羅俊霞 趙建波 張 剛 梁 爽 申戰(zhàn)賓 段鹿梅 宋曉爽張啟成 馬 蕾 潘 玲

（1. 鄭州市農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量檢測流通中心， 鄭州 450006； 2. 鄭州市農(nóng)業(yè)技術(shù)推廣中心， 鄭州 450002； 3. 河南恒晟檢測技術(shù)有限公司， 河南新鄭451100； 4.鄭州市農(nóng)業(yè)綜合行政執(zhí)法支隊， 鄭州450000）

蔥蒜類蔬菜是一類具特殊香辛味的蔬菜， 又稱香辛類蔬菜或鱗莖類蔬菜[1]。 這類蔬菜在我國栽培較廣， 具有較好市場發(fā)展前景， 主要包括大蒜、 洋蔥、 韭菜、 大蔥、 分蔥、 香蔥、 胡蔥、 韭蔥及薤等。 同其他蔬菜一樣， 該類蔬菜生產(chǎn)過程中要使用一些化學(xué)藥物防治病蟲草害[2～4]。 我國加入 WTO后， 國際上對進(jìn)口農(nóng)產(chǎn)品在安全品質(zhì)方面設(shè)置的門檻越來越高， 限制了鱗莖類蔬菜的發(fā)展， 提高農(nóng)產(chǎn)品品質(zhì)、 特別是提高農(nóng)產(chǎn)品的安全品質(zhì)迫在眉睫。

檢測在保證農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全中起著至關(guān)重要的作用。 但鱗莖類蔬菜是一類較為特殊的蔬菜， 其中含有硫醚類、 硫代磺酸甲酯、 亞硫代磺酸甲酯等硫化物[5～8]給農(nóng)藥殘留的色譜質(zhì)譜檢測分析造成很大的困擾。 國際分析化學(xué)家組織 （AOAC）、 聯(lián)合國糧食及農(nóng)業(yè)組織 （FAO）、 國際原子能機(jī)構(gòu) （IAEA）、 國際純粹和應(yīng)用化學(xué)聯(lián)合會 （IUPAC） 專家聯(lián)席會議提出的 《有機(jī)化學(xué)物痕量分析方法單實驗室驗證指南》規(guī)定， 在驗證殘留分析方法時對大蒜須單獨評價[9]。 因此， 該類蔬菜的農(nóng)藥殘留檢測分析方法成為行業(yè)內(nèi)的難點、 熱點。 農(nóng)藥殘留的一般分析過程為提?。瓋艋瓩z測[10]。 為了消除有機(jī)硫化物對該類蔬菜的色譜質(zhì)譜法檢測帶來的干擾， 在制樣前或樣品前處理過程中多引入特殊的處理， 或?qū)Ψ治鲞^程進(jìn)行優(yōu)化和改進(jìn)， 以減小此類物質(zhì)帶來的影響。 目前對該類蔬菜中農(nóng)藥殘留檢測的前處理方面已有諸多研究， 主要涉及制樣前鈍化酶的方法， 對常規(guī)前處理中的提取、 凈化步驟的優(yōu)化改進(jìn)及其他方法的應(yīng)用等。 本文對該類蔬菜的色譜質(zhì)譜法檢測的前處理方法進(jìn)行了梳理總結(jié)， 以期為此類蔬菜的農(nóng)藥殘留檢測方法的建立和研究提供思路。

一、 鈍化酶處理方法

鈍化酶的目的是去除鱗莖類蔬菜中有機(jī)硫化物的影響。 因為在完整的細(xì)胞內(nèi)， 鱗莖類蔬菜中含有的雜原子和活性酶與底物分隔存在， 在粉碎樣品的過程中細(xì)胞受損傷， 酶作用于底物產(chǎn)生大量硫基干擾物， 對其中農(nóng)藥殘留的定性和定量產(chǎn)生影響[11～15]。 酶的鈍化一般在制樣或者樣品未被徹底粉碎前進(jìn)行， 否則不能有效去除硫化物的干擾[12～16]。目前研究較多的鈍化酶的方法有加熱處理法、 低溫冷凍法、 磷酸處理法、 硫酸磺化法等。

