摘要： 目的 研究低溫脅迫下桑寄生種子的各生理指標(biāo)變化。方法 2018年6月-2019年5月采集20批桑寄生種子，分別選擇不同溫度處理，并在不同時間取樣開展各項生理指標(biāo)的檢測，分析其指標(biāo)變化。結(jié)果 -5、0、5、10攝氏度時處理1、2、3、4d后的相對電導(dǎo)率均高出對照組（P<0.05）。-5、0、5、10攝氏度時處理1、2、3、4d后的可溶性糖與對照組差異顯著（P<0.05）。-5、0、5、10攝氏度時處理1、2、3、4d后的可溶性淀粉與對照組比較差異顯著（P<0.05）。-5、0、5、10攝氏度時處理1、2、3、4d后的可溶性蛋白與對照組比較差異顯著（P<0.05）。結(jié)論 低溫脅迫下桑寄生種子的電導(dǎo)率、可溶性糖、可溶性淀粉及可溶性蛋白發(fā)生明顯變化，尤其是0攝氏度及以下的條件不利于種子保存。

關(guān)鍵詞：桑寄生;相對電導(dǎo)率;低溫脅迫;種子

【中圖分類號】R4 【文獻標(biāo)識碼】A 【文章編號】2107-2306（2021）06-225-01

桑寄生屬于我國傳統(tǒng)中藥材之一，具有強筋骨、除風(fēng)濕、安胎及補肝腎的作用，同時成為國內(nèi)特色的道地寄生類藥材。而桑寄生種子具有一定頑拗性，其低溫敏感性較強，且容易失活，加上其僅可經(jīng)過種子繁殖，可直接影響其繁殖發(fā)展[1]。以往臨床曾針對頑拗性種子進行低溫保存的研究，但實際能夠長時間低溫保存的報道較少，可能與其低溫敏感的響應(yīng)機制存在關(guān)系，同時成為頑拗性種子死亡的主要因素[2-3]。一旦種子受到低溫脅迫，其不僅出現(xiàn)生物膜改變，還可導(dǎo)致膜系統(tǒng)結(jié)構(gòu)發(fā)生變化，促使膜上各類酶活性受損，最終造成種子變質(zhì)死亡[4]。另外為了減輕低溫帶來的損害，種子可能通過產(chǎn)生小分子物質(zhì)或者分解原本物質(zhì)的方式，來穩(wěn)定細(xì)胞膜系統(tǒng)，進而避免低溫脅迫引發(fā)的傷害[5]。因此本文展開試驗，結(jié)果如下：

1 資料與方法

1.1 材料

2018年6月-2019年5月采集20批桑寄生種子，其種子的成熟度、飽滿度一致，且無機械損傷或者病蟲害。分別進行常規(guī)清洗、剝除果皮果膠，放在不同溫度下處理，同時選擇25攝氏度下處理的種子作為對照組。其中不同溫度為-5、0、5、10攝氏度，其環(huán)境相對濕度均處于70-75%左右，而對照品在人工氣候的培養(yǎng)箱內(nèi)進行。

1.2 方法

選擇電導(dǎo)儀（DDS-307）檢測-5、0、5、10攝氏度及處理后1、2、3、4d的電導(dǎo)率，并遵照蒽酮比色法檢測可溶性糖與淀粉，按考馬斯亮藍G-250法檢測可溶性蛋白，嚴(yán)格按照試劑盒說明書要求進行操作。

1.3 觀察指標(biāo)

對比不同溫度處理桑寄生種子1、2、3、4d后的相對電導(dǎo)率、可溶性糖、可溶性淀粉及可溶性蛋白水平。

1.4 統(tǒng)計學(xué)處理

全文數(shù)據(jù)選擇SPSS 20.0系統(tǒng)計算，表達計量數(shù)據(jù)，選擇t檢驗;百分比表達計數(shù)數(shù)據(jù)，選擇X2檢驗，P<0.05為兩組數(shù)據(jù)存在差異。

2 結(jié)果

2.1 不同溫度處理后的相對電導(dǎo)率

-5、0、5、10攝氏度時處理1、2、3、4d后的相對電導(dǎo)率均高出對照組（P<0.05）。見表1。

2.2 不同溫度處理后的可溶性糖水平

-5、0、5、10攝氏度時處理1、2、3、4d后的可溶性糖與對照組差異顯著（P<0.05）。見表2。

2.3 不同溫度處理后的可溶性淀粉水平

-5、0、5、10攝氏度時處理1、2、3、4d后的可溶性淀粉與對照組比較差異顯著（P<0.05）。見表3。

2.4 不同溫度處理后的蛋白水平

-5、0、5、10攝氏度時處理1、2、3、4d后的可溶性蛋白與對照組比較差異顯著（P<0.05）。見表4。

3 討論

由于頑拗性種子難以耐受低溫，難以使用低溫種子庫等常規(guī)方式進行保存，明顯提升種子保存的困難程度[6]。因此全面掌握頑拗性種子低溫敏感的機理成為關(guān)鍵，但其過程較為復(fù)雜，目前臨床僅對其脫水敏感性進行觀察，并未重視低溫敏感的研究[7]。因此本文展開分析，對桑寄生種子在低溫脅迫下的生理指標(biāo)進行觀察，為低溫敏感機制提供參考依據(jù)。

