張連忠

（唐山師范學(xué)院，河北唐山 063000）

仔豬斷奶后前兩周是其生命中最關(guān)鍵的時期，因為免疫系統(tǒng)尚未發(fā)育完全。新生仔豬常受致病菌感染，其中腹瀉是由腸毒素性大腸桿菌引起的，仔豬腹瀉的嚴(yán)重程度可達(dá)50%。腸毒性大腸桿菌特別是4型菌毛窩藏菌株是豬出生第一周最重要的致病菌，它引起初生乳豬和早期斷奶仔豬嚴(yán)重的水樣腹瀉（周傳麗等，2014）。腸毒性大腸桿菌產(chǎn)生的毒素包括耐熱性腸毒素（STa和STb），這些毒素可能會抑制腸腔內(nèi)鈉離子和氯離子的吸收，刺激腸液分泌，導(dǎo)致水和電解質(zhì)損失（張雪寒等，2003）。一般來說，抗生素過去通常用于治療細(xì)菌感染，但隨著對抗生素耐藥性及畜產(chǎn)品殘留的認(rèn)識及飼料全面禁抗的實施，研究和開發(fā)抗生素替代品至關(guān)重要。目前，益生元、益生菌、有機酸、酶、中草藥等非抗生素化合物在養(yǎng)豬生產(chǎn)中得到廣泛應(yīng)用。益生菌可以平衡腸道菌群，增加有益微生物數(shù)量，刺激豬的免疫系統(tǒng)（蘇麗婭和蘇秀蘭，2015）。在厭氧條件下，植物乳桿菌最適pH為5.5～6.5，植物乳桿菌通過糖酵解途徑產(chǎn)生乳酸和短鏈脂肪酸，它還能抑制細(xì)菌病原體的生長（裴向陽，2018）。因此，本研究以感染腸毒性大腸桿菌的斷奶仔豬為動物模型，評估植物乳桿菌對感染腸毒性大腸桿菌斷奶豬生長性能、絨毛形態(tài)及糞中微生物含量的影響。

1 材料與方法

1.1 試驗設(shè)計 試驗選擇21 d斷奶、平均體重為（6.31±0.03）kg的仔豬525頭，隨機分為3組，每組5個重復(fù)，每個重復(fù)35頭。對照組飼喂基礎(chǔ)日糧，感染組和植物乳桿菌組斷奶仔豬飼喂基礎(chǔ)日糧，在15 d時通過口服接種2 mL/頭腸毒性大腸桿菌，植物乳桿菌組斷奶仔豬在15～28 d飼喂基礎(chǔ)日糧+1×108CFU/kg植物乳桿菌。

1.2 數(shù)據(jù)記錄 試驗期間在各階段記錄仔豬重量及每天腹瀉豬的頭數(shù)，每周記錄1次飼料用量，用于計算生長性能和腹瀉率。

1.3 樣品采集與分析 分別在接種腸毒性大腸桿菌7和14 d后以重復(fù)為單位收集糞便樣品，參考王四新等（2016）的方法分析糞中乳酸桿菌、大腸桿菌和細(xì)菌總數(shù)含量。試驗結(jié)束后，每個重復(fù)隨機選擇3頭仔豬進(jìn)行屠宰，分離十二指腸、空腸和回腸，制備成切片。參考王現(xiàn)盟（2010）的方法測定絨毛形態(tài)。

1.4 數(shù)據(jù)分析 試驗數(shù)據(jù)采用SPSS軟件單因素方差分析模型進(jìn)行統(tǒng)計分析，同時進(jìn)行多重比較，結(jié)果以“平均值±標(biāo)準(zhǔn)誤”表示。

2 結(jié)果與分析

2.1 植物乳桿菌對感染腸毒性大腸桿菌斷奶豬生長性能的影響 由表2可知，對照組與處理組對斷奶后14 d仔豬體重、1～14 d和1～28 d平均日增重、1～14 d飼料報酬及各階段平均日采食量的影響均無顯著差異（P＞0.05）。斷奶后28 d，對照組仔豬平均體重為14.03kg，而感染組仔豬平均體重僅為13.31kg，兩組差異顯著（P＜0.05）。同時，對照組和植物乳桿菌組斷奶后15～28 d仔豬平均日增重、飼料報酬及1～28 d飼料報酬均顯著高于感染組（P＜0.05）。與感染組相比，對照組和植物乳桿菌組斷奶后28 d仔豬的腹瀉率分別顯著降低36.43%和31.35%（P＜ 0.05）。

