白玉彬，圖門烏力吉，薩仁其木格，雙 金

（1.阿魯科爾沁旗農(nóng)牧局，內(nèi)蒙古赤峰 025550；2.阿魯科爾沁旗農(nóng)牧業(yè)機(jī)械化服務(wù)中心，內(nèi)蒙古赤峰 025550；3.內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué)動物科學(xué)學(xué)院，呼和浩特 010018）

小球藻（chlorella）屬綠藻綱小球藻科［1］，是一種陸生單細(xì)胞微藻，呈球形，直徑3～8μm，據(jù)研究20多億年前已出現(xiàn)，是地球上最早的生命之一，也是人類第一個人工培養(yǎng)的微藻［2］。小球藻約有10個品種，在自然界分布極廣。

近年來隨著藻類生物技術(shù)的發(fā)展，微藻在環(huán)保、保健食品及飼料添加劑的生產(chǎn)等方面已被廣泛應(yīng)用［3-5］。在歐美和日本等發(fā)達(dá)國家，尤其在日本將其作為保健食品和動物飼料添加劑已有50多年的歷史。我國對微藻的研究始于20世紀(jì)50年代，到了80年代人們已了解微藻的形態(tài)和生物學(xué)特性，并開始培養(yǎng)，以藻類為原料的保健品、食品及其添加劑不斷涌現(xiàn)［6］。研究表明，小球藻含有多種成分，尤其是蛋白質(zhì)含量豐富［4-5］，另外富含獨(dú)特的活性物質(zhì)，如活性生長因子（CGF）［6］、多糖、生物素以及葉綠素與葉酸等四大成分［7］，具有諸多功效，如抗菌［8］、免疫［9］和解毒［10］，在家畜家禽飼料中的應(yīng)用效果明顯。目前，小球藻粉及其懸浮液已被我國農(nóng)業(yè)農(nóng)村部批準(zhǔn)為新型飼料添加劑。

本試驗(yàn)應(yīng)用一種陸生小球藻懸浮液（含活性小球藻1 000萬/mL以上），添加于罕山白絨山羊母羊飼糧中，測定對其繁殖性能的影響，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 材料與方法

1.1 小球藻制劑來源與制備

1.1.1 培養(yǎng)基小球藻培養(yǎng)基配方見表1。

表1 小球藻培養(yǎng)基配方 mg·L-1

1.1.2 培養(yǎng)程序小球藻母藻由內(nèi)蒙古林業(yè)科學(xué)院提供。培養(yǎng)程序：母藻接種至100 mL，100 mL至1 L，1 L至5 L，再到18 L，最后到噸桶，每個梯度培養(yǎng)7 d。制成的小球藻制劑每毫升含1 000萬小球藻細(xì)胞。

1.2 試驗(yàn)動物及試驗(yàn)設(shè)計(jì)

2018年2月初—2019年5月底，從罕山白絨山羊場基礎(chǔ)母羊群中選擇妊娠130 d左右母羊44只，隨機(jī)分為2組，每組22只。對照組采用基礎(chǔ)飼糧，無小球藻；試驗(yàn)組則在基礎(chǔ)飼糧中加40 mL/（只·d）小球藻。試驗(yàn)期為50 d，其中預(yù)試期14 d、正試期36 d。

1.3 飼養(yǎng)管理

試驗(yàn)羊全期舍飼，每組一欄。飼喂方式為每天上午和下午定量飼喂全混合飼糧（TMR）2次，飲水1次。觀察羊群采食、反芻、休息和分娩狀態(tài)，發(fā)現(xiàn)異常要及時處置，并做好記錄。

1.4 基礎(chǔ)飼糧組成及營養(yǎng)水平

為了突出小球藻的營養(yǎng)差異，試驗(yàn)采用同一基礎(chǔ)飼糧，并按NRC（1985）［11］要求把母羊飼糧營養(yǎng)水平進(jìn)行調(diào)試計(jì)算，飼糧組成及營養(yǎng)水平見表2。

