陸勝楠 施勝龍 侯劍華 黃春鑫 趙禹喆

1.齊齊哈爾醫(yī)學院附屬第三醫(yī)院超聲科，黑龍江 齊齊哈爾 161099；2.齊齊哈爾醫(yī)學院附屬第二醫(yī)院超聲科，黑龍江 齊齊哈爾 161000 3.齊齊哈爾市中醫(yī)醫(yī)院超聲科，黑龍江 齊齊哈爾 161099

甲狀腺乳頭狀癌是臨床上最常見的甲狀腺癌類型，整體惡性程度較低、預后情況較好，但仍有部分甲狀腺乳頭狀癌患者容易早期發(fā)生淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移并影響遠期生存率[1,2]。因此，本課題組提出假設(shè)：通過CEUS檢查能夠通過反映甲狀腺癌病灶內(nèi)的微血管分布來評估病情。為了驗證這一假設(shè)及術(shù)前CEUS檢查對甲狀腺乳頭狀癌患者病情的評估價值，本研究具體分析了甲狀腺乳頭狀癌患者術(shù)前超聲造影與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、蛋白酶表達、術(shù)后無復發(fā)生存的相關(guān)性。

1 資料與方法

1.1一般資料 選擇2013年2月-2016年8月期間在我院接受手術(shù)切除治療的甲狀腺乳頭狀癌患者作為研究對象，入組標準：①接受甲狀腺全切除+頸部淋巴結(jié)擴大清掃；②經(jīng)術(shù)后病理診斷為甲狀腺乳頭狀癌；③術(shù)前均接受CEUS檢查。排除標準：①甲狀腺病灶直徑<0.5cm；②對造影劑過敏；③既往有其他惡性腫瘤病史。共納入78例患者，包括男性44例、女性34例，年齡32-63歲、平均43.94±0.64歲，病灶直徑0.6-3.2cm、平均1.41±0.18cm。

1.2CEUS檢查方法 應用ARIETTA 70彩色超聲儀進行CEUS檢查，探頭頻率3-9MHz，造影劑為意大利 Bracco 公司生產(chǎn)的主要成份為磷脂包裹的六氟化硫(SF6)的聲諾維(SonoVue)。檢查時，患者取平臥位、頭后仰、充分暴露頸前區(qū)，進行常規(guī)超聲檢查后確定目標結(jié)節(jié)、選擇顯示病灶最大徑的切面，切換至超聲造影模式，將抽取配制好的造影劑混懸液 2.0 ml 經(jīng)外周靜脈團注，隨后推注 5.0 ml生理鹽水沖管，注入造影劑的同時按下計時鍵及動態(tài)存儲鍵，連續(xù)觀察病灶灌注60s，觀察結(jié)節(jié)內(nèi)增強程度以及被膜侵犯情況，計算達峰時間(TTP)和平均通過時間(MTT)[3]。

1.3MMP2、MMP9的免疫組化染色方法 取手術(shù)切除的甲狀腺癌病灶，制作石蠟切片。結(jié)果判讀，陽性細胞數(shù)<10%、著色較淡為陰性，陽性細胞數(shù)≥10%、著色呈棕黃色顆粒者為陽性。

1.4術(shù)后無復發(fā)生存的隨訪 手術(shù)結(jié)束后進行隨訪，隨訪截止時間為2018年12月，記錄患者無復發(fā)生存情況。

1.5統(tǒng)計學方法 采用SPSS21.0軟件錄入數(shù)據(jù)，組間計數(shù)資料的比較采用卡方檢驗、計量資料的比較采用t檢驗，P<0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

2 結(jié) 果

2.1CEUS特征、參數(shù)與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的相關(guān)性 CEUS的圖像如圖1所示。CEUS高增強、等增強、低增強患者的淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移率比較有顯著性差異(P<0.05)；被膜侵犯、被膜未侵犯患者的淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移率比較有顯著性差異(P<0.05)。淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移患者的CEUS參數(shù)TTP、MTT均明顯低于無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移患者，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。

圖1 甲狀腺癌的CEUS圖像左圖顯示病灶內(nèi)高增強、邊界不清、被膜受侵犯；右圖顯示病灶內(nèi)低增強、邊界清晰、被膜未受侵犯。

2.2超聲造影特征、參數(shù)與蛋白酶表達的相關(guān)性 甲狀腺癌病灶內(nèi)MMP2、MMP9免疫組化染色如圖2所示。CEUS高增強、等增強、低增強患者甲狀腺癌病灶內(nèi)MMP2、MMP9的陽性表達率比較有顯著性差異(P<0.05)；被膜侵犯、被膜未侵犯患者甲狀腺癌病灶內(nèi)MMP2、MMP9的陽性表達率比較有顯著性差異(P<0.05)。MMP2、MMP9陽性表達患者的CEUS參數(shù)TTP、MTT均明顯低于MMP2、MMP9陰性表達患者(P<0.05)。

圖2 蛋白酶的免疫組化染色圖左圖為MMP2的免疫組化染色圖右圖為MMP9的免疫組化染色圖。

2.3超聲造影特征與術(shù)后無復發(fā)生存的相關(guān)性 CEUS高增強、等增強、低增強患者的術(shù)后無復發(fā)生存曲線比較有顯著性差異(P<0.05)；被膜侵犯、被膜未侵犯患者的術(shù)后無復發(fā)生存曲線比較有顯著性差異(P<0.05)。

3 討 論

本研究對甲狀腺乳頭狀癌患者CEUS特征與MMP2、MMP9表達的相關(guān)性進行了分析，結(jié)果如下：CEUS增強信號越強、MMP2及MMP9的陽性表達率越高，被膜受侵犯患者的MMP2及MMP9的陽性表達率高于被膜未受侵犯患者。這一結(jié)果提示CEUS特征與MMP2、MMP9的表達存在相關(guān)性，MMP2和MMP9的高表達能夠增加病灶內(nèi)血供、促進病灶被膜受侵犯，進一步通過分析MMP2、MMP9表達與CEUS參數(shù)的關(guān)系可知：MMP2、MMP9陽性表達患者的CEUS參數(shù)TTP、MTT均明顯低于MMP2、MMP9陰性表達患者。這一結(jié)果與CEUS特征與MMP2、MMP9表達相關(guān)性的分析結(jié)果一致，提示MMP2、MMP9是引起甲狀腺乳頭狀癌患者CEUS特征及參數(shù)變化的分子，兩者的高表達有利于增加病灶內(nèi)血供。

綜上所述，甲狀腺乳頭狀癌患者術(shù)前超聲造影與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、蛋白酶表達、術(shù)后無復發(fā)生存存在相關(guān)性，能夠用于病情評估。