朱智鋒，劉萍，許讓偉，陳傳武，鄧崇嶺，牛英，朱壹，王鵬蔚，鄧秀新，程運江?

1華中農(nóng)業(yè)大學(xué)園藝林學(xué)學(xué)院/國家柑橘保鮮技術(shù)研發(fā)專業(yè)中心/農(nóng)業(yè)農(nóng)村部園藝作物生物學(xué)與種質(zhì)創(chuàng)制（果樹）重點實驗室/園藝植物生物學(xué)教育部重點實驗室，武漢 430070；2廣西柑橘育種與栽培工程技術(shù)研究中心/廣西特色作物研究院，廣西桂林 541004；3江西綠萌科技控股有限公司，江西信豐 341600

0 引言

【研究意義】沙糖橘（Citrusreticulate）具有皮薄、化渣、汁多、含糖量高、口感清甜的特點，深受消費者的青睞[1]；廣西桂林是中國最大的沙糖橘產(chǎn)區(qū)，2018年種植面積7.70萬hm2，產(chǎn)量161.10萬t[2]。但是保鮮期短，腐爛損耗大等采后問題已成為制約沙糖橘產(chǎn)業(yè)高質(zhì)量發(fā)展的瓶頸；桂林沙糖橘正常成熟期為12月下旬，正值不同類型柑橘集中上市期，銷售壓力逐年增加，亟需尋找延長沙糖橘錯峰銷售的實用技術(shù)。【前人研究進展】20世紀(jì)50年代，日本發(fā)明了地膜覆蓋技術(shù)并應(yīng)用于農(nóng)業(yè)生產(chǎn)且取得顯著成效，我國于1979年引進該技術(shù)[3-4]，20世紀(jì)末在三峽庫區(qū)開展柑橘地膜覆蓋試驗，并根據(jù)我國柑橘產(chǎn)區(qū)的氣候特點進行了改良，采用地表覆膜和果實套袋等輔助措施防止凍害，以確保樹體和留樹保鮮的果實安全越冬，這些措施在三峽庫區(qū)的大水體周邊取得了良好的效果。沙糖橘對積溫要求很高，其自然成熟期持續(xù)的陰雨和低溫冷害成為制約廣西沙糖橘穩(wěn)產(chǎn)增收的突出問題，直接引入三峽庫區(qū)等地的留樹保鮮技術(shù)無法從根本上解決桂林沙糖橘越冬問題。在生產(chǎn)實踐中，廣西特色作物研究院等單位發(fā)明了樹冠覆膜的留樹保鮮技術(shù)，近年來在廣西等柑橘主產(chǎn)區(qū)大范圍應(yīng)用[5-6]。已有的研究表明，柑橘樹冠覆膜可增加果皮重量、提高可溶性固形物含量、影響可滴定酸含量從而改變固酸比，顯著降低落果率、凍害發(fā)生率，有效減少因低溫而形成的凍傷疤痕[7-10]，樹冠覆膜會降低單果重、延緩果皮光澤度的下降、提高顏色指標(biāo)a*值使果實呈橘紅色[7,9,11]；但隨著覆膜后采收期的延長，果實腐爛率增加、失重速率加快[12]、果實浮皮率上升[13]?！颈狙芯壳腥朦c】過去10余年的生產(chǎn)實踐表明，桂北沙糖橘樹冠覆膜實現(xiàn)了沙糖橘安全越冬的目標(biāo)，筆者前期調(diào)研發(fā)現(xiàn)，樹冠覆膜對沙糖橘的品質(zhì)和采后保鮮性能也產(chǎn)生很大影響，但具體的作用機制還缺乏相關(guān)研究。前人的研究主要聚焦在樹冠覆膜對果實口感品質(zhì)、外觀色澤和產(chǎn)業(yè)效益的影響，而對長達2—3個月覆膜后果實的品質(zhì)和代謝物變化趨勢、不同采收期的保鮮性能、科學(xué)合理采收時期的確定以及采后保鮮性能改善的原因還缺乏相關(guān)研究?！緮M解決的關(guān)鍵問題】闡明樹冠覆膜改善沙糖橘保鮮性能的機制，從果實品質(zhì)及保鮮性能綜合分析留樹保鮮的合理期限，以期確定沙糖橘樹冠覆膜的適宜采收期，為沙糖橘產(chǎn)業(yè)可持續(xù)發(fā)展提供理論支撐。

