秦婷婷，董媛媛，孫路萍，苗麗娟，王佳美

（山西振東開元制藥有限公司，山西長治 046108）

蜂蠟為蜜蜂科昆蟲中華蜜蜂（Apis cerawa Fabricius）或意大利蜂（Apis mellifera Linnaeus）分泌的蠟，是通過將蜂巢置水中加熱，經(jīng)過濾、冷凝取蠟或再精制的方法獲得的一種產(chǎn)品[1]。蜂蠟的使用歷史悠久，與人類生活密切相關(guān)，被廣泛應(yīng)用于農(nóng)業(yè)、醫(yī)藥業(yè)、美容及化工等行業(yè)。現(xiàn)代研究結(jié)果表明，蜂蠟作為藥物使用有補(bǔ)中益氣、解毒止痢、生肌斂瘡的作用[2]；蜂蠟常作為中藥賦形劑、潤滑劑、穩(wěn)定劑等用于蠟丸、軟膏、膠囊外殼等制品中，具有不與主藥發(fā)生作用，也不破壞主藥的療效且安全、綠色、高效等優(yōu)點(diǎn)。有研究證實(shí)，添加了蜂蠟的藥丸殼可以有效推遲被包覆藥丸的變質(zhì)期[3]。另外，蜂蠟還有抗衰老、潤膚、除皺美容等功效[4]。蜂蠟乳化后不僅與油互溶，還可以使油與其他配料結(jié)合在一起，所以蜂蠟是化妝品普遍使用的原料之一。

蜂蠟分為黃蠟和白蠟，白蠟是由黃蠟漂白后制成的[2]，兩者的化學(xué)成分基本相同。蜂蠟中的化學(xué)成分主要有烷醇和烷酸形成的酯類、烷烴類、游離脂肪酸類、游離脂肪醇類以及少量的揮發(fā)油、維生素類等[4-5]。熬制蜂蠟油的植物油一般使用大豆油，大豆油主要成分是脂肪酸，包括棕櫚酸7%～10%，硬脂酸2%～5%，花生酸1%～3%，油酸22%～30%，亞油酸50%～60%以及亞麻油酸5%～9%[6]。蜂蠟油中的不飽和脂肪酸與空氣中的氧發(fā)生氧化反應(yīng)生成過氧化物，這是油脂發(fā)生氧化的最初產(chǎn)物，這個(gè)過程稱為自動(dòng)氧化。過氧化產(chǎn)物不穩(wěn)定、具有較高的活性，進(jìn)一步氧化可變成低分子的醛酮，使蜂蠟油出現(xiàn)異味，品質(zhì)下降[7-8]。

蜜丸是中成藥中臨床應(yīng)用最廣的劑型，蜜丸制作過程中常在上下壓板溝槽或者模輥上涂以少量蜂蠟油作為潤滑劑，防止粘附，便于制丸。將蜂蠟和植物油按1 ∶8 的比例倒入鍋內(nèi)，加熱熬制1 ～2 h 即可制得蜂蠟油。而由于放置時(shí)間過長或貯存不當(dāng)使蜂蠟油變質(zhì)，導(dǎo)致蜜丸出現(xiàn)令人不愉快的氣味，影響患者服用并造成藥品質(zhì)量下降。油脂發(fā)生酸敗表現(xiàn)為過氧化值、羰基值和酸值的升高，感官指標(biāo)最明顯的就是油蛤味[9]。

本試驗(yàn)設(shè)置多個(gè)不同加熱時(shí)間和放置時(shí)間的實(shí)驗(yàn)組，觀察蜂蠟油過氧化值和酸值的變化，判斷影響蜂蠟油品質(zhì)的影響因素，為蜂蠟油的制作和儲(chǔ)存提供理論參考。

1 材料與方法

1.1 試劑與儀器

蜂蠟（批號(hào)：F20200107-I），滄州森林蠟業(yè)有限公司；乙醚（批號(hào)：200506），洛陽市化學(xué)試劑廠；乙醇（批號(hào)：102011），天津市致遠(yuǎn)化學(xué)試劑有限公司；冰醋酸（批號(hào)：051042），天津市致遠(yuǎn)化學(xué)試劑有限公司；碘化鉀（批號(hào)：20161201），天津市大茂化學(xué)試劑廠；大豆油（批號(hào)：20200422），山西糧豐食品有限公司；三氯甲烷（批號(hào)：200410），洛陽市化學(xué)試劑廠；可溶性淀粉（批號(hào)：20190812），天津市北辰方正試劑廠。

