nóng)藥有限公司)；75%肟菌·戊唑醇WG (拜耳作物科學(xué)(中國)有限公司)；33.5%喹啉銅SC (興辰藥業(yè)(中國)有限公司)；10%苯醚甲環(huán)唑WG (東莞市瑞德豐生物科技有限公司)；25%粉唑醇SC (鹽城利民農(nóng)化有限公司)；50%嘧菌酯WG (河北冠農(nóng)農(nóng)化有限公司)；40%嘧霉胺SC (拜耳作物科學(xué)(中國)有限公司)；5%氨基寡糖素AS (江蘇克勝集團(tuán)股份有限公司)。

1.2 試驗(yàn)方法

1.2.1 室內(nèi)毒力試驗(yàn)

毒力測定：采用菌絲生長速率法和孫云沛共毒系數(shù)法測定[18-20]。根據(jù)預(yù)試驗(yàn)結(jié)果將每種藥劑梯度稀釋，制備含藥平板。用直徑5 mm打孔器將已活化培養(yǎng)長勢(shì)均勻的邊緣菌落打成5 mm菌餅，接種刀取菌餅正面朝下接種于含藥平板正中央，無菌水作空白對(duì)照，每個(gè)處理設(shè)3個(gè)重復(fù)，置于28 ℃恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，待對(duì)照培養(yǎng)基菌落直徑約為培養(yǎng)皿直徑的80%時(shí)，采用十字交叉法測量各處理菌落直徑，計(jì)算抑制率和EC50。

聯(lián)合毒力評(píng)價(jià)：將篩選所得到的最佳單劑(戊唑醇)同氨基寡糖素按照有效成分質(zhì)量比1∶1、l∶2、1∶3、1∶4、1∶5、1∶6、1∶7、1∶8、1∶9、1∶10的比例復(fù)配，采用菌絲生長速率法，評(píng)價(jià)不同配比物對(duì)葡萄座腔菌的抑制作用。計(jì)算抑制率和EC50，得到相關(guān)共毒系數(shù)(CTC)，作為最后綜合評(píng)價(jià)藥劑混用增效作用的指標(biāo)。指標(biāo)評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)為：80＜CTC為拮抗作用，80＜CTC＜120為相加作用，CTC＞120為增效作用。計(jì)算公式如下：

1.2.2 田間試驗(yàn)

參照《農(nóng)藥田間藥效試驗(yàn)準(zhǔn)則》(二) GB/T 17980.118—2004[21]，試驗(yàn)于2020年5-10月于貴州中康農(nóng)業(yè)科技有限公司獼猴桃基地進(jìn)行。將篩選出的增效作用較強(qiáng)的混劑(質(zhì)量比1∶1、1∶9、1∶10)分別稀釋5 000、10 000、15 000倍用于田間試驗(yàn)，并以對(duì)應(yīng)單劑和清水作對(duì)照，分別于獼猴桃坐果期、膨大期、采收前1個(gè)月進(jìn)行施藥，每個(gè)處理4次重復(fù)，每小區(qū)5株獼猴桃樹，試驗(yàn)小區(qū)隨機(jī)區(qū)組排列。采收期，每個(gè)小區(qū)隨機(jī)采集50個(gè)果實(shí)，測定果實(shí)縱徑、橫徑、側(cè)徑、單果質(zhì)量，并計(jì)算果形指數(shù)。隨后置于28 ℃恒溫箱內(nèi)貯藏10 d待所有果實(shí)軟化，調(diào)查獼猴桃軟腐病發(fā)病情況，并計(jì)算病果率、防效。計(jì)算公式如下：