桑寄生種子通常對低溫較為敏感，本文結(jié)果中看到：-5、0、5、10攝氏度時處理1、2、3、4d后的相對電導(dǎo)率、可溶性淀粉、可溶性糖及可溶性蛋白與對照組差異顯著（P<0.05），提示低溫脅迫下桑寄生種子的電導(dǎo)率、可溶性糖及可溶性淀粉受到一定影響，特別是0攝氏度及以下條件時，不利于種子保存。經(jīng)分析發(fā)現(xiàn)，電導(dǎo)率與低溫脅迫的時長存在一定關(guān)系，隨著處理時間的延長，其溫度越低，細(xì)胞膜受到的傷害越大，且電導(dǎo)率隨之升高[8]。而可溶性糖、淀粉及蛋白均屬于植物滲透調(diào)節(jié)物質(zhì)及內(nèi)容物，經(jīng)過分解滲透或者積累方式調(diào)節(jié)物質(zhì)，可達到平衡細(xì)胞滲透的效果，進而避免逆境條件對植物造成的傷害[9-10]。曾有研究指出[11]，較高水平的可溶性糖以及蛋白在增強植物抗寒性上具有重要意義。而桑寄生種子在低溫環(huán)境中，可能出現(xiàn)相關(guān)糖來抵抗低溫脅迫，但隨著處理時長的增加，其合成能力受到損害。由此可見，不同溫度及處理時間下，桑寄生種子上可溶性糖、淀粉及蛋白水平發(fā)生一系列變化，尤其是0攝氏度及以下條件時變化更明顯，不利于其保存及萌發(fā)。

綜上所述，低溫脅迫下桑寄生種子的電導(dǎo)率、可溶性糖、可溶性淀粉及可溶性蛋白發(fā)生明顯變化，尤其是0攝氏度及以下的條件不利于種子保存。

參考文獻：

[1]萬凌云，裴河歡，付金娥，等.桑寄生種子的頑拗性生物學(xué)特征及保存技術(shù)研究[J].種子，2019，38（12）：48-53.

[2]沙曉梅，李娟，帕提古力·阿不力孜，等.低溫脅迫對棉花種子萌發(fā)的影響[J].種子，2021，40（2）：80-85.

[3]KWEON， SANG HYO， KIM， JONG-HYUN， IM， MIR， et al. Physical Properties of （Na1-xKx）NbO3 Thin Film Grown at Low Temperature Using Two-Dimensional Ca2Nb3O10 Nanosheet Seed Layer[J]. ACS applied materials & interfaces，2018，10（30）：25536-25546.

[4]徐婷，樊景勝，連永利，等.低溫對高緯度半干旱區(qū)玉米主栽品種種子萌發(fā)特性的影響[J].安徽農(nóng)業(yè)科學(xué)，2021，49（9）：25-27.

[5]鄧曉娟，蘇秀娟，瑪依拉·依不拉音，等.人工老化和低溫脅迫對陸地棉種子活力的影響和評價[J].新疆農(nóng)業(yè)科學(xué)，2021，58（6）：998-1005.

[6]李秀梅，古吉，李亞清，等.不同引發(fā)溫度及時間對煙草種子低溫萌發(fā)的影響[J].種子，2020，39（5）：99-103.

[7]張曉寧，張燁，肖玉菲，等.含水量對超低溫保存后馬尾松種子生理生化特性的影響[J].種子，2020，39（8）：48-51.

[8]徐小萌，呂鵬輝，趙陽佳，等.利用低溫萌發(fā)試驗評價不同顏色紫云英種子的活力[J].北京農(nóng)學(xué)院學(xué)報，2021，36（2）：16-19.

[9]DE ANDRADE DE SIQUEIRA， GEISA LIANDRA， DA SILVEIRA， ANA CLAUDIA， DA SILVEIRA LAZZAROTTO， SIMONE ROSA， et al. Hydrolysis of the low gelatinization temperature Araucaria angustifolia pine seed starch Thermal， rheological and structural properties[J]. Journal of thermal analysis and calorimetry，2019，138（2）：1269-1278.

[10]李任任，耿貴，呂春華，等.低溫對甜菜種子發(fā)芽及幼苗生長的影響[J].黑龍江大學(xué)自然科學(xué)學(xué)報，2020，37（6）：718-725.

[11]樊娟，龍海江，向曉龍，等.低溫脅迫對戊唑醇包衣高粱種子出苗和幼苗生理生化的影響[J].東北農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報，2020，51（3）：26-35.

欽州市科學(xué)研究與技術(shù)開發(fā)計劃項目 合同編號：201811503

作者簡介：裴河歡（1981-），男，在職研究生，副主任藥師，主要從事藥用植物學(xué)、天然藥物開發(fā)和中藥制劑研發(fā)，E-mail：pei.hehuan@163.com。