表2 飼糧組成及營養(yǎng)水平（干物質(zhì)基礎(chǔ)）

1.5 測定項(xiàng)目

1.5.1 草料采食量每組一欄，每天計(jì)量青干草和精料添槽量及剩余量，差值即每日一欄的消耗量，再除以羊數(shù)得單位草料采食量。

1.5.2 繁殖性能1）母羊繁殖率=（實(shí)際繁殖的母羊總數(shù)÷參與試驗(yàn)的母羊總數(shù)）×100%。

2）母羊產(chǎn)羔率=［初生羔羊總數(shù)（包括死胎）÷母羊總數(shù)］×100%。

3）羔羊體重：包括初生重、36日齡體重。

4）36日齡羔羊日增重=（平均36日齡體重-平均初生體重）÷36。

5）36日齡羔羊死亡率=（36日齡內(nèi)羔羊死亡只數(shù)÷總初生羔羊數(shù)）×100%。

6）36日齡羔羊腹瀉率=（36日齡內(nèi)羔羊腹瀉只數(shù)÷總初生羔羊數(shù)）×100%。

1.5.3 血清的分離和細(xì)胞因子、抗氧化物含量的測定把母羊血液在3 500 r/min離心10 min，分離血清，-25℃冷凍保存。采用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）法測定血清細(xì)胞因子白細(xì)胞介素6（IL-6）、白細(xì)胞介素1β（IL-1β）含量、干擾素ɑ（IFN-ɑ）含量及血清抗氧化物超氧化物歧化酶（SOD）和谷胱甘肽（GSH）含量，試劑盒購自寶信生物科技有限公司。

1.5.4 經(jīng)濟(jì)效益對比分析1）收入=36日齡羔羊平均體重×單價-羔羊平均死亡損失。其中平均死亡損失=36日齡羔羊體重×單價×羔羊死亡率。2）支出=母羊TMR平均單耗×單價。3）利潤=收入-支出。

1.6 數(shù)據(jù)的統(tǒng)計(jì)分析

用Excel表計(jì)算試驗(yàn)?zāi)秆虍a(chǎn)羔數(shù)、山母羊繁殖率、產(chǎn)羔率、羔羊初生重、羔羊死亡率、羔羊腹瀉率、母羊和羔羊草料采食量、羔羊日增重及經(jīng)濟(jì)效益指標(biāo)。

用非配對重復(fù)觀察值不相等t檢驗(yàn)方法對試驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行差異檢驗(yàn)。

2 結(jié)果與分析

2.1 小球藻對母羊產(chǎn)羔率、繁殖率及羔羊腹瀉率、死亡率的影響

見表3。

表3 母羊產(chǎn)羔率、繁殖率及羔羊腹瀉率、死亡率測定結(jié)果

由表3可以看出：試驗(yàn)組母羊產(chǎn)羔率為100%，繁殖率為77.27%，明顯高于對照組；試驗(yàn)組羔羊腹瀉率和死亡率分別為13.64%、9.09%，均低于對照組。

2.2 小球藻對羔羊體重及日增重的影響

見表4。

由表4可以看出，試驗(yàn)組羔羊初生重稍高于對照組，但差異不顯著（P＞0.05），試驗(yàn)組羔羊36日齡體重極顯著高于對照組（P＜0.01），羔羊36日齡內(nèi)日增重極顯著高于對照組（P＜0.01）。

