劉 夢 ，莊 蕾 ，吳 森,，余忠祥 ，閻明毅 ，張強龍 ，吳占月 ，韓 翠

（1.青海大學畜牧獸醫(yī)科學院，青海 西寧 810016；2.青海省高原家畜遺傳資源保護與創(chuàng)新利用重點實驗室，青海 西寧 810016）

藏羊抗寒、抗粗飼料，對高寒草地的低壓、寒冷等自然條件和多年生宿營放牧管理模式有較強的適應性[1]。歐拉羊原稱歐拉型藏羊，是在高寒缺氧的生態(tài)環(huán)境中，經(jīng)過長期的自然和人工飼養(yǎng)而培育出來的地方特色畜種，相對于其他藏羊身體大、四肢高、腰背寬而平、后軀豐滿、肉用生產(chǎn)性能好及早期生長發(fā)育快[2]。2018年7月“歐拉型藏羊”被審定列為國家畜禽遺傳資源，更名為歐拉羊。在同一畜種中，相比較于有角動物，無角型性格溫順，攻擊性低、生產(chǎn)性能良好，且更適合現(xiàn)代集約化養(yǎng)殖。有研究指出，無角公羊的適應性較強，尤其在冬季和春季，無角公羊的體況明顯優(yōu)于有角公羊[3]；無角母羊的繁殖性能優(yōu)于有角母羊，培育無角羊?qū)Πl(fā)展草原生態(tài)畜牧業(yè)具有重要的意義[4]。同時，歐拉羔羊經(jīng)短時間育肥后日增重高，接近進口純種肉羊水平，增重速度也相當快，適用于羊肉的工業(yè)化生產(chǎn)，具有廣闊的市場前景，是肉羊養(yǎng)殖場和專業(yè)家庭飼養(yǎng)肉羊的理想品種[5]。本研究以青海省歐拉羊主產(chǎn)區(qū)的傳統(tǒng)有角型歐拉羊及新選育出的無角型歐拉羊為研究對象，對青海牧區(qū)傳統(tǒng)放牧養(yǎng)殖模式下的歐拉羊進行短期精料補飼，并檢測血清生化指標，以期為無角型歐拉羊生產(chǎn)性能評定及生產(chǎn)養(yǎng)殖提供理論和技術(shù)支持，同時，為未來無角型歐拉羊品種育成提供技術(shù)理論支持。

1 材料與方法

1.1 試驗設(shè)計

該試驗于2020年4～6月，在青海省黃南藏族自治州河南蒙古族自治縣開展。隨機選取有角和無角各年齡段健康且生長環(huán)境一致的歐拉羊（共48只）作為試驗動物，分成2組（有角型為A組，無角型為B組），每組三個重復，每個重復8只羊。正常放牧飼養(yǎng)，放牧后同時進行補飼。預試期為10 d，正式飼喂期為60 d，試驗共70 d。

1.2 試驗羊的飼養(yǎng)管理

所有試驗羊在自然放牧條件下，下午6∶00時補飼1次羔羊自配精補料，參照NRC（2004）推薦的中國肉羊飼養(yǎng)標準配制基礎(chǔ)飼糧。每個年齡階段的歐拉羊，在正式試驗階段的第0～30 d補飼精料0.5 kg/d，第31～60 d補飼精料1.0 kg/d。試驗羊在試驗期間可自由采食和飲水，定期進行驅(qū)蟲和疫苗防疫。

1.3 樣本采集及指標測定方法

采集的血液樣本在青海省畜牧獸醫(yī)科學院實驗室內(nèi)利用“酶標生物”的綿羊血清Elisa試劑盒進行血清生化指標測定，每組歐拉羊清晨空腹靜脈采血，靜置后，2500 r/min離心20 min。檢測收集的上清，保存過程中若出現(xiàn)沉淀，應再次離心。

1.4 血清生化指標測定

該試驗檢測的血清指標包括血清生化指標、免疫指標和抗氧化指標（共計24個）。

（1）血清生化指標：谷草轉(zhuǎn)氨酶（AST）、谷丙轉(zhuǎn)氨酶（ALT）、堿性磷酸酶（ALP）、總蛋白（TP）、白蛋白（Albumin）、總膽固醇（TC）、甘油三酯（TG）、雌二醇（E2）、生長激素（GH）、胰島素（INS）、尿素（Urea）。

（2）免疫指標：球蛋白（GLB）、免疫球蛋白 A（IgA）、免疫球蛋白G（IgG）、免疫球蛋白 M（IgM）、白細胞介素 1β（IL-1β）、白細胞介素 2（IL-2）、白細胞介素 4（IL-4）、白細胞介素 6（IL-6）。

