舒 曉，褚能明，張雪梅，孟 霞，李典晏，黃程蘭，向 嘉，楊俊英

（重慶市農(nóng)業(yè)科學(xué)院，農(nóng)業(yè)農(nóng)村部農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)測(cè)試中心（重慶），重慶 401329）

雞蛋含有豐富的蛋白質(zhì)、脂肪、維生素和人體所需的鈣、鐵、鉀等礦物質(zhì)，所含的蛋白質(zhì)對(duì)肝臟組織損傷有修復(fù)作用，富含的DHA和卵磷脂、卵黃素有利于神經(jīng)系統(tǒng)和身體的發(fā)育，能健腦益智，是中國(guó)家庭必備的食品之一，因此保障雞蛋的食用安全具有重要意義。目前對(duì)雞蛋中磺胺類[1-2]、喹諾酮類[3-4]、硝基呋喃等[5-6]等抗生素類藥物的殘留研究較多[7-9]，對(duì)農(nóng)藥殘留檢測(cè)的研究相對(duì)較少。但根據(jù)實(shí)地調(diào)研情況，大部分養(yǎng)殖場(chǎng)都對(duì)養(yǎng)殖環(huán)境進(jìn)行了消毒、殺蟲(chóng)、防蠅。尤其是在天氣炎熱的夏季，如果畜禽動(dòng)物通過(guò)食用直接或者間接受到農(nóng)藥污染的養(yǎng)殖水、飼料等將殺蟲(chóng)劑、殺菌劑引入體內(nèi)富集，可能產(chǎn)出受到農(nóng)藥污染的畜禽產(chǎn)品或直接造成畜禽產(chǎn)品的農(nóng)藥污染[10-11]。長(zhǎng)期食用農(nóng)藥殘留超標(biāo)的畜禽產(chǎn)品，可引起慢性中毒，甚至產(chǎn)生致畸、致癌和致突變作用[12-13]。由于2017年的“毒雞蛋”事件，目前對(duì)雞蛋中農(nóng)藥殘留的檢測(cè)研究大多與氟蟲(chóng)腈及其代謝物[14-16]有關(guān)或局限于部分有機(jī)氯農(nóng)藥[17]，檢測(cè)的農(nóng)藥種類和范圍較少。農(nóng)藥殘留檢測(cè)的前處理方式主要有固相萃取[18-19]、QuEChERS（quick, easy, cheap, effective, rugged, and safe）等[20-21]，雞蛋樣品的農(nóng)藥殘留檢測(cè)前處理通常采用QuEChERS方法[22-23]。相應(yīng)的檢測(cè)方法主要有氣相色譜法[24-25]、氣相色譜-質(zhì)譜（gas chromatography-mass spectrometry，GC-MS）法[26]、液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法等[22,27-29]。目前采用氣相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜（gas chromatography-tandem mass spectrometry，GC-MS/MS）對(duì)雞蛋中農(nóng)藥的多殘留研究報(bào)道較少[23,30]。GC-MS/MS是由GC和兩個(gè)四極桿質(zhì)量分析器串聯(lián)組成，通常第1個(gè)質(zhì)量分析器將選定的母離子預(yù)分離，通過(guò)中間碰撞池碰撞產(chǎn)生子離子碎片，由第2級(jí)質(zhì)量分析器篩選產(chǎn)生的特定子離子。因此具有靈敏度高、準(zhǔn)確性強(qiáng)、有較強(qiáng)的抗干擾能力的優(yōu)點(diǎn)，是農(nóng)藥殘留分析領(lǐng)域的主要技術(shù)之一[31]。雞蛋中脂肪質(zhì)量分?jǐn)?shù)約為10%～12%，在前處理方法中增加去除脂質(zhì)的步驟對(duì)降低基質(zhì)效應(yīng)的影響同時(shí)減少對(duì)儀器的損耗可能有較好的作用，在部分水果和肉類樣品的農(nóng)藥殘留和環(huán)境污染物的檢測(cè)研究中，增強(qiáng)型脂質(zhì)去除（EMR-Lipid）已成功用于去除脂質(zhì)[32]。本研究創(chuàng)造性的將EMR-Lipid用于雞蛋樣品前處理過(guò)程中去除脂質(zhì)并結(jié)合GC-MS/MS進(jìn)行檢測(cè)。根據(jù)對(duì)養(yǎng)殖場(chǎng)的殺蟲(chóng)劑、殺菌劑使用情況調(diào)研，分析了雞蛋中62 種農(nóng)藥殘留檢測(cè)情況。

