周云婷，朱曉玲，王春琴，李俊行(.新昌縣食品藥品檢驗(yàn)檢測(cè)中心，浙江 新昌 500；.浙江醫(yī)藥股份有限公司新昌制藥廠，浙江 新昌 500；.浙江省食品藥品檢驗(yàn)研究院，浙江 杭州 005)

0 引言

噴昔洛韋(penciclovir，PCV)是一種全合成的第四代無環(huán)鳥苷類抗病毒藥物，為伐昔洛韋的活性代謝物，臨床多用于帶狀皰疹患者，對(duì)HSV-1、HSV-2、VzV和E-B病毒有抑制活性，而對(duì)CMV病毒的活性較弱。與阿昔洛韋相比，其抗病毒效果顯著，是一種抗病毒譜較廣的藥物[1-6]。通過合成工藝分析，本品潛在的元素雜質(zhì)有鐵、鎳、銅、鋅、鉛，元素雜質(zhì)具有一定的潛在毒性[7]，根據(jù)ICH Q3D元素雜質(zhì)技術(shù)指導(dǎo)原則，需要對(duì)噴昔洛韋中5種元素雜質(zhì)(鐵、鎳、銅、鋅、鉛)進(jìn)行質(zhì)量控制。電感耦合等離子體質(zhì)譜(ICP-MS)法具有同時(shí)測(cè)定多種元素的優(yōu)勢(shì)，本文采用ICP-MS法建立噴昔洛韋中5種元素雜質(zhì)(鐵、鎳、銅、鋅、鉛)同時(shí)測(cè)定的定量方法[8-10]。

1 儀器與試藥

Agilent7700X型電感耦合等離子體質(zhì)譜儀，配置ASX-500型自動(dòng)進(jìn)樣器(安捷倫科技有限公司)；MARS6型微波消解儀(CEM公司)；mettler toledo XS205DU型電子分析天平(梅特勒托利多儀器有限公司)。

噴昔洛韋(浙江醫(yī)藥股份有限公司制備，批號(hào)為150901、150902、150903)；元素標(biāo)準(zhǔn)溶液、內(nèi)標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)溶液(安捷倫科技有限公司)；硝酸(Merck公司)；水為超純水。

2 方法與結(jié)果

2.1 儀器參數(shù)

積分時(shí)間為0.1～0.3 sec per point；峰模式為Full Quant(3)；重復(fù)次數(shù)為3次；檢測(cè)模式為He mode；蠕動(dòng)泵轉(zhuǎn)速為0.1 rps；內(nèi)標(biāo)元素為45Sc，72Ge，115In，175Lu，209Bi；定量元素為56Fe，60Ni，63Cu，66Zn，208Pb。

2.2 溶液配制

稀釋劑：移取30 mL HNO3，加水稀釋至1 000 mL，混勻；

內(nèi)標(biāo)溶液：移取100 mg/L的內(nèi)標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)溶液25 μL，用稀釋劑稀釋至25 mL，混勻；

空白溶液：取500 μL內(nèi)標(biāo)溶液，用稀釋劑稀釋至50 mL，混勻；

標(biāo)準(zhǔn)曲線溶液：分別精確移取一定量元素標(biāo)準(zhǔn)溶液于10 mL量瓶中，加入100 μL內(nèi)標(biāo)溶液和適量稀釋劑稀釋至刻度，混勻(Fe、Ni、Cu、Zn、Pb元素的線性濃度分別為2、10、20、40、80、100 ng/mL)。

報(bào)告限度溶液：移取20 μL元素標(biāo)準(zhǔn)溶液于10 mL量瓶中，加入100 μL內(nèi)標(biāo)溶液和適量稀釋劑稀釋至刻度，混勻(Fe、Ni、Cu、Zn、Pb濃度均為2 ng/mL)。

供試品溶液：稱取供試品約250 mg于消解罐中，加8 mL硝酸，按消解程序(100 ℃維持30 min，經(jīng)過30 min升溫至150 ℃，保持30 min；壓力為5.5 MPa；功率為1 000 W)進(jìn)行操作后，轉(zhuǎn)移剩余溶液至25 mL容量瓶中，加250 μL內(nèi)標(biāo)溶液，并用稀釋劑稀釋定容，搖勻。

2.3 專屬性試驗(yàn)

