范志軍，朱慶昂，李 佩，王冬梅，吳隆坤,*

1.黑龍江北大荒綠色健康食品有限責(zé)任公司 (佳木斯 154007)2.沈陽師范大學(xué) 糧食學(xué)院 (沈陽 110034)

油粕是提取油脂后的副產(chǎn)物，不同植物原料提油后油粕化學(xué)成分和含量有所差異，油粕在食品工業(yè)中有著廣泛的應(yīng)用前景。豆粕是豆油生產(chǎn)的副產(chǎn)品，由于含有豐富的必需氨基酸，長期以來一直被認(rèn)為是食品和動物飼料中廉價(jià)的植物蛋白來源。豆粕存在蛋白質(zhì)溶解性差、適口性差、色澤暗、消化率低、抗?fàn)I養(yǎng)因子不良等缺點(diǎn),限制了其生物利用度[1]。月見草是一種油性藥用植物，原產(chǎn)北美洲，現(xiàn)已在歐洲廣泛種植。學(xué)者發(fā)現(xiàn)月見草籽粕提取物含有較強(qiáng)的抗氧化活性，在抗氧化活性方面與油菜籽和葵花籽相似，對月見草籽粕中活性成分研究發(fā)現(xiàn)，其提取物在抗衰老、防曬和美白方面的功效[2-4]。

油莎豆屬于莎草科，是一種單子葉禾本科植物，根莖末端產(chǎn)生塊莖，自20世紀(jì)50年代引入我國以來，現(xiàn)主要在北部和中部地區(qū)栽培[5]。目前，采油后的副產(chǎn)物膳食被大量用作飼料，油莎豆塊莖中淀粉的含量幾乎是馬鈴薯的兩倍，淀粉的性質(zhì)可與玉米或馬鈴薯淀粉的性質(zhì)相媲美，因此被廣泛應(yīng)用于糖果、冷飲和果凍中[6]。

元寶楓是我國特有的樹種，其種子含有豐富的營養(yǎng)，含油量較高，油中不飽和神經(jīng)酸含量高，富含神經(jīng)酸，元寶楓油粕作為其榨油的副產(chǎn)物也具有很高的研究價(jià)值[7]。元寶楓粕甲醇提取物中鑒定出15種化合物，油粕提取物對四種人類腫瘤細(xì)胞系(A-549，SMMC-7721，MCF-7和SW-480)均有細(xì)胞毒性，而且比元寶楓籽油表現(xiàn)出更高的乙酰膽堿酯酶抑制活性[8]。元寶楓籽中蛋白質(zhì)富含18 種氨基酸，含有人體所需的 8 種氨必需基酸[9]。

本研究選取了大豆、月見草籽、油莎豆和元寶楓籽，對這4種作物籽粒使用小型全自動螺旋榨油機(jī)提油后的餅粕進(jìn)行成分分析，并對其提取物進(jìn)行抗氧化活性能力測定試驗(yàn)。

1 材料與方法

1.1 儀器、材料和試劑

1.1.1實(shí)驗(yàn)儀器

FW100型高速萬能粉碎機(jī)；ZYJ型小型螺旋榨油機(jī)；DHG-9146A型電熱鼓風(fēng)干燥箱；ZDDN-II-A型凱氏定氮儀；CNMR-1000型脂肪測定儀；721型紫外可見-分光光度計(jì)；SB-25-12DT型超聲波清洗機(jī)；RE-52AA型型旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀。

1.1.2材料試劑

元寶楓籽，采自遼寧彰武；油莎豆，購于西安；月見草籽，沈陽佳實(shí)植物油開發(fā)有限公司提供；大豆，市售；1, 1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH)、2,2-聯(lián)氮-二(3-乙基-苯并噻唑-6-磺酸)二銨鹽(ABTS)，均為分析純，Sigma試劑公司；石油醚(60 ℃～90 ℃)、無水乙醇、過硫酸鉀溶液、鹽酸(AR)，均為分析純，購于天津大茂公司。

1.2 方法

1.2.1油粕的預(yù)制備

四種原料經(jīng)150 ℃炒制預(yù)處理20 min后破碎，用小型全自動螺旋榨油機(jī)進(jìn)行冷榨，榨油機(jī)轉(zhuǎn)數(shù)為33，自動冷榨3遍，獲得相應(yīng)油粕，對油粕用萬能粉碎機(jī)進(jìn)行粉碎，過60 目篩。

1.2.2油粕中抗氧化成分的提取

取粉碎后油粕5 g，加入 50%乙醇水溶液100 mL，在 40 ℃下微波輻射30 min，過濾，濾液以旋轉(zhuǎn)薄膜蒸發(fā)儀減壓濃縮至膏狀，真空干燥，得到粉末狀物[5]。用甲醇溶解上述得到的乙醇提取干燥物，配制成梯度濃度的提取物溶液作為樣品溶液。

1.2.3測定方法

1.2.3.1 基本成分的測定

水分含量的測定，參照GB/T 5009.3—2010；灰分含量的測定：參照GB/T 6438—2007；粗脂肪含量的測定，參照GB/T 5009.6—2016；總糖含量的測定，參照SN/T 4206—2015;蛋白質(zhì)含量的測定，采用凱氏定氮法。