1 材料與方法

1.1 材料與試劑

62 種農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)品（純度≥95%，質(zhì)量濃度1 000 mg/L）德國(guó)Dr.Ehrenstorfer GmbH公司和美國(guó)Sigma-Aldrich公司；乙酸（優(yōu)級(jí)純） 成都市科龍化工試劑廠；乙腈（色譜純） 天津四友有限責(zé)任公司；正己烷（色譜純） 德國(guó)Meker公司；氯化鈉（優(yōu)級(jí)純） 上海國(guó)光試劑有限責(zé)任公司；除水鹽包（MgSO42.5 g、NaCl 0.5 g） 上海安譜試驗(yàn)科技股份有限公司；實(shí)驗(yàn)用水均為超純水（電阻率18.2 Ω·cm）。

增強(qiáng)型脂質(zhì)去除分散固相萃?。‥MR-Lipid）凈化管美國(guó)安捷倫科技公司；QuEChERS凈化管（內(nèi)填150 mg MgSO4、50 mg PSA、50 mg C18） 天津阿爾塔科技公司。

1.2 儀器與設(shè)備

GCMS-TQ8050三重四極桿質(zhì)譜儀 日本島津公司；SH-Rxi-5Sil MS色譜柱（30 m×0.25 mm，0.25 μm）；H1850R離心機(jī) 長(zhǎng)沙湘儀離心機(jī)有限公司；WH-600超聲波清洗機(jī) 濟(jì)寧萬(wàn)和超聲電子設(shè)備有限公司；Elix5超純水系統(tǒng) 美國(guó)Millipore公司；SK-1快速混勻器 浙江省金壇市科析儀器有限公司；移液槍德國(guó)Eppendorf公司；T18-B-S25勻漿儀 德國(guó)IKA公司；TP-402天平 美國(guó)Denver公司；TTL-DCII型多功能氮吹儀 北京恒天科力科技發(fā)展有限公司。

1.3 方法

1.3.1 標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制

1.3.1.1 溶劑標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制

用1 mL吸量管分別吸取質(zhì)量濃度為1 000 mg/L標(biāo)準(zhǔn)品1 mL于10 mL容量瓶中，用乙腈稀釋定容至刻度線，配制成100 mg/L的標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液，于4 ℃冰箱避光保存，有效期6 個(gè)月；用1 mL吸量管分別移取1 mL標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液于50 mL容量瓶中，用乙腈稀釋定容至刻度線，配制成2 mg/L混合標(biāo)準(zhǔn)溶液，于4 ℃冰箱避光保存?zhèn)溆?，有效? 個(gè)月。后續(xù)所需不同質(zhì)量濃度溶劑標(biāo)準(zhǔn)溶液用2 mg/L混合標(biāo)準(zhǔn)溶液進(jìn)行逐級(jí)稀釋。

1.3.1.2 基質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制

用10 mL吸量管取1.3.1.1節(jié)所配混合溶劑標(biāo)準(zhǔn)溶液于10 mL容量瓶中，將溶劑氮吹近干后，用樣品空白基質(zhì)定容至刻度線。后續(xù)根據(jù)需要用樣品空白基質(zhì)進(jìn)行逐級(jí)稀釋。

1.3.1.3 基質(zhì)效應(yīng)計(jì)算公式

通過(guò)配制不同質(zhì)量濃度梯度的溶劑標(biāo)準(zhǔn)溶液和基質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)溶液，分別繪制溶劑標(biāo)準(zhǔn)曲線和基質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)曲線溶劑，根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線斜率計(jì)算基質(zhì)效應(yīng)。計(jì)算公式如下：