（3）抗氧化指標：超氧化物歧化酶（SOD）、過氧化氫酶（CAT）、乳酸脫氫酶（LDH）、谷胱甘肽過氧化酶（GSH-Px）、丙二醛（MDA）。

1.5 數(shù)據(jù)統(tǒng)計分析

數(shù)據(jù)資料采用Excel進行整理，采用IBM SPSS 24.0程序軟件進行T檢驗比較兩組差異，結(jié)果以“平均值±標準差”表示。P＜0.05為差異顯著。

2 結(jié)果與分析

2.1 血清生化指標的測定

2.1.1 補飼對有角和無角歐拉羊血清生化指標的影響。由表1可以看出，在6月齡歐拉羊血清樣品中B組 TP、INS含量顯著高于 A 組（P＜0.05），而 A 組 GH含量顯著高于B組（P＜0.05），其余各項均未呈現(xiàn)出顯著性差異 （P＞0.05）；在12月齡歐拉羊血清樣品中Urea、TC、AST、E2四項指標均未呈現(xiàn)出顯著性差異（P＞0.05），除 B 組 ALT 含量顯著高于 A 組（P＜0.05），其余各項指標A組均顯著高于B組（P＜0.05）；在36月齡歐拉羊血清樣品中TG、ALP兩項指標呈現(xiàn)顯著性差異（P＜0.05），且 A 組 TG、ALP 含量高于 B 組，其余各項均未呈現(xiàn)出顯著性差異（P＞0.05）。

表1 補飼對有角、無角歐拉羊血清生化指標的影響

2.2 血清免疫指標的測定

2.2.1 補飼對有角和無角歐拉羊血清免疫指標的影響。由表2可以看出，在6月齡羊免疫血清樣品中IgM、IL-6 兩項指標呈現(xiàn)出顯著性差異（P＜0.05），其余各項均未呈現(xiàn)出顯著性差異 （P＞0.05）。B組中IgM、IL-2、IL-4和IL-6含量均高于A組，但IL-2、IL-4含量差異不顯著 （P＞0.05）；12月齡羊免疫血清樣品中IL-2、IL-4、IL-6三項指標呈現(xiàn)出顯著性差異 （P＜0.05），其余各項未呈現(xiàn)出顯著性差異（P＞0.05）。 A組IgA、GLB、IL-1、IL-2、IL-4、IL-6 含量均高于 B 組，但IgA、GLB、IL-1 含量差異不顯著 （P＞0.05）；36 月齡羊免疫血清樣品中 IgM、GLB、IL-2、IL-4、IL-6 五項指標呈現(xiàn)出顯著性差異（P＜0.05），其余各項未呈現(xiàn)出顯著性差異（P＞0.05）。 B 組 IgA、IgM、IgG、GLB、IL-1、IL-2含量均高于A組，但是IgA、IgG和IL-1含量差異不顯著（P＞0.05）。

表2 補飼對有角、無角歐拉羊血清免疫指標的影響

2.3 血清抗氧化指標的測定

2.3.1 補飼對有角和無角歐拉羊血清抗氧化指標的影響。由表3可以看出，在6月齡歐拉羊抗氧化血清樣品中，B組SOD、CAT含量均高于A組，但差異不顯著（P＞0.05）。而A組GSH-Px含量高于B組，但差異也不顯著（P＞0.05）；在12月齡歐拉羊抗氧化血清樣品中，SOD、CAT和GSH-Px含量均呈現(xiàn)出顯著性差異（P＜0.05）。且A組SOD、CAT含量均顯著高于B組，B組GSH-Px含量高于A組（P＜0.05）；在36月齡歐拉羊抗氧化血清樣品中，SOD、MDA含量均呈現(xiàn)出顯著性差異（P＜0.05）。且 B 組 SOD、GSH-Px含量均高于 A組，但GSH-x含量差異不顯著 （P＞0.05）。在 A組CAT、MDA含量均高于B組，但CAT含量差異不顯著（P＞0.05）。