FK-150L 蒸汽鍋，北京科益機(jī)械設(shè)備有限公司；酸式滴定管、堿式滴定管，天津市天波玻璃儀器有限公司。

1.2 試驗(yàn)方法

1.2.1 試液的配制

三氯甲烷-冰醋酸（2 ∶3）混合液的配制：量取200 mL 三氯甲烷和300 mL 冰醋酸混合，即得。

碘化鉀試液：取碘化鉀16.5 g，加水使溶解成100 mL，即得。本液應(yīng)臨用新制。

硫代硫酸鈉滴定母液（0.1 mol/L）：取硫代硫酸鈉26 g 與無水碳酸鈉0.20 g，加新沸過的冷水適量使其溶解并稀釋至1 000 mL，搖勻，放置1 個(gè)月后過濾。

硫代硫酸鈉滴定液（0.1 mol/L）的標(biāo)定：精確稱取在120 ℃干燥至恒重的基準(zhǔn)重鉻酸鉀0.15 g，置碘瓶中，加水50 mL 使溶解，加碘化鉀2.0 g，輕輕振搖使溶解，加稀硫酸40 mL，搖勻，密封；在暗處放置10 min后，加水250 mL稀釋，用本液滴定至近終點(diǎn)時(shí)，加淀粉指示液3 mL，繼續(xù)滴定至藍(lán)色消失而顯亮綠色，并將滴定的結(jié)果用空白試驗(yàn)校正。每1 mL 硫代硫酸鈉滴定液（0.1 mol/L）相當(dāng)于4.903 mg 的重鉻酸鉀。根據(jù)本液的消耗量與重鉻酸鉀的取用量，算出本液的濃度，即得[1]。

硫代硫酸鈉滴定液（0.01 mol/L）：移取100 mL剛標(biāo)定過的硫代硫酸鈉滴定母液于1 000 mL 棕色容量瓶中，用水稀釋至標(biāo)線，搖勻，使用時(shí)配制。

淀粉指示液：取可溶性淀粉0.5 g，加水5 mL 攪勻后，緩緩傾入100 mL 沸水中，隨加隨攪拌，繼續(xù)煮沸2 min，放冷，傾取上層清液，即得。本液應(yīng)臨用新制。

酚酞指示液：取1.000 0 g 酚酞，加無水乙醇溶解，定容至100 mL，即得。

氫氧化鈉滴定液（0.1 mol/L）：取澄清的氫氧化鈉飽和溶液5.6 mL，加新沸過的冷水定容至1 000 mL，搖勻。

氫氧化鈉滴定液的標(biāo)定：先對(duì)基準(zhǔn)物鄰苯二甲酸氫鉀進(jìn)行恒重（連續(xù)兩次干燥后稱重的差異小于0.3 mg）。精密稱取0.600 0 g 鄰苯二甲酸氫鉀,加新沸過的冷水50 mL，振搖，使其盡量溶解，加酚酞指示液2 滴，用氫氧化鈉滴定液滴定；在接近終點(diǎn)時(shí)，應(yīng)使鄰苯二甲酸氫鉀完全溶解，滴定至溶液顯粉紅色。每1 mL 氫氧化鈉滴定液（0.1mol/L）相當(dāng)于20.42 mg鄰苯二甲酸氫鉀，根據(jù)消耗的氫氧化鈉滴定液的量和鄰苯二甲酸氫鉀的取用量，計(jì)算滴定液的濃度。

1.2.2 過氧化值的測定

取蜂蠟50 g，大豆油400 mL，加入蒸汽鍋中，加熱至全部融化后取樣作為空白對(duì)照，繼續(xù)加熱90 min，每10 min 取樣一次，共計(jì)9 個(gè)樣品，冷卻后用于過氧化值測定。

