曾廣旦

（深圳市寶安區(qū)寶安中醫(yī)院集團(tuán) 檢驗(yàn)科，廣東 深圳 518101）

0 引言

帶狀皰疹（herpes zoster,HZ）由水痘-帶狀皰疹病毒（varicella-zostervirus,VZV）引起，病毒進(jìn)入脊髓后根神經(jīng)節(jié)中，導(dǎo)致由該神經(jīng)支配區(qū)皮膚出現(xiàn)皮疹、水皰等癥狀[1]。通常從皰液、痂皮等標(biāo)本中病毒分離培養(yǎng)診斷結(jié)合臨床癥狀確診，診斷準(zhǔn)確率高但耗時(shí)長、對設(shè)備及技術(shù)人員要求較高，具有一定局限性。對于不典型帶狀皰疹，如眼帶狀皰疹、帶狀皰疹腦膜炎需要依靠實(shí)驗(yàn)室指標(biāo)檢測。有研究表明免疫力低下的人群HZ 發(fā)病率較免疫功能正常人高[2]。本研究旨在探討外周血細(xì)胞免疫指標(biāo)在HZ 患者中檢測價(jià)值，現(xiàn)報(bào)告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

回顧性分析2015 年6 月至2019 年12 月我院收治的60 例疑似HZ 患者臨床資料。根據(jù)病毒分離培養(yǎng)結(jié)果分為陽性組（n=32）和陰性組（n=28）。陽性組中，男18 例，女14 例；年齡26～65 歲，平均（45.28±9.17）歲；病程2～5d，平均（3.25±0.67）d；皰疹部位：頭面部2 例，頸部5 例，胸部10 例，腰部15 例。納入標(biāo)準(zhǔn)：符合HZ 診斷標(biāo)準(zhǔn)[4]；發(fā)病時(shí)間明確，發(fā)病后7d 內(nèi)就診；未接受過抗病毒藥物治療。陰性組中，男17 例，女11 例；年齡27～66歲，平均（46.51±9.28）歲；病程2～6d，平均（3.37±0.71）d。納入標(biāo)準(zhǔn)：陽性組患者符合HZ相關(guān)診斷標(biāo)準(zhǔn)[3]；兩組患者均無風(fēng)濕免疫性疾病史；檢測前尚未開展相關(guān)治療措施；檢測前均簽署知情同意書。兩組患者排除標(biāo)準(zhǔn)：合并有重大器官功能不全；配合度差；妊娠或哺乳期婦女。

1.2 檢測方法

所有患者入院后進(jìn)行病毒分離培養(yǎng)，將受損皮膚面膜置于病毒運(yùn)輸介質(zhì)中，溫度為4℃，收集標(biāo)本后于48h 內(nèi)送檢后根據(jù)病毒生長狀況進(jìn)行分組。兩組患者均于清晨空腹抽取外周靜脈血5mL 后加入肝素抗凝，應(yīng)用流式細(xì)胞儀（美國Beckman-Coulter公司，型號：EPICS-XL Ⅱ型）分析，采集細(xì)胞數(shù)大于10000，采用Listmode 系統(tǒng)軟件分析數(shù)據(jù)，測定出外周血CD4+、CD8+及CD4+/CD8+占比。當(dāng)3 項(xiàng)指標(biāo)任意一項(xiàng)異常則診斷為HZ 陽性，當(dāng)3 項(xiàng)指標(biāo)檢測結(jié)果均為正常范圍則診斷為HZ 陰性。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用軟件SPSS 20.0 進(jìn)行數(shù)據(jù)處理，計(jì)量資料先實(shí)施Shapiro-Wilk 正態(tài)性檢驗(yàn)，均確認(rèn)近似服從正態(tài)分布，以平均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（）表示，組間比較行獨(dú)立樣本t檢驗(yàn)，計(jì)數(shù)資料以[例(百分?jǐn)?shù))]形式表示，采用χ2檢驗(yàn)，無特殊說明均以P<0.05代表差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；相關(guān)性分析采用Spearman相關(guān)性模型；采用統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件Medcalc 18.2 將各血清學(xué)指標(biāo)及聯(lián)合概率錄入，繪制對應(yīng)受試者工作特征（ROC）曲線，讀取曲線下面積（AUC）、置信區(qū)間（95%CI）、靈敏度、特異度、截?cái)嘀档葏?shù)信息。

2 結(jié)果

2.1 外周血CD4+、CD8+、CD4+/CD8+水平比較

陽性組外周血CD4+、CD4+/CD8+水平顯著低于陰性組（P<0.05）；陽性組外周血CD8+水平顯著高于陰性組（P<0.05），見表1。

表1 兩組患者外周血CD4+、CD8+、CD4+/CD8+水平對比（）

表1 兩組患者外周血CD4+、CD8+、CD4+/CD8+水平對比（）

2.2 檢測價(jià)值比較

如圖所示，外周血CD4+、CD8+、CD4+/CD8+水平診斷HZ 的ROC 曲線所示，上述指標(biāo)均有一定的診斷效能（AUC 均>0.5），Youden 指數(shù)對應(yīng)cut-off 值分別為37.41%、25.20%、1.47。詳見圖1、表2。

圖1 各指標(biāo)診斷HZ 的ROC 曲線

表2 ROC 曲線參數(shù)

2.3 外周血細(xì)胞免疫指標(biāo)檢測效能

外周血細(xì)胞免疫指標(biāo)診斷HZ 靈敏度為93.75%（30/32），特異度為67.56%（19/28），準(zhǔn)確率為81.67%（49/60），陽性預(yù)測值為76.92%（30/39），陰性預(yù)測值為90.48%（19/21），Kappa 值為0.626，見表3。