（一） 加熱處理

1. 加熱處理的效果。 加熱鈍化鱗莖類蔬菜中的活性酶的方式有微波爐加熱和水浴鍋加熱兩種。使用色譜或質(zhì)譜檢測器進(jìn)行農(nóng)藥殘留的測定前， 將鱗莖類蔬菜樣品切大段或塊進(jìn)行加熱處理一定的時間， 可以有效鈍化其中活性酶的活性， 樣品破碎后不會產(chǎn)生大量的硫化物， 從而減少或者去除其對待檢物質(zhì)的干擾[13～27]。 但兩種加熱方式都會造成部分待檢物質(zhì)回收率不同程度地降低[13～27]。

2.加熱處理的弊端。 （1） 微波加熱。 將樣品切大段或塊進(jìn)行微波處理， 樣品難以準(zhǔn)確定量稱取，不好解決稱樣的精確度與采樣的代表性之間的矛盾[13]； 且微波處理受制的因素較多， 處理的時間和微波爐的功率、 處理時所使用的玻璃器皿的大小、所處理樣品量的大小等因素有關(guān)； 同時微波加熱處理對部分農(nóng)藥有一定的降解作用， 使其回收率下降[13～25]。 微波處理對百菌清的影響較大， 微波處理后百菌清的回收率最多達(dá)到30%左右[14～15]； 當(dāng)微波處理時間超過40 s 時， 毒死蜱和對硫磷的回收率明顯下降， 其他農(nóng)藥回收率也有不同程度的下降[17]。 在固定功率且最優(yōu)的條件下， 微波處理對99 種農(nóng)藥的降解率可以控制在30%以內(nèi)， 但是隨著條件波動， 該步驟對某些農(nóng)藥的降解率達(dá)到50%左右[19]。 使用不同功率的微波爐、 不同的檢測器測定不同鱗莖類蔬菜中不同種類的農(nóng)藥時， 對樣品進(jìn)行微波加熱處理一定時間， 待測農(nóng)藥的回收率無顯著變化， 微波加熱的時間超過一定時間之后，部分待檢物質(zhì)的回收率降低[21～24]。 久效磷、 對硫磷、 毒死蜱、 敵敵畏、 馬拉硫磷等5 種有機(jī)磷農(nóng)藥經(jīng)過微波爐加熱后降解率為21%～41.5%[25]。（2）水浴加熱。 采用水浴加熱法鈍化韭菜中的活性酶， 分別在破碎前和乙腈相吹干后， 在80℃條件下對其進(jìn)行水浴加熱處理。 樣品破碎前加熱處理6 min、乙腈相吹干后繼續(xù)邊加熱邊用氮氣吹， 時間在30 s～4 min， 均可以有效去除樣品本底硫化物的影響， 獲得較好的凈化效果[26～27]。 甲胺磷、 樂果、 三唑磷、 殺螟硫磷、 毒死蜱等5 種有機(jī)磷農(nóng)藥在不同的蔬菜介質(zhì)中經(jīng)過高溫水煮過程有不同程度的降解[28]。

（二） 磷酸處理

1. 磷酸的使用方法和效果。 為了鈍化鱗莖類蔬菜中的酶， 在稱好的100 g 樣品中加入6 mL 濃磷酸和12 mL 水后， 用組織搗碎機(jī)破碎樣品可以有效去除此類蔬菜中有機(jī)硫化物在質(zhì)譜檢測器上對待檢物質(zhì)的干擾， 洋蔥樣品加磷酸處理后， 待檢物質(zhì)回收率均≤120%[18]。 在樣品提取過程中采用磷酸（1+1）溶液鈍化鱗莖類蔬菜中的活性酶， 百菌清的回收率隨著磷酸（1+1）溶液增加而提高。 當(dāng)磷酸（1+1）溶液的使用量至2 mL， 百菌清的提取效率為30%～100%[29]。 在樣品破碎之前加磷酸處理可以去除鱗莖類蔬菜中的含硫化合物， 解決上機(jī)測定時的高背景干擾問題， 有助于定性定量[30]。 在磷酸酸性溶液中打碎鱗莖類蔬菜樣品再進(jìn)行提取及凈化（10%的磷酸效果最佳）， 硫化物的干擾減少很多，利于百菌清、 氟菌酰胺等在中性到弱酸性介質(zhì)中比較穩(wěn)定的農(nóng)藥的定性和定量[31]。