1 材料與方法

1.1 試驗材料及處理

試驗于2017年12月22日至2018年3月30日在廣西壯族自治區(qū)桂林市荔浦縣青山鎮(zhèn)所底屯果園進行，試驗材料為生長一致的7年生沙糖橘，枳砧，平地果園；2017年12月22日采用雙行倒“V”型對樹冠覆膜，每隔兩行覆膜，取中間兩行不覆膜的行作為對照，覆膜材料為聚氯乙烯無色薄膜（厚度0.04—0.08 mm，幅寬6—8 m），在樹冠頂上30—40 cm處薄膜覆蓋并遮住四周。覆膜前一周，選晴天對樹體進行殺蟲殺菌處理。取樣時隨機選取對照和樹冠覆膜處理各8株，每株在東、西、南、北、中5個方位采果，每個方位隨機采取9個果實，每株采45個果實。晴天無雨水天氣采樣，于12月29日進行第一次取樣，此后根據(jù)天氣狀況間隔約15 d采樣，共采樣7次，試樣果實用透氣的泡沫盒包裝好，當(dāng)天直接運回實驗室。

1.2 測定指標(biāo)及方法

1.2.1 色差分析 果實色差測定參照朱峰[14]的方法，采用色彩色差儀（C-400 colorimeter，Minolta Corp，Osaka，Japan）。隨機選取10個果實測定果皮的L*值、a*值、b*值，每個果實在赤道面測6個點，取平均值。L*值表征亮度，L*值越大亮度越高。a*值由負(fù)到正表征果實由綠到紅的變化趨勢，正值越大，紅色越深；負(fù)值越小，綠色越深。b*值由負(fù)到正表征果實由藍到黃的變化趨勢，正值越大，黃色越深；負(fù)值越小，藍色越深。

1.2.2 可溶性固形物和可滴定酸的測定 隨機選取18個果實榨汁混勻。果肉可溶性固形物（total soluble solid，TSS）按照愛宕數(shù)顯糖度計 PAL-1（Atago，Japan）的使用說明測定?？傻味ㄋ幔╰itratable acid，TA）的測定參照酸度計（GMK-835，G-WON HITECH CO，LTD，Korea）使用說明操作，取上述每組中的果汁0.306 mL加入到30 mL蒸餾水中稀釋混勻，上機測定。以上指標(biāo)均在儀器上重復(fù)測定3次。

1.2.3 初生代謝物提取及分析 隨機選取 16個果實，將果皮、果肉分離后，分別用液氮冷凍并磨成粉末狀，每組樣品的果肉取3份，每份稱取0.3—0.4 g。樣品初生代謝物的提取參照劉淑楨等[15]的方法，樣品的衍生化步驟參照盛玲[16]的方法，質(zhì)譜分析條件參照孫曉華[17]的方法。以核糖醇為內(nèi)標(biāo)（0.2 mg·mL-1）加入300 μL，通過內(nèi)標(biāo)濃度和最后上機的總體系及峰面積的比值計算每g樣品中相應(yīng)物質(zhì)的量。測定結(jié)果取其平均值，代謝物含量以μg·g-1鮮重（μg·g-1FW）表示。