1.3.2 樣品前處理

首先將雞蛋去殼并用勻漿儀充分均質(zhì)后，準(zhǔn)確稱取5 g（精確至0.01 g）均質(zhì)樣品于50 mL離心管中，加入5 mL水，10 mL 1%乙酸-乙腈，渦旋混勻1 min，超聲提取10 min。加3 g氯化鈉后渦旋混合1 min，4 500 r/min離心10 min。吸取5 mL乙腈層加入到經(jīng)過(guò)3 mL水活化的EMR-Lipid凈化管中，渦旋1 min。在15 mL離心管中加入陶瓷均質(zhì)子，將上述上清液倒入離心管中，加入除水鹽包，渦旋振蕩1 min，以9 000 r/min低溫高速離心 5 min。取1 mL上清液待測(cè)。

1.3.3 色譜條件

毛細(xì)管色譜柱：SH-Rxi-5Sil MS（30 m×0.25 mm，0.25 μm）；載氣：氦氣（純度≥99.999%）；恒流模式，流速1.2 mL/min；進(jìn)樣口溫度250 ℃；不分流進(jìn)樣；柱壓73 kPa。柱程序升溫：初始溫度60 ℃，保持1.00 min，以30 ℃/min的速率上升到150 ℃，然后以10 ℃/min的速率上升到300 ℃，保持5.00 min；進(jìn)樣體積1.0 μL。

1.3.4 質(zhì)譜條件

電子電離源；離子化電壓：70 V；碰撞氣：氬氣（純度≥99.999%）；碰撞誘導(dǎo)解離氣壓：200 kPa；傳輸線溫度：250 ℃；離子源溫度：200 ℃；發(fā)射電流：150 μA；循環(huán)時(shí)間：0.3 s；分析模式為多反應(yīng)監(jiān)測(cè)掃描（multi reaction monitoring，MRM）模式。Q3SCAN全掃描模式下色譜條件與MRM掃描模式下的色譜條件一致，掃描范圍：m/z80～500。

1.4 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)及圖表繪制

采用島津GC-MS Postrun Analysis和LabSolutions Insight GCMS對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。采用GC-MS Postrun Analysis進(jìn)行全掃描數(shù)據(jù)的導(dǎo)出，導(dǎo)出后的數(shù)據(jù)用Office Excel 2007作圖。采用Office Excel 2007進(jìn)行表格繪制、基質(zhì)效應(yīng)的數(shù)據(jù)分析和圖片繪制。

2 結(jié)果與分析

2.1 儀器條件的優(yōu)化

GC條件選擇高純度載氣避免影響儀器正常工作以保證結(jié)果準(zhǔn)確性。在進(jìn)行微量組分分析時(shí)需選擇不分流進(jìn)樣方式，在不分流進(jìn)樣方式下必須使用程序升溫模式，且初溫低于溶劑沸點(diǎn)10～20 ℃。每種農(nóng)藥在不同基質(zhì)中定性定量離子對(duì)的響應(yīng)可能有所不同，因此質(zhì)譜條件的優(yōu)化需通過(guò)對(duì)雞蛋的基質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)溶液進(jìn)行子離子全掃，比較在不同碰撞電壓下離子響應(yīng)豐度，選擇信號(hào)強(qiáng)度好、響應(yīng)穩(wěn)定的定性定量離子對(duì)。本研究中的甲拌磷砜和毒死蜱保留時(shí)間為11.834 min和11.830 min，在GC圖上難以區(qū)分，但它們的定性定量離子對(duì)不同，通過(guò)串聯(lián)質(zhì)譜即可將兩種物質(zhì)區(qū)別。為同時(shí)滿足定性和定量的要求，在MRM模式下根據(jù)掃描的離子對(duì)數(shù)量設(shè)定掃描循環(huán)時(shí)間為0.3 s，使每個(gè)色譜峰的采集點(diǎn)在15 個(gè)左右。在以上色譜和質(zhì)譜條件下62 種農(nóng)藥質(zhì)量濃度為100 μg/L的離子對(duì)、碰撞能量等優(yōu)化后的參數(shù)見(jiàn)表1。