2. 磷酸處理的弊端。 采用磷酸處理對不銹鋼均質(zhì)器會產(chǎn)生腐蝕， 不宜采用[11]。 蘇建峰等[13]認(rèn)為， 在多殘留分析中引入磷酸這種中強(qiáng)酸適用范圍較窄。 王祥云等[29]、 洪萍等[32]認(rèn)為， 磷酸是一種黏稠的， 不揮發(fā)的中強(qiáng)酸， 在230℃以上會脫水而形成焦磷酸， 它的存在會對氣相色譜儀的進(jìn)樣口和毛細(xì)管柱產(chǎn)生損傷， 并影響進(jìn)樣重復(fù)性， 在檢測中用磷酸處理檢測有機(jī)磷農(nóng)藥， 如果不去除殘留磷酸，對實驗儀器及結(jié)果重復(fù)性產(chǎn)生較大影響， 即使利用固相萃取柱進(jìn)行凈化也很難去除。

（三） 低溫冷凍

1. 低溫冷凍的處理方法和效果。 王連珠等[11]、蘇建峰等[16]分別將大蔥和大蒜樣品在－18℃的冰箱中進(jìn)行冷凍處理不同的時間后取出制樣， 進(jìn)行后續(xù)處理， 分別用氣相色譜－FPD 檢測器和質(zhì)譜檢測器進(jìn)行檢測， 發(fā)現(xiàn)這種方法可鈍化大蔥中的活性酶，從而減少基質(zhì)干擾， 使所得到的譜圖雜峰明顯減少； 黃志強(qiáng)等[33]認(rèn)為， 將鱗莖類蔬菜（蕎頭）樣品進(jìn)行冷凍處理后， 在一定溫度條件下提取、 處理樣品凈化效果較好， 可以有效減少有機(jī)硫化物的干擾。

2. 低溫冷凍處理的機(jī)理和條件。 蘇建峰等[16]在試驗中繼續(xù)延長冷凍時間至4 d 與1 d 相比， 結(jié)果沒有明顯變化， 認(rèn)為低溫冷凍處理只能暫時抑制鱗莖類蔬菜中活性酶的活力， 不會使其永久失活；所得到的色譜圖雜峰明顯減少的原因是冷凍造成細(xì)胞內(nèi)外滲透壓發(fā)生改變， 引起細(xì)胞部分脫水， 從而改變細(xì)胞內(nèi)蛋白質(zhì)的理化特性， 間接導(dǎo)致部分酶失活， 引起基質(zhì)干擾減少； 冷凍處理可以減少基質(zhì)干擾， 但不能阻斷硫基干擾物質(zhì)的生成。 冷凍后進(jìn)行提取的溫度條件對待測物質(zhì)的回收率有一定程度的影響， 在2℃的條件下進(jìn)行提取效果好， 在較高的溫度條件下 （25℃、 30℃） 進(jìn)行提取， 未能得到理想的色譜圖[33]。

（四） 硫酸磺化

1. 硫酸磺化的方法和效果。 高志杰[34]發(fā)現(xiàn)， 制樣時， 在樣品未完全破碎的狀態(tài)下， 按照樣品∶硫酸為2∶1 的比例加入10%的硫酸溶液后進(jìn)行樣品破碎， 在樣品提取步驟按照提取液∶濃硫酸為10∶1 的比例加入濃硫酸進(jìn)行提取凈化和后續(xù)處理， 氣相色譜－ECD 測定韭菜中五氯硝基苯殘留時不僅取得了較好的去除硫化物的效果， 而且獲得較好的回收率。 SUZUKI 等[35]在前處理過程中加入高錳酸鉀－硫酸溶液， 使樣品中的硫化物在酸性條件下經(jīng)高錳酸鉀氧化成極性更強(qiáng)的醇、 酸或砜類物質(zhì)而溶于水， 農(nóng)藥溶于正己烷， 正己烷與水不能互溶的原理使它們彼此分離達(dá)到去除硫化物干擾的目的。