1.2.3.2 DPPH·自由基清除能力的測定

以無水乙醇為溶劑，精密稱取DPPH配制成濃度為0.125 mmol/L 的溶液，避光備用。取稀釋不同梯度濃度的樣品溶液 100 μL分別和100 μL DPPH工作溶液混合于孔酶標(biāo)板中，用無水乙醇做空白對照，避光孵育 35 min 反應(yīng)穩(wěn)定后在 517 nm 測定其吸光值，用 DPPH·自由基清除率表示抗氧化能力。用IC50值表示樣品清除 50%的DPPH自由基所需要的樣品濃度，每個(gè)質(zhì)量濃度測定3次，取平均值[6]。

1.2.3.3 ABTS+·清除能力的測定[7]

用ABTS(7 mmol/L)水溶液和過硫酸鉀(2.45 mmol/L)溶液以1∶1(v/v)混合，避光條件下室溫放置15 h，使用時(shí)用無水乙醇稀釋，在734 nm處的吸光值為 0.70±0.02，即配置形成為ABTS工作液。分別吸取不同濃度的樣品溶液20 μL和 180 μL ABTS工作液于 96 孔酶標(biāo)板中進(jìn)行混合，并置于黑暗處反應(yīng)6 min ，于 734 nm 測定其吸光值，用20 μL 70%乙醇替換樣品做空白對照，用 ABTS+·清除率表示結(jié)果，樣品清除50%的 ABTS+·所需要的樣品濃度為IC50值。

2 結(jié)果與討論

2.1 油粕基本成分分析

由表1可見，豆粕中灰分、總糖、蛋白質(zhì)、粗脂肪含量高于其他三種油粕，但是其水分含量低。油莎豆粕水分、灰分、蛋白質(zhì)含量較少，粗脂肪含量較多。月見草粕水分、蛋白質(zhì)、灰分含量較多，粗脂肪、總糖等含量較少。元寶楓粕蛋白質(zhì)、總糖、灰分含量多，水分、粗脂肪含量少。豆粕總糖含量遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于其他三種油粕，而月見草粕和油莎豆粕總糖含量較低。四種油粕中豆粕脂肪含量最高，月見草粕含量最低。小型螺旋榨油機(jī)壓榨法制取油脂后，這四種油脂副產(chǎn)物中雖然都?xì)埓嬉欢ǖ挠椭?，但是油脂含量普遍不高?/p>

表 1 四種原料油粕中成分 %

2.2 DPPH·自由基清除能力的測定結(jié)果

由圖1可知，當(dāng)油粕的醇提取液質(zhì)量濃度發(fā)生改變后，其抗氧化活性能力也隨之發(fā)生改變，DPPH·清除率隨著油粕醇提取液濃度增加而增加。研究表明：4種油粕醇提取物抗氧化活性能力都較為顯著。經(jīng)計(jì)算得出，豆粕醇提取液IC50值為1.260 mg/mL,月見草粕醇提取液IC50值為0.570 mg/mL,油莎豆粕醇的提取液IC50值為0.970 mg/mL，元寶楓粕醇的提取液IC50值為0.710 mg/mL。

圖1 4種油粕乙醇提取物對DPPH·清除率

IC50高表示抗氧化劑的清除自由基的能力弱，反之，IC50低清除自由基能力強(qiáng)。因此，對DPPH·自由基清除能力月見草粕>元寶楓粕>油莎豆粕>豆粕。

2.3 ABTS+·清除能力的測定結(jié)果

由圖2可知，4種油粕的提取物對ATBS+·都有著良好的清除作用，但4種油粕提取物對ATBS+·的清除率存在顯著的差異。在一定的濃度內(nèi)，隨著試樣濃度的增加，其對ATBS+·的清除率隨之上升，但到達(dá)一定質(zhì)量濃度后，清除率上升緩慢。4種油粕提取物IC50值從小到大依次是月見草粕(0.500 mg/mL)<元寶楓粕(0.610 mg/mL)<油莎豆粕(1.230 mg/mL)<豆粕(1.850 mg/mL)。不同油粕清除能力存在顯著性差異，月見草的清除能力顯著高于油莎豆粕和豆粕，這與不同油粕樣品提取物對DPPH·自由基清除作用結(jié)果一致。

圖2 4種油粕提取物ABTS+·自由基清除率

3 結(jié)論

采用小型螺旋榨油機(jī)榨油后的元寶楓粕、月見草粕、油莎豆粕與大豆粕進(jìn)行對比，發(fā)現(xiàn)豆粕中蛋白質(zhì)、總糖、粗脂肪含量遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于其他3種油粕，且油粕水分含量均高于豆粕。油粕可在飼料、寵物食品、水產(chǎn)養(yǎng)殖、造紙、食品工業(yè)等方面進(jìn)行應(yīng)用，今后對其油粕中活性物質(zhì)的功能特性進(jìn)行深入研究。本試驗(yàn)僅采用兩種抗氧化活性測定方法，為對于抗氧化活性相對高的油粕的抗氧化成分分析、純化及進(jìn)一步利用以及抗氧化活性的分子機(jī)制都是今后研究的方向。