1.2.4 呼吸速率測定 設(shè)2個生物學(xué)重復(fù)，每8個果實為一生物學(xué)重復(fù)，每個生物學(xué)重復(fù)取3次。稱重后密封在2.5 L塑料盒中，25℃放置2 h；用1 mL注射器抽取氣體頂空注入氣相色譜儀（Gas Chromatography，Agilent，7890A，USA）（CTR-1填充柱（Altech），F(xiàn)ID檢測器）。測完用排水法計算果實的體積。呼吸速率計算公式根據(jù)本實驗室前期制作的 CO2標(biāo)準(zhǔn)曲線：Y（CO2量）=CO2峰面積/26377，氣態(tài)CO2的密度為 1.977 mg·mL-1。呼吸速率為：CO2mL·kg-1·h-1。

1.2.5 果實腐爛率和失重率測定 將采收的果實隨機各取180個貯藏于室溫（10—18℃）、相對濕度（RH）50%—65%的環(huán)境條件下，貯藏一段時間統(tǒng)計腐爛數(shù)計算腐爛率。每個處理取 20個果實分別編號，每隔15 d對相應(yīng)編號果實稱重計算失重率。

1.2.6 果皮總蠟提取及分析 采樣后立即提取果面蠟質(zhì)，總蠟的提取和果皮表面積的計算參考王金秋[18]的方法，并對GC-MS樣品制備稍作修改：取10 mL樣品溶液，用氮吹儀吹干，加入100 μL N,O-雙（三甲基硅烷基）三氟乙酰胺（N,O-bis（trimethylsilyl）trifluoroacetamid，BSTFA，Sigma），充分振蕩混勻后放入70℃烘箱衍生化孵育1 h，結(jié)束后放入常溫下冷卻，再加100 μL色譜純?nèi)燃淄?。用孔?.22 μm的針筒微孔濾膜過濾至玻璃內(nèi)插管中，用于 GC-MS測定。GC-MS測定條件：氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用（Thermo，DSQⅡ），TR-1 ms毛細(xì)管柱（100%二甲基聚硅氧烷，30 m×25 μm×0.1 μm），EI離子源（70 eV），掃描范圍50—650 m/z，進樣口溫度250℃，離子源溫度 300℃，傳輸線溫度 250℃，氫氣為載氣，流量為1.2 mL·min-1；程序升溫：70℃起始，保持1 min，以 10℃·min-1升至 200℃，保持 1 min，2℃·min-1升至270℃，保持1 min，1℃·min-1升至300℃，保持1 min，3℃·min-1升至320℃，保持5 min，分流比10﹕1；自動進樣，進樣量1 μL。GC測定程序同GC-MS。

1.2.7 RNA提取及定量分析 果皮 RNA提取采用Trizol法，參照劉慶[19]的方法。反轉(zhuǎn)錄成單鏈 cDNA操作按照 HiScript? II Q RT SuperMix for qPCR（+gDNA wiper）試劑盒（Vazyme）商業(yè)操作說明進行。引物經(jīng)Primer 5和Primer Express軟件（Applied Biosystems，CA，USA）設(shè)計完成，并在phytozome12網(wǎng)站中克里曼丁數(shù)據(jù)庫將前后引物反向Blaste驗證，結(jié)果都只比對到1條目的基因，定量引物由上海生工生物工程公司合成。實時定量聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（RT-qPCR）在 Light Cycler?480（Roche Applied Science）儀器的384孔板上完成。體系（10 μL）的配制和程序設(shè)置根據(jù)試劑盒 Hieff?qPCR SYBR?Green Master Mix（No Rox）的操作說明進行?；虻谋磉_量數(shù)據(jù)分析采用 2-ΔΔCT計算。

1.2.8 果皮脫落酸含量（ABA）的測定 果皮 ABA測定方法參照朱峰[14]的報道。采用酶聯(lián)免疫吸附測定法（Enzyme-linked Immunosorbent Assays，簡稱ELISA）檢測柑橘有色層中ABA含量（試劑盒由中國農(nóng)業(yè)大學(xué)王保民教授提供），步驟分為樣品內(nèi)ABA含量提取及ELISA競爭免疫反應(yīng)測定兩部分（因樣品原因，只測定了12月29日、1月10日和1月12日3個時期）。

