崔永利

【摘要】目的：分析血液標本內(nèi)乙肝病毒應(yīng)用核酸檢測法的檢測價值。方法：選擇160份無償獻血者的血液標本作為檢測對象，應(yīng)用核酸檢測法與酶聯(lián)免疫吸附法，對比兩種檢查方式在乙肝病毒檢測結(jié)果方面的結(jié)果。結(jié)果：相比于酶聯(lián)免疫吸附法而言，核酸檢測法在乙肝病毒檢出的敏感性與特異性明顯更高，核酸檢測法的漏診率低于酶聯(lián)免疫吸附法檢測結(jié)果，酶聯(lián)免疫吸附法的窗口期長于核酸檢測法窗口期，兩組檢測方法各方面差異對比具有明顯差異（P<0.05）；對比不同感染類型的HBV-DNA含量與陽性率可知，大三陽患者HBV-DNA含量與陽性率更高，與其他兩種類型相比較均存在明顯差異（P<0.05），而小三陽與急性或慢性感染期患者相比則無明顯差異（P>0.05）。結(jié)論：血液標本應(yīng)用核酸檢測法對乙肝病毒進行檢測，具有較高的特異性與敏感性，可減少漏診率，縮短窗口期，相比于酶聯(lián)免疫吸附法檢測結(jié)果而言更具優(yōu)勢，也可通過對HBV-DNA含量與陽性率進行定量檢測，可作為有效的篩查方式。

【關(guān)鍵詞】血液標本；核酸檢測法；乙肝病毒

[中圖分類號]R440； R512.62 [文獻標識碼]A [文章編號]2096-5249（2021）05-0127-02

乙肝病毒是導(dǎo)致乙型病毒性肝炎等疾病發(fā)生的主要致病原因，主要通過血液傳播，危害性較大，因此，加強對獻血人群血液內(nèi)乙肝病毒篩查，對于乙肝疾病控制具有重要意義[1]。以往臨床多采用酶聯(lián)免疫吸附法對乙肝病毒進行篩查，此種檢測方式具有費用低、操作簡便等優(yōu)勢，但是由于乙肝病毒存在窗口期，隱匿性相對較高，采用此法檢測時存在一定的漏診情況。近年來，臨床開始應(yīng)用核酸檢測法對乙肝病毒進行檢測，此種檢測方式屬于分子生物學(xué)檢測方法，可直接對乙肝病毒DNA含量進行測定，進而對是否存在乙肝感染情況進行反應(yīng)，診斷靈敏度較高[2]。因此，本研究選擇160例無償獻血者的血液標本開展對比研究，觀察核酸檢測法對乙肝病毒的檢出情況，現(xiàn)匯報如下。

1 資料與方法

1.1資料 選擇160份無償獻血者的血液標本作為檢測對象，獻血者中男性89例、女性71例，年齡20～57歲，平均年齡（32.59±3.68）歲，納入標準：符合《獻血者健康檢查標準》中相關(guān)要求自愿獻血者；經(jīng)過金標試紙法、丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶化學(xué)法檢測乙肝表面抗原（HBsAg）結(jié)果合格者。

1.2方法 所有檢測血液標本均符合要求，均經(jīng)過初檢與復(fù)檢。將血液標本采集后均分到兩個5 mL樣本管內(nèi)，一管裝有分離膠EDTA-K2抗凝真空管，一管裝有分離膠促凝真空管，分別采用核酸檢測法與酶聯(lián)免疫吸附法進行檢測，每個樣本上均需貼上唯一條形碼，將血液樣本進行離心處理，放置在4℃的保溫箱內(nèi)存儲，所有血液樣本均需在采集后48 h內(nèi)完成檢測[3]。酶聯(lián)免疫吸附法：選擇FAME24/20型全自動酶免疫分析儀，應(yīng)用HBV血清血標志物檢測，包括乙肝表面抗原（HBsAg）、乙肝e抗原（HBeAg）、乙肝e抗體（HBeAb）、乙肝核心抗體（HBcAb）、乙肝表面抗體（HBsAb）。核酸檢測法方法：利用實時熒光定量PCR系統(tǒng)對HBV-DNA進行檢測，陽性標準為Ig（HBV-DNA）>2.7。

