施愛軍,吳曉柳

1.江蘇省南通市如東中醫(yī)院檢驗科,江蘇南通 226400;2.江蘇省腫瘤醫(yī)院科技處,江蘇南京 210009

肝癌是消化系統(tǒng)常見的惡性腫瘤之一，其發(fā)生率和病死率分別排在惡性腫瘤的第3位和第2位，嚴重影響人們的身體健康[1]。早期肝癌的治療以手術(shù)治療為主，并且手術(shù)治療的治愈率較高，患者手術(shù)預(yù)后較好。因此，早期預(yù)測肝癌對于改善患者預(yù)后、提高患者生存率均具有重要的臨床價值[2]。糖類抗原153(CA153)是一種腫瘤抗原，主要分布于細胞膜上，與肝癌細胞的侵襲和轉(zhuǎn)移密切相關(guān)[3]。Kruppel樣因子5(KLF5)屬于轉(zhuǎn)錄因子蛋白家族成員，參與基因轉(zhuǎn)錄調(diào)控，與肝癌細胞的增殖和轉(zhuǎn)移密切相關(guān)[4]。目前對于CA153、KLF5在肝癌中的作用仍然缺乏了解，本研究旨在通過檢測血清CA153、KLF5水平，探討其在肝癌患者中的水平及其在肝癌診斷中的價值，現(xiàn)報道如下。

1 資料與方法

1.1一般資料 選擇2018年2月至2019年8月江蘇省南通市如東中醫(yī)院診治的65例肝癌患者作為肝癌組。納入標(biāo)準(zhǔn)：(1)經(jīng)病理學(xué)診斷確診為肝癌；(2)入院前未接受過放化療治療；(3)不存在感染性疾病和自身免疫性疾?。?4)臨床資料完整。排除標(biāo)準(zhǔn)：(1)存在嚴重腎損傷；(2)合并存在其他類型腫瘤；(3)入院前3個月內(nèi)接受過抗炎治療。肝癌組中，女30例，男35例；年齡34～79歲，平均(57.90±11.47)歲；30例甲胎蛋白(AFP)<200 ng/mL，35例AFP≥200 ng/mL；12例腫瘤大小<3 cm，53例腫瘤大小≥3 cm；37例乙型肝炎表面抗原(HBsAg)呈陰性，28例HBsAg呈陽性；40例TNM分期為Ⅰ～Ⅱ期，25例為Ⅲ期；腫瘤中高分化患者49例，低分化患者16例；43例無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移，22例有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移。選擇同期在江蘇省南通市如東中醫(yī)院進行健康體檢的65例體檢健康者作為對照組，其中男37例，女28例；年齡37～74歲，平均(56.02±17.89)歲。兩組年齡和性別比例比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)，具有可比性。本研究經(jīng)江蘇省南通市如東中醫(yī)院倫理委員會同意。

1.2血清CA153、KLF5水平檢測 研究對象入院后采集空腹靜脈血5 mL，室溫靜置30 min，5 000 r/min離心20 min，離心半徑12.5 cm，收集上清液并凍存于-80 ℃。采用電化學(xué)發(fā)光儀(美國雅培科技有限公司，型號：i2000SR)及其配套試劑盒檢測血清CA153水平。采用酶聯(lián)免疫吸附法檢測血清KLF5水平，使用KLF5檢測試劑盒(上海江萊生物科技有限公司，貨號0-001223)檢測血清KLF5水平，試驗操作嚴格按照試劑盒說明書進行。

2 結(jié) 果

2.1兩組血清CA153和KLF5水平比較 肝癌組血清CA153和KLF5水平明顯高于對照組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。見表1。

表1 兩組血清CA153和KLF5水平比較

2.2肝癌組患者血清CA153和KLF5水平與臨床相關(guān)參數(shù)的關(guān)系 血清CA153和KLF5水平均與TNM分期和淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移相關(guān)(P<0.05)，而與性別、年齡、AFP水平、腫瘤大小、HBsAg水平及腫瘤分化程度無關(guān)(P>0.05)。見表2。

表2 肝癌組患者血清CA153和KLF5水平與臨床相關(guān)參數(shù)的關(guān)系(ng/mL)

2.3血清CA153和KLF5水平對肝癌的診斷價值分析 CA153聯(lián)合KLF5診斷肝癌的曲線下面積(AUC)、靈敏度和特異度均高于CA153、KLF5單獨檢測(P<0.05)。見表3、圖1。