表162 種農(nóng)藥GC-MS/MS分析的MRM參數(shù)Table 1GC-MS/MS parameters for analysis of 60 pesticides in selected reaction monitoring mode

續(xù)表1

續(xù)表1

2.2 提取劑的選擇

乙腈作為提取溶劑適合提取的目標(biāo)物極性范圍最廣，共提物少，并且農(nóng)藥在乙腈介質(zhì)中較穩(wěn)定，不經(jīng)溶劑置換即可用于GC-MS分析，廣泛應(yīng)用于農(nóng)藥多殘留分析。固相分散萃取前處理方法中也多以乙腈作為提取劑[33-34]。但在乙腈旳作用下，某些農(nóng)藥如三氯殺螨醇等易發(fā)生降解，在乙腈中添加1%的乙酸可作為分析物保護(hù)劑[35-36]。水的加入可增加極性農(nóng)藥的溶解度。因此本研究考察3 種提取劑組合對(duì)提取效果的影響，分別為10 mL乙腈+5 mL水、10 mL 1%乙酸-乙腈、10 mL 1%乙酸-乙腈+5 mL水。取3 種不同提取劑的空白樣品上清液不經(jīng)凈化步驟，直接上機(jī)，在SCAN模式下對(duì)3 種提取液進(jìn)行全掃描。如圖1所示，使用10 mL乙腈+5 mL水作為提取劑，基質(zhì)效應(yīng)最弱，背景干擾最小。采用含有10 mL 1%乙酸-乙腈作為提取劑時(shí)背景干擾較大。為驗(yàn)證3 種提取劑組合的提取效果，以加標(biāo)回收實(shí)驗(yàn)結(jié)果為判定依據(jù)，結(jié)果如表2所示。62 種農(nóng)藥在用10 mL乙腈+5 mL水提取時(shí)，有64.5%的農(nóng)藥回收率在70%～120%之間。10 mL 1%乙酸-乙腈+5 mL水作為提取劑時(shí)，98.4%的農(nóng)藥平均加標(biāo)回收率為70.7%～117.2%。使用10 mL 1%乙酸-乙腈作為提取劑時(shí)，有46.8%的農(nóng)藥回收率在70%～120%之間，因此加入水可以更好的使農(nóng)藥集中到有機(jī)相中。結(jié)果表明10 mL 1%乙酸-乙腈+5 mL水作為提取劑的效果最好。

圖1 Q3SCAN模式下3 種提取液空白基質(zhì)全掃描圖Fig.1 Chromatogram of blank samples with three different extraction solvent combinations in Q3SCAN mode

表2 不同溶劑組合的62 種農(nóng)藥添加回收率的影響Table 2 Statistical results of spiked recovery rates of 62 pesticides with different extraction solvent combinations

2.3 鹽的選擇

對(duì)比只加入3 g NaCl和加入4 g MgSO4+1 g NaCl兩種鹽組合的不同萃取效果。加標(biāo)回收實(shí)驗(yàn)結(jié)果如表3所示。可以看到加入3 g NaCl的萃取效果優(yōu)于加入4 g MgSO4+1 g NaCl的效果。4 g MgSO4的加入雖然使水相和有機(jī)相更容易分離，但與水產(chǎn)生了劇烈的放熱效果，使一部分的農(nóng)藥受到損失。

表3 2 種鹽組合對(duì)62 種農(nóng)藥添加回收率的影響Table 3 Statistical results of spiked recoveries of 62 pesticides with extraction solvents added with two different salt combinations