1.3觀察指標 記錄兩組檢測結(jié)果的敏感度、特異性、診斷誤診率進行對比，對窗口期時間進行記錄。

1.4統(tǒng)計學(xué)處理 利用統(tǒng)計軟件SPSS24.0對本組涉及數(shù)據(jù)進行處理，分為計量與計數(shù)資料，計量資料以

_x±s進行描寫，開展t檢驗，計數(shù)資料以百分數(shù)進行描寫，開展c2值檢驗，數(shù)據(jù)對比值P<0.05時，提示有明顯差異。

2 結(jié)果

2.1兩種檢查方式結(jié)果 觀察組敏感度與特異性高于對照組，觀察組的漏診率低于對照組，觀察組的窗口期時間明顯低于對照組（P<0.05），詳見表1。

2.2不同感染狀態(tài)的HBV-DNA含量與陽性率 選擇的160例血液樣本中經(jīng)檢出，大三陽者共計13例，小三陽者共計10例，急性或慢性感染期者5例，對比觀察三種類型的HBV-DNA含量與HBV-DNA陽性率可知，三組比較存在一定差異（P<0.05）；大三陽患者與小三陽、急性或慢性感染期患者相比，HBV-DNA含量與陽性率比較均存在明顯差異（P<0.05），而小三陽與急性或慢性感染期患者相比則無明顯差異（P>0.05）。詳見表2。

3 討論

3.1乙肝病毒感染 乙肝病毒主要傳染源包括急性乙肝患者、慢性乙肝患者、乙型肝炎病毒攜帶者，其中乙型肝炎病毒感染者無論是出于急慢性期或者潛伏期，血液中所攜帶的乙肝病毒均具有傳染性。乙肝病毒包括血液傳播，以輸血與血制品為主，第二為母嬰傳播，第三為密切接觸傳播，第四是醫(yī)源性傳播[4]，其中以血液傳播的占比最大。乙肝病毒感染機體后，由于機體免疫應(yīng)答強弱不同，肝細胞受損程度差異，HBV免疫病理損害也存在一定差異。

我國作為乙肝病毒感染的高發(fā)國家，呈現(xiàn)高流行發(fā)展趨勢，獻血者開展血液篩查時發(fā)現(xiàn)，乙肝病毒的陽性檢出率較高。因此，加強對無償獻血者的血液篩檢工作，阻止含有乙肝病毒的血液樣本輸注，可有效阻止乙肝病毒經(jīng)輸血途徑傳播，對于乙肝病毒傳播具有預(yù)防作用[5]。乙肝病毒感染后會存在隱匿性與窗口期等問題，導(dǎo)致臨床診斷時存在較大的漏診風險。因此，選擇最佳的篩查方式，對乙肝病毒進行檢查，及時將無償獻血者的血液進行區(qū)分，及時排除存在乙肝病毒感染者的血液，對于乙肝疾病預(yù)防控制具有重要意義。

3.2酶聯(lián)免疫吸附法 酶聯(lián)免疫吸附法是乙肝病毒診斷的傳統(tǒng)方式，可保持良好的免疫活性，檢測指標主要是抗原與抗體，檢測窗口期時間較長[6]，且部分存在感染風險的陽性血液標本用此法檢查時，不易被檢出，易出現(xiàn)誤診情況。酶聯(lián)免疫吸附法主要是通過酶復(fù)合物、抗體結(jié)合方式顯色對病毒進行標記，一旦病毒變異，或者出現(xiàn)病毒感染窗口期等影響后，會影響檢查結(jié)果，出現(xiàn)一定的漏檢可能。

