陳麗芳 李艷奇 鞠超

（1，山東省榮成市動物疫病預(yù)防控制中心 264300；2，山東省榮成市城西畜牧獸醫(yī)站 264300）

羊小反芻獸疫是羊只感染小反芻獸疫病毒引發(fā)的一種急性、熱性傳染病，以病羊體溫升高、口腔潰瘍、腹瀉、肺部炎癥為主要臨床特征，因此，羊小反芻獸疫又稱為口炎肺腸炎復(fù)合癥。小反芻獸疫病毒主要通過呼吸系統(tǒng)感染健康羊只，不同品種的羊均是小反芻獸疫病毒的天然宿主，其中山羊的易感性高于綿羊，由于羊小反芻獸疫發(fā)病率與死亡率較高，已被我國列為一類動物疫病，因此，養(yǎng)殖戶需要高度關(guān)注小反芻獸疫的流行特點，有針對性地進行防控，提高羊群免疫力，確保養(yǎng)羊業(yè)健康可持續(xù)發(fā)展。

1 病原特點

羊小反芻獸疫的致病原為小反芻獸疫病毒，該病毒與牛瘟病毒具有相似的物理和化學(xué)特性，均屬于副黏病毒科麻疹病毒屬。羊小反芻獸疫病毒耐寒冷，可在低溫和冰箱內(nèi)存活較長時間，但該病毒對pH 的敏感性較高，在酸性環(huán)境（pH＜4.0）和堿性環(huán)境（pH＞11）均可被殺滅，且羊小反芻獸疫病毒也不耐熱，在50℃下1h 即可被殺滅，75%酒精、2%的氫氧化鈉和碘制劑等均可有效滅活羊小反芻獸疫病毒。

2 流行特點

2.1 易感動物

小反芻獸疫病毒主要感染小反芻動物，不同品種羊均可感染，其中山羊和綿羊的易感性較高，野生山羊、野生綿羊也可感染，但山羊的發(fā)病率和死亡率高于綿羊，歐洲品系山羊的易感性高于亞洲品系，不同羊只個體因自身抗病力不同，其發(fā)病率和死亡率也存在差異。一般易感羊群發(fā)病率超過60%，死亡率超過50%[1]。

2.2 傳染源及其傳播途徑

羊小反芻獸疫的傳染源為感染病羊或隱性帶毒動物。羊小反芻獸疫的傳播途徑包括直接感染和間接感染，健康羊只可通過直接接觸感染病畜、分泌物、排泄物或污染的飼料飼草、水源、用具、護具進行病毒感染，小反芻獸疫病毒存在于公羊精液中，通過人工授精間接感染，該病毒也可存在于胚胎中經(jīng)胚胎移植感染母羊。

2.3 流行季節(jié)

羊小反芻獸疫一年四季均可發(fā)病，大多以零星散發(fā)為主，若疫區(qū)中易感動物數(shù)量較多且管控不嚴(yán)時也會出現(xiàn)地方流行性。

3 臨床癥狀

羊小反芻獸疫潛伏期為4～20d，大多數(shù)為1 周左右。羊小反芻獸疫根據(jù)臨床癥狀表現(xiàn)劃分為急性型、標(biāo)準(zhǔn)型和溫和型。急性型羊小反芻獸疫發(fā)病突然，病程短，不超過2d，臨床癥狀不明顯，養(yǎng)殖戶往往還未察覺，病羊已經(jīng)死亡。標(biāo)準(zhǔn)型羊小反芻獸疫是最常見的類型，病羊感染后持續(xù)高熱，體溫上升至41℃，可持續(xù)發(fā)熱3～5d，病羊呼吸困難，咳嗽，出現(xiàn)支氣管肺炎，口腔和鼻腔的分泌物增加，口腔也會出現(xiàn)程度不等的口腔潰瘍，病羊腹瀉嚴(yán)重，病程后期糞便中帶血，精神沉郁，脫水消瘦，若不及時治療，病羊尤其是年齡較小的羊只死亡率較高，可達50%～100%，妊娠母羊流產(chǎn)率也較高。溫和型羊小反芻獸疫羊只臨床癥狀輕微，體溫最高至39℃，癥狀與感冒相似，一般經(jīng)過2～3d 治療即可康復(fù)。