表4 羔羊體重、日增重測定結(jié)果

2.3 小球藻對母羊TMR采食量的影響

見表5。

表5 母羊TMR采食量測定結(jié)果

由表5可以看出：試驗(yàn)組母羊只均采食量比對照組下降9.89%。

結(jié)合表4數(shù)據(jù)可知，試驗(yàn)組羔羊增重速度比對照組快，但母羊TMR采食量卻低于對照組，說明小球藻使母羊草料利用率提高。

2.4 小球藻對母羊血清細(xì)胞因子含量的影響

見表6。

表6 母羊血清細(xì)胞因子含量測定結(jié)果 ng·L-1

由表6可以看出：與對照組相比，試驗(yàn)組母羊IL-6和IL-1β含量極顯著下降（P＜0.01），IFN-ɑ含量則顯著下降（P＜0.05）。

2.5 小球藻對母羊血清抗氧化物含量的影響

見表7。

表7 母羊血清抗氧化物含量測定結(jié)果

由表7可以看出，與對照組想比，試驗(yàn)組母羊血清SOD和GSH含量均顯著增加（P＜0.05）。

2.6 經(jīng)濟(jì)效益分析

見表8。

表8 只均母羊經(jīng)濟(jì)效益分析

由表8可以看出，只均母羊羔羊利潤試驗(yàn)組（111.57元/只）比對照組（88.39元/只）高23.18元/只，提高26.22%，效果很明顯。

3 討論

本試驗(yàn)中，試驗(yàn)組產(chǎn)羔率和繁殖率比對照組高很多，分析原因可能與小球藻不直接相關(guān)，是母羊配種或妊娠診斷失誤及一些偶然因素造成，如試驗(yàn)組產(chǎn)雙羔較多，再如飼養(yǎng)管理等因素使對照組母羊流產(chǎn)，應(yīng)該與小球藻營養(yǎng)沒有直接的關(guān)系。

小球藻含有豐富的生長因子（CGF），它具有很強(qiáng)的免疫活性，尤其是對機(jī)體細(xì)胞免疫具有增強(qiáng)功效［12-14］。本試驗(yàn)結(jié)果表明，小球藻使母羊SOD和GSH含量顯著提高，同時使血清IL-6、IL-1β和IFN-ɑ等細(xì)胞因子水平明顯下降。說明小球藻可提高機(jī)體抗氧化能力，同時提高巨噬細(xì)胞的吞噬能力，促進(jìn)淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化和增殖，并降低機(jī)體免疫系統(tǒng)的激活程度，最終減少單核巨噬細(xì)胞等免疫細(xì)胞釋放一系列細(xì)胞因子的數(shù)量，使血清IL-6、IL-1β和IFN-ɑ水平明顯下降，符合以往的研究結(jié)果［15］。

動物機(jī)體在應(yīng)激反應(yīng)或感染等情況下，引起免疫系統(tǒng)被激活，結(jié)果首先單核巨噬細(xì)胞和淋巴細(xì)胞誘發(fā)免疫反應(yīng)，并很快釋放包括IL-6、IL-1β和IFN-ɑ在內(nèi)的一系列細(xì)胞因子［16］。細(xì)胞因子對動物代謝和內(nèi)分泌具有較大的影響，包括免疫應(yīng)激動物的外周組織吸收葡萄糖和氨基酸受到抑制，能量和蛋白質(zhì)重新進(jìn)行分配以滿足與免疫有關(guān)器官組織的利用［17］，使動物生長發(fā)育受到抑制；其次，免疫系統(tǒng)激活的程度影響著動物的神經(jīng)內(nèi)分泌和生長速度。免疫系統(tǒng)高度激活使動物生長能力下降，除了物質(zhì)代謝轉(zhuǎn)向免疫外，還有一個很重要的原因就是因?yàn)榧?xì)胞因子抑制了動物產(chǎn)生與生長發(fā)育相關(guān)激素的含量，如生長激素（GH）和胰島素樣生長因子（IGF-Ⅰ和IGF-Ⅱ）等的分泌水平，從而使血液GH、IGF-Ⅰ和IGF-Ⅱ含量下降［19］，影響動物正常生長發(fā)育。

因此，通過給母羊飼喂小球藻，使其免疫力提高而降低其免疫激活水平，減少細(xì)胞因子的釋放，提高抗氧化物水平，同時提高循環(huán)血液中GH和IGF-Ⅰ含量，增加養(yǎng)分利用率而提高母羊泌乳能力，并增加其羔羊生長速度和免疫力，降低羔羊腹瀉的發(fā)生和減少死亡率。

另外，小球藻含有豐富生物素、葉綠素、葉酸以及多糖等活性物質(zhì)及其養(yǎng)分，也有助于提高母羊泌乳能力和羔羊生長發(fā)育［7］。

4 結(jié)論

1）添加小球藻的試驗(yàn)組羔羊初生重與對照組沒有明顯差異，但使羔羊體重和日增重明顯提高。2）與對照組相比，試驗(yàn)組羔羊36日齡內(nèi)腹瀉率和死亡率明顯下降。3）試驗(yàn)組母羊日均采食量低于對照組。4）與對照組相比，試驗(yàn)組血清IL-6（P＜0.01）、IFN-ɑ（P＜0.05）和IL-1β（P＜0.01）含量明顯下降，血清SOD和GSH含量均顯著增加（P＜0.05）。5）試驗(yàn)組每只羔羊利潤（111.57元/只）比對照組（88.39元/只）高23.18元/只，提高26.22%，效果明顯。