2. 硫酸磺化的局限性。 因為硫酸具有強(qiáng)氧化性， 因此此類處理只適合性質(zhì)相對穩(wěn)定的農(nóng)藥如有機(jī)氯等的檢測[32]。

二、 常規(guī)前處理方法的優(yōu)化和改進(jìn)

（一） 樣品提取

在農(nóng)藥殘留的色譜質(zhì)譜法檢測的前處理中， 可以選擇的提取溶劑有乙酸乙酯、 乙腈、 正己烷、 丙酮、 二氯甲烷等。 這些溶劑迥異的理化性質(zhì)是色譜質(zhì)譜法檢測前處理過程中選擇提取溶劑的理論基礎(chǔ)。 乙酸乙酯在水中溶解度較小， 和水較易分層，但作為提取溶劑容易提取到較多的色素、 脂肪等非極性干擾物， 對大部分極性農(nóng)藥提取效果不佳； 乙腈極性極強(qiáng)， 能溶解多種物質(zhì), 干擾物質(zhì)較少， 通過鹽析較易與水分層； 正己烷基本不溶于水， 和水易于分層， 但其是非極性溶劑， 對有機(jī)磷類農(nóng)藥溶解性差； 丙酮可以從樣品中很好地提取出農(nóng)藥， 但是其與水互溶， 很難與水形成分層[36]。 由于鱗莖類蔬菜樣品和待檢物質(zhì)種類繁多， 在提取步驟選擇相同的溶劑得到了不同的提取效果。 （1） 乙酸乙酯。朱濤等[12]在利用質(zhì)譜檢測器測定大蒜中的嘧霉胺、噻螨酮殘留量時， 采用乙酸乙酯進(jìn)行提取， 獲得滿意效果， 不僅基質(zhì)干擾小， 而且回收率滿意； 但乙酸乙酯對甲基嘧啶磷、 甲基對硫磷的提取效果欠佳。 黃志強(qiáng)等[33]用氣相色譜法測定蕎頭中13 種有機(jī)磷農(nóng)藥殘留量時用， 2 mL 乙酸乙酯提取1 次，二者的回收率在50%以下， 用1∶1 的乙酸乙酯和正己烷的混合溶液進(jìn)行第2 次提取， 除敵敵畏以外的其他12 種農(nóng)藥回收率為65%～120%， 多數(shù)在85%左右。 徐宜宏等[37]用氣相色譜、 串聯(lián)質(zhì)譜檢測器檢測韭菜中34 種農(nóng)藥殘留時發(fā)現(xiàn)， 乙酸乙酯對多數(shù)農(nóng)藥可以獲得滿意的提取效果， 對少數(shù)農(nóng)藥（如百菌清） 未獲得滿意的提取效果。 許天鈞等[38]認(rèn)為， 測定洋蔥及洋蔥調(diào)味汁中二嗪磷農(nóng)藥殘留時， 當(dāng)樣品為洋蔥時， 用乙酸乙酯做提取溶劑較好。 王雯雯等[39]采用乙酸乙酯進(jìn)行樣品提取， 利用質(zhì)譜檢測器實現(xiàn)了1 次進(jìn)樣同時檢測大蔥中170 種農(nóng)藥殘留， 農(nóng)藥的添加回收率能滿足要求。 陳克云等[40]在對蒜苔中咪鮮胺及其代謝物殘留檢測中發(fā)現(xiàn)， 采用乙酸乙酯作為提取溶劑， 目標(biāo)物有較好的回收率， 但色素較多。 （2） 乙腈。 徐宜宏等[37]發(fā)現(xiàn)，乙腈對如百菌清等農(nóng)藥的提取效果比乙酸乙酯好。王雯雯等[39]利用三重串聯(lián)四極桿氣質(zhì)聯(lián)用儀1 次進(jìn)樣同時檢測大蔥中170 種農(nóng)藥殘留時， 采用乙腈進(jìn)行樣品提取， 農(nóng)藥的添加回收率也能滿足要求。 陳克云等[40]在對蒜苔中咪鮮胺及其代謝物殘留檢測中， 綜合考慮提取效率及提取液的干凈程度， 認(rèn)為選擇乙腈作為提取劑較合適。 李萍萍等[41]在氣相色譜－三重四極桿串聯(lián)質(zhì)譜法測定含硫蔬菜中46 種農(nóng)藥殘留量時， 將提取溶劑乙腈改為1%乙酸乙腈時， 乙酰甲胺磷、 百菌清的回收率從低于10%提高到69%～120%。 周昱等[42]利用乙腈作為提取溶劑， 有效提取了植物源復(fù)雜基質(zhì)中70 種有機(jī)磷農(nóng)藥， 并能降低復(fù)雜基質(zhì)中的部分干擾。 （3） 丙酮。采用丙酮提取雜質(zhì)多且含有大量水分， 需增加液－液萃取步驟， 且容易發(fā)生乳化[12，39]。 陳克云等[40]在對蒜苔中咪鮮胺及其代謝物殘留檢測中， 采用丙酮作為提取溶劑， 獲得了乙酸乙酯同等的回收率， 但提取溶液中色素較多。 徐宜宏等[37]用氣相色譜串聯(lián)質(zhì)譜檢測器檢測韭菜中34 種農(nóng)藥殘留， 蔣施等[43]在氣相色譜－三重四極桿串聯(lián)質(zhì)譜法確證姜中120種農(nóng)藥殘留量中都發(fā)現(xiàn)丙酮的提取效果最差。 （4）其他提取劑。 朱濤等[12]在氣相色譜－質(zhì)譜聯(lián)用法測定大蒜中的嘧霉胺、 噻螨酮殘留量時， 用正己烷作為提取溶劑， 嘧霉胺、 噻螨酮的回收率較低。 王雯雯等[39]、 陳克云等[40]分別利用二氯甲烷提取大蔥中170 種農(nóng)藥殘留和蒜苔中咪鮮胺及其代謝物殘留，發(fā)現(xiàn)二氯甲烷提取大蔥基質(zhì)雜質(zhì)多， 對測定的干擾大； 提取咪鮮胺及其代謝物殘留回收率低。 徐宜宏等[37]、 蔣施等[43]為了兼顧多種農(nóng)藥殘留檢測的需要， 分別采用體積比80∶20 和體積比80∶15 的乙腈和乙酸乙酯的混合溶液提取韭菜中34 種農(nóng)藥殘留和姜中120 種農(nóng)藥殘留， 用氣相色譜串聯(lián)質(zhì)譜檢測器進(jìn)行檢測， 提高了農(nóng)藥的回收率， 獲得了不錯的檢測效果。 蘇建峰等[44]、 許天鈞等[45]在測定大蒜中農(nóng)藥殘留時， 為了提高乙腈對大蒜基體組織的滲透性， 在乙腈中加入適量水進(jìn)行樣品提取， 獲得比較好的提取效果。