1.3 數(shù)據(jù)統(tǒng)計與分析

采用Excel 2003進行數(shù)據(jù)統(tǒng)計，用SPSS 20.0軟件中 Duncan新復(fù)極差法對數(shù)據(jù)進行差異顯著性和相關(guān)性分析，用Origin 8.0和TBtools軟件作圖。

2 結(jié)果

2.1 樹冠覆膜對果皮色澤的影響

果面色澤是衡量果實外觀品質(zhì)的重要指標(biāo)。測定不同采收時期果實的色差指數(shù)發(fā)現(xiàn)，隨著留樹保鮮時間的延長，沙糖橘果皮亮度總體呈下降的趨勢（圖1-A）；1月23日至3月30日，樹冠覆膜的果皮L*值高于對照，說明在樹冠覆膜后期，能夠延緩果皮亮度的下降速度。樹冠覆膜和對照組的果皮紅度a*值變化趨勢一致（圖1-B），且樹冠覆膜的果皮 a*值在1月23日和3月16日分別達到20.17和19.85，顯著高于對照（P<0.05），表明樹冠覆膜的沙糖橘果皮更偏向于紅色。圖1-C表明樹冠覆膜后期（32 d后）果皮泛黃，尤其是在2月28日和3月16日，樹冠覆膜使代表黃色程度的b*值顯著（P<0.05）高于對照組（分別為12.75、12.16和 11.37、10.75）。綜合分析果皮的色差指標(biāo)，留樹保鮮到2月28日后，果面呈現(xiàn)亮度低、泛黃的表型；3月16日果面亮度L*和紅色值a*略微上升可能是由于氣溫回暖，光照充足使其著色有所提高，試驗數(shù)據(jù)結(jié)果符合當(dāng)?shù)禺?dāng)年的氣候變化。

2.2 樹冠覆膜對果實可溶性固形物、可滴定酸及固酸比的影響

可溶性固形物和可滴定酸的含量及固酸比是衡量果實風(fēng)味品質(zhì)及成熟度的重要參數(shù)。由圖2-A可看出，隨著采收期的推遲，露地沙糖橘果實的可溶性固形物含量呈現(xiàn)先升后降趨勢，樹冠覆膜沙糖橘則逐步升高，由12月29日的最低值12.27%提高到3月 30日的 14.10%，7個采收時期都極顯著（P<0.01）高于對照組。覆膜與對照的可滴定酸變化趨勢基本一致，并且均在 2月28日達到峰值，分別為0.87%和0.80%（圖2-B），隨后迅速降低。通常有機酸含量高或有機酸降解緩慢的柑橘品種其保鮮性能較好，采后貯藏過程中有機酸的消耗是導(dǎo)致柑橘果實風(fēng)味和品質(zhì)下降的主要原因[16,20-21]，有機酸是可滴定酸中的主要成分；可滴定酸的變化趨勢暗示2月28日之后采收的沙糖橘果實品質(zhì)和保鮮性能可能在下降。覆膜與對照的固酸比變化趨勢總體一致，先降后升，并于2月28日降至最低，分別為 15.49、13.86，3月逐漸回升。樹冠覆膜顯著提高沙糖橘的可溶性固形物含量（1.37%—3.37%）、可滴定酸含量和固酸比（1.87—8.12），從而改善果實的風(fēng)味品質(zhì)。

