張璐瑤 肖陳晨 葉曉林 葛長(zhǎng)軍 李世升

摘 要 青頭蘿卜市場(chǎng)接受度高，本研究通過傳統(tǒng)品種形態(tài)學(xué)比較及分子標(biāo)記檢測(cè)等方法比較了不同地方優(yōu)良青頭蘿卜品種。形態(tài)學(xué)及分子標(biāo)記分析結(jié)果表明：濰縣青蘿卜、黃州蘿卜和蘋果味青頭蘿卜在植物學(xué)形狀與其他品種有明顯差異，南鄉(xiāng)蘿卜糠心程度較早;SSR分子標(biāo)記檢測(cè)下，濰縣青蘿卜、武青蘿卜和蘋果味青頭蘿卜與其他品類存在差異。

關(guān)鍵詞 青頭蘿卜;植物學(xué)性狀;品種比較;分子標(biāo)記

中圖分類號(hào)：S631.1 文獻(xiàn)標(biāo)志碼：A DOI：10.19415/j.cnki.1673-890x.2021.21.103

青頭蘿卜適應(yīng)性強(qiáng)、耐貯運(yùn)，具有良好的商品性，是廣大種植戶的主栽品種。青頭蘿卜肉質(zhì)緊密、脆甜多汁，有清熱解毒、助消化等醫(yī)療保健功能[1]。為篩選長(zhǎng)勢(shì)更優(yōu)、產(chǎn)量更高、營(yíng)養(yǎng)更好的青頭蘿卜品種，結(jié)合形態(tài)學(xué)及分子標(biāo)記分析，開展針對(duì)黃州蘿卜、濰縣青蘿卜等系列地方優(yōu)秀青頭蘿卜品種比較試驗(yàn)，以期為廣大種植戶和育種材料篩選提供參考。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

參試蘿卜品種為吳家山青頭蘿卜、濰縣青蘿卜、九頭青蘿卜、河南青頭蘿卜、甘肅青頭蘿卜、黃州蘿卜、自由青頭蘿卜、蘋果味青頭蘿卜、武青蘿卜和南鄉(xiāng)蘿卜，各品種種子來自黃岡師范學(xué)院大別山生物資源庫和黃州蘿卜研究中心，2020年9月采用常規(guī)方法種植于黃岡市農(nóng)科院梅家墩實(shí)驗(yàn)基地。

1.2 試驗(yàn)方法

試驗(yàn)地塊土壤為砂壤土，前茬為蘿卜，小區(qū)試驗(yàn)面積為21.6 m2，筑深溝高洼，穴播。每個(gè)蘿卜品種3次重復(fù)，隨機(jī)區(qū)組排列[2]。

待成熟后采收蘿卜，利用Imge-J軟件V 1.4進(jìn)行植物學(xué)性狀測(cè)定，利用SPSS 15進(jìn)行相關(guān)性狀方差分析。

提取蘿卜樣品DNA，通過1%瓊脂糖電泳檢測(cè)DNA質(zhì)量，之后利用PCR擴(kuò)增目的基因，PCR反應(yīng)體系包括：12.5 μL 2×Taq PCR MasterMix，0.5 μL DNA，1 μL 10 μmol·L-1引物，10 μL雙蒸水。擴(kuò)增程序?yàn)椋?4 ℃預(yù)變性3 min;94 ℃變性30 s，56 ℃退火30 s，72 ℃延伸30 s，35個(gè)循環(huán);72 ℃終延伸5 min，4 ℃保存，PCR擴(kuò)增產(chǎn)物使用1%瓊脂糖凝膠電泳分離。分子標(biāo)記引物序列如表1[3-4]。

2 結(jié)果與分析

2.1 各參試青頭蘿卜品種植物學(xué)性狀比較

傳統(tǒng)蘿卜肉質(zhì)根為主要食用部分，故其商品性主要體現(xiàn)在根部。通過觀察比較各參試青頭蘿卜品種的生長(zhǎng)發(fā)育過程，對(duì)青頭蘿卜品種的根、葉等重要植物學(xué)性狀進(jìn)行統(tǒng)計(jì)，并重點(diǎn)分析根部性狀，統(tǒng)計(jì)結(jié)果如表2。

由表2可知：?jiǎn)胃L(zhǎng)最長(zhǎng)的是蘋果味青頭蘿卜長(zhǎng)（25.67 cm），南鄉(xiāng)蘿卜的單根長(zhǎng)最短（5.47 cm），差異顯著;單根寬最寬的是南鄉(xiāng)蘿卜（7.60 cm），濰縣青蘿卜的單根寬最短（4.43 cm），差異顯著;單根最重的是九頭青蘿卜（0.48 kg），濰縣青蘿卜的單根重最輕