（二） 樣品凈化

1. 凈化柱填料的種類、 作用及應(yīng)用效果。 在農(nóng)藥殘留的檢測過程中固相萃取是常用的凈化手段， 常用的吸附柱填料有碳材料、 弗羅里硅土 （硅鎂吸附劑、 Florisil）、 氧化鋁和硅膠等[36]。 （1） 碳材料。 活性炭和石墨化炭黑 （GCB、 Carb）， 對植物色素都有強(qiáng)烈的吸附作用， 脫色效果較好[46-49]； 但活性炭對多數(shù)農(nóng)藥的吸附能力也較強(qiáng)[48～49]， 導(dǎo)致農(nóng)藥回收率下降[49]， 且對硫化物等干擾物質(zhì)吸附性較差， 凈化效果不好[33]。 Carb 對樣品中的極性和非極性平面環(huán)狀有機(jī)化合物吸附能力強(qiáng)， 可除去具有平面芳香環(huán)結(jié)構(gòu)的雜質(zhì)， 對色素的去除效果顯著[44]，使用Carb 凈化對農(nóng)藥的回收率無影響[37]。 使用GCB凈化， 多數(shù)農(nóng)藥回收率為90%～110%[49]， 但GCB對噻菌靈、 抑霉唑等農(nóng)藥的吸附性較強(qiáng)， 導(dǎo)致其回收率偏低[54]。 （2） 硅膠。 是將硅酸鈉溶液中加入鹽酸得到的溶膠沉淀物進(jìn)行部分脫水制得的多孔固體， 能有效去除糖等極性雜質(zhì)[46]， 如提取物中的長鏈脂肪酸以及大分子甾醇類物質(zhì)[47]， 通常需要活化去除水分， 使用前加入適量水分調(diào)節(jié)吸附性能[46]。在大蒜中嘧霉胺、 噻螨酮殘留量的氣相色譜－質(zhì)譜聯(lián)用法測定中， 采用硅膠柱進(jìn)行樣品凈化可以有效減少樣品雜質(zhì)， 降低基質(zhì)干擾， 減少離子源污染[12]；黃志強(qiáng)等[33]結(jié)合低溫處理的方法用氣相色譜火焰光度檢測器（FPD）測定蕎頭中13 種有機(jī)磷農(nóng)藥殘留，結(jié)果顯示， 硅膠柱凈化效果最好， 優(yōu)于單用石墨化碳黑、 Florisil 和氧化鋁。 利用C18 （十八烷基硅烷鍵合硅膠） 凈化， 液相色譜質(zhì)譜技術(shù)檢測異菌脲等10 種農(nóng)藥殘留， 回收率普遍偏高[50]。 （3） Florisil。Florisil 是將硫酸鎂和硅酸鈉作用生成的沉淀物經(jīng)過濾干燥而得到的硅酸鎂， 是一種表面積極大的、具有高選擇性的、 多孔性的固體吸附劑， 正相條件下能夠從非極性基質(zhì)中強(qiáng)烈吸附極性分析物， 在應(yīng)用中根據(jù)需要可以添加一些表面活性劑， 使其吸附能力增強(qiáng)[51]。 林靜等[50]利用 Florisil 凈化， 液相色譜質(zhì)譜技術(shù)檢測異菌脲、 三唑酮等10 種農(nóng)藥殘留，發(fā)現(xiàn)近半數(shù)農(nóng)藥回收率偏低。 （4） 其他材料。 PSA的化學(xué)名稱是N－丙基乙二胺， 離子交換能力比氨基柱強(qiáng)， 可與金屬離子產(chǎn)生鰲合作用， 用于提取金屬離子， 去除有機(jī)酸、 色素、 糖類和金屬離子等極性雜質(zhì)， 配合使用合適極性的溶劑可達(dá)到吸附雜質(zhì)而不吸附分析物的目的， 在蔬菜中多農(nóng)藥殘留分析中應(yīng)用較為廣泛[17，44]。 氧化鋁， 有酸性、 中性和堿性之分， 可根據(jù)農(nóng)藥的性質(zhì)選用， 其活性較大， 在使用前須去活處理[46]。 張智超等[12]以失活的氧化鋁（0.4 mL H2O 和 200 g Al2O3） 涂敷一定的硝酸銀（500 mgAgNO3、2.5 mL 丙酮、0.6 mLH2O） 為填料，建立了電子捕獲檢測器測定大蒜中二甲戊靈殘留的方法， 獲得滿意的色譜圖和回收率； 使用1 000 mg/6 mL 的PSA 小柱凈化后， 用氣相色譜－電子捕獲檢測器（GC－ECD）檢測， 從譜圖上看凈化效果優(yōu)于Carb/NH2（石墨化炭黑 / 氨基復(fù)合柱，500 mg/6 mL）、Florisil（1 000 mg/6 mL）[17]。無水 MgSO4是中性化合物， 吸水快， 和各種有機(jī)物均不起化學(xué)反應(yīng)， 常用作干燥劑， 除去水份。 復(fù)合柱， GPC+PSA填料的凈化效果優(yōu)于GPC 小柱和PSA 小柱[17]。 王雯雯等[39]利用NH2/Carb 的串聯(lián)柱進(jìn)行凈化， 用氣相色譜質(zhì)譜聯(lián)用儀檢測， 實現(xiàn)了大蔥基質(zhì)中的170種農(nóng)藥殘留的一次性測定， 獲得較好的回收率和相對標(biāo)準(zhǔn)偏差。 Carb/PSA 復(fù)合柱的凈化效果優(yōu)于Carb柱， 回收率也高[42]。 使用 Carb/NH2柱和 Cleanert TPT（茶葉農(nóng)藥殘留檢測專用柱）凈化，多菌靈、 咪鮮胺的回收率較低[50]； 使用Waters PRiME HLB 柱凈化， 異菌脲、 咪鮮胺的回收率較低[50]。 凝膠色譜（GPC） 能有效地去除色素和油脂等大分子雜質(zhì)[17]，在鱗莖類蔬菜中農(nóng)藥殘留檢測的應(yīng)用中可以選擇環(huán)己烷－乙酸乙酯（1∶1）為流動相[43，52]。 陽離子交換柱， 根據(jù)目標(biāo)物的性質(zhì)， 許天鈞等[38，45]在測定洋蔥及洋蔥調(diào)味汁中二嗪磷農(nóng)藥殘留和大蒜中甲基嘧啶磷和乙基嘧啶磷殘留量中， 均使用陽離子交換柱進(jìn)行凈化， 獲得良好的凈化效果。