2.3 樹冠覆膜對果實初生代謝物的影響

為進一步探究樹冠覆膜留樹保鮮期間果實初生代謝物的變化情況，用 GC-MS檢測沙糖橘樹冠覆膜 7個采收時期果肉的初級代謝物含量?；?GC-MS色譜圖數(shù)據(jù)庫及部分標(biāo)樣比對結(jié)果，在果實中共鑒定出37種常見的初生代謝物，包括12種氨基酸、7種有機酸、14種糖醇類以及4種脂肪酸。由圖3-A可知，根據(jù)初生代謝物的變化趨勢，聚類分析結(jié)果將不同處理、不同采收期的代謝規(guī)律為3類，類別Ⅰ為12月29日至2月3日4個采收期的對照和覆膜處理樣品（除了2月3日采收的覆膜組），類別Ⅱ為2月28日至3月30日3個采收期所有的對照組和覆膜處理樣品，類別Ⅲ為樹冠覆膜后2月3日采收的果實單獨歸為一類。脯氨酸是植物體內(nèi)重要的滲透調(diào)節(jié)物質(zhì)，植物在遭受干旱、高鹽、高低溫以及重金屬等脅迫時，通過增加脯氨酸合成以及減少脯氨酸降解來積累脯氨酸，以響應(yīng)和適應(yīng)逆境脅迫[22-24]；圖3-B表明在3個月的留樹貯藏期間，脯氨酸呈現(xiàn)先上升后降低再升高的趨勢，尤其是 2月 28日開始脯氨酸含量大幅度提高，在3月30日采收的對照組脯氨酸最高，覆膜后期脯氨酸的含量顯著降低。γ-氨基丁酸（GABA）的富集與植物所經(jīng)歷脅迫應(yīng)激反應(yīng)有關(guān)，在受到低氧、低溫、熱、鹽滲透、機械損傷等脅迫時，會導(dǎo)致GABA的積累[25-26]。隨著留樹貯藏時間的延長，GABA呈現(xiàn)逐漸積累的趨勢；2月3日后，GABA積累速度加快，樹冠覆膜后果實中GABA的含量整體低于對照處理。結(jié)果表明，2月上旬前果實初生代謝物的含量較為穩(wěn)定，此后，大部分代謝物開始發(fā)生變化，導(dǎo)致果實初生代謝物整體異于前期。

2.4 樹冠覆膜對果實呼吸速率的影響

呼吸速率的大小可反映植物體代謝活動的強弱及對自身能量物質(zhì)的損耗速率，是評價果實貯藏性能的重要指標(biāo)。圖4結(jié)果表明，隨著留樹時間的延長，沙糖橘果實采后呼吸速率先加快后減弱，樹冠覆膜與對照組都在2月3日達到峰值，分別為29.50 mL·kg-1·h-1、35.31 mL·kg-1·h-1；樹冠覆膜的沙糖橘呼吸速率在測定的6個采收時期里有4個時期低于對照組，表明樹冠覆膜能在一定程度上降低果實的呼吸速率，進而降低果實自身能量損耗。

2.5 樹冠覆膜對果實腐爛率的影響

腐爛率是評價果實貯藏性能以及保鮮效果的主要指標(biāo)。如圖5所示，12月29日采收的果實腐爛率最低，貯藏 60 d時覆膜和對照腐爛率分別為 3.61%和2.55%。隨著采收期的推遲，樹冠覆膜和對照組的沙糖橘果實腐爛率都在不同程度地升高；覆膜和對照在2月3日、2月28日、3月16日采收貯藏25 d后腐爛率分別為19.26%、32.06%、30.00%和35.68%、49.23%、47.65%；1月23日采收后貯藏60 d腐爛率都低于后面3個時期采后貯藏25 d的腐爛率。該結(jié)果表明樹冠覆膜能夠?qū)⒉珊蟾癄€率降低1.06%—17.65%，提高保鮮性能；但采收期的不合理延長，沙糖橘保鮮性能會降低，采后腐爛率升高。

2.6 不同采收期的采后失重率比較

果實失重率一定程度上代表著果實的皺縮程度和新鮮度，是評價果實貯藏性能的指標(biāo)之一。圖6表明，樹冠覆膜一周，果實采后失重率差異不顯著，分別為6.90%和6.37%；覆膜一定時間后（約15 d后），果實采后的失重率極顯著低于對照（P<0.01），1月10日和1月23日覆膜的失重率分別低于對照3.44%、2.37%。表明樹冠覆膜能顯著降低果實水分散失速率，提高采后保鮮性能。