3.3核酸檢測法 近年來，隨著醫(yī)學(xué)技術(shù)的不斷發(fā)展，核酸檢測在血液篩查工作中逐漸普及應(yīng)用。核酸檢測作為新型分值生物學(xué)檢測方法，是通過提取患者血液、呼吸道等標本，對是否存在外來病毒核酸進行檢測，進而判斷是否存在病毒感染。在乙肝病毒篩查中利用核酸檢測，可通過對乙肝病毒DNA含量進行測定，進而了解患者血液標本中是否感染乙肝病毒[7]。臨床采用核酸檢測法具有標本回收率高、易于自動化的特點，屬于血清學(xué)臨床診斷的一種補充方式，此種方式適用于大量血液標本檢測篩查工作。研究發(fā)現(xiàn)，核酸檢測對乙肝病毒進行檢測時，可縮短窗口期，對于隱匿性乙肝病毒感染具有較高的檢出率。核酸檢測主要是通過核酸擴增技術(shù)進行檢測，可對血液標本中的病毒核酸進行早期定量檢查，可直接對乙肝病毒的感染情況進行反應(yīng)，因此，診斷結(jié)果更可靠，靈敏度更高。

3.4臨床篩查診斷的應(yīng)用效果 有關(guān)研究發(fā)現(xiàn)[8]，核酸檢測與酶聯(lián)免疫吸附法兩種檢測方式在乙肝病毒陽性檢出率方面比較無差異（P<0.05），而在靈敏度、特異性方面，核酸檢測明顯更高。臨床研究發(fā)現(xiàn)，核酸檢測法的窗口期僅為酶聯(lián)免疫吸附法的1/2左右，使得兩種檢查方法存在一定差異性。經(jīng)酶聯(lián)免疫吸附法檢測結(jié)果顯示為陽性者，再次開展核酸檢測結(jié)果可為陰性，此時可初步判斷乙肝患者經(jīng)過藥物治療后，血液內(nèi)仍存留HBsAg殘留，此時會導(dǎo)致兩種檢測結(jié)果出現(xiàn)差異。血液標本中應(yīng)酶聯(lián)免疫檢測法檢測后結(jié)果為陰性時，利用核酸檢測結(jié)果也可為陽性，此時多為乙肝病毒感染早期，由于酶聯(lián)免疫吸附法無法檢出感染，此時會使檢測結(jié)果出現(xiàn)差異，同時針對早期乙肝病毒感染患者，無法通過酶聯(lián)免疫吸附法檢出，也會出現(xiàn)一定的誤診率[9]。鑒于此，酶聯(lián)免疫吸附法與核酸檢測法在臨床篩查時，針對早期乙肝病毒感染以及治療后的乙肝患者兩種檢查結(jié)果可存在一定差異性，兩種檢查方式具有一定的互補性，條件允許時先后開展兩項檢測，可更好提升檢查結(jié)果的準確性，降低漏診率，更好阻止乙肝病毒經(jīng)血液傳播。有關(guān)研究發(fā)現(xiàn)，HBV感染狀態(tài)與HBV-DNA陽性率與含量存在一定關(guān)系，大三陽患者的陽性率與含量明顯升高。分析原因可知，乙肝病毒處于急性感染期、慢性感染期時，無傳染性，但是隨著HBV-DNA陽性率與含量升高，HBV血液標本的傳染性越強。因此，在臨床檢測時也可通過HBV-DNA定量檢測，對乙肝病毒的傳染性進行正確評估。

本組研究進一步證實，相比于酶聯(lián)免疫吸附法而言，采用核酸檢測的靈敏度與特異性更高，誤診率較低，同時空窗期時間更短，在臨床診斷時更據(jù)優(yōu)勢。結(jié)果分析可知，利用核酸檢測后，可對血液標本中HBV-DNA含量進行準確診斷，及時對乙肝病毒感染情況進行反映，及時排除存在乙肝病毒的血液標本，盡可能避免因輸血導(dǎo)致患者感染乙肝病毒，最大程度提升輸血安全性。

綜上所述，血液標本中對乙肝病毒進行檢測時，核酸檢測、酶聯(lián)免疫吸附法均具有較高的檢出率，但是在靈敏度、特異性、誤診率以及空窗期等指標對比，核酸檢測的優(yōu)勢更明顯，可作為酶聯(lián)免疫吸附檢測乙肝病毒的輔助檢查方式，使臨床篩查結(jié)果更可靠，更好提升輸血安全性。

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