2. 洗脫劑的選擇。 選擇洗脫劑應(yīng)該綜合考慮凈化柱的填料和農(nóng)藥的性質(zhì)。 （1） Florisil 柱的洗脫。 測定鱗莖類蔬菜中氟環(huán)唑殘留時采用體積分?jǐn)?shù)8∶2 的正己烷∶丙酮的混合溶液洗脫2 次 （每次10 mL）[13]； 測定大蔥中百菌清和三唑酮殘留量時采用體積分?jǐn)?shù)1∶1 的石油醚∶丙酮的混合溶液[29]；在測定韭菜中有機(jī)磷農(nóng)藥殘留時， 選用體積分?jǐn)?shù)為9∶1 的正己烷∶乙酸乙酯混合溶液， 使用量為5 mL； 乙酸乙酯與正己烷的二元溶劑中隨著乙酸乙酯比例的增加凈化效果降低[47]； 測定蔥屬蔬菜中二甲嘧菌胺和吡氟禾草靈殘留量采用體積分?jǐn)?shù)為1∶19 的丙酮： 正己烷混合溶液效果好， 目標(biāo)物在10 mL 內(nèi)基本完全回收[53]。（2） 硅膠柱的洗脫。 增加丙酮的用量， 將丙酮∶正己烷混合溶液的體積分?jǐn)?shù)由1∶99 改為 10∶90， 用量 25 mL， 大蒜基質(zhì)中噻螨酮、 嘧霉胺的回收率從0 升至100%[12]； 測定蕎頭中13 種有機(jī)磷農(nóng)藥時用體積分?jǐn)?shù)1∶1 的乙酸乙酯∶正己烷作為洗脫劑， 既能減少干擾物質(zhì)， 農(nóng)藥殘留的回收率也較高[33]。 （3） 碳材料柱的洗脫。 測定含硫蔬菜中46 種農(nóng)藥殘留時， 采用體積分?jǐn)?shù)為3∶1 的1%乙酸的乙腈和甲苯的混合溶液洗脫Carb/NH2柱， 用氣相色譜－質(zhì)譜檢測器測定， 46 種農(nóng)藥在0.1 mg/kg 的加標(biāo)水平下回收率高于69%[41]；測定蔥屬蔬菜中二甲嘧菌胺和吡氟禾草靈殘留量采用乙腈洗脫C18 柱可以除去大部分弱極性的雜質(zhì)[53]。 （4） 其他材料柱的洗脫。 測定大蒜中二甲戊靈殘留， 洗脫敷硝酸銀的堿性氧化鋁柱時選擇體積分?jǐn)?shù)1∶2 的乙酸乙酯∶石油醚的混合溶液。 郭永澤等[18]認(rèn)為， 硝酸銀對含硫農(nóng)藥有很強(qiáng)的吸附， 回收率不能達(dá)到要求[20]。 而采用陽離子交換柱凈化，根據(jù)目標(biāo)物的不同選擇不同的活化和洗脫， 測定二嗪磷時先后用甲醇和甲酸－甲醇－水溶液 （甲醇－水體積比1∶1，含體積比2%甲酸）活化小柱， 上樣后依次采用體積比為1∶1 的甲醇－水 （含2%甲酸）溶液淋洗雜質(zhì)、用0.5%的氨水－甲醇洗脫目標(biāo)物[38]； 測定甲基嘧啶磷和乙基嘧啶磷時， 依次用體積分?jǐn)?shù)為1∶5 的1%甲酸∶甲醇混合液、 3 mL 甲醇溶液淋洗雜質(zhì)， 用含有0.5%氨水的甲醇溶液洗脫目標(biāo)物均獲得良好的凈化效果和回收率[45]。