2.7 樹冠覆膜對果皮脫落酸含量的影響

ABA是植物體內(nèi)重要的應(yīng)激激素，在調(diào)節(jié)植物的生長發(fā)育、氣孔導(dǎo)度、果實成熟軟化及色澤發(fā)育等方面起著重要作用，當(dāng)植物受到脅迫，如低溫、干旱、高鹽等環(huán)境條件，及除草劑使用等都能影響植物體內(nèi)ABA水平[27-28]。田間觀察發(fā)現(xiàn)，相對于露天栽培的沙糖橘，樹冠覆膜后土壤較為干燥，結(jié)合當(dāng)?shù)貧夂蛱攸c及栽培條件，推測樹冠覆膜后形成相對干旱的環(huán)境可能會提高植株內(nèi)源 ABA的含量，進而影響果實的品質(zhì)和保鮮性能，因此本研究對果皮內(nèi)源 ABA進行檢測。圖7表明，與對照相比，樹冠覆膜初期（12月29日）果皮ABA含量差異不顯著；1月10日和1月23日，樹冠覆膜沙糖橘果皮 ABA含量分別比對照高15.04 和 13.48 ng·g-1。

2.8 樹冠覆膜對果面蠟質(zhì)成分的影響

果面蠟質(zhì)層是果實適應(yīng)和抵抗不良貯藏環(huán)境的第一道防線，蠟質(zhì)的含量、組成對保持果實食用品質(zhì)、降低失水速率和延長貯藏壽命具有重要意義[29-30]。覆膜后采后失重率下降，果面光澤度下降，而光澤度的下降往往是蠟質(zhì)增厚的表現(xiàn)；同時也提高了 ABA含量，關(guān)于ABA調(diào)控植物表皮蠟質(zhì)生物合成從而降低失水的研究已有相關(guān)報道[31]，因此，探究果面蠟質(zhì)成分的變化是對其相關(guān)表型差異的進一步解析。通過GC-MS和GC對采收期果實表皮的蠟質(zhì)成分進行檢測，鑒定到蠟質(zhì)的主要 4大類成分，分別是直鏈的脂肪烷烴類、脂肪醛類、脂肪酸以及伯醇。圖8-A內(nèi)標(biāo)法相對定量結(jié)果表明，樹冠覆膜與對照的蠟質(zhì)含量變化趨勢基本一致，覆膜后蠟質(zhì)增多，與對照相比，蠟質(zhì)至少提高8.48%，且在多個采收時期顯著高于對照。由圖 8-B看出，沙糖橘果面蠟質(zhì)主要以脂肪醛類為主（62.52%—75.00%），其次是烷烴（12.08%—22.16%）、脂肪酸（7.82%—12.54%）、伯醇（2.3%—3.93%）。樹冠覆膜后，果面蠟質(zhì)成分的比例變化不大。如圖 8-C所示，樹冠覆膜能夠極顯著提高烷烴的含量（碳原子數(shù)為23、25、27、29、31、33直鏈烷烴的總量）（P<0.01），顯著提高部分采收時期蠟質(zhì)中醛類（碳原子數(shù)為 24、26、28、30脂肪醛）和伯醇（碳原子數(shù)為24、26、28的伯醇）含量（P<0.05）；而脂肪酸的含量（碳原子數(shù)為20、22、24、26、28的脂肪酸）差異不顯著。因此，樹冠覆膜顯著提高沙糖橘果面的蠟質(zhì)含量，蠟質(zhì)總量提高 1.14—3.47 μg·cm-2。