表3 補飼對有角、無角歐拉羊血清抗氧化指標的影響

3 討論

3.1 補飼對有角和無角歐拉羊血清生化指標的影響

血清生化指標的變化可以評價機體的健康水平和營養(yǎng)物質(zhì)的代謝。在血清生化指標方面，TP、ALB含量可直接反映動物機體蛋白質(zhì)代謝水平和肝臟蛋白質(zhì)合成能力[6-7]。在該試驗中，除12月齡外，B組TP、ALB含量高于A組，說明補飼能夠促進無角型歐拉羊?qū)Φ鞍踪|(zhì)的消化吸收利用率，改善無角型歐拉羊肝臟和腎臟功能，但營養(yǎng)不良或消耗增加會導致TP濃度出現(xiàn)降低的現(xiàn)象[8]。血清中ALP、ALT、AST活性是機體肝功能的重要指標[9]，AST可調(diào)節(jié)機體內(nèi)蛋白質(zhì)的代謝，當?shù)鞍踪|(zhì)代謝水平提高或肝功能受損時，血清中AST的活性就會升高[10]。在該試驗中，除6月齡外，A組ALP含量顯著高于B組，說明補飼可增強無角型歐拉羊心臟功能和提高肌肉組織代謝功能，足以維持機體肝臟的正常生理功能，這與賀長青等[11]研究報道的結(jié)果一致。且隨各年齡段的增長，A組ALT、AST含量高于B組，但差異不顯著，這與李輝等[12]研究報道一致。該試驗與黃蘭菊[13]的研究報道有相同之處，他在研究中提到，育肥羔羊在8月齡前生長較快，10月齡前后生長速度緩慢，因此8月齡前是研究產(chǎn)肉性能的重要年齡段。對應本試驗中6月齡歐拉羊血清生化指標的測定結(jié)果，無角型歐拉羊在生長育肥的關(guān)鍵時期生長代謝能力要強于有角型歐拉羊。

3.2 補飼對有角和無角歐拉羊血清免疫指標的影響

在血清免疫指標中，免疫球蛋白是由具有抗體球蛋白活性的漿細胞產(chǎn)生的，由一種高活性小分子多肽分泌的免疫細胞和細胞因子合成，動物血清中免疫球蛋白和細胞因子水平雖然低，但在機體的免疫防御系統(tǒng)中起著重要的作用[14]。其中，IgA、IgG和IgM均是動物機體體液免疫的主要檢測指標。在該試驗中，除6月齡外，B組IgA、IgG和IgM含量高于A組，說明補飼能夠顯著改善無角型歐拉羊的免疫功能，這與胡興義等[15]報道的研究結(jié)果一致。動物機體細胞免疫的主要檢測指標[16]是 IL－2、IL－6。 IL-2能夠刺激 T 淋巴細胞增殖，它是介導細胞免疫的主要細胞因子，可調(diào)節(jié)單核細胞、巨噬細胞、B淋巴細胞和抗體等的產(chǎn)生，它在免疫過程中起著重要作用[17]。在該試驗中，除12月齡外，B組IL-2含量高于A組，說明補飼可以提高動物機體的免疫力。IL－6能夠誘導B細胞分化和分泌，它是免疫系統(tǒng)中重要的細胞因子，能促進B細胞分化和增殖，重新產(chǎn)生免疫應答[18]。本試驗主要檢測IgA、IgG、IgM、GLB、IL－1、IL－2、IL－4 和 IL－6 的含量變化，同時從體液免疫和細胞免疫方面探討補飼對有角型和無角型歐拉羊血清免疫指標的影響。

3.3 補飼對有角和無角歐拉羊血清抗氧化指標的影響

血清抗氧化指標，由于動物體內(nèi)自由基的產(chǎn)生和消除一直處于微觀動態(tài)平衡，當動物機體受到外在因素刺激后發(fā)生氧化反應，產(chǎn)生大量自由基，且動物體內(nèi)的SOD、CAT和GSH－Px等發(fā)生抗氧化酶還原反應，通過酶解系統(tǒng)可以清除自由基，維持動物體內(nèi)氧化還原的微動力學平衡[19]。該試驗結(jié)果顯示，在12月齡時，A組SOD、CAT含量顯著高于B組，除6月齡外，B組GSH－Px含量高于A組。說明補飼可以提高SOD、CAT、GSH－Px的含量，使機體免受損傷。MDA 是脂質(zhì)氧化的最終產(chǎn)物，MDA含量直接反映了動物體內(nèi)脂質(zhì)氧化和細胞損傷的程度[20]。在該試驗中，A組MDA含量高于B組，說明補飼能夠顯著改善無角型歐拉羊的抗氧化功能。這與陳浩等[21]的研究結(jié)果相同，他的研究結(jié)果中顯示，動物體內(nèi)SOD、GSH-Px等指標上升，而對應的動物體內(nèi)的MDA下降時，動物的抗氧化能力增強，抗氧化水平提高。

4 結(jié)論

綜上所述，在補飼情況下能夠改善無角型歐拉羊的免疫水平、抗氧化能力，進而提高血清中生長激素的含量。補飼對放牧條件下無角型歐拉羊生長體況的提高有促進作用。