李世忠

（遼寧省農(nóng)藥檢定站，遼寧 沈陽(yáng) 110034）

1 前言

丙炔氟草胺·乙草胺乳油主要由丙炔氟草胺和乙草胺復(fù)配而成，丙炔氟草胺·乙草胺乳油為玉米田苗后除草劑，適用于防除玉米田一年生和多年生禾本科雜草和闊葉雜草。目前對(duì)于丙炔氟草胺·乙草胺乳油復(fù)配有效成分含量的檢測(cè)，多采用氣相色譜和液相色譜分別檢測(cè)。通過(guò)大量的實(shí)驗(yàn)測(cè)定并結(jié)合本實(shí)驗(yàn)室的條件，找到了丙炔氟草胺·乙草胺乳油的液相色譜分離方法，結(jié)果表明，方法快速準(zhǔn)確，適用于農(nóng)藥企業(yè)質(zhì)量控制和質(zhì)檢機(jī)構(gòu)市場(chǎng)監(jiān)控。

2 實(shí)驗(yàn)部分

2.1 儀器與試劑

安捷倫HP1100液相色譜儀，具二極管陣列檢測(cè)器；色譜工作站；KQ-100超聲波清洗器；BP221S賽多利斯電子天平；色譜柱：Hypersil ODS 4.6 mm×250 mm 5μm。

丙炔氟草胺標(biāo)樣≥98.0%；乙草胺標(biāo)樣≥98.0%；2,4-滴異辛酯≥98.0%。

2.2 色譜條件

流動(dòng)相：V（乙腈）∶V（水）=50∶50；經(jīng)濾膜過(guò)濾，并進(jìn)行脫氣；

流速：1.0 mL·min-1；

檢測(cè)波長(zhǎng)：230 nm；

進(jìn)樣體積：5μL；

保留時(shí)間（min）: 丙炔氟草胺約5.2 min，乙草胺約10.6 min。

在上述色譜條件下，丙炔氟草胺和乙草胺的標(biāo)樣譜圖見(jiàn)圖1，丙炔氟草胺·乙草胺乳油樣品的色譜圖見(jiàn)圖2。

圖1 丙炔氟草胺·乙草胺標(biāo)樣譜圖

圖2 丙炔氟草胺·乙草胺乳油樣品譜圖

由此可見(jiàn)，色譜峰分離較好。

2.3 分析步驟

2.3.1 標(biāo)樣溶液的配制：

稱(chēng)取丙炔氟草胺標(biāo)樣約0.03（精確至0.000 1 g）置于50 mL容量瓶中，用乙腈溶解并稀釋至刻度，搖勻、備用。稱(chēng)取乙草胺標(biāo)樣約0.085 g (精確至0.000 1 g），置于50 mL容量瓶中，用移液管準(zhǔn)確移取5 mL上述丙炔氟草胺溶液至于其中，用乙腈溶解并稀釋至刻度，搖勻、制成混合標(biāo)樣溶液備用。

2.3.2 試樣溶液的配制

準(zhǔn)確稱(chēng)取約0.12 g樣品（準(zhǔn)確至0.000 1 g ）于50 mL容量瓶中，用乙腈溶解，超聲振蕩后，冷卻至室溫后用孔徑為0.45 μm的濾膜過(guò)濾，待測(cè)。

2.3.3 測(cè)定

在上述操作條件下，待儀器穩(wěn)定后，連續(xù)注入數(shù)針標(biāo)樣溶液，直至相鄰兩針丙炔氟草胺（乙草胺）峰面積相對(duì)變化小于1.5%后，按照標(biāo)樣溶液、試樣溶液、試樣溶液、標(biāo)樣溶液的順序進(jìn)行測(cè)定。

2.3.4 計(jì)算

將測(cè)得的兩針試樣溶液以及試樣前后兩針標(biāo)樣溶液中辛酰溴苯腈（煙嘧磺隆、2，4-滴異辛酯）分別進(jìn)行平均。

將測(cè)得的兩針試樣溶液以及試樣前后兩針標(biāo)樣溶液峰面積分別進(jìn)行平均，丙炔氟草胺（乙草胺）的質(zhì)量分?jǐn)?shù)X1按式(1)計(jì)算：

式中：m1—標(biāo)樣溶液中丙炔氟草胺（乙草胺）的質(zhì)量，g；

m2—試樣的質(zhì)量，g；

A1—標(biāo)樣溶液中丙炔氟草胺（乙草胺）峰面積的平均值；

A2—樣品溶液中丙炔氟草胺（乙草胺）峰面積的平均值；

ω—標(biāo)樣中丙炔氟草胺（乙草胺）的質(zhì)量分?jǐn)?shù)，%；

r—標(biāo)樣稀釋倍數(shù)丙炔氟草胺r=10，乙草胺r=1。

3 結(jié)果與討論

3.1 線性關(guān)系試驗(yàn)