（0.13 kg），差異顯著;甘肅青頭蘿卜葉片數(shù)最少（10片），葉片數(shù)最大的是黃州蘿卜（17片），差異顯著;展開度最大的是黃州蘿卜（72.33 cm），河南青頭蘿卜的葉片展開度最短（47.67 cm），差異顯著;吳家山青頭蘿卜露地高度為0 cm，蘋果味青頭蘿卜露地高度為14.67 cm，差異顯著;濰縣青蘿卜的株高最低（18.97 cm），單株株高最高的是黃州蘿卜（36.83 cm），差異顯著;葉片長(zhǎng)度最長(zhǎng)的是武青蘿卜（45.93 cm），九頭青的葉片長(zhǎng)度最短（27.00 cm），差異顯著。

2.2 青頭蘿卜肉質(zhì)根解剖形態(tài)比較

青頭蘿卜肉質(zhì)根是體現(xiàn)其商品性關(guān)鍵結(jié)構(gòu)。圖1顯示了青頭蘿卜各品種的肉質(zhì)根形態(tài)及肉質(zhì)根橫切面結(jié)構(gòu)，可以看到肉色和肉質(zhì)根皮色較為一致，肉質(zhì)根皮青色分布較廣且較深時(shí)肉質(zhì)根內(nèi)部顏色也都更表現(xiàn)為青色，如濰縣青蘿卜及蘋果味青頭蘿卜肉質(zhì)根內(nèi)外都充滿青色且分布較多。除此之外，發(fā)現(xiàn)肉質(zhì)根空心（糠心）程度差異明顯，相同生長(zhǎng)周期條件下，南鄉(xiāng)蘿卜較早出現(xiàn)肉質(zhì)根空心情況。

A～J分別為甘肅青頭蘿卜、武青蘿卜、黃州蘿卜、濰縣青蘿卜、蘋果味青頭蘿卜、自由青頭蘿卜、河南青頭蘿卜、吳家山青頭蘿卜、南鄉(xiāng)蘿卜、九頭青蘿卜的肉質(zhì)根;A1～J1分別為上述蘿卜肉質(zhì)根橫切面。

2.3 分子標(biāo)記在青頭蘿卜間的差異分布

蘿卜形態(tài)差異同遺傳物質(zhì)特別是分子標(biāo)記的差異分布密切相關(guān)。由圖2可知，蘿卜SSR分子標(biāo)記R101在武青蘿卜沒有擴(kuò)增出條帶，與其他9個(gè)樣品存在差異;SSR分子標(biāo)記R102在濰縣青蘿卜和蘋果味青頭蘿卜中沒有擴(kuò)增出條帶，與其他8個(gè)樣品存在差異;SSR分子標(biāo)記R103在武青蘿卜中也沒有擴(kuò)增出條帶，與其他9個(gè)樣品存在差異。

基于R101、R102和R103三種SSR分子標(biāo)記的擴(kuò)增條帶比較結(jié)果，發(fā)現(xiàn)武青蘿卜、濰縣青蘿卜和蘋果味青頭蘿卜同本實(shí)驗(yàn)中的其他類型蘿卜遺傳關(guān)系較遠(yuǎn)或差異更大，相對(duì)而言，南鄉(xiāng)蘿卜、自由青頭蘿卜、黃州蘿卜、甘肅青頭蘿卜、河南青頭蘿卜、九頭青蘿卜和吳家山青頭蘿卜遺傳關(guān)系較近。

1～11分別為南鄉(xiāng)蘿卜、武青蘿卜、蘋果味青頭蘿卜、自由青頭蘿卜、黃州蘿卜、甘肅青頭蘿卜、河南青頭蘿卜、九頭青蘿卜、濰縣青蘿卜、吳家山青頭蘿卜和Marker。

3 結(jié)論

通過對(duì)各參試青頭蘿卜品種的植物學(xué)形態(tài)特征和分子標(biāo)記等進(jìn)行連續(xù)觀察和比較分析，結(jié)果表明南鄉(xiāng)蘿卜單根最寬且長(zhǎng)度最短，相同生長(zhǎng)周期條件下較早出現(xiàn)糠心;濰縣青蘿卜根長(zhǎng)、單根重和株高均為最低;黃州蘿卜的葉片展開度、葉片數(shù)量和株高都是最高，但露地高最低。武青蘿卜在分子標(biāo)記R101和R103中均未能擴(kuò)增出條帶，表明武青蘿卜明顯不同于其他類型青頭蘿卜;濰縣青蘿卜和蘋果味青頭蘿卜在R102分子標(biāo)記中均無法擴(kuò)增出條帶，表明濰縣青蘿卜和蘋果味青頭蘿卜比較接近，符合兩者肉質(zhì)根形態(tài)特征的一致性，另外該兩類蘿卜也明顯不同于其他蘿卜。

通過植物學(xué)性狀比較及分子標(biāo)記分析后，上述結(jié)果可為廣大蘿卜種植用戶選擇青頭蘿卜品種提供參考依據(jù)。結(jié)合前人研究結(jié)果[5-6]，本研究對(duì)青頭蘿卜進(jìn)行系統(tǒng)形態(tài)比較及分子標(biāo)記檢測(cè)，可更有針對(duì)性利用與開發(fā)青頭蘿卜類型的地方優(yōu)秀蘿卜品種。

參考文獻(xiàn)：

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（責(zé)任編輯：趙中正）