三、 其他前處理方法的應(yīng)用

1.溶劑轉(zhuǎn)移技術(shù)。 基于丙酮對絕大多數(shù)的農(nóng)藥具有極佳的溶解性能； 除油脂外的雜質(zhì)在正己烷中溶解的較少， 且正己烷與水進(jìn)行兩相分配時大部分雜質(zhì)在水相中； 丙酮同時具有親水和親脂的特性，當(dāng)親水和親脂同時滿足時， 優(yōu)先表現(xiàn)出的是親脂性，所以正己烷能夠從水相中萃取出丙酮相這3 個實驗現(xiàn)象， 蘇建峰等[13]提出在前處理過程中溶劑轉(zhuǎn)移的思路， 構(gòu)建了鱗莖類蔬菜中農(nóng)藥殘留的實驗?zāi)Ｐ停?建立了溶劑轉(zhuǎn)移－氣相色譜－質(zhì)譜法和選擇洗脫－氣相色譜法測定大蒜中289 種農(nóng)藥多殘留的方法。

2.QuEchERS 方法。 QuEChERS 法是 2003 年由美國化學(xué)家提出的， 由于其簡便、 高效、 快速、 價廉等優(yōu)點迅速用于食品方面的農(nóng)藥殘留分析[37]， 也廣泛應(yīng)用于鱗莖類蔬菜農(nóng)藥殘留檢測中[44，49～52，54～55]。QuEChERS 法主要涉及一定量的無水MgSO4、 PSA、C18 和GCB 等幾種試劑， 在應(yīng)用中根據(jù)樣品的特點和待檢物質(zhì)的性質(zhì)對各試劑的用量進(jìn)行優(yōu)化。 根據(jù)樣品和待檢物質(zhì)的不同， 學(xué)者們通過對QuEChERS法中凈化劑進(jìn)行優(yōu)化， 給出了最佳組合（見表1）。

表1 QuEChERS 法中凈化劑的優(yōu)化組合

四、 總結(jié)與展望

目前色譜質(zhì)譜技術(shù)是農(nóng)藥殘留檢測的主流方法， 在鱗莖類蔬菜農(nóng)藥殘留檢測中廣泛應(yīng)用， 但是高通量的檢測方法依然難以建立。 鱗莖類蔬菜都含有含硫化合物， 但每種蔬菜各有不同的性質(zhì)， 韭菜、 蒜薹、 大蔥等色素含量高， 大蒜粘度大， 等等。 在建立檢測方法時， 不僅應(yīng)該考慮目標(biāo)物的性質(zhì)， 還要兼顧樣品的特點。 在所調(diào)研的文獻(xiàn)中， 高通量的檢測方法所檢測的多種農(nóng)藥因農(nóng)藥結(jié)構(gòu)不同、 性質(zhì)各異， 以同一種前處理方法上機(jī)測定后往往不能滿足所有農(nóng)藥對回收率的要求[43～44，52]。

前文所述的各種技術(shù)都存在一定的局限性。 通過鈍化酶的方法去除樣品中硫化物時， 在制樣時應(yīng)該充分考慮試驗過程中樣品的整體使用量及其特點， 將樣品切大段 （蔥、 韭菜、 蒜薹等） 或去除表皮 （蒜、 洋蔥等） 后整體進(jìn)行加熱， 之后再行破碎以解決準(zhǔn)確稱量的問題； 加熱處理導(dǎo)致農(nóng)藥降解而使回收率降低的問題還需進(jìn)一步研究或者根據(jù)不同的基質(zhì)對檢測結(jié)果進(jìn)行校正[56]。 目前QuEchERS 方法得到了較為廣泛的應(yīng)用， 筆者認(rèn)為， 溶劑轉(zhuǎn)移技術(shù)同QuEchERS 方法進(jìn)行對接， 將會實現(xiàn)鱗莖類蔬菜中農(nóng)藥殘留高通量檢測方法的建立。