分別取空白溶液和報(bào)告限度溶液，依法進(jìn)樣測(cè)定?？瞻兹芤褐懈髟氐挠?jì)數(shù)值(CPS)不大于報(bào)告限度溶液中各元素計(jì)數(shù)值的15%可認(rèn)為無干擾，結(jié)果(如表1所示)表明，空白溶液的本底對(duì)各元素的檢測(cè)無干擾。

表1 專屬性數(shù)據(jù)表

2.4 線性試驗(yàn)

分別取各標(biāo)準(zhǔn)曲線溶液進(jìn)樣測(cè)定，計(jì)算線性方程和相關(guān)系數(shù)，結(jié)果(如表2所示)表明，相關(guān)系數(shù)均大于0.99，每個(gè)元素雜質(zhì)在2～100 ng/mL范圍內(nèi)線性關(guān)系良好。

表2 線性數(shù)據(jù)表

2.5 檢測(cè)靈敏度試驗(yàn)(檢測(cè)限、定量限和報(bào)告限)

取空白溶液，依法進(jìn)樣測(cè)定，重復(fù)10次。每個(gè)元素濃度3倍標(biāo)準(zhǔn)偏差(3δ)所對(duì)應(yīng)的濃度計(jì)算為檢測(cè)限；每個(gè)元素濃度10倍標(biāo)準(zhǔn)偏差(10δ)所對(duì)應(yīng)的濃度計(jì)算為定量限。取報(bào)告限度溶液，依法進(jìn)樣測(cè)定，重復(fù)6次，每個(gè)元素測(cè)試結(jié)果的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差(RSD)應(yīng)不大于20%。結(jié)果(如表3所示)表明，本方法具有較好的檢測(cè)靈敏度，鐵、鎳、銅、鋅、鉛的檢測(cè)限分別為0.142、0.009、0.025、0.024、0.004 ng/mL，鐵、鎳、銅、鋅、鉛的定量限分別為0.474、0.031、0.084、0.079、0.014 ng/mL，可以把2 ng/mL設(shè)定為各元素的報(bào)告限度。

表3 檢測(cè)靈敏度數(shù)據(jù)表

2.6 精密度試驗(yàn)

分別在供試品中加入40 ng/mL的鐵和10 ng/mL的鎳、銅、鋅、鉛，平行操作6次，依法處理并測(cè)定，結(jié)果(如表4所示)表明，本方法平行操作6次的RSD在1%～2%之間，表明本方法具有較好的精密度。

表4 精密度數(shù)據(jù)表

2.7 加樣回收率試驗(yàn)

分別在供試品中加入10 ng/mL、40 ng/mL和80 ng/mL的鐵和2 ng/mL、10 ng/mL和20 ng/mL的鎳、銅、鋅、鉛，按照供試品溶液的制備方法依法處理并進(jìn)樣測(cè)定，計(jì)算各元素的加樣回收率，結(jié)果(如表5所示)表明，本方法各元素的加樣回收率在97%到106%之間，表明本方法具有較好的準(zhǔn)確度。

表5 加樣回收率數(shù)據(jù)表

2.8 樣品測(cè)定

取噴昔洛韋樣品3批，依法處理并測(cè)定，結(jié)果(如表6所示)均未檢出。

表6 樣品測(cè)定數(shù)據(jù)表 單位：ng/mL

3 結(jié)語

元素雜質(zhì)的檢測(cè)，也可采用原子分光光度法或者原子吸收法建立方法，但每次只能檢測(cè)一種元素雜質(zhì)，工作效率較低。本實(shí)驗(yàn)應(yīng)用ICP-MS技術(shù)手段，通過較全面的方法學(xué)驗(yàn)證，建立了同時(shí)測(cè)定噴昔洛韋中5種元素雜質(zhì)的方法，驗(yàn)證結(jié)果表明，每個(gè)元素雜質(zhì)在2～100 ng/mL范圍內(nèi)線性關(guān)系良好，三個(gè)濃度加樣回收率在97%到106%之間。鐵、鎳、銅、鋅、鉛的檢測(cè)限分別為0.142、0.009、0.025、0.024、0.004 ng/mL。該方法具有良好的專屬性、檢測(cè)靈敏度、精密度、線性和準(zhǔn)確度，可用于噴昔洛韋中5種元素雜質(zhì)(鐵、鎳、銅、鋅、鉛)的控制。