稱(chēng)取丙炔氟草胺標(biāo)樣0.301 2 g （精確至0.000 1 g）（質(zhì)量分?jǐn)?shù)99.3%），置于50 mL容量瓶中，用乙腈溶解并稀釋至刻度，搖勻、備用。稱(chēng)取乙草胺標(biāo)樣0.856 2 g（精確至0.000 1 g）（質(zhì)量分?jǐn)?shù)99.2%），置于50 mL容量瓶中，用移液管準(zhǔn)確移取5 mL上述丙炔氟草胺溶液至于其中，用乙腈溶解并稀釋至刻度，搖勻、用移液管分別移取3、4、5、6、7 mL至50 mL容量瓶中，用乙腈定容，配置成5個(gè)梯度濃度的標(biāo)準(zhǔn)溶液。待儀器穩(wěn)定后按濃度從低到高順序進(jìn)樣。以標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度為橫坐標(biāo)，峰面積為縱坐標(biāo)制得標(biāo)準(zhǔn)曲線。見(jiàn)圖1、圖2。

圖3 丙炔氟草胺測(cè)定方法線性關(guān)系圖

圖4 乙草胺測(cè)定方法線性關(guān)系數(shù)據(jù)

3.2 精密度試驗(yàn)

對(duì)73%丙炔氟草胺·乙草胺乳油試樣進(jìn)行5次平行測(cè)定，檢驗(yàn)分析方法的精密度。測(cè)得丙炔氟草胺的標(biāo)準(zhǔn)偏差為0.004，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差為0.18%，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差低于2.33% Horwits公式計(jì)算值，測(cè)得乙草胺的標(biāo)準(zhǔn)偏差為 0.229，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差為0.33%，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差低于1.41% Horwits公式計(jì)算值。因此本方法對(duì)73%丙炔氟草胺·乙草胺乳油中的丙炔氟草胺和乙草胺含量測(cè)定有良好的精密度。

3.3 準(zhǔn)確度試驗(yàn)

為驗(yàn)證本方法的系統(tǒng)誤差，對(duì)方法的準(zhǔn)確度進(jìn)行了驗(yàn)證，按照配方比例要求，將除原藥以外的所有助劑混合，做制劑空白。按制劑標(biāo)稱(chēng)值在制劑空白中分別添加一定質(zhì)量的丙炔氟草胺標(biāo)樣、乙草胺標(biāo)樣，分別測(cè)定丙炔氟草胺、乙草胺的回收率，最終測(cè)定丙炔氟草胺回收率在98.6%～100.1%之間，乙草胺回收率在98.8%～99.9%之間，分析方法具有良好的準(zhǔn)確度。

3.4 特異性測(cè)定試驗(yàn)

本標(biāo)準(zhǔn)分析方法采用HPLC-DAD峰純度分析法對(duì)丙炔氟草胺、乙草胺進(jìn)行鑒別。由譜圖可知，73%丙炔氟草胺·乙草胺乳油在該分析方法下丙炔氟草胺、乙草胺于230 nm處對(duì)紫外光均有較強(qiáng)的吸收信號(hào)。從色譜圖可以清晰地看出，有效成分丙炔氟草胺、乙草胺處無(wú)其他物質(zhì)干擾，色譜峰純度因子丙炔氟草胺為999.8、乙草胺為999.8、符合定量分析要求。

3.5 非分析物干擾試驗(yàn)

助劑中的任何干擾物均會(huì)導(dǎo)致分析方法出現(xiàn)系統(tǒng)偏差，分析時(shí)同時(shí)測(cè)定不帶助劑的丙炔氟草胺、乙草胺原藥和空白樣品，通過(guò)不加助劑的原藥色譜圖和不加原藥的助劑色譜圖判定，結(jié)果顯示，非分析物對(duì)有效成分丙炔氟草胺、乙草胺的分析不構(gòu)成干擾。

4 結(jié)束語(yǔ)

用本高效液相色譜法檢測(cè)丙炔氟草胺·乙草胺乳油中的丙炔氟草胺和乙草胺，具有快速準(zhǔn)確等優(yōu)點(diǎn)，且重現(xiàn)性、穩(wěn)定性、分離效果均能滿足產(chǎn)品的質(zhì)量要求，是一個(gè)較為理想的檢驗(yàn)方法。