1.3 數(shù)據(jù)處理

采用Excel 2016和DPS 7.5數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。

2 結(jié)果與分析

2.1 不同殺菌劑對(duì)葡萄座腔菌的毒力

由表1可知，在供試的11種殺菌劑中，以戊唑醇對(duì)葡萄座腔菌菌絲生長的抑制作用最強(qiáng)，其EC50為0.87 mg/L；其次是肟菌·戊唑醇和粉唑醇，EC50分別為1.07 mg/L和1.19 mg/L。氨基寡糖素的抑制效果最弱、作用最慢，其EC50為222.34 mg/L，但其作為一種植物誘抗劑，能夠激發(fā)植物體產(chǎn)生防御反應(yīng)從而減輕病原菌對(duì)植物的侵害[12]。因此，本試驗(yàn)特選用戊唑醇與氨基寡糖素進(jìn)行復(fù)配。

表1 不同殺菌劑對(duì)葡萄座腔菌的毒力

2.2 戊唑醇與氨基寡糖素復(fù)配對(duì)葡萄座腔菌的毒力

從表2可以看出，戊唑醇和氨基寡糖素復(fù)配對(duì)葡萄座腔菌的EC50為0.12～1.75 mg/L，共毒系數(shù)為62.33～931.99，所有配比藥劑對(duì)葡萄座腔菌均表現(xiàn)出較好的抑制效果，其中戊唑醇和氨基寡糖素有效成分質(zhì)量比為1∶1、1∶2、1∶3、1∶4、1∶5、1∶9、1∶10均有增效作用，而以1∶1混配的增效作用最為顯著，CTC達(dá)931.99。

表2 戊唑醇和氨基寡糖素復(fù)配對(duì)葡萄座腔菌的毒力

2.3 田間防治效果

如表3所示，田間試驗(yàn)中，戊唑醇和氨基寡糖素以1∶1、1∶9、1∶10混配后的不同稀釋倍數(shù)處理均可降低獼猴桃軟腐病的發(fā)病率。其中，戊唑醇和氨基寡糖素以1∶1混配的較高施用濃度(5 000倍稀釋)處理的病果率僅為6.48%，防效達(dá)87.90%，高于其他處理；中、低濃度(10 000、15 000倍稀釋)處理的防效也在78%以上。2種對(duì)應(yīng)單劑的防效均低于復(fù)配，說明戊唑醇與氨基寡糖素按一定質(zhì)量比復(fù)配能有效降低軟腐病病果率，提高防控效果。

表3 戊唑醇和氨基寡糖素復(fù)配對(duì)獼猴桃軟腐病的田間防效

續(xù)表3

2.4 對(duì)獼猴桃果實(shí)外觀品質(zhì)的影響

由表4可知，戊唑醇和氨基寡糖素以1∶1、1∶9、1∶10混配的不同稀釋倍數(shù)處理及對(duì)應(yīng)單劑對(duì)獼猴桃果實(shí)外觀品質(zhì)均具有良好的促進(jìn)作用。其中，表現(xiàn)最好的為戊唑醇和氨基寡糖素以1∶9混配后稀釋5 000倍液，顯著提高了獼猴桃果實(shí)平均單果質(zhì)量21.18%；其次是戊唑醇和氨基寡糖素以1∶10混配后稀釋10 000倍和5%氨基寡糖素AS稀釋 5 000倍，平均單果質(zhì)量分別提高了20.91%、20.79%。綜上，戊唑醇和氨基寡糖素復(fù)配可促進(jìn)獼猴桃果實(shí)外觀品質(zhì)的形成，提高產(chǎn)量。

表4 戊唑醇和氨基寡糖素復(fù)配對(duì)獼猴桃果實(shí)外觀品質(zhì)的影響

3 結(jié) 論

本研究試驗(yàn)證實(shí)戊唑醇和氨基寡糖素有效成分質(zhì)量比1∶1復(fù)配對(duì)獼猴桃軟腐病有很好的防治效果，防效高達(dá)78%以上；同時(shí)減少戊唑醇的用量，可延緩其抗藥性的發(fā)生和發(fā)展；還能較好地促進(jìn)獼猴桃外觀品質(zhì)形成，提高產(chǎn)量[13,22-25]，可在獼猴桃生產(chǎn)上進(jìn)行推廣應(yīng)用。