表3 血清CA153和KLF5水平對肝癌的診斷價值分析

圖1 血清CA153和KLF5單獨及聯(lián)合檢測的ROC曲線

3 討 論

目前肝癌的治療主要以手術(shù)為主，且手術(shù)治療能夠有效提高早期肝癌患者的生存率，但早期肝癌的臨床癥狀不明顯，患者往往在出現(xiàn)便血和腹痛等癥狀時才到醫(yī)院就診，而此時腫瘤已處于晚期階段，錯失了最佳治療時機，導(dǎo)致癌癥進一步惡化[5]。目前，肝癌的診斷主要以超聲診斷、核磁共振診斷和AFP檢測為主。超聲和核磁共振的診斷費用高，并且診斷肝癌的準(zhǔn)確度和靈敏度偏低[6]。AFP是目前臨床上應(yīng)用較為廣泛的肝癌篩查指標(biāo)，但是在肝炎、肝硬化和膽管上皮細胞癌等疾病的患者中均能夠檢測到AFP水平異常，其對診斷肝癌的特異度和靈敏度較低[7]。因此，找到與肝癌發(fā)病密切相關(guān)的生物標(biāo)志物并將其應(yīng)用于肝癌的診斷對于肝癌患者的治療和預(yù)后改善具有重要意義。

CA153由腫瘤細胞特異性產(chǎn)生，主要分布于細胞膜上，其是一種糖基化蛋白，在腫瘤轉(zhuǎn)移過程中起到誘導(dǎo)作用[8]。CA153與白細胞介素-6和腫瘤壞死因子等腫瘤炎癥相關(guān)因子結(jié)合，誘導(dǎo)腫瘤細胞發(fā)生轉(zhuǎn)移[9]。本研究中，肝癌患者血清CA153水平明顯升高，表明CA153可能參與肝癌的發(fā)生發(fā)展過程。目前，對于肝癌中CA153水平升高的機制仍然缺乏了解，可能與微小RNA的調(diào)節(jié)及CA153蛋白的泛素化降解相關(guān)。在乳腺癌的研究中發(fā)現(xiàn)，微小RNA-34a能夠結(jié)合到CA153信使RNA的3′非編碼區(qū)，抑制CA153表達，進而抑制腫瘤轉(zhuǎn)移[10]。此外，本研究發(fā)現(xiàn)，CA153水平與TNM分期和淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移相關(guān)，表明血清CA153水平能夠反映肝癌患者病情的嚴重程度。其原因可能是由于CA153水平與腫瘤惡性程度密切相關(guān)。有研究表明，CA153往往在乳腺癌、肝癌和肺癌等惡性程度較高的腫瘤中水平升高，且CA153水平較高的患者其腫瘤轉(zhuǎn)移和浸潤能力較強[11]。

KLF5在G1/S期和G2/M期的細胞周期轉(zhuǎn)換中起到重要作用，參與調(diào)節(jié)細胞有絲分裂、轉(zhuǎn)移和侵襲等病理生理過程[12]。本研究中，肝癌患者血清KLF5水平明顯升高，其機制可能與結(jié)合到KLF5信使RNA的5′非編碼區(qū)的微小RNA表達下調(diào)相關(guān)，如在肝癌細胞中，miR-145-5p結(jié)合KLF5信使RNA后抑制其表達，進而起到抑制肝癌進展的作用[13]。此外，肝癌患者血清KLF5水平與TNM分期和淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移相關(guān)，TNM分期越高、有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的肝癌患者血清KLF5水平越高，表明KLF5也能夠作為肝癌嚴重程度的衡量指標(biāo)。其原因可能是由于KLF5水平與腫瘤炎癥的發(fā)生密切相關(guān)。有研究表明，KLF5能夠活化核因子-κB炎癥信號通路,進而促進腫瘤進展[14]。

進一步研究顯示，單獨使用血清CA153、KLF5進行檢測時，CA153的特異度和靈敏度分別為61.98%和62.64%，均低于KLF5的68.72%和74.81%，提示在單獨進行血清項目檢測時，KLF5的臨床價值更高。血清CA153、KLF5聯(lián)合檢測的特異度和靈敏度分別為78.29%和83.19%，均高于兩項指標(biāo)單獨檢測，提示CA153、KLF5聯(lián)合檢測的診斷效果最佳，在臨床肝癌檢測中建議CA153、KLF5聯(lián)合檢測。

綜上所述，肝癌患者的血清CA153、KLF5水平異常升高，并且均與TNM分期和淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移相關(guān)，二者聯(lián)合檢測在肝癌診斷中具有一定臨床價值。