4 診斷檢測

4.1 鑒別診斷

羊小反芻獸疫在臨床癥狀上和羊病毒性腹瀉、羊傳染性膿皰和羊口蹄疫有許多相似之處，在診斷時應(yīng)做好鑒別診斷，如附表所示。

附表 羊小反芻獸疫與其他疾病鑒別診斷

4.2 實驗室檢測

4.2.1 抗體檢測

主要采用阻斷ELISA 或競爭ELISA 方法檢測綿羊、山羊血清或血漿中小反芻獸疫病毒抗體。檢測過程主要包括采集樣品、分離血清、布板與操作、結(jié)果判定等。一是樣品采集及處理：無菌采集血液，用常規(guī)方法分離血清備用。二是布板與操作；在分別取50ul 陰性血清、陽性血清、稀釋液對照加在抗原包被板中，陰性、陽性對照血清各設(shè)2 孔。在樣品孔中加入稀釋液25ul/孔，再加入待檢血清25ul/孔，37℃孵育60min。棄去板中液體，加洗滌液清洗4 次，最后一次拍干殘留液。每孔加入50ul 酶標(biāo)抗體，37℃孵育30min。重復(fù)步驟2，每孔加底物溶液50ul，室溫避光作用15min。最后每孔加入終止液50ul，用酶標(biāo)儀在450nm 波長下測定OD 值，計算阻斷率。三是結(jié)果判定：陽性對照阻斷率（PB）＞60，陰性對照阻斷率（PB）＜40，實驗結(jié)果有效；否則，應(yīng)重新進行實驗。待檢樣品阻斷率（PB）＞50，判為陽性；待檢樣品阻斷率（PB）≤50，判為陰性?？贵w檢測可用于檢測免疫羊的免疫抗體及未免疫羊的感染抗體。

4.2.2 病原學(xué)檢測

小反芻獸疫的病原學(xué)診斷方法主要包括RT-PCR、實時熒光定量PCR、環(huán)介導(dǎo)等溫擴增技術(shù)（LAMP）和抗原捕獲ELISA 等。目前實驗室常用熒光RT-PCR 方法來進行羊小反芻獸疫病毒核酸的檢測。具體步驟包括樣品采取、樣品前處理、核酸提取、擴增檢測、結(jié)果分析等。一是樣品采集及處理：首先配制0.01mol/L pH7.4 的磷酸鹽緩沖液（PBS 液），進行高壓滅菌后，分裝于1ml 的小離心管中。采集羊的鼻腔棉拭子、結(jié)膜拭子等放在盛有PBS 液的小離心管中，冷藏送到實驗室進行檢測。二是樣品處理及核酸提?。簷z測時將棉拭子充分捻動，擠干后棄去拭子，取樣品液離心取上清采取手動提取或自動核酸提取的方法進行小反芻獸疫病毒核酸提取（制備RNA）。三是擴增檢測（RT-PCR 操作）：從試劑盒中取出RT-PCR 反應(yīng)液、Taq 酶、RT-PCR 酶，在室溫融化后，瞬時離心，計算好各試劑的用量，加入適當(dāng)體積的離心管中，向每個PCR 管中各分裝15ul，每管加10ul 制備的RNA，瞬時離心，排好順序放入熒光PCR 儀內(nèi)，設(shè)置好擴增程序，進行RT-PCR 反應(yīng)。四是結(jié)果分析：陰性對照Ct 值應(yīng)為none，陽性對照Ct 值應(yīng)小于或等于28.0，實驗成立。Ct 值為none 的樣本判為陰性，Ct 值小于或等于30.0 的樣本判為陽性。

