潘佳瀅，肖磊，劉津秀

（沈陽師范大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院，遼寧沈陽 110034）

應(yīng)激是一種機體在內(nèi)部或外界緊張性刺激的影響下，而產(chǎn)生的一系列非特異性應(yīng)答反應(yīng)的機體狀態(tài)。緊張性刺激包括物理因素和精神因素兩方面，或是二者的共同作用[1]。從進(jìn)化的方面來講，動物在生長過程中不可避免地會受到內(nèi)外環(huán)境因素的刺激，機體為了能夠適應(yīng)這種變動的環(huán)境，需要產(chǎn)生相應(yīng)的反應(yīng)來應(yīng)對這些刺激[2]。應(yīng)激通常指兩方面：一方面是心理對壓力的感知，另一方面是身體對壓力的反應(yīng)，這涉及從新陳代謝到肌肉乃至記憶的多個系統(tǒng)。

對所有動物來說，一定程度的應(yīng)激是必要的，其是動物應(yīng)對生存挑戰(zhàn)和不確定因素的手段。對危險的感知引發(fā)了一種稱為戰(zhàn)斗或逃跑反應(yīng)（Fight-orflight response）的自動反應(yīng)系統(tǒng)，其通過激素信號激活，使動物做好迎接威脅或逃離威脅的準(zhǔn)備[3]。緊張性刺激能引起有機體一系列生理和心理反應(yīng)。生理反應(yīng)表現(xiàn)為交感神經(jīng)興奮、垂體和腎上腺皮質(zhì)激素分泌增多、血糖升高、血壓上升、心率加快和呼吸加速等[4]。野生動物生理生態(tài)學(xué)研究中常常涉及活體取血等實驗操作，因此檢測抓取等固定處理造成的束縛應(yīng)激（Wrap Restraint Stress，WRS）是否影響動物的血液生理指標(biāo)，從而引起應(yīng)激，是十分必要的。

1 材料與方法

1.1 材料與儀器

實驗室繁殖雄性達(dá)烏爾黃鼠10 只，自然光照，標(biāo)準(zhǔn)鼠飼料、單籠飼養(yǎng)，水食自取。血糖儀為穩(wěn)豪倍優(yōu)型血糖儀，強生（上海）醫(yī)療器材有限公司；強生（Johnson）穩(wěn)豪型血糖試紙（葡萄糖氧化酶法），強生（上海）醫(yī)療器材有限公司。

1.2 檢測方法

如圖1 所示，分別將達(dá)烏爾黃鼠放入自制束縛性網(wǎng)籠，在0 min、5 min、10 min、20 min、30 min、60 min 時逐一拿出，并進(jìn)行尾尖取血，用血糖儀測量血糖。

圖1 束縛性網(wǎng)籠

1.3 數(shù)據(jù)統(tǒng)計分析

SPSS20.0 進(jìn)行數(shù)據(jù)統(tǒng)計，單因素方差分析。P＜0.05 為差異顯著，P＜0.01 為差異極顯著。

2 結(jié)果與分析

2.1 束縛應(yīng)激對達(dá)烏爾黃鼠血糖的影響

達(dá)烏爾黃鼠在不同束縛時間時的血糖見圖2。如圖2 所示，在束縛5 ～30 min 時，達(dá)烏爾黃鼠血糖水平從（7.53±0.49）mmol/L 分別升高到（10.57±0.48）mmol/L、（12.69±1.27）mmol/L、（11.89±1.39）mmol/L、（11.64±1.16）mmol/L，與束縛前的血糖水平具有顯著差異。在束縛10 min 時，其血糖與束縛前的血糖具有極顯著差異。在束縛60 min 時，其血糖水平有所回落，為（10.06±0.94）mmol/L，與束縛前差異不顯著。

圖2 達(dá)烏爾黃鼠在不同束縛時間時的血糖

2.2 達(dá)烏爾黃鼠體重與其血糖及應(yīng)激反應(yīng)引起的血糖變化幅度的關(guān)系

體重與血糖的相關(guān)性概率與相關(guān)系數(shù)見表1。如表1 所示，達(dá)烏爾黃鼠血糖與體重不相關(guān)，且在束縛10 min 時、60 min 時血糖與束縛前血糖的差值也與體重不相關(guān)。

表1 體重與血糖的相關(guān)性概率與相關(guān)系數(shù)

2.3 應(yīng)激反應(yīng)引起達(dá)烏爾黃鼠血糖變化幅度與其初始血糖的關(guān)系

初始血糖與束縛后血糖變化量的相關(guān)性概率與相關(guān)系數(shù)見表2。如表2 所示，達(dá)烏爾黃鼠在束縛10 min、60 min 時血糖與束縛前血糖的變化量，與初始血糖不相關(guān)。

表2 初始血糖與束縛后血糖變化量的相關(guān)性概率與相關(guān)系數(shù)

束縛應(yīng)激是通過交感神經(jīng)興奮和下丘腦-垂體-腎上腺軸激活來實現(xiàn)的[5]，這屬于急性應(yīng)激反應(yīng)，是應(yīng)激后的非特異性反應(yīng)。經(jīng)統(tǒng)計學(xué)分析，達(dá)烏爾黃鼠在束縛10 min 和60 min 后的血糖變化量與其體重和初始血糖水平無明顯差異，提示束縛應(yīng)激對達(dá)烏爾黃鼠血糖產(chǎn)生的影響與束縛應(yīng)激本身有關(guān)。

另外，在慢性應(yīng)激中，持續(xù)性刺激會導(dǎo)致兒茶酚胺的不斷產(chǎn)生和分泌。這會產(chǎn)生多種生理后果，如高血糖和高血壓病，并可能導(dǎo)致Ⅱ型糖尿病和心血管疾病。部分兒茶酚胺，如腦中的神經(jīng)遞質(zhì)去甲腎上腺素等物質(zhì)會改變認(rèn)知以及其他心理過程，導(dǎo)致情緒波動、暴躁、抑郁癥和焦慮。此外，長期壓力刺激腎上腺分泌皮質(zhì)醇可以降低免疫功能，增加患病風(fēng)險。高水平的皮質(zhì)醇也與體重增加有關(guān)，尤其是腹部脂肪的堆積[6]。

3 結(jié)論

束縛應(yīng)激對達(dá)烏爾黃鼠血糖造成的影響隨時間變化會產(chǎn)生很大的差異。束縛在短時間（5 min）內(nèi)即引起達(dá)烏爾黃鼠的應(yīng)激反應(yīng)，使其血糖顯著升高，束縛1 h 后，動物逐漸適應(yīng)束縛籠，血糖趨于恢復(fù)。因此，對達(dá)烏爾黃鼠等動物活體相關(guān)指標(biāo)取材測定時，動作一定要快速、準(zhǔn)確，避免應(yīng)激對生理指標(biāo)造成影響進(jìn)而影響其他實驗結(jié)果。