2.4 除脂的凈化效果

雞蛋中都含有一定量的脂肪，因此在凈化步驟中考察了除脂與不除脂的實(shí)驗(yàn)效果。不除脂的方式為常用的QuEChERS方法，直接取1.3.2節(jié)所述前處理步驟中第1次離心后的上清液1 mL通過(guò)QuEChERS凈化管（MgSO4、PSA、C18）后上機(jī)檢測(cè)。選擇的除脂方式有兩種，一種為增強(qiáng)型脂質(zhì)去除（EMR-Lipid），處理步驟同1.3.2節(jié)。另1 種采用正己烷溶劑除脂，正己烷也在許多研究工作種被用于出去脂肪[37]。具體方式為取1.3.2節(jié)所述步驟中第1次離心后的上清液5 mL于15 mL離心管中，加入5 mL正己烷，渦旋1 min后在4 500 r/min離心5 min，取下層有機(jī)溶劑1 mL上機(jī)檢測(cè)。首先對(duì)直接經(jīng)過(guò)QuEChERS凈化管和經(jīng)過(guò)兩種除酯方式凈化后的雞蛋樣品基質(zhì)在SCAN模式下進(jìn)行全掃，結(jié)果如圖2所示?？梢钥闯鲭u蛋樣品的空白基質(zhì)經(jīng)過(guò)兩種去除脂質(zhì)步驟的基線明顯低于未除酯的基線。其中經(jīng)過(guò)正己烷除脂后的背景干擾小于經(jīng)過(guò)EMR-Lipid凈化的背景干擾，在62 種農(nóng)藥的主要出峰區(qū)域，即在保留時(shí)間為4～6 min以及9～20 min之間，EMR-Lipid凈化后的背景干擾也明顯小于經(jīng)過(guò)QuEChERS凈化管的背景干擾。在保留時(shí)間為6～9 min時(shí)，雖然直接經(jīng)過(guò)QuEChERS凈化管的背景干擾較小，但是待測(cè)的62 種農(nóng)藥均不在在此區(qū)間出峰。為驗(yàn)證正己烷去脂、增強(qiáng)型脂質(zhì)去除與不除脂直接通過(guò)QuEChERS凈化管3 種凈化方式的效果。以空白加標(biāo)樣品的回收率為判定依據(jù)，結(jié)果如表4所示。可以看到經(jīng)過(guò)EMR-Lipid除脂凈化后有98.4%的農(nóng)藥加標(biāo)回收率為70.7%～117.2%，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差為0.3%～10.9%。經(jīng)過(guò)正己烷除脂后，由于六六六、滴滴涕等一部分農(nóng)藥在正己烷中有一定的溶解性，進(jìn)入到正己烷層中，導(dǎo)致部分農(nóng)藥的回收率降低，僅61.3%的農(nóng)藥回收率范圍在70%～120%之間。雖然正己烷除脂對(duì)降低背景干擾有優(yōu)異的效果，但對(duì)回收率有較大的影響。QuEChERS凈化的結(jié)果為90.3%的農(nóng)藥回收率范圍在70%～120%之間，且部分農(nóng)藥相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差（relative standard deviation，RSD）較大，檢測(cè)精密度受到一定的背景干擾影響。所以增強(qiáng)型脂質(zhì)去除為雞蛋樣品農(nóng)藥殘留檢測(cè)前處理步驟中較優(yōu)的凈化方式。

圖2 Q3SCAN模式下除脂與不除脂的空白樣品基質(zhì)Fig.2 Chromatogram of blank samples with and without defatting treatment in Q3SCAN mode

表4 除脂與不除脂對(duì)62 種農(nóng)藥添加回收率的影響Table 4 Statistical results of spiked recoveries of 62 pesticides with and without defatting treatment