2.9 樹冠覆膜對蠟質(zhì)合成相關(guān)基因表達量的影響

樹冠覆膜后，果面蠟質(zhì)含量差異較大，因此選取3個采收期的果皮樣品，通過RT-qPCR對已報道的蠟質(zhì)合成相關(guān)基因定量分析。CER1以及KCS家族成員等都是被報道與蠟質(zhì)合成相關(guān)的基因[32-33]；CER2是負(fù)責(zé)C28—C30 VLCFA?；溠由斓暮诵拿?；羥酰輔酶脫水酶HCD為單基因編碼，參與蠟質(zhì)成分碳鏈延伸環(huán)節(jié)的脫水反應(yīng)；MAH1是中鏈烷烴羥化酶相關(guān)基因，參與仲醇和酮類的合成。圖 9表明，露地栽培的沙糖橘，其大部分與蠟質(zhì)合成相關(guān)的基因隨留樹時間延長而表達量降低，該趨勢符合前人連續(xù) 3年對柑橘整個發(fā)育時期蠟質(zhì)含量變化的數(shù)據(jù)結(jié)果，即蠟質(zhì)主要是在花后150—180 d大量合成[18]。CER1-1、CER1-3、CER2、HCD以及MAH1的表達量在覆膜中后期顯著高于對照。蠟質(zhì)是由多種成分組成的次生代謝物，在進化中屬于非常保守的結(jié)構(gòu)，由一系列酶催化合成，合成路徑復(fù)雜，其含量的高低由多基因共同調(diào)控?？傮w上，樹冠覆膜后的蠟質(zhì)合成相關(guān)基因表達量高于對照，這與蠟質(zhì)含量的變化趨勢較為一致。

3 討論

留樹保鮮技術(shù)在我國應(yīng)用廣泛，主要方式有地膜覆蓋、果實套袋、樹冠覆膜以及露地留樹保鮮等。廣西桂林地區(qū)的沙糖橘直接引用地表覆膜技術(shù)并沒有取得像三峽庫區(qū)周邊一樣的應(yīng)用效果，可能是由于三峽庫區(qū)大水體周邊的溫度變化較為平緩、溫差小，而廣西桂林地區(qū)冬季多為陰雨天氣，常遇偏北風(fēng)，易形成凍雨。樹冠覆膜屬于簡易的半封閉式溫室大棚，具有避雨控濕、保溫避寒、減少病蟲害、減少裂果落果、延長果實市場供應(yīng)期、提高經(jīng)濟效益等作用[34-36]。前人對金柑樹冠覆膜并對采收期的品質(zhì)分析結(jié)果表明，覆膜后果實可溶性固形物含量顯著增加、可滴定酸含量下降[36]；對沙糖橘覆膜試驗結(jié)果表明，覆膜顯著提高糖酸比、減少枝梢凍害發(fā)生率[35]。本研究對7個采收期、不同處理的沙糖橘品質(zhì)和保鮮性能的變化趨勢進行了研究，結(jié)果表明樹冠覆膜和對照在留樹保鮮期間，果實光澤度都逐漸下降，且覆膜果實光澤度高于對照，但隨著覆膜后采收期的推遲，果皮色澤由前期的橘紅色轉(zhuǎn)為后期的橘黃色，色澤暗淡，此結(jié)果與前人報道基本一致[7,9,11]；同時，樹冠覆膜后果實可溶性固形物顯著高于對照組，呈現(xiàn)先升高，3月中旬下降之后再上升的趨勢。樹冠覆膜能使果皮鮮亮，呈現(xiàn)橘紅色，極顯著提高果實可溶性固形物含量，分析其原因可能是，樹冠覆膜改變了光照和樹冠內(nèi)的晝夜溫差從而促進果實糖分積累與著色；王振興等[36]研究表明清見橘橙樹冠覆膜可以明顯改善樹冠內(nèi)小氣候，使樹冠內(nèi)溫度升高，陰雨潮濕天氣時覆膜能控制土壤濕度形成相對干旱的環(huán)境，晴天干旱時又能保持一定的濕度；范七君等[35]對金柑試驗結(jié)果也表明覆膜降低了樹冠的空氣濕度，一定程度上加大了晝夜溫差，增加葉面積和葉綠素含量從而保障光合同化物的積累。