表2 植物乳桿菌對感染腸毒性大腸桿菌斷奶豬生長性能的影響

2.2 植物乳桿菌對感染腸毒性大腸桿菌斷奶豬絨毛形態(tài)的影響 由表3可知，處理組與對照組相比較，十二指腸、空腸和回腸的絨毛高度、隱窩深度、絨毛高度與隱窩深度比值均無顯著差異（P＞0.05）。對照組十二指腸絨毛高度388.35 μm，相對于感染組絨毛高度361.55 μm顯著提高7.41%（P＜0.05）。對照組和植物乳桿菌組空腸絨毛高度分別是360.60 μm和355.68 μm，兩組差異不顯著（P＞0.05），而這兩組相對于感染組空腸絨毛高度334.75 μm分別顯著提高了7.72%和6.25%（P＜0.05）。

表3 植物乳桿菌對感染腸毒性大腸桿菌斷奶豬絨毛形態(tài)的影響

2.3 植物乳桿菌對感染腸毒性大腸桿菌斷奶豬糞中微生物含量的影響 由表4可知，對照組、感染組和植物乳桿菌組對感染腸毒性大腸桿菌7和14 d后仔豬糞中細(xì)菌總數(shù)的影響均無顯著差異（P＞0.05），對感染腸毒性大腸桿菌14 d后糞中乳酸桿菌數(shù)量也無顯著影響（P＞0.05）。感染組仔豬感染腸毒性大腸桿菌7 d后糞中大腸桿菌數(shù)量較對照組顯著提高11.45%（P＜0.05），感染腸毒性大腸桿菌14 d后糞中大腸桿菌數(shù)較對照組和植物乳桿菌組分別顯著提高12.29%和10.57%（P＜0.05）。與感染組相比，植物乳桿菌組仔豬感染腸毒性大腸桿菌7 d后糞中乳酸桿菌數(shù)量顯著提高2.99%（P＜0.05）。

表4 植物乳桿菌對感染腸毒性大腸桿菌斷奶豬糞中微生物含量的影響 lg CFU/mL

3 討論

生長性能結(jié)果表明，腸毒性大腸桿菌降低了斷奶仔豬體重和飼料效率，增加了腹瀉率，但感染組補充植物乳桿菌后可以改善飼料效率，降低腹瀉率，這與Zhang等（2011）報道的結(jié)果一致，其推測，添加植物乳桿菌對仔豬生長性能的有利影響可能與提高仔豬絨毛高度有關(guān)。此外，植物乳桿菌還可以調(diào)節(jié)腸道環(huán)境和/或腸道菌群的生長，從而降低腹瀉率。一般而言，益生菌的目的是維持腸道生態(tài)系統(tǒng)，改善動物健康。感染組體重降低是染毒后的一個有害后果，這是由于大腸桿菌F4暴露后的腹瀉。腸毒性大腸桿菌是新生仔豬腹瀉的常見原因，通常黏附于十二指腸、空腸和回腸的上皮細(xì)胞，其中大腸桿菌F4產(chǎn)生的毒素導(dǎo)致隱窩細(xì)胞Cl－分泌增加，絨毛細(xì)胞對Na+和Cl－的吸收減弱（Moxley等，1999），腸內(nèi)過量的電解質(zhì)會導(dǎo)致失水和隨后的腹瀉。

早期研究表明，補充植物乳桿菌可增加腸道內(nèi)乳酸桿菌總數(shù)，黏附于腸壁，促進(jìn)糞便中致病菌的排泄。與預(yù)期一樣，感染腸毒性大腸桿菌7 d后仔豬飼喂補充植物乳桿菌的日糧糞中乳酸桿菌數(shù)量增加，這意味著植物乳桿菌可能不會在腸道中持續(xù)很長時間。因此，長期補充以產(chǎn)生更高的乳酸菌群可能是一個更好的選擇。本研究中另一個值得關(guān)注的問題是，添加植物乳桿菌組感染14 d后糞中細(xì)菌總數(shù)和乳酸桿菌數(shù)量無顯著差異，這與Lahteinen等（2015）報道的結(jié)果一致，這可能是由于補充植物乳桿菌的時間有限，導(dǎo)致乳酸菌在腸道內(nèi)的生長沒有延長，也可能是由于調(diào)節(jié)了豬腸道內(nèi)其他細(xì)菌群落。

腸道形態(tài)是益生菌補充后監(jiān)測的重要指標(biāo)。絨毛高度越高，小腸吸收能力越強。本研究結(jié)果發(fā)現(xiàn)，感染腸毒性大腸桿菌的斷奶豬飼喂植物乳桿菌日糧可以改善空腸及在數(shù)值上改善十二指腸的絨毛高度，這可能由于植物乳桿菌能產(chǎn)生短鏈脂肪酸刺激腸上皮細(xì)胞，增加絨毛高度（Suo等，2012）。Yang等（2014）報道，植物乳桿菌能增加仔豬十二指腸和空腸的絨毛高度。

4 結(jié)論

日糧添加植物乳桿菌可以降低腸毒性大腸桿菌對斷奶仔豬生長性能的抑制作用，改善空腸絨毛高度，提高感染后7 d糞中乳酸桿菌數(shù)量，降低感染后14 d糞中大腸桿菌數(shù)量。