2.5 線性范圍、定量限、回收率和精密度結(jié)果

用空白雞蛋樣品，根據(jù)1.3.2節(jié)前處理方法得到雞蛋基質(zhì)提取液，參考農(nóng)藥在儀器上的響應(yīng)情況，根據(jù)1.3.2.2節(jié)所述步驟，用雞蛋基質(zhì)提取液準(zhǔn)確配制5、10、20、50、100、200、300、400 μg/L 8 個(gè)不同梯度質(zhì)量濃度的基質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)溶液。在1.3.3節(jié)儀器條件下，以農(nóng)藥的峰面積與質(zhì)量濃度作標(biāo)準(zhǔn)曲線。結(jié)果表明，除α-硫丹、β-硫丹和咪鮮胺3 種農(nóng)藥外的59 種農(nóng)藥在5～400 μg/L之間線性關(guān)系良好，α-硫丹、β-硫丹和咪鮮胺3 種農(nóng)藥在50～400 μg/L之間線性關(guān)系良好。各農(nóng)藥的線性相關(guān)性系數(shù)均大于0.95。配制0.1、0.5、1、2、3、4、5 μg/L 6 個(gè)低質(zhì)量濃度的基質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)溶液和1、2、4、10、15 、20、50 μg/L 5 個(gè)較低質(zhì)量濃度的基質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)溶液進(jìn)樣，由化學(xué)工作站計(jì)算出每個(gè)農(nóng)藥的信噪比，根據(jù)方法的檢出限為3 倍的信噪比，定量限為10 倍的信噪比得出對(duì)應(yīng)每種農(nóng)藥的檢出限和定量限。結(jié)果表明除α-硫丹、β-硫丹和咪鮮胺3 種農(nóng)藥外，62 種農(nóng)藥中有59 種農(nóng)藥在信噪比為3左右時(shí)，對(duì)應(yīng)的檢出限為0.5～5.0 μg/kg之間，在信噪比為10左右時(shí)，對(duì)應(yīng)的定量限在1.0～20.0 μg/kg之間，α-硫丹、β-硫丹和咪鮮胺的定量限較高為50 μg/kg。本實(shí)驗(yàn)采用雞蛋的基質(zhì)匹配液-外標(biāo)法定量，按低、中、高3 個(gè)水平確定加標(biāo)回收實(shí)驗(yàn)的添加量，在選擇最低水平的添加量時(shí)，考慮到大部分農(nóng)藥的定量限為10 μg/kg和20 μg/kg，所以最低水平添加量為20 μg/kg。3 個(gè)不同水平的添加量分別為20、60 μg/kg和100 μg/kg，每個(gè)水平重復(fù)3 次，得到每種農(nóng)藥的平均回收率和RSD，結(jié)果如表4所示。當(dāng)添加量為20 μg/kg時(shí)，除三唑酮、溴氰菊酯、p,p’-DDT以外，其余農(nóng)藥的回收率均在61.2%～115.0%之間，RSD為1.8%～18.4%，當(dāng)添加量為60 μg/kg時(shí)，除p,p’-DDE和p,p’-DDT以外，其余農(nóng)藥的回收率在60.6%～116.3%之間，RSD在1.2%～23.3%之間，當(dāng)添加量為100 μg/kg時(shí)，檢測(cè)農(nóng)藥的回收率均在70.7%～117.2%范圍內(nèi)，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差為0.3%～10.9%。通常GC法或GC-MS/MS法在檢測(cè)雞蛋中農(nóng)藥殘留時(shí)，多采用固相萃取柱凈化等復(fù)雜前處理方法，多殘留檢測(cè)時(shí)不能確保每種農(nóng)藥的檢出限、定量限、回收率和RSD都得到好的結(jié)果，單殘留檢測(cè)時(shí)的結(jié)果通常更好，但檢測(cè)效率較低。QuEChERS前處理方法比固相萃取柱凈化的方法更簡(jiǎn)單快捷，得到的回收率和RSD等結(jié)果與GC以及GC-MS/MS法報(bào)道相比[23,28,30]，有檢測(cè)范圍廣同時(shí)保證靈敏度好、精密度高的優(yōu)點(diǎn)。與Zhang Xining等[22]一些液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法的相關(guān)報(bào)道相比[27]，在回收率和精密度上能保持相當(dāng)?shù)慕Y(jié)果。液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜檢測(cè)時(shí)前處理方法通常為QuEChERS法同時(shí)受基質(zhì)效應(yīng)的影響更小，檢出限和定量限通常更低。

表5 62 種農(nóng)藥的回收率、RSD和方法定量限Table 5 Recoveries, relative standard deviations and limits of quantitation of 62 pesticides

續(xù)表5

2.6 基質(zhì)效應(yīng)