5 防控措施

5.1 科學(xué)接種疫苗，提高羊群免疫力

科學(xué)的疫苗接種是提高機體抵抗力，降低羊小反芻獸疫感染風(fēng)險的重要措施，養(yǎng)殖戶需要給予重視，制定好接種計劃并堅持實施。目前，羊小反芻獸疫防疫疫苗主要為小反芻獸疫活疫苗，超過1 月齡的羊進行全群免疫，妊娠母羊也可接種，疫苗用滅菌生理鹽水稀釋后，每只羊頸部皮下注射1ml，免疫后抗體保護最長時間可達36 個月，需要注意稀釋后的疫苗應(yīng)避免陽光直射，且在3h 內(nèi)需要用完，羊只注射時不能共用針頭。疫苗接種后要實時關(guān)注羊群狀況，若出現(xiàn)免疫反應(yīng)需要對其進行隔離觀察，同時做好羊群免疫登記，記錄好疫苗批號、生產(chǎn)日期、免疫日期、免疫日齡、注射劑量等信息。

5.2 做好日常管理，切掉傳播途徑

（1）加強羊群的飼養(yǎng)管理，提供羊只營養(yǎng)均衡、搭配合理的飼草飼料，保持羊舍通風(fēng)良好，干凈整潔，可以有效提高羊只對疾病的抵抗力。（2）加強羊場和羊舍的日常清潔管理，及時清掃羊舍地面的糞污，清水沖刷后及時用風(fēng)機吹干，保持地面干燥。（3）制定科學(xué)的消毒管理制度，每周對羊舍進行一次消毒，每一批羊出欄后對羊舍進行徹底清洗消毒。（4）堅持自繁自養(yǎng)，若引種必須堅持科學(xué)引進，對引入的羊只進行為期30d 的隔離觀察，羊只健康后才能合群。（5）嚴(yán)格管理進出場的人員、車輛，尤其是進入生產(chǎn)區(qū)的人員和車輛要規(guī)范消毒操作，以免出現(xiàn)人員、車輛帶毒問題。

5.3 加強監(jiān)測預(yù)警，實行科學(xué)防控

結(jié)合實際情況，制定小反芻獸疫監(jiān)測與流行病學(xué)調(diào)查計劃，主動開展羊群免疫抗體檢測及病原學(xué)監(jiān)測工作，監(jiān)測中發(fā)現(xiàn)群體免疫抗體水平不合格的，應(yīng)向主管部門及時報告，迅速強化免疫措施，按照有關(guān)免疫規(guī)定及時補免，并跟蹤監(jiān)測，確保免疫密度與質(zhì)量。病原學(xué)監(jiān)測發(fā)現(xiàn)，陽性樣品要及時送國家外來動物疫病參考實驗室進行病原分離鑒定，并將陽性情況按快報要求逐級上報。對病原檢測陽性畜和外引動物感染抗體陽性畜進行撲殺凈化，必要時對同群畜進行撲殺，并作無害化處理[2]。根據(jù)監(jiān)測情況進行風(fēng)險評估及預(yù)警預(yù)報，為防控羊小反芻獸疫提供科學(xué)依據(jù)。

6 結(jié)語

本文從該病的病原特點、流行特點、臨床癥狀、診斷檢測及防控措施等方面進行闡述，以期為大家在小反芻獸疫的認(rèn)識和防控上提供參考。綜上所述，科學(xué)的疫苗接種和飼養(yǎng)管理可以有效防控羊小反芻獸疫的發(fā)生，為羊群健康生產(chǎn)奠定基礎(chǔ)。今后需要進一步探討研究更有效的防控方法，加強疫情監(jiān)測與風(fēng)險評估，做好羊場生物安全管理工作，從源頭杜絕該病的發(fā)生，以促進養(yǎng)羊業(yè)的健康穩(wěn)定發(fā)展。