精確稱取供試品5 g，置250 mL 碘瓶中，加三氯甲烷-冰醋酸（2 ∶3）混合液30 mL，振搖溶解后，加入碘化鉀試液0.5 mL，準(zhǔn)確振搖萃取1 min，然后加水30 mL，用硫代硫酸鈉滴定液（0.01 mol/L）滴定，注意緩慢加入滴定液，并充分振搖直至黃色幾乎消失，加淀粉指示液5 mL，繼續(xù)滴定并充分振搖至藍(lán)色消失，同時(shí)做空白試驗(yàn)?？瞻自囼?yàn)中硫代硫酸鈉滴定液（0.01 mol/L）的消耗量不得超過0.1 mL。按照式（1）計(jì)算過氧化值[1]：

式（1）中，X為供試品的過氧化氫值；A為供試品消耗硫代硫酸鈉滴定液（0.01 mol/L）的體積，mL；B為空白試驗(yàn)消耗硫代硫酸鈉滴定液（0.01 mol/L）的體積，mL；W為供試品的重量，g。

1.2.3 酸值的測定

取蜂蠟50 g，大豆油400 mL，加入蒸汽鍋中，加熱至全部融化后繼續(xù)加熱60 min，冷卻后在放置90 d內(nèi)于不同時(shí)間分別取樣用于酸值的檢測。

精密稱取供試品10 g，置250 mL 錐形瓶中，加乙醇-乙醚（1 ∶1）混合液50 mL（臨用前加酚酞指示液1.0 mL，用0.1 mol/L 的氫氧化鉀滴定液調(diào)至微顯粉紅色），振搖使完全溶解（如不易溶解，可緩慢加熱回流使溶解），用氫氧化鉀滴定液（0.1 mol/L）滴定，至粉紅色持續(xù)30 秒不褪。按照式（2）計(jì)算酸值[1]：

式（2）中，Y為供試品的酸值，mgKOH/g；A為消耗氫氧化鉀滴定液（0.1 mol/L）的體積，mL；56.1為氫氧化鉀的分子量；W為供試品的重量，g。

2 結(jié)果與分析

2.1 加熱時(shí)間對(duì)蜂蠟油過氧化值的影響

加熱時(shí)間對(duì)蜂蠟油過氧化值和酸值的影響如圖1 所示。從圖1 可看出，蜂蠟油中的過氧化物和酸值隨著加熱時(shí)間的延長而逐漸增加。其中，加熱時(shí)間在60 min 以內(nèi)時(shí)，過氧化值增幅緩慢，隨著加熱時(shí)間繼續(xù)延長，蜂蠟油中的過氧化值迅速增加。加熱60 min 時(shí)蜂蠟油中的過氧化值是最初的1.2 倍，酸值是21.7 倍；加熱90 min 時(shí)蜂蠟油中的過氧化值增加了6 倍，而酸值增高近80 倍。由此可見，加熱時(shí)間控制在60 min 以內(nèi)時(shí)對(duì)蜂蠟油品質(zhì)的影響較小。

圖1 加熱時(shí)間對(duì)蜂蠟油過氧化值和酸值的影響

2.2 貯存時(shí)間長短對(duì)蜂蠟油過氧化值的影響

貯存時(shí)間對(duì)蜂蠟油過氧化值和酸值的影響如圖2 所示。從圖2 可看出，蜂蠟油中的過氧化值和酸值隨著貯存時(shí)間的延長而逐漸升高。貯存時(shí)間在15 d之內(nèi)時(shí)，蜂蠟油中過氧化值和酸值增加緩慢，表明蜂蠟油的酸敗反應(yīng)緩慢；而超過15 d 之后，蜂蠟油中的過氧化值和酸值急劇增加，酸敗反應(yīng)加劇。貯存90 d 時(shí)，蜂蠟油中的過氧化值增加了7 倍，酸值增加了將近9 倍。由此可見，減少貯存時(shí)間可延緩蜂蠟油的變質(zhì)。

圖2 貯存時(shí)間對(duì)蜂蠟油過氧化值和酸值的影響

3 結(jié)論

蜂蠟油中的過氧化物、酸值隨著加熱時(shí)間和貯存時(shí)間的延長而逐漸增加。其中，加熱時(shí)間在60 min 以內(nèi)時(shí)，過氧化值增幅緩慢，對(duì)蜂蠟油品質(zhì)的影響較小；貯存時(shí)間在15 d 之內(nèi)時(shí)，蜂蠟油中過氧化值和酸值增加緩慢，縮短貯存時(shí)間可避免蜂蠟油的變質(zhì)。