雞蛋中富含蛋白質(zhì)、氨基酸、維生素等營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，基質(zhì)效應(yīng)往往會(huì)對(duì)分析準(zhǔn)確性產(chǎn)生重要影響，因此有必要對(duì)此研究過(guò)程中雞蛋樣品的基質(zhì)效應(yīng)進(jìn)行分析。分別配制質(zhì)量濃度為1、2、4、10、15、20、50、100、200、400 μg/L的溶劑標(biāo)準(zhǔn)溶液和空白基質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)溶液，繪制了溶劑標(biāo)準(zhǔn)曲線和基質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)曲線。

根據(jù)1.3.2.3節(jié)基質(zhì)效應(yīng)的計(jì)算公式，基質(zhì)效應(yīng)在－20%～20%之間為弱基質(zhì)效應(yīng)，在－50%～－20%和20%～50%為中等基質(zhì)效應(yīng)，低于－50%或超過(guò)50%為強(qiáng)基質(zhì)效應(yīng)[38]。各組分農(nóng)藥的基質(zhì)效應(yīng)結(jié)果如圖3所示，可以直觀地看到采用GC-MS/MS法對(duì)雞蛋中62種農(nóng)藥進(jìn)行檢測(cè)時(shí)，大部分農(nóng)藥都有不同程度的基質(zhì)效應(yīng)，并且多為基質(zhì)抑制效應(yīng)。僅有20 種農(nóng)藥為弱基質(zhì)效應(yīng)。31 種農(nóng)藥為中等基質(zhì)效應(yīng)。11 種農(nóng)藥為強(qiáng)基質(zhì)效應(yīng)。因此在結(jié)果分析中有必要通過(guò)基質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)曲線進(jìn)行校正。

圖3 62 種農(nóng)藥的基質(zhì)效應(yīng)Fig.3 Matrix effects for 62 pesticides

2.7 實(shí)際樣品分析測(cè)定

從重慶市各區(qū)縣養(yǎng)殖場(chǎng)和農(nóng)貿(mào)市場(chǎng)中隨機(jī)抽取了40 份雞蛋樣品，對(duì)方法進(jìn)行驗(yàn)證。其中有2 份樣品有檢出，檢出農(nóng)藥分別為聯(lián)苯菊酯和氟蟲(chóng)腈硫醚，檢出比例為5%。其中聯(lián)苯菊酯檢出量為6.9 μg/kg，氟蟲(chóng)腈硫醚檢出量為17.0 μg/kg，氟蟲(chóng)腈硫醚的檢出濃度超過(guò)了歐盟標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定的蛋類食品最大殘留限量值5 μg/kg，未超過(guò)我國(guó)GB 2763—2019《食品中農(nóng)藥最大殘留限量》以及國(guó)際食品法典委員會(huì)規(guī)定的20 μg/kg最大殘留限量值。在以往的一些研究中也有氟蟲(chóng)腈及其代謝物的檢出[22,39]，表明殺蟲(chóng)劑的非法使用在畜禽養(yǎng)殖過(guò)程中應(yīng)引起重視。實(shí)際樣品的檢測(cè)結(jié)果也表明基質(zhì)增強(qiáng)去除脂質(zhì)結(jié)合GC-MS/MS在雞蛋中的農(nóng)藥殘留檢測(cè)有較好的實(shí)際應(yīng)用價(jià)值。

3 結(jié) 論

采用GC-MS/MS法對(duì)雞蛋中農(nóng)藥多殘留進(jìn)行了檢測(cè)分析。1%乙酸-乙腈作為溶劑，氯化鈉鹽析，采用基質(zhì)增強(qiáng)去脂分散固相萃取對(duì)有機(jī)相進(jìn)行凈化，有效去除了雞蛋中的脂肪成分，與常用的QuEChERS凈化法相比得到了更為優(yōu)異的回收率和重復(fù)性結(jié)果。該方法前處理步驟簡(jiǎn)單快捷、靈敏度高、專屬性強(qiáng)及重復(fù)性好，并成功應(yīng)用于雞蛋樣品的分析，為雞蛋中多種農(nóng)藥殘留量的監(jiān)測(cè)提供了有力的技術(shù)手段，為限量值的制定提供了相應(yīng)的數(shù)據(jù)基礎(chǔ)，保障了雞蛋的安全食用。