表3 外周血細(xì)胞免疫指標(biāo)檢測與病毒分離培養(yǎng)結(jié)果比較（例）

3 討論

HZ 受病毒感染后，常發(fā)于身體單側(cè)表現(xiàn)為聚集性水皰并且伴隨有神經(jīng)痛。常規(guī)診斷HZ 采用病毒分離培養(yǎng)方法，培養(yǎng)需耗費(fèi)一定的時(shí)間，HZ病情進(jìn)展快，早期診斷并且及時(shí)進(jìn)行藥物治療對于病情控制及預(yù)后恢復(fù)意義重大。因此，急需尋求一種及診斷效率及準(zhǔn)確率高的檢測方法。

VZV 感染機(jī)體后會(huì)在神經(jīng)元內(nèi)潛伏一段時(shí)間后由相關(guān)因素誘發(fā)后導(dǎo)致機(jī)體免疫力下降進(jìn)而激活VZV，損害末梢神導(dǎo)致相應(yīng)皮膚部位病變[5]。T 淋巴細(xì)胞是機(jī)體細(xì)胞免疫系統(tǒng)中關(guān)鍵細(xì)胞群，能分泌功能各異的細(xì)胞因子，包括激活和促進(jìn)炎癥反應(yīng)因子和抑制類因子，CD4+為輔助性T 淋巴細(xì)胞，CD8+為抑制性T 淋巴細(xì)胞，兩者通過淋巴管、外周血和組織液進(jìn)行循環(huán)，進(jìn)而發(fā)揮細(xì)胞免疫調(diào)節(jié)等功能，在機(jī)體抗病毒中起重要作用[6]。HZ 患者T 淋巴細(xì)胞亞群CD4+指標(biāo)比正常人低、CD8+指標(biāo)水平高于正常人。有研究表明，外周血CD4+、CD8+水平異常患者感染HZ 風(fēng)險(xiǎn)較大[7-9]。對入組患者進(jìn)行病毒分離培養(yǎng)，根據(jù)培養(yǎng)結(jié)果分為陽性組和陰性組，通過數(shù)據(jù)定量分析并繪制ROC 曲線，評價(jià)不同組別外周血細(xì)胞免疫指標(biāo)表達(dá)水平，對比后發(fā)現(xiàn)陽性組外周血CD4+水平低于陰性組，CD8+指標(biāo)水平高于陰性組。CD4+檢測ROC曲線AUC 為0.785，截?cái)嘀禐?7.41%，提示外周血CD4+對于診斷HZ 有一定效能，其水平小于37.41%時(shí)表明患者有較大概率患有HZ。CD8+診斷HZROC 曲線AUC 為0.778，其水平大于25.20%時(shí)提示患HZ 可能性較大。HZ 發(fā)病是細(xì)胞免疫狀態(tài)出現(xiàn)紊亂的結(jié)果，早期檢測患者外周血中CD4+、CD8+水平能夠反映患者細(xì)胞免疫功能狀態(tài)，有利于判定HZ 患者病情及預(yù)后，為綜合治療提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。

正常狀態(tài)下機(jī)體內(nèi)T 淋巴細(xì)胞相互作用共同調(diào)節(jié)機(jī)體免疫。當(dāng)淋巴細(xì)胞壓群發(fā)生功能異常時(shí)，機(jī)體免疫系統(tǒng)產(chǎn)生紊亂，病毒更易侵入機(jī)體。當(dāng)VZV感染潛伏于機(jī)體內(nèi)能夠激活機(jī)體Th1 型細(xì)胞免疫反應(yīng)，機(jī)體處于應(yīng)激反應(yīng)狀態(tài)并發(fā)生炎癥反應(yīng)，從而抑制自身免疫功能，為潛伏于體內(nèi)的病毒激活提供條件。CD4+/CD8+能夠有效反映機(jī)體免疫功能狀態(tài)[10]。本研究結(jié)果顯示，HZ 陽性組患者CD4+/CD8+比值較陰性組低，兩組比值檢測準(zhǔn)確率和靈敏度均高于單項(xiàng)。ROC 曲線AUC 為0.880，截?cái)嘀禐?.47，提示HZ 患者機(jī)體免疫系統(tǒng)紊亂更為明顯，當(dāng)CD4+/CD8+值小于1.47 時(shí)高度懷疑患者患有HZ。CD4+/CD8+檢測靈敏度為100%，均高于CD4+檢測的82.14%CD8+檢測的60.71%，提示將兩種外周血免疫細(xì)胞指標(biāo)比值進(jìn)行檢測在鑒別HZ 中效果更為顯著[11-12]。本研究還發(fā)現(xiàn)，以“金標(biāo)準(zhǔn)”作為參考，采用外周血細(xì)胞免疫指標(biāo)檢測診斷HZ 靈敏度為93.75%，特異度為67.56%，準(zhǔn)確率為81.67%，Kappa 值為0.626，與病毒細(xì)菌分離培養(yǎng)結(jié)果呈現(xiàn)一致性較高。表明外周血細(xì)胞免疫指標(biāo)可作為另一種診斷參考方式，相比于病毒細(xì)菌分離培養(yǎng)耗時(shí)長、對人員專業(yè)度要求高等缺點(diǎn)，具有簡便高效優(yōu)點(diǎn)，為臨床診斷提供新思路。

綜上所述，外周血CD4+、CD8+、CD4+/CD8+水平在診斷HZ 中均具有較高診斷效能，能夠?yàn)榕R床上及早確診病情提供重要依據(jù)，操作較為簡便，對后續(xù)治療方針制定具有重大意義。