彭云武,王榮輝,楚 渠, 梁嘉俊, 孟 剛, 凌 君

(1.安康學(xué)院 陜西省蠶桑重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,陜西 安康 725000;2.陜西省安康市蠶種場(chǎng), 陜西 安康 725000)

硒是1957年德國(guó)科學(xué)家Schwarz證明為人和動(dòng)物必需的微量元素之一[1]。安康市各種中藥材含硒[2,3]。查詢(xún)資料顯示安康是國(guó)內(nèi)最大的天然富硒區(qū)[4,5]。1-脫氧野尻霉素(1-DNJ)是一種極性化合物 ，在醫(yī)療保健方面有著重大的應(yīng)用價(jià)值[6,7,8]。類(lèi)黃酮是一類(lèi)多苯化合物，屬于植物次生代謝物。桑樹(shù)被國(guó)家衛(wèi)生部確認(rèn)為“藥食同源”植物。陜西石泉珍愛(ài)生態(tài)農(nóng)業(yè)科技開(kāi)發(fā)有限公司年生產(chǎn)桑葉粉、桑葉茶等產(chǎn)品達(dá)30 t，陜西福臻茶業(yè)有限公司年產(chǎn)桑葉茶50 t。目前已經(jīng)有相關(guān)文獻(xiàn)報(bào)道了桑樹(shù)類(lèi)黃酮、1-脫氧野尻霉素等含量的測(cè)定分析[9,10,11]，鑒于此，于2019年5月15日同時(shí)采取9個(gè)桑樹(shù)品種的頂桑芽葉和7～8位成熟片葉烘干分析其硒、類(lèi)黃酮、1—DNJ的含量，為桑葉的綜合利用提供理論數(shù)據(jù)。

1 材料與方法

1.1 實(shí)驗(yàn)材料

試驗(yàn)桑樹(shù)品種有：908誘、陜桑305、荷葉白、強(qiáng)桑一號(hào)、農(nóng)桑14、雙安-農(nóng)桑8號(hào)、育71-1、金十、豐田2號(hào)。2019年5月15日結(jié)合春季大蠶期桑樹(shù)摘心技術(shù)處理分別采摘桑芽和芽端向下第7～8位的成熟新鮮葉片，洗掉灰塵等雜物，自然通風(fēng)條件下晾干后放入預(yù)熱電熱鼓風(fēng)干燥箱內(nèi)85℃，烘干備用。

茶葉：紫陽(yáng)縣煥古鎮(zhèn)茶葉，市場(chǎng)上購(gòu)買(mǎi)。

土壤：在采摘紫陽(yáng)縣雙安鎮(zhèn)林本河村雙安-農(nóng)桑8號(hào)桑葉樣本時(shí)取桑樹(shù)位置地表下15 cm處的土壤，在安康學(xué)院恒口蠶?；厝∩@地表下15 cm處的土壤。

1.2 儀器藥品

電感耦合等離子體質(zhì)譜儀 、原子熒光光度計(jì)、電子天平、電熱恒溫鼓風(fēng)干燥箱、超聲波清洗機(jī)、可見(jiàn)分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、自動(dòng)控溫消化爐、高效液相色譜儀等。

濃硝酸(GR)、1%硝酸、60%乙醇、蒸餾水、鹽酸、乙腈 、醋酸 、甲醇、植物類(lèi)硒測(cè)定試劑盒、1-DNJ試劑盒、植物類(lèi)黃酮試劑盒。

1.3 試驗(yàn)方法

1.3.1 硒的測(cè)定 植物硒元素含量的測(cè)定：采用硝酸消解，ICP-MS法測(cè)定植物硒元素含量[12]。稱(chēng)取干試樣 0.5 g，消化，消化液定容至刻度備用，試液上機(jī)測(cè)定硒元素含量。

土壤硒元素含量的測(cè)定：采用硝酸-雙氧水-氫氟酸消解，ICP-MS法測(cè)定土壤硒元素含量[13]。稱(chēng)取待測(cè)樣品0.2 g，消化，消化液定容搖勻，試液上機(jī)測(cè)定硒元素含量。

1.3.2 類(lèi)黃酮的測(cè)定 樣本烘干粉碎，稱(chēng)取0.02 g，加入提取液，提取2h，離心10 min，取上清液上樣到分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀，測(cè)定510 nm處吸光值。根據(jù)測(cè)定的數(shù)值計(jì)算桑葉中的類(lèi)黃酮含量。

1.3.3 1-DNJ的測(cè)定 9個(gè)桑樹(shù)品種樣本的桑葉1-DNJ含量的測(cè)定所采樣品均采用反相高效液相色潽-紫外檢測(cè)法測(cè)定[14]。稱(chēng)取0.1 g樣本，加入試劑三，過(guò)夜浸提，取離心上清液。取樣本上清液，加入試劑一和試劑二，反應(yīng)30 min，加入試劑三定容至1 mL，加樣品在高效液相色潽儀進(jìn)行測(cè)試。

1.4 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析

試驗(yàn)測(cè)定的數(shù)據(jù)用DPS 15.10軟件分析。

2 結(jié)果與分析

2.1 9個(gè)不同桑樹(shù)品種和2份土壤硒的含量

從圖1可知，桑樹(shù)品種的硒含量桑芽比片葉低，只有雙安-農(nóng)桑8號(hào)和908誘桑芽比片葉高；從桑芽與片葉的平均數(shù)看，桑樹(shù)品種之間硒含量依次為農(nóng)桑14硒含量0.38 mg·kg-1、陜桑305硒含量0.33 mg·kg-1、育71-1硒含量0.27 mg·kg-1、強(qiáng)桑一號(hào)和荷葉白硒含量0.24 mg·kg-1、金十和豐田2號(hào)硒含量0.23 mg·kg-1、雙安-農(nóng)桑8號(hào)硒含量0.71 mg·kg-1、908誘硒含量0.08 mg·kg-1、煥古炒青茶硒含量0.24 mg·kg-1、安康學(xué)院恒口蠶桑基地土壤硒含量0.17 mg·kg-1、紫陽(yáng)縣雙安鎮(zhèn)林本河村土壤硒含量0.25 mg·kg-1，結(jié)果顯示桑樹(shù)的硒含量品種之間存在差異，桑樹(shù)富硒能力較強(qiáng)。