廣西桂林地區(qū)冬季多陰雨天氣，濕度較大，樹冠覆膜一定程度上控制土壤濕度形成相對干旱的環(huán)境，干旱促進植物 ABA的快速積累。ABA促進果實著色、果實品質(zhì)提高及植物表皮蠟質(zhì)合成已有相關(guān)報道[37-38]，本研究對沙糖橘樹冠覆膜后的果皮脫落酸含量進行了測定，結(jié)果也表明覆膜后果實ABA含量顯著高于對照。植物表皮蠟質(zhì)是覆蓋在所有陸生植物與空氣接觸部位的一層疏水性的保護屏障，具有調(diào)節(jié)植物非氣孔性失水、抵御極端溫度、抵抗病原菌入侵等作用[39-44]，果面蠟質(zhì)的增多往往會降低水分的散失，普遍認(rèn)為柑橘貯藏保鮮先保水。本研究中，樹冠覆膜的果實失重率和采后腐爛率都顯著低于對照，由此推測沙糖橘樹冠覆膜后采后保鮮性能的改善可能與蠟質(zhì)有關(guān)，前人的研究忽視了果面蠟質(zhì)層的作用。本研究對蠟質(zhì)檢測結(jié)果表明 7個采收時期果面總蠟含量都顯著高于對照，大部分蠟質(zhì)合成相關(guān)基因的表達量也高于對照。結(jié)合前人和本研究結(jié)果，樹冠覆膜改善沙糖橘果實品質(zhì)及采后保鮮性能的原因，可能是通過樹冠覆膜改善樹冠內(nèi)小氣候，從而提高樹體內(nèi)源激素ABA含量，改善果實的著色、糖分的積累和果面蠟質(zhì)的生物學(xué)特性；但ABA積累的量并沒有促進果實的掉落，前人的研究結(jié)果表明柑橘樹冠覆膜降低落果率[8,34]，關(guān)于成熟果實落果生理機制較為復(fù)雜，具體有待進一步研究。

柑橘留樹保鮮采收期應(yīng)考慮果實的品質(zhì)、采后保鮮性能、樹體開花坐果時間等綜合因素。牛英等[13]研究結(jié)果表明沙糖橘果實大小與留樹時間的長短對果實浮皮程度均有顯著影響，果實越大、留樹保鮮時間越長，浮皮率越高，浮皮指數(shù)越大，浮皮越嚴(yán)重。生產(chǎn)實踐表明酸含量高的柑橘品種其果實可以掛樹貯藏到翌年四月底，柑橘采后貯藏過程中有機酸的消耗是導(dǎo)致果實風(fēng)味品質(zhì)下降的主要原因[20-21]。本研究中，果實可滴定酸在2月28日開始迅速下降，果實的固酸比從初期的22.30降至2月28日的15.49，果面光澤度 L*值也逐漸降低到 2月 28日的 69.96；1月23日、2月28日和3月16日3個采收期，果面顏色由鮮紅色逐漸轉(zhuǎn)為橘黃色再轉(zhuǎn)為紅色，對于沙糖橘這一品種，消費者更喜好紅色外觀；因此就果實內(nèi)外部品質(zhì)而言，沙糖橘不適宜晚于2月28日采收。覆膜后隨著采收期的推遲，果肉初生代謝物逐漸發(fā)生變化，果實自身的呼吸強度呈現(xiàn)升高趨勢；采后腐爛率逐漸增加，保鮮性能降低。桂林地區(qū)的沙糖橘開花時間多為3月下旬，樹體開花需消耗大量的養(yǎng)分物質(zhì)，若3月份揭膜采收會對當(dāng)年的開花坐果有一定影響。

4 結(jié)論

樹冠覆膜能夠提高沙糖橘內(nèi)源性 ABA含量，提高果面蠟質(zhì)含量，降低采后失重率和腐爛率；提高果實可溶性固形物、可滴定酸含量和固酸比，降低果實呼吸速率，改善外觀品質(zhì)使果皮色澤紅艷；但采收期的不合理延長會大大降低果實品質(zhì)和保鮮性能，廣西桂林地區(qū)樹冠覆膜的沙糖橘最晚采收期應(yīng)控制在2月下旬前完成。