圖1 試驗(yàn)樣品的硒含量/(mg·kg-1)

2.2 不同桑樹(shù)品種的類(lèi)黃酮含量

從圖2可知，桑樹(shù)品種的桑芽與片葉含類(lèi)黃酮的量因品種不同有差異；從桑芽與片葉的平均數(shù)看，桑樹(shù)品種之間類(lèi)黃酮含量依次為陜桑305號(hào)40.64 mg·g-1、強(qiáng)桑一號(hào)37.82 mg·g-1、豐田2號(hào)37.63 mg·g-1、荷葉白32.26 mg·g-1、金十28.73 mg·g-1、育71-1 28.05 mg·g-1、雙安-農(nóng)桑8號(hào)26.19 mg·g-1、農(nóng)桑14含量24.21 mg·g-1、908誘22.94 mg·g-1、煥古炒青茶含量86.77 mg·g-1。結(jié)果顯示桑樹(shù)的類(lèi)黃酮含量品種之間存在差異，桑葉的類(lèi)黃酮含量低于茶葉。

圖2 樣品中類(lèi)黃酮含量/(mg·g-1干重)

2.3 不同桑樹(shù)品種的1-DNJ含量

從圖5可知，桑樹(shù)品種的桑芽比片葉1-DNJ含量高，只有強(qiáng)桑一號(hào)和908誘桑芽比片葉低；從桑芽與片葉的平均數(shù)看，桑樹(shù)品種之間的1-DNJ含量依次為908誘1.75 mg·g-1、農(nóng)桑14 號(hào)1.25 mg·g-1、豐田2號(hào)1.07 mg·g-1、育71-1含量1.06 mg·g-1、強(qiáng)桑一號(hào)0.98 mg·g-1、金十0.95 mg·g-1、雙安-農(nóng)桑8號(hào)0.85 mg·g-1、荷葉白0.76 mg·g-1、陜桑305含量0.59 mg·g-1、煥古炒青茶1-DNJ含量0.52 mg·g-1。結(jié)果顯示桑樹(shù)的1-DNJ含量品種之間存在差異，桑葉的1-DNJ含量高于茶葉。

圖3 1-DNJ空白標(biāo)準(zhǔn)圖譜

圖4 1-DNJ桑葉樣本圖譜

圖5 1-DNJ含量/(mg·g-1)

3 結(jié)論

(1)桑樹(shù)的桑芽硒含量比片葉含量低；桑樹(shù)品種的硒含量依次是農(nóng)桑14號(hào)0.38 mg·kg-1﹥陜桑305硒含量0.33 mg·kg-1﹥育71-1硒含量0.27 mg·kg-1﹥強(qiáng)桑一號(hào)和荷葉白硒含量0.24 mg·kg-1﹥金十和豐田2號(hào)硒含量0.23 mg·kg-1﹥雙安-農(nóng)桑8號(hào)硒含量0.71 mg·kg-1﹥908誘硒含量0.08 mg·kg-1。煥古炒青茶硒含量0.24 mg·kg-1，安康學(xué)院恒口蠶?；赝寥牢?.17 mg·kg-1、紫陽(yáng)縣雙安鎮(zhèn)林本河村土壤硒含量0.25 mg·kg-1。桑樹(shù)的硒含量品種之間存在差異，桑樹(shù)富硒能力較強(qiáng)。

(2)桑樹(shù)的桑芽類(lèi)黃酮含量與片葉類(lèi)黃酮含量因桑樹(shù)品種不同有差異；桑樹(shù)品種之間類(lèi)黃酮含量依次為陜桑305號(hào)40.64 mg·g-1﹥強(qiáng)桑一號(hào) 37.82 mg·g-1﹥豐田2號(hào)37.63mg·g-1﹥荷葉白32.26 mg·g-1﹥金十28.73 mg·g-1﹥育71-1含量28.05 mg·g-1﹥雙安-農(nóng)桑8號(hào)26.19 mg·g-1﹥農(nóng)桑14號(hào)24.21 mg·g-1﹥908誘22.94 mg·g-1，煥古炒青茶86.77 mg·g-1。桑樹(shù)的類(lèi)黃酮含量品種之間存在差異，桑葉的類(lèi)黃酮含量低于茶葉。

(3)桑樹(shù)的桑芽1-DNJ含量比片葉高；桑樹(shù)品種的1-DNJ含量依次為908誘1.75 mg·g-1﹥農(nóng)桑14號(hào)1.25 mg·g-1﹥豐田2號(hào)1.07 mg·g-1﹥育71-1含量1.06 mg·g-1﹥強(qiáng)桑一號(hào)0.98 mg·g-1﹥金十0.95 mg·g-1﹥雙安-農(nóng)桑8號(hào)0.85 mg·g-1﹥荷葉白0.76 mg·g-1﹥陜桑305號(hào)0.59 mg·g-1，煥古炒青茶1-DNJ含量0.52 mg·g-1。桑樹(shù)的1-DNJ含量品種之間存在差異,該試驗(yàn)結(jié)果驗(yàn)證了安康地區(qū)桑樹(shù)品種中桑葉DNJ含量具有顯著差異的結(jié)論[11]，桑葉